气相色谱法测定蛇床子提取物中蛇床子素的含量
高效液相色谱法测定复方蛇丹软膏中蛇床子素的含量
（ 约含蛇 床子素 ２ ） 置于 １０ｍ 量瓶 中 ， 无水 乙醇适 ０ｍｓ ， ０ ｌ 加 量， 置热水浴 中振摇使蛇床 子素溶解 ， 超声 ３ｍｉ， 冷至室 ｎ放
温， 加无水乙醇稀释至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 弃去初滤液 ， 储存续 滤液 ， 用流动相定量稀释制成约含 ２ ｒ 的溶 液 ， ｎ ｌ 摇匀 ； 同 法制备蛇床子素对照 品溶液 ， ２ ｌ 取 Ｏ 注人高液相色谱仪 ， 结 果表 明 ，三批样 品的含量分别是 ９ ．９ ９ ．８ １０３ ％， ９６ ％，９ ％，０ ． ９ ２ 符合规定。
３ 结 论
２ ０ ０ ）其余试剂均为色谱纯 、 ０３５ ； 分析纯 。
１ 方 法 ． ２
１ ． 色谱条件 ： ｉ ｎｉＣ ８色谱柱 （５ ｍｘ ． ｍ ５ ．１ ２ Ｄａ ｓ １ ｍｏ ｌ ２ ０ｍ ４６ ｍ，
Ｉ ， ， 甲醇． （０２ ） 流动相 ， ｚ ｍ） 水 ８： 为 ０ 检测波长 ：２ ｍ， ３０ｎ 流速 ：． １ ０ ｍｌ ｉ， ／ ｎ理论塔板数按蛇床子素峰计算不得低 于 １０ 。其他 ｍ ００
・
１ Hale Waihona Puke ４ ・ ２ 主垦垫塑 Ｊ
２１ 年 １ 月第 １ 卷第 １ 期 Ｃ ｉ ｓ Ｒｍ ｄ ｓ ｌｉ ，ｃ ｂｒ ０２ ０１．ｏ１ ０２ ｏ ２ ０ ｈ ｅｅ ｅ ｅｉ ＆ＣｉＣ Ｏｔ ｅ ２１． １２ ． ｎ ｅ ｎ８ ｏ Ｖ．Ｎ ０
・
药 物 研 究 ・
高效液相色谱法测定 复方蛇丹软膏中蛇床子素的含量
［ ］ 周然 ， ４ 彭涛 ， 冯玛莉 ， 蛇床子挥发 油止痒作用相关机制研究． 等．
中国药物与临床 ， ０ ， （ ）９１ ． ２ ３ ３ １ ：－１ ０ ［ ］ 高培平 ， ５ 苑振亭 ， 李志 强． 蛇床子素凝 胶的药效 学研究． 中国医
高效液相色谱法测定蛇床子洗液中蛇床子素含量
高效液相色谱法测定蛇床子洗液中蛇床子素含量
赵大伟;杜丽荣
【期刊名称】《中国保健营养：临床医学学刊》
【年(卷),期】2009(018)003
【摘要】目的建立测定蛇床子洗液中蛇床子素的方法。
方法使用高效液相色谱法，色谱柱为DiamOnsilC18柱（250mm×4．6mm，5μm），检测波长322nm，
流动相为甲醇-水（78：22）。
结果在12．08μg-96．64μg范围内有良好的线性，平均回收率为90．11％，1LSD为1．98％（11=5）。
结论该法操作简便，结果；隹确，灵敏度高，重现性好．可用于该洗液的质量控制。
【总页数】2页(P47-48)
【作者】赵大伟;杜丽荣
【作者单位】绥化学院化学与制药工程系,152061;黑龙江龙桂制药有限公
司,152061
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定利夫康洗液中蛇床子素的含量 [J], 李鹏;陈琴华;朱军;彭林
2.高效液相色谱法测定复方苦参子洗液中蛇床子素含量 [J], 杨曼;李鹏
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5.反相高效液相色谱法测定克痒舒洗液中蛇床子素的含量 [J], 陈琴华;李鹏;朱军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
GC-MS测定利夫康洗液中蛇床子素的含量
GC-MS测定利夫康洗液中蛇床子素的含量陈琴华;朱军;黄麟杰;余飞【摘要】目的：建立快速、灵敏的气相-质谱联用法,测定利夫康洗液中蛇床子素的含量。
方法色谱条件：DB-5MS (30 m ×0．32 mm,0．25μm)石英毛细管色谱柱；程序升温条件为140℃保持2 min,以10℃/min升至280℃,保持6 min；进样口和接口温度为280℃。
样品水浴蒸干,乙酸乙酯溶解,应用气相-质谱联用法进行测定。
结果蛇床子素在1．0~50μg/mL 线性关系良好, r =0．9991,精密度为2．01%,平均回收率为97．26%,检测限为1．0 ng/mL。
结论本方法简便、快速,灵敏度高,结果准确可靠,可以用于利夫康洗液中蛇床子素的含量测定。
%Objective To develop a rapid and sensitive GC-MS method for the determination of osthole in li-fukang lotion. Methods GC-MS conditions:DB-5MS capillary column (30 m × 0. 32 mm × 0. 25 μm);column tem-perature program:140 ℃ held 2 min,and then programmed to 280 ℃ at 10 ℃/min for 6min;interface and inlet tem-perature:280 ℃. The sample was evaporated and dissolved by acetic ether. Quantitative determination of analysis was performed by GC-MS. Results The linear range of osthole was 1. 0 ~50μg/mL ( r =0. 999 1 ) . The recovery rate was 97. 26%,RSD was 2. 01%,and the limit of quantitation was 1. 0 ng/mL. Conclusion The method is convenient and rapid,with good sensibility and accuracy,it can be used to determine the content of osthole in lifukang lotion.【期刊名称】《实用药物与临床》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】3页(P429-431)【关键词】利夫康洗液;蛇床子素;气相色谱-质谱【作者】陈琴华;朱军;黄麟杰;余飞【作者单位】湖北医药学院附属东风医院药物分析与筛选研究所，湖北十堰442008;湖北医药学院附属东风医院药物分析与筛选研究所，湖北十堰442008;湖北医药学院附属东风医院药物分析与筛选研究所，湖北十堰442008;湖北医药学院附属东风医院药物分析与筛选研究所，湖北十堰442008【正文语种】中文利夫康洗液由苦参、黄柏、蛇床子、白鲜皮、黄连、地肤子、花椒、赤芍、板蓝根、何首乌、土茯苓等11味中药组成，具有清热燥湿、杀虫止痒的功效，常用于真菌性、滴虫性阴道炎以及湿疹、接触性皮炎和体股癣[1]。
高效液相色谱法测定复方蛇床酊中蛇床子素的含量
复方蛇床酊为湖南 中医药大学药学院研制 的外用酊剂， 由 蛇床子、土荆皮、黄柏等 中药组成， 具有清热解毒、燥湿止痒、 杀虫的功能， 主治湿 热带下及各种妇科炎症、皮肤瘙瘁 及湿疹
等 。蛇床 子素 为方 中君 药 蛇 床 子 的 主 要有 效成 分 ， 本试 验 采 用 Ｈ Ｌ 对其 含 量 进 行 测 定 ， 报 道 如 下 。 Ｐ Ｃ法 现
ｅａ ．ｏｌ ｅ ｆ ｈ ｒ ａ ｅｔ ｓＢ ｏｎ ｎｖｒｉ Ｃ Ｂ ｉｎ ０ １ ２ Ｃ ｉａ ．ｏｌ ｅ ｆ ｈ ｒ ａ ｅｔ ｓＨｕａ ｔ ｌ Ｃ ｌ ｇ Ｐ ａｍ ｃｕｉ ， ｅ＇ｇＵ ｉｅｓｙｏ Ｍ， ｅ ｉ １０ ０ ， ｈｎ ：２Ｃ ｌ ｇ Ｐ ａｍ ｃｕｉ ， ｎ ｎ ｅ ｏ ｃ ｉ ｔ ｆＴ ｊｇ ｅ ｏ ｃ Ｕ ｉ ｒｉ Ｔ Ｍ， ｈ ｎ ｓａ４ ０ ０， ｈｎ） ｎｖ ｓ ｏ Ｃ ， ａｇ ｈ １２ ８ Ｃ ｉ ｅ ｔｆ ｙ Ｃ ａ
ｌ ｅ ｒｒ ｌｔ ｎ ｈｐｂ ｔ ｅ ． ８ ．２ ｇ （＝Ｏ９ ９９． ｈ ｖ ｒ ｇ ｅｏ ｅｙｗａ ８５ ％ ａ ｄ Ｒ Ｄ ｓ ｉ ａ ｅａｉ ｓ ｉ ｅ ｎ ｏ ｗｅ ｎ００１ ～０ １ ６ｌ ｒ ．９ ）Ｔ ｅａ ｅａ ｅｒｃ ｖ ｒ ｓ９ ．５ ｎ Ｓ ｗａ ａ
（． １ 北京 中医 药 大 学 中 药 学 院 ， 京 １０ ０ ；２ 湖 南 中医 药 大 学 药 学 院， 南 长 沙 ４ ０ ０） 北 ０ １２ ． 湖 １２ ８
摘要 ：目的
建立复方蛇床 酊中蛇床 子素含量的 高效液相 色谱 测定 方法。方法
采用 Ｈ ｐ ｒ ｉ Ｄ 色谱柱 ｙ ｅ １０ 制成 阴性对 照 溶 液及 对 照 药材 溶液 。照 ． ， 薄 层色谱 法 ［ 中华 人 民共 和 国药 典》 ０ ５ 《 ２０ 年版 （ 部） 一 附录 ⅥＢ 试验， 取供试品溶液、 吸 阴性 对 照 溶 液 、 照 药 材 溶 液 各 １ ， 对 ０ 分 别 点 于 同 一 硅胶 Ｇ 薄 层板 上， 以三 氯 甲烷一 甲醇 一 丁酮 一 甲酸 （． ０ ３： ． ０ ３ 为展 开 剂 ， 开， 出， 干 ， 以 ３ 三 ９４： ． ０ ３： ． ） 展 取 晾 喷 ％ 氯 化 铝 乙醇溶 液 ， 紫外 光 灯 （６ ｍ 下 检 视 。供 试 品色 谱 中， 置 ３ ５ｉ） ｒ 在 与 对 照 药 材 色 谱 相应 的位 置 上 ， 显相 同颜 色 的荧 光 斑 点 。见
蛇床子中欧前胡素和蛇床子素提取与分析方法研究 6 80%加热回流3次 1h
ｏ ｚ
图 １ 欧前胡素、蛇床子素对照品 （）和蛇床子总提取物 （ ）色谱图 ａ ｂ １ ． 欧前胡素 ａ蛇床子素 ．
２ 增刊 ） ０３ ３（ ，２ ０
２ 增刊） ０３ ３（ ，２０ １ ９
后，欧前胡素和蛇床子素提取量无显著差异，考虑到在大规模生产时的成本与资源利用等因素，选择用 ６ 倍量溶剂进行提取较为合适。 在实验研究中发现，蛇床子样品回流时间越长，测得含量呈下降趋势，可能是欧前胡素和蛇床子素对
典》２０ 年版一部记载具有温肾壮阳、 ００ 燥湿， 祛风， 杀虫之功效。 欧前胡素和蛇床子素为蛇床子的主要活 性成分之一。有关蛇床子药材中定量检测通常有薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法。由于欧前胡 素和蛇床子素的不稳定性有文献报道提取效率和溶剂的关系、水提物活性成分的研究、 温度与时间对提取 蛇床子素香豆素得率、正交实验等方法。本文用不同溶剂、不同提取方法及正交实验法，较为系统地研究
２３ 标准曲线 分别配制不同浓度的欧前胡素和蛇床子素对照品混合溶液， ． 在上述色谱条件下进行测定， 进样量为 ｌ 。以欧前胡素和蛇床子素进样量 （）对峰面积 （）进行线性拟合，欧前胡素和蛇床子素 Ｏ ｌ ａ Ｌ Ｘ Ｙ
回归方程分别为：
欧前胡素 Ｙ ０６１ ８５． ７２２ ｙ ．９８ ＝ Ｘ一１５．， ０９９ ＝ 蛇床子素 Ｙ ９８Ｘ一４４．， ＝．９３ ２１１ ＝ ９０４ ｙ ９９ ０ 结果欧前胡素在 ３ｎ －８ｎ，蛇床子素在 １６ｇ ２ｎ 范围内线性关系良 ４ｇ ０ｇ ６ ０ｎ －１０ｇ ２ 好。
表３
因素
因素水平表
回流次数
水乎
溶剂量 （／） Ｖｇ
蛇床子检测方法
蛇床子含量测定方法（蛇床子素）蛇床子为伞形科植物蛇床Chidium monnieri(L.)Cuss.的干燥成熟果实。
2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其蛇床子素的含量。
英文：osthole别名：甲氧基欧芩酚，欧芹酚甲醚提取来源：伞形科植物欧前胡[Peucedanum osthruthium(L.)Koch]的根，蛇床[Cnidium monnieri(L.) Cusson]的果实挥发油等。
性质：属香豆素类化合物。
棱柱状结晶（乙醚）、针状结晶（稀乙醇）。
熔点83～84℃。
沸点145～150℃。
溶于碱溶液、甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、醋酸乙酯和沸石油醚等，不溶于水和石油醚。
CAS: 484-12-8分子式：C15H16O3 分子量：244.29药理作用：蛇床子素具有解痉、降血压、抗心律失常、增强免疫功能及广谱抗菌作用。
一、高效液相色谱法2005版《中国药典》蛇床子含量测定项下：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（65：35）为流动相；检测波长为322nm。
理论板数按蛇床子素峰计算应不得低于2500。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇25ml，密塞，称定重量，放置2小时，超声处理（功率300W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量。
精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
HPLC法测定蛇床子及其制剂中蛇床子素的含量，制备样品时一般以50%乙醇、碳酸氢钠饱和溶液、甲醇等为提取溶剂，按流动相系统分类介绍：A：甲醇-水此系统应用最多，常用的比例为：①Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国)；色谱柱为YWG-C18(10μm,4.6mm×250mm)；流动相为甲醇-水(80：20)；检测波长322nm；柱温25℃。
②Waters高效液相色谱仪；C18色谱柱（Xterra column，pH1～12，5μm，3.9mm×190mm）；流动相为甲醇-水(75：75)；检测波长322nm；柱温28℃。
蛇床子中蛇床子素的提取及检测方法的研究
性 范围 。
器
Ｃ
＆ 蛊
崔 辱
１ ． ２ ． ２ 精 密度的 测 定 配 制 含 蛇 床 子素 浓 度 为 ５ 、 １ ０和 ４ Ｏ ｇ ・ ｍＬ 的标准 溶液 ， 用高 效液 相 色谱 检测， 每 个样 品在 １ ｄ内检 测 ３次 ， 计算 Ｅ ｌ 内变异
多种研究 表 明 ， 蛇 床 子 的提 取 物 对 大豆 尖 孢 镰 刀 菌有抑 制作用 Ｉ ｌ ］ ， 而 提取 物 中的主要 成分 是 蛇床 子素Ｌ ３ ］ ， 因此 通 过检 测 提 取 物 中 蛇床 子 素 的 含 量 可 以判 断提取 方法 是否适 当 ］ 。通 过 ４因素
系数 。每个样 品每 天检 测 １次 ， 连续 ３ ｄ ， 根据 结 果计 算 日间变 异 系数 。
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ２ － ¨一 ２ ８ 作者简介： 宋伟 丰（ １ ９ ８ ２ 一 ） ， 男， 黑龙 江省 甘南县 人 ， 硕士， 助 理研究员 ， 从 事 植 物 保 护 研 究 。Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｓ ０ ｎ ｇ ｗｅ ｉ ｆ ｅ ｎ ｇ ２ Ｏ Ｏ Ｏ ＠
１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｎ。 ｒ
样量 １ Ｏ Ｌ； 流速 １ ． ０ ｍＬ・ ｍｉ ｎ 一 。
２ ５ ｍＬ容量瓶 中 ， 相 当于 ８ Ｏ Ｐ ． ｇ ・ ｍＬ － 浓度， 作 为母 液 。再稀释得 终浓 度 为 ５ 、 １ Ｏ 、 ２ ０和 ４ ０ ｇ ・ ｍＬ 的 标准溶 液 ， 连 同母 液分 别 用 高 效 液相 色 谱 进 行检
再稀释得终浓度为51020和40gml标准溶液连同母液分别用高效液相色谱进行检标准曲线的绘制及线性范围的确定准1浓度作为母1的测以平均峰面积对相应浓度作线性回归即得标准曲线根据相关系数的大小评价定量方法的线性范围
蛇床子中蛇床子素提取效率与几种溶剂关系
Abstract Capillary gas chromatography was used to determine extracting rates of osthol from Cnidium Monnieri ( L.) Cusson by several solvents.The result showed that the extracting efficiency were higher by chloroform and aceton, were weaker in order by anhydrous alcohol and 95% alcohol and was the lowest by distilled water at the same temperature.
95%乙醇 21.7 4.3 25.5 76.5
无水乙醇 23.4 4.3 28.1 83.9
丙酮 24.5 5.7 30.2 90.1
氯仿 25.8 4.5 30.3 90.4
3 讨论
溶剂对药材化学组分的提取率主要决定于其溶解度。由表1、表2可见，因蛇床子素(及其它一般香豆素为脂溶性化合物)在95%乙醇和无水乙醇尤其水中的溶解度不高，故冷浸的提取率较低，升高温度则可提高；而丙酮由于其水溶性、脂溶性均较理想，且渗透性强，故在冷浸时已接近100℃时的提取率。因此，在实验室提取时，用丙酮冷浸提取两次即可提取88.1%的蛇床子素，工艺简单，且提取后因其沸点低而极易回收，是较佳的提取溶剂，缺点是其挥发性大，易燃，安全性差，不适于生产性提取。氯仿溶剂的提取率亦较高，但毒性大且价格昂贵，仅适于分析时使用。无水乙醇可用工业酒精代替，在100℃时2次回流提取可达83.9%的提取率，是适合工业生产性的较好溶剂。
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气相色谱法测定蛇床子提取物中蛇床子素的
含量
作者：张晓霞，周卯星，张高勇，宫竹云，聂永亮
【关键词】蛇床子素；,,气相色谱法,
摘要：目的建立完善的气相色谱测定蛇床子素含量的方法。
方法首先采用柱层析的方法对样品进行预处理，分离蛇床子提取物中的甘油三酯，并结合红外和核磁图谱验证；然后采用DB5色谱柱，外标法测定蛇床子素的含量。
结果经过预处理的样品在该条件下测定蛇床子素，线性范围好，r=0.999 7；回收率为97.97%~102.4%；RSD 为1.09%（n=5）。
结论该方法简便、准确度高，重现性好。
关键词：蛇床子素；气相色谱法
The Determination for the Osthole of the Extracts from Fructus Cnidii by the Gas Chromatography
Abstract：Fructus cnidii was isolated from the fruits of Cnidium Monnieri(L.) Cusson ,which is a useful traditional Chinese herb. Osthole, a chemical principle isolated, was determined and quantitatively analysed by the capillary gas
chromatography. The method of column chromatography with silica-gel as the stationary phase was employed for the separation of triglyceride from the extracts. The fraction was verified by IR and NMR. The GC-9A system consisted of DB-5 column could be applied for the determination for the osthole. External standard method was used for quantitative analysis. The results showed that the linear range of the standard curve was good(r=0.999 7). The recovery rate was between 97.97% and 102.4%, and RSD was 1.09%(n=5). This method is simple,easy and reliable. It also has good repeatability and sensibility.
Key words：Osthole; Gas Chromatagraphy
蛇床子Fructus Cnidii，为伞形科蛇床属植物蛇床Cnidium monnieri(L.)Cusson的干燥成熟果实，具有散寒、祛风、燥湿、杀虫、止痒等功能［1］。
蛇床子中的有效成分为蛇床子素，常用的分析方法包括薄层扫描法［2］、高效液相色谱法［3］和气相色谱法［4］。
其中，采用气相色谱法测定蛇床子素时，样品均采取直接进样的方式，然而蛇床子提取物中含有甘油三酯等油脂成分，甘油三酯分子量大,沸点高,测定中很难流出，因此，如果不在测定前去除甘油三酯，会在色谱柱中积聚甚至造成测定时鬼峰的出现，从而影响分析结果的准确性。
本文首先采用柱层析的方法对蛇床子提取物进行了预处理，分离去除了
甘油三酯，然后用外标法测定了蛇床子素的含量。
现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 仪器GC9A气相色谱仪,带火焰离子化检测器(FID)及CR3A数据微处理机（日本岛津公司）；ESJ20型电子天平（沈阳龙腾电子称重仪器有限公司）；27030型红外光谱仪（日本日立公司）；DRX300型超导核磁共振仪（瑞士布鲁克公司）；层析柱（自制Φ=15 mm, h=300 mm）。
1.2 药品与试剂蛇床子素对照品（广州合成三先生物科技有限公司）按本实验方法测定，经归一化计算含量为98% ；蛇床子（武汉天惠生物有限公司）；硅胶(青岛海洋化工厂；80~100目，使用前于120℃烘5 h)；石油醚（沸程30~60℃）、苯、丙酮、95%乙醇均为分析纯。
蛇床子提取物为超临界CO2萃取物（自制）。
1.3 色谱条件色谱柱:DB5石英毛细管柱（30 m×0.32 mm）；检测器:FID；柱温采用程序升温：初始温度为80℃，保持2 min后以5℃/min的速率升至310℃，恒温8 min；检测室与进样口温度∶320℃；载气：He；流速：30 ml/min；分流比30∶1；进样量：1μl。
1.4 方法将蛇床子提取物经柱层析处理后，精密称取适量于。