生化实验常用知识详细(考研复试可用)

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生化知识点重点总结

生化知识点重点总结

生化知识点重点总结1. 生物大分子:生体内的大分子主要包括蛋白质、核酸、多糖和脂质等。

蛋白质是生物体内最重要的大分子之一,它具有结构和功能多样性;核酸是DNA和RNA的总称,它携带了生物体的遗传信息;多糖是由许多单糖分子聚合而成,主要包括淀粉、糖原和纤维素等;脂质是生物体内比较复杂的一类大分子,包括脂肪、磷脂和皂质等。

2. 蛋白质的结构和功能:蛋白质是生物体内最重要的大分子之一。

它的结构可以分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。

蛋白质的功能包括酶作用、结构作用、传递作用和免疫作用等。

3. 核酸的结构和功能:核酸是DNA和RNA的总称,它携带了生物体的遗传信息。

DNA是双链结构,RNA是单链结构。

核酸的功能主要包括遗传信息的传递和蛋白质合成等。

4. 多糖的结构和功能:多糖是由许多单糖分子聚合而成。

它主要包括淀粉、糖原和纤维素。

多糖的功能包括能量储备和结构支持等。

5. 脂质的结构和功能:脂质是生物体内比较复杂的一类大分子,包括脂肪、磷脂和皂质等。

脂质的功能包括能量储备、结构支持和传递信号等。

6. 细胞膜的结构和功能:细胞膜是细胞的外层膜。

它主要由脂质分子和蛋白质分子构成。

细胞膜的功能包括细胞的结构支持、物质的进出和信号的传递等。

7. 酶的性质和作用:酶是生物体内的一类特殊蛋白质,它在生物体内具有催化作用。

酶的作用包括降低反应活化能、增加反应速率和特异性催化等。

8. 代谢途径:代谢是生物体内的一系列化学反应过程。

代谢途径主要包括糖代谢、脂质代谢、核酸代谢和蛋白质代谢等。

9. 能量的利用和储存:能量是维持生命活动的重要物质基础。

生物体内的能量主要通过ATP和NADH等化合物来储存和利用。

10. 酶的调控:酶的活性受到多种因素的调控,包括底物浓度、温度、pH值和酶的抑制剂等。

11. 免疫系统:免疫系统是生物体内的一套防御系统,它包括天然免疫和获得性免疫两个部分。

12. 体内环境平衡:体内的环境平衡主要包括细胞内外离子平衡、酸碱平衡和渗透压平衡等。

生化考研知识点归纳总结

生化考研知识点归纳总结

生化考研知识点归纳总结一、细胞生物化学1. 细胞的结构与功能细胞是生命的基本单位,包括原核细胞和真核细胞。

原核细胞包括细菌和蓝藻等,真核细胞包括植物、动物和真菌细胞。

细胞有细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等多个部分组成。

2. 细胞膜细胞膜是细胞的保护膜,内外有不同的脂类和蛋白质组成。

蛋白质有通道蛋白、受体蛋白、酶蛋白和结构蛋白等。

细胞膜的重要功能包括细胞识别、物质的运输、细胞信号传导等。

3. 蛋白质合成、折叠和降解蛋白质的合成在细胞质中进行,包括转录和翻译两个过程。

新合成的蛋白质需要经过正确的折叠,否则会形成蛋白质聚集,造成细胞内质的损害。

细胞中有多种蛋白质降解途径,主要包括泛素-蛋白酶体途径和溶酶体-体液途径。

4. 细胞核细胞核包括染色质、核仁和核膜等部分。

染色体是DNA和蛋白质的复合物,其中DNA包括基因和非编码序列。

5. 线粒体和叶绿体线粒体是细胞内的能量生产中心,通过氧化磷酸化产生ATP。

叶绿体是植物细胞的特有细胞器,通过光合作用产生ATP和还原能量。

6. 细胞信号传导细胞中的信号传导包括内分泌传导、神经传导和细胞间相互作用等多种方式,主要通过蛋白质、核酸和小分子等信号分子的相互作用实现。

7. 细胞凋亡和坏死细胞凋亡是细胞自身程序性死亡,表现为细胞凋亡因子的释放和内质网的应激等。

细胞坏死是外因导致的异常细胞死亡,与炎症反应和细胞内环境的改变相关。

二、生物大分子结构与功能1. 蛋白质的结构和功能蛋白质包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。

蛋白质的功能包括酶的催化作用、结构蛋白的机械支持、激素的信号传导等。

2. 核酸的结构和功能核酸包括DNA和RNA,DNA包括脱氧核糖核酸和蛋白质组成,并负责遗传信息的传递。

RNA包括核糖核酸和蛋白质组成,并负责基因的转录和翻译。

3. 糖类的结构和功能糖类包括单糖、双糖和多糖,主要作为细胞的能量来源和结构支持。

4. 脂质的结构和功能脂质包括甘油三酯、磷脂、类固醇和脂蛋白等,主要作为细胞膜的组成成分和储存能量。

医学检验的生化复习重点资料

医学检验的生化复习重点资料

医学检验的生化复习重点1、电泳是指溶液中带电粒子在电场中定向移动的现象,2、光谱分析技术是指利用物质具有吸收、发射或散射光谱谱系的特点;对物质进行定性或定量的分析技术。

3、危急值某些检验结果出现了可能会危及患者生命的极限值,遇到这种情况时,应迅速将检验结果报告给临床医师或当班护士,并要求接打电话双方都要有通话记录。

4、组合检验实验室在征求临床专家意见的基础上,选择性地将某些项目组合在一起,成为一个固定的检测系列,如肝功能系列等。

5、真值是指采用一组最可靠的参考方法测得的近似真值的数值。

6、质控物是指专门用于质量控制目的的标本或溶液,该溶液不能做校准。

7、重复性条件是指在尽量相同的条件下,包括检验人员、仪器、环境、检验程序等,以及在尽量短的时间内对同一被测对象相互独立进行的测试条件。

8、再现性条件是指在不同实验室,由不同操作者使用不同的设备,按相同的测试万法,对同一被测对象相互独立进行的测试条件。

9、同工酶是同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体,具有相同的催化功能,但其分子组成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布和细胞内定位不同的一类酶。

10、连续测定酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据,求出酶反应初速度,间接计算酶活性浓度的方法称为连续监测法。

11、空腹血糖是指体内不摄入含热量的食物后,所测得的静脉血浆葡萄糖浓度。

12、OGTT 是在口服一定量葡萄糖后2h内作系列血浆葡萄糖浓度测定,以评价不同个体对血糖的调节能力的一种标准方法,并且对确定健康和疾病个体也有价值。

13、糖尿病(DM) 是一组由于胰岛素分泌不足或(和) 胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病,高血糖是其特征。

14、低糖血症指血糖浓度低于空腹血糖参考水平下限。

多数人建议空腹血糖参考下限为2.78mmol/L (50mg/dl)。

15、氧解离曲线当在连续PO2 范围测定血液的S02 时,将S02 与PO2 绘制曲线,得到一个S 型图形,被称作氧解离曲线。

生化检验知识点归纳总结

生化检验知识点归纳总结

生化检验知识点归纳总结一、生化检验的基本原理1. 生化检验的定义:生化检验是通过对人体的生化物质进行定量或定性的分析,以达到对体内生化状态和功能的了解的一种检验方法。

2. 生化检验的基本原理:生化检验是通过测定人体内的生化物质,如葡萄糖、蛋白质、脂类、酶等物质的含量和活性,以及相关代谢产物的浓度来反映体内生化过程的变化,为疾病的诊断、鉴别诊断和疗效监测提供重要的实验依据。

二、常用指标及其临床意义1. 血糖:血糖是人体内最主要的能量来源,其测定对糖尿病、甲状腺功能异常、妊娠、垂体功能异常等有重要的临床意义。

2. 肝功能指标:包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、球蛋白、谷氨酰转肽酶等指标,可以反映肝功能的变化,对肝炎、肝硬化、药物中毒等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。

3. 肾功能指标:包括肌酐、尿素氮、尿酸、血尿酸、尿蛋白、尿微量白蛋白等指标,可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能的变化,对肾炎、肾结石、肾功能衰竭等疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。

4. 血脂指标:包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等指标,可以反映血脂代谢的变化,对高血脂症、动脉粥样硬化等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。

三、常见的生化检验项目1. 血清蛋白电泳:通过电泳分离血清蛋白,以及对蛋白的定量和鉴定,可以对免疫性疾病、肝病、肾病、恶性肿瘤等疾病进行诊断和鉴别诊断。

2. 血清肝功能指标:主要包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、白蛋白、球蛋白等指标的测定,用于评价肝细胞功能和肝细胞损伤的程度。

3. 血清肾功能指标:主要包括肌酐、尿素氮、尿酸、尿微量白蛋白等指标的测定,用于评价肾小球滤过功能和肾小管功能的变化。

4. 血清电解质及酸碱平衡指标:包括钠、钾、氯、钙、镁、磷酸盐、二氧化碳结合力等指标的测定,用于评价电解质的平衡和酸碱的调节功能。

四、生化检验的标本采集与储存1. 血液标本采集:在采集静脉血时一定要选择适当的静脉针头,遵循正确的穿刺技术和取血流程,尽量避免静脉内血栓的形成,尽量避免血细胞破裂。

考研生化重点知识归纳总结

考研生化重点知识归纳总结

考研生化重点知识归纳总结考研生化重点知识主要包括以下内容:蛋白质化学:蛋白质是生命活动中重要的分子之一,具有多种结构和功能。

考研生化学科中,需要掌握蛋白质的基本组成单位、氨基酸的分类及三字符表示法、肽的概念及理化性质、蛋白质层面结构与功能关系、蛋白质相对分子量、两性电离及等电点、蛋白质的胶体性质、紫外光吸收特征、变性与复性等知识点。

核酸化学:核酸是生物体的遗传物质,分为DNA和RNA两种。

在考研生化学科中,需要掌握核酸的种类和组成单位、DNA的一级结构、二级结构、三级结构和RNA的分子结构、核酸的一般性质、紫外光吸收特征、核酸的变性与复性等知识点。

酶:酶是由生物体内活细胞产生的具有催化作用的有机物,是生物体内化学反应的催化剂。

在考研生化学科中,需要掌握酶的概念、作用机制、酶促反应动力学、酶的抑制剂等知识点。

糖类:糖类是生物体内重要的供能物质,分为单糖、二糖和多糖。

在考研生化学科中,需要掌握单糖的结构及性质、二糖的结构及性质、多糖的结构及性质等知识点。

脂类与生物膜:脂类是生物体内重要的组成部分,具有多种生理功能。

生物膜是细胞膜的组成成分,由脂类和蛋白质组成。

在考研生化学科中,需要掌握脂类的分类及性质、生物膜的组成及功能等知识点。

生物氧化与代谢:生物氧化和代谢是生物体内化学反应的重要过程,涉及到能量的转换和物质的合成与分解。

在考研生化学科中,需要掌握生物氧化和代谢的基本概念、呼吸链和氧化磷酸化作用等知识点。

蛋白质合成与基因表达:蛋白质合成是生物体内分子合成的重要过程,基因表达则是指基因转录和翻译的过程。

在考研生化学科中,需要掌握蛋白质合成的原料及步骤、遗传密码等知识点。

以上是考研生化学科中的重点知识,考生需要认真学习和掌握。

同时,考生还需要了解学科前沿动态和最新研究成果,以更好地应对考试和未来的学术研究工作。

考研生化专业知识点与实验技能总结

考研生化专业知识点与实验技能总结

考研生化专业知识点与实验技能总结生物化学,作为生物科学的一个重要分支,是研究生物体内生命现象的化学过程的学科,也是考研生物专业的重点之一。

在备考考研生化专业时,掌握一定的知识点和实验技能是至关重要的。

下面将为大家总结一些考研生化专业的知识点和实验技能,希望对大家备战考研有所帮助。

1.常见的生化学知识点蛋白质结构与功能蛋白质是生物体内功能最为复杂的大分子,有着多种结构与功能。

了解蛋白质的一级、二级、三级和四级结构,以及蛋白质的功能与生理作用对于生化学考研至关重要。

代谢途径代谢是生命活动的基础,了解糖酵解、三羧酸循环、氧化磷酸化等代谢途径的细节及调控机制是考研生化专业的热点内容。

DNA与RNADNA和RNA是遗传物质的载体,通过遗传信息的传递和表达,控制生物体内的基因功能,了解基因的表达调控、DNA复制和RNA转录等基本原理是考研生化的重点。

2.生化实验技能基础实验技能掌握基础的实验操作技能,如制备缓冲液、离心技术、凝胶电泳等是考研生化实验的基础。

免疫学实验技能掌握免疫层析、酶联免疫吸附实验等免疫学实验技能,能够帮助理解免疫反应机制,应对考研生化实验中的相关题目。

分子生物学实验技能熟练运用PCR技术、蛋白免疫印迹等分子生物学实验技术,对于研究生化学相关领域的学术研究和实验操作具有重要意义。

以上是关于考研生化专业知识点与实验技能的简要总结,希望对大家在备考考研时有所帮助。

生化学作为一门综合性学科,对于考生来说挑战重重,但只要努力学习,掌握重点知识和实验技能,相信你一定能在考研中取得优异的成绩。

加油!个人在考研生化专业的复习过程中,既要注重理论知识的积累,也要注重实验技能的提升,培养严密的逻辑思维和实验操作技巧,这样才能在考试中游刃有余地应对各种题型,取得优异的成绩。

临床生化考研知识点归纳

临床生化考研知识点归纳

临床生化考研知识点归纳
临床生化是医学领域中的一个重要分支,它涉及到生物化学在临床诊断和治疗中的应用。

以下是临床生化考研的一些关键知识点归纳:
1. 临床生化基础
- 酶的分类与作用机制
- 代谢途径的基本概念,如糖酵解、三羧酸循环等
- 蛋白质、核酸、脂质的生物合成与代谢
2. 临床生化检验技术
- 酶联免疫吸附测定(ELISA)的原理与应用
- 电泳技术在蛋白质分析中的应用
- 色谱技术在生化分析中的重要性
3. 临床生化指标
- 肝功能指标,如ALT、AST、ALP、GGT等
- 肾功能指标,如BUN、Cr、尿酸等
- 血糖、血脂、电解质等的检测与临床意义
4. 疾病的生化机制
- 糖尿病的生化基础与血糖调节
- 高脂血症的生化特点
- 肝病、肾病等器官疾病的生化变化
5. 临床生化与药物治疗
- 药物代谢的生化过程
- 药物对生化指标的影响
- 药物相互作用的生化机制
6. 临床生化与遗传病
- 遗传性代谢病的生化特征
- 遗传病的生化诊断方法
- 遗传性代谢病的治疗原则
7. 临床生化研究方法
- 实验设计的原则与方法
- 统计学在临床生化研究中的应用
- 临床生化研究的伦理问题
8. 临床生化的前沿进展
- 代谢组学在疾病诊断中的应用
- 蛋白质组学在疾病机制研究中的作用
- 基因编辑技术在遗传病治疗中的前景
结束语
临床生化是一个不断发展的领域,随着科学技术的进步,新的检测方法和治疗手段不断涌现。

掌握这些基础知识点,将有助于深入理解临床生化的复杂性和应用前景,为未来的研究和临床工作打下坚实的基础。

生化实验考试知识点

生化实验考试知识点

生物化学实验复习资料(蓝林)生物化学是研究生命的化学。

是研究组成生物体物质的结构及其功能、代谢及其中的能量代谢、信号物质的信号传导、生命遗传物质的遗传及变异和表达调控、以及疾病发生和治疗相关的生物化学问题等的科学。

玻璃仪器的洗涤一般玻璃仪器用肥皂或去污粉以毛刷洗涤即足以满足要求,洗后应将肥皂或去污粉仔细冲掉,将水倾去后,器壁不挂水珠,视为合格。

铬酸洗液仅用于毛刷不能洗净的仪器,切勿滥用普通玻璃仪器之洗涤。

使用铬酸洗液时,仪器应干燥;过多的水份将使洗液迅速失效。

用过之铬酸洗液须加以保存以反复使用,直至变为绿色后方可舍弃;其舍弃法与浓硫酸液相同。

用洗液浸洗过的玻璃仪器,应先用自来水冲洗,然后再用蒸馏水或去离子水清洗,清洗时,宜采用“少量多次”原则以节约蒸馏水,同时清洗的效率也高。

温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶的影响实验原理大多数酶的化学本质是蛋白质、凡能引起蛋白质变质的因素,都可以使酶丧失活性、温度、pH、抑制剂、激活剂、对酶活性有显著的影响。

淀粉各种糊精麦芽糖葡萄糖加加加碘碘碘变蓝蓝、紫、褐、红不变色氨基酸、蛋白质的性质鉴定实验原理氨基酸与蛋白质分子组成中的某些特殊结构与某些试剂作用可以表现出特殊的颜色反应,利用此性质,可检验出氨基酸及蛋白质。

肝糖原的提取与鉴定实验原理糖原是一高分子化合物。

微溶于水,无还原性。

肝糖原是糖在体内的重要储存形式之一,是体内糖的重要来源之一,原理2 肝糖原理的糖在体内的重要储存形式之一,是体内糖的重要来源之一,糖原是一高分子化合物。

微溶于水,无还原性、与碘作用生成红色。

本实验通过对动物肝脏研磨,在三氯醋酸作用下一使其中的蛋白质被沉淀,二使糖原水解酶失活,从而过滤得到糖原。

实验步骤称肝脏约1g+10%三氯醋酸1ml 研磨+5%三氯醋酸2ml 研磨至肉糜状过滤(滤液收集在带刻度的离心管中)加入等体积95%乙醇混匀、静置10min 离心弃去上清夜、留沉淀加蒸馏水1ml 搅拌溶解而得糖原溶液待用。

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1. 绪论欢迎同学们到生物化学实验室来!对于大多数学生来说,这不是第一次做化学实验,但是我们相信,生物化学实验一定是大家最感兴趣、最激动人心的实验,当然也是花费最大、最辛苦的实验。

同学们在过去几年中所学到的各种实验技术和操作技能,在这些实验中将会经常用到,当然更重要的是要学会一些新的、在生物化学的科学研究中最常用的实验方法。

同学们在生物化学实验方面要取得好成绩,在很大程度上,取决于你们对这些专门化实验技术的熟练掌握和对生物化学原理的深入了解。

当同学们进行实验时,无疑将会与以前做的各种实验进行比较。

在生物化学实验中,大家会发现,极少有像无机化学和有机化学实验那样进行化学反应和分离出“克”数量级的产物。

同学们将进行的是“毫克”和“微克”数量级的研究,并且在多数情况下,生物分子是溶解在溶液中的,而且往往看不到所研究的物质,但是将会看到动态的生物化学过程和由生物分子引起的生物化学变化。

实验中所用到的各种技术和方法,将起到“眼睛”的作用,用以对各种生物化学过程进行监测。

同学们通过生物化学实验应该做到:⑴学习设计一个实验的基本思路,掌握各个实验的基本原理,学会严密地组织自己的实验,合理地安排实验步骤和时间。

⑵训练实验的动手能力,学会熟练地使用各种生物化学实验仪器,包括各种天平、各种分光光度计、各种离心机、自动部分收集器、恒流泵、核酸蛋白检测仪、冰冻干燥机、酸度计、电导率仪、高速分散器、各种电泳装置和摇床等等。

⑶学会准确翔实地记录实验现象和数据的技能,提高实验报告的写作能力,能够整齐清洁地进行所有的实验,培养严谨细致的科学作风。

⑷掌握生物化学的各种基本实验方法和实验技术,尤其是各种电泳技术和层析枝术,为今后参加科研工作打下坚实的基础。

预祝同学们以优异的成绩跨进这一新的科学殿堂,成为攀登生物科学高峰的新的勇士!1.1 生物化学实验技术发展简史生物科学在20世纪有惊人的发展,其中生物化学与分子生物学的进展尤为迅速,这样一门最具活力和生气的实验科学,在21世纪必将成为带头的学科,这主要有赖于生物化学与分子生物学实验技术的不断发展和完善。

这里我们简单回顾一下生物化学实验技术的发展历史。

20年代:微量分析技术导致了维生素、激素和辅酶等的发现。

瑞典著名的化学家T.Svedberg奠基了“超离心技术”,1924年制成了第一台5000×g(5000 r/min~8000 r/min)相对离心力的超离心机(相对离心力“RCF”的单位可表示为“×g”),开创了生化物质离心分离的先河,并准确测定了血红蛋白等复杂蛋白质的分子量,获得了1926年的诺贝尔化学奖。

30年代:电子显微镜技术打开了微观世界,使我们能够看到细胞内的结构和生物大分子的内部结构。

40年代:层析技术大发展,两位英国科学家Martin和Synge发明了分配色谱(层析),他们获得了1952年的诺贝尔化学奖。

由此,层析技术成为分离生化物质的关键技术。

“电泳技术”是由瑞典的著名科学家Tisellius所奠基,从而开创了电泳技术的新时代,他因此获得了1948年的诺贝尔化学奖。

50年代:自1935年Schoenheimer和Rittenberg首次将放射性同位素示踪用于碳水化合物及类脂物质的中间代谢的研究以后,“放射性同位素示踪技术”在50年代有了大的发展,为各种生物化学代谢过程的阐明起了决定性的作用。

60年代:各种仪器分析方法用于生物化学研究,取得了很大的发展,如HPLC技术、红外、紫外、圆二色等光谱技术、NMR核磁共振技术等。

自1958年Stem,Moore 和Spackman设计出氨基酸自动分析仪,大大加快了蛋白质的分析工作。

1967年Edman和Begg制成了多肽氨基酸序列分析仪,到1973年Moore和Stein设计出氨基酸序列自动测定仪,又大大加快了对多肽一级结构的测定,十多年间氨基酸的自动测定工作得到了很大的发展和完善。

1962年,美国科学家Watson和英国科学家Crick因为在1953年提出的DNA分子反向平行双螺旋模型而与英国科学家Wilkins分享了当年的诺贝尔生理医学奖,后者通过对DNA分子的X-射线衍射研究证实了Watson和Crick的DNA模型,他们的研究成果开创了生物科学的历史新纪元。

在X-射线衍射技术方面,英国物理学家Perutz对血红蛋白的结构进行X-射线结构分析, Kendrew测定了肌红蛋白的结构,成为研究生物大分子空间立体结构的先驱,他们同获1962年诺贝尔化学奖。

此外,在60年代,层析和电泳技术又有了重大的进展,在1968—1972年Anfinsen创建了亲和层析技术,开辟了层析技术的新领域。

1969年Weber应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定了蛋白质的分子量,使电泳技术取得了重大进展。

70年代:基因工程技术取得了突破性的进展,Arber,Smith和Nathans三个小组发现并纯化了限制性内切酶,1972年,美国斯坦福大学的Berg等人首次用限制性内切酶切割了DNA分子,并实现了DNA分子的重组。

1973年,又由美国斯坦福大学的Cohen等人第一次完成了DNA 重组体的转化技术,这一年被定为基因工程的诞生年,Cohen成为基因工程的创始人,从此,生物化学进入了一个新的大发展时期。

与此同时,各种仪器分析手段进一步发展,制成了DNA序列测定仪、DNA合成仪等。

80至90年代:基因工程技术进入辉煌发展的时期,1980年,英国剑桥大学的生物化学家Sanger和美国哈佛大学的Gilbert分别设计出两种测定DNA分子内核苷酸序列的方法,而与Berg共获诺贝尔化学奖,从此,DNA序列分析法成为生物化学与分子生物学最重要的研究手段之一。

他们3人在DNA重组和RNA结构研究方面都作出了杰出的贡献。

1981年由Jorgenson和Lukacs首先提出的高效毛细管电泳技术(HPCE),由于其高效、快速、经济,尤其适用于生物大分子的分析,因此受到生命科学、医学和化学等学科的科学工作者的极大重视,发展极为迅速,是生化实验技术和仪器分析领域的重大突破,意义深远。

现今,由于HPCE技术的异军突起,HPLC技术的发展重点己转到制备和下游技术。

1984年德国科学家Kohler、美国科学家Milstein和丹麦科学家Jerne由于发展了单克隆抗体技术,完善了极微量蛋白质的检测技术而共享了诺贝尔生理医学奖。

1985年美国加利福尼亚州Cetus公司的Mullis等发明了PCR技术(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应的DNA扩增技术,对于生物化学和分子生物学的研究工作具有划时代的意义,因而与第一个设计基因定点突变的Smith共享1993年的诺贝尔化学奖。

除上述历史以外,还可以列出许多生物化学发展史上的重要成就,例如:美国哈佛大学的Folin教授和中国的吴宪教授对生物化学常用的各种分析方法(血糖分析、蛋白质含量分析、氨基酸测定等)的建立作出了历史性的贡献。

美国化学家Pauling确认氢键在蛋白质结构中以及生物大分子间相互作用的重要性等,他获得了诺贝尔化学奖。

英藉德裔生物化学家Krebs,在1937年发现了三羧酸循环,对细胞代谢及分子生物学的研究作出了重要贡献,他与美藉德裔生物化学家Lipmann共获1953年诺贝尔生理医学奖。

英国生物化学家Sanger还于1953年确定了牛胰岛素中氨基酸的精确顺序而获得1958年的诺贝尔化学奖。

1959年,美藉西班牙裔科学家Uchoa发现了细菌的多核苷酸磷酸化酶,研究并重建了将基因内的遗传信息通过RNA中间体翻译成蛋白质的过程。

他和Kornberg分享了当年的诺贝尔生理医学奖,而后者的主要贡献在于实现了DNA分子在细菌细胞和试管内的复制。

美国生物化学家Nirenberg在破译遗传密码方面作出了重要贡献,Holly阐明了酵母丙氨酸tRNA的核苷酸排列顺序,后来证明所有tRNA的结构均相似。

美藉印度裔生物化学家Khorana曾合成了精确结构的己知核酸分子,并首次人工制成酵母基因。

他们3人共获1969年诺贝尔生理医学奖。

法国生物学家Lwoff、JAcob和生物化学家Monod由于在病毒DNA和mRNA等方面出色的大量研究工作而共获1965年诺贝尔生理医学奖。

1988年,美国遗传学家McClintock由于在二十世纪五十年代提出并发现了可移动的遗传因子而获得诺贝尔生理医学奖。

1989年,美国科学家Altman和Cech由于发现某些RNA 具有酶的功能(称为核酶)而共享诺贝尔化学奖。

1993年,美国科学家Roberts和Sharp由于在断裂基因方面的工作而荣获诺贝尔生理医学奖。

1994年,美国科学家Gilman和Rodbell由于发现了G 蛋白在细胞内信息传导中的作用而分享诺贝尔生理医学奖。

1995年,美国科学家Lewis、德国科学家Nusslein-Volhard和美国科学家Wieschaus由于在20世纪40~70年代先后独立鉴定了控制果蝇体节发育基因而共享诺贝尔生理医学奖。

我国生物化学界的先驱吴宪教授在20年代初由美回国后,在协和医科大学生化系与汪猷、张昌颖等人一道完成了蛋白质变性理论、血液生化检测和免疫化学等一系列有重大影响的研究。

1965年我国化学和生物化学家用化学方法在世界上首次人工合成了具有生物活性的结晶牛胰岛素,1983年又通过大协作完成了酵母丙氨酸转移核糖核酸的人工合成。

近年来,在酶学研究、蛋白质结构及生物膜的结构与功能等方面都有举世瞩目的研究成果。

由近百年来生物化学及其实验技术的发展史可以看出,该学科的发展与实验技术的发展密切相关,每一种新的生化物质的发现与研究都离不开实验技术,实验技术每一次新的发明都大大推动了生物化学研究的进展,因而对于每一位现代生物科学工作者,尤其是生物化学工作者,学习并掌握各种生物化学实验技术就是极为重要的。

1.2 实验室规则⑴实验前必须认真预习实验内容,明确本次实验的目的和要求,掌握实验原理,写好实验预习报告,否则,不能进行实验。

⑵实验时自觉遵守实验室纪律,保持室内安静,不大声说笑和喧哗。

⑶实验过程中要听从教师指导,认真按照实验步骤和操作规程进行实验。

若想改进和设计新的实验方法,必须取得教师的同意。

实验时认真进行实验记录,实验完毕及时整理数据,按时上交实验报告。

⑷实验台面、称量台、药品架、水池以及各种实验仪器内外都必须保持清洁整齐,药品称完后立即盖好瓶盖放回药品架,严禁瓶盖及药勺混杂,切勿使药品(尤其是NaOH)洒落在天平和实验台面上,毛刷用后必须立即挂好,各种器皿不得丢弃在水池内。

⑸配制试剂和用无离子水要注意节省,按实验实际使用量配制,多余的重要试剂和各种有机试剂要按教师要求进行回收,昂贵的Sephadex、Sepharose凝胶和DEAE纤维素等,用后必须及时回收,不得丢弃。

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