真菌检测步骤
检验真菌的方法
检验真菌的方法
1. 直接镜检法：将短柄棉签蘸取患部分泌物、皮屑、毛发等样本，涂于玻璃片上，用40倍至100倍的显微镜下观察，检测真菌的形态和数量。
2. 细胞学检查法：可采用细胞学方法检查骨髓、淋巴结等组织样本中是否存在真菌，包括涂片法、细胞学初筛法、细胞学制片法等。
3. 培养法：将样本接种于含有丰富营养成分的培养基上，利用真菌的生长特点判定是否存在真菌的培养。
4. 核酸检测法：查找真菌的DNA或RNA序列，并使用PCR 技术的手段拓展浓度，最后用电泳技术侦察出真菌的情况。
5. 基于免疫学的检测：包括诸如ELISA和荧光法等方法，主要检测真菌产生的免疫球蛋白或抗原，以用于检测真菌是否存在。
真菌鉴定操作方法包括哪些
真菌鉴定操作方法包括哪些
真菌鉴定操作方法包括以下几个步骤：
1. 样品收集：从被疑为真菌感染的环境、病患或植物体上采集样品，如组织块、培养物、孢子等。
2. 处理样品：根据实验要求，对采集的样品进行预处理，如切片、培养等。
3. 形态学观察：使用显微镜对样品进行观察，包括颜色、形状、大小、壁厚、孢子结构等特征的描述。
4. 细胞学观察：通过染色技术，如涂片染色、孢子培养等，观察真菌细胞的形态特征，如核型、核仁数量、细胞器等。
5. 生理生化特性检测：通过一系列生理生化特性检测，如生长速度、生长温度范围、菌落颜色、碳源利用等，进一步确定真菌属或种的分类位置。
6. 分子生物学检测：采用PCR、DNA测序等分子生物学手段，对样品中真菌所含的特定基因进行放大和分析，以确定真菌的种属和亲缘关系。
7. 地理分布分析：结合分布地理位置的信息和已有的真菌数据库，比对结果，进一步确定真菌的物种分类。
8. 结果分析与鉴定：根据所得的观察数据和检测结果，对真菌进行分类鉴定，并确认其属、种等分类阶元。
需要注意的是，这些步骤可以根据具体实验目的和所涉及的真菌种类进行调整和补充，适用的方法可能会有所差异。
检测不同环境中的细菌和真菌步骤
检测不同环境中的细菌和真菌步骤
1.样品采集：使用无菌工具（如消毒棉签、无菌采样袋等），在待测环境中采集样品。
可以选择不同的环境，如室内表面、土壤、空气或水源等。
2.样品处理：将采集到的样品进行处理，以便更好地分离和培养细菌和真菌。
处理过程可能包括样品的稀释、研磨或加入适当的缓冲液。
3.培养细菌和真菌：将处理后的样品分别接种在适当的培养基上。
选择适当的培养基可以有助于细菌和真菌的生长和繁殖。
培养基可以根据需要添加抗生素或选择性剂，以抑制非目标微生物的生长。
4.孵育：将接种的培养基置于适当的温度和湿度条件下，培养细菌和真菌。
不同的微生物可能对温度和湿度有不同的要求，因此需要根据目标微生物的特性进行相应的调整。
5.观察和鉴定：在培养一定时间后，观察培养基上是否有细菌和真菌的生长。
可以使用显微镜观察细菌和真菌的形态特征，如形状、大小和颜色等。
也可以使用一些生化试剂或基因检测方法来鉴定微生物的种类。
6.数据分析：根据观察结果，进行数据记录和分析。
可以统计不同环境中细菌和真菌的数量、种类和分布情况等。
真菌检测的质量控制的流程
真菌检测的质量控制的流程引言概述：真菌检测是一项重要的质量控制措施，用于确保产品和环境的卫生安全。
本文将介绍真菌检测的质量控制流程，包括样品采集、实验室分析、数据分析、结果评估和报告编写等五个部分。
一、样品采集1.1 选择适当的采样点：根据产品或环境的特点，选择代表性的采样点，包括可能存在真菌污染的区域。
1.2 采集样品：使用无菌容器采集样品，避免污染。
对于固体样品，使用消毒的工具采集，并尽量避免表面污染。
对于液体样品，使用无菌容器直接采集。
1.3 样品标识和记录：对采集的样品进行标识，包括采样点、采样日期和时间等信息。
确保样品的追溯性和准确性。
二、实验室分析2.1 样品处理：将样品进行适当的处理，如分离、培养等，以便于后续的分析。
2.2 真菌检测方法选择：根据需求选择合适的真菌检测方法，如培养法、PCR法等。
确保方法的准确性和可靠性。
2.3 实验室条件控制：保持实验室的洁净和温湿度控制，避免实验室环境对结果产生干扰。
三、数据分析3.1 数据整理和记录：将实验结果进行整理和记录，包括真菌种类、数量等信息。
3.2 数据分析和统计：对实验结果进行分析和统计，比较不同样品之间的差异和趋势。
3.3 结果解读和判定：根据数据分析的结果，判断样品是否符合真菌污染的标准，评估卫生安全风险。
四、结果评估4.1 结果比对：将实验结果与相关标准进行比对，判断是否符合要求。
4.2 风险评估：根据实验结果和相关标准，对真菌污染的风险进行评估，确定是否需要采取控制措施。
4.3 结果记录和存档：将结果进行记录和存档，以备后续参考和追溯。
五、报告编写5.1 报告内容：根据实验结果和评估，编写真菌检测报告，包括样品信息、实验方法、结果和评估等内容。
5.2 报告格式和要求：按照相关标准和要求，编写报告，确保报告的准确性和可读性。
5.3 报告审核和发布：对报告进行审核，确保报告的质量和可靠性，然后发布给相关部门或客户。
结论：真菌检测的质量控制流程包括样品采集、实验室分析、数据分析、结果评估和报告编写等五个部分。
真菌培养检查方法
真菌培养检查方法真菌培养检查是医院常用的检查方法，用于检测和鉴定真菌感染。
以下是真菌培养检查的步骤和注意事项：1. 采集标本：根据感染部位的不同，采集不同的标本。
例如，对于皮肤真菌感染，可以从病灶边缘刮取皮屑；对于深部真菌感染，可能需要采集血液、尿液等标本。
采集的标本应该尽快送往实验室进行培养，以免影响检查结果。
2. 培养基选择：根据不同的真菌种类，选择不同的培养基。
常用的培养基有沙保弱培养基、孟加拉红培养基等。
培养基的选择应该根据实验室的具体要求进行选择。
3. 接种：将采集的标本接种在培养基上，接种时要避免污染。
接种后将培养基放入恒温箱中进行培养。
4. 观察：在培养期间，需要定期观察培养基上是否有菌落生长。
一般情况下，真菌在培养基上生长需要几天到几周的时间。
如果发现有菌落生长，需要进行形态学鉴定和生化反应等试验，以确定真菌的种类。
5. 鉴定：通过形态学鉴定和生化反应等试验，可以确定真菌的种类。
有时还需要进行其他检查，如药敏试验等，以确定真菌对不同药物的敏感性。
6. 报告：鉴定完成后，医生会将结果报告给患者。
报告中包括真菌的种类、药敏试验结果等内容。
根据报告，医生可以制定相应的治疗方案。
注意事项：1. 在采集标本前，应该注意个人卫生，避免污染标本。
2. 培养期间，应该保持恒温箱的温度和湿度，以确保培养基上的真菌能够正常生长。
3. 在鉴定真菌时，应该注意观察菌落的形态和颜色等特征，以及进行生化反应等试验，以确保鉴定结果的准确性。
4. 对于深部真菌感染，需要进行多次检查，以排除假阳性的可能。
怎样才能方便的观察和检测细菌和真菌
怎样才能方便的观察和检测细菌和真菌为了方便观察和检测细菌和真菌，我们可以采取以下几个步骤：1.准备样品首先，我们需要准备一些样品，这些样品可能包括空气、土壤、水、食物等。
确保样品的收集是干净的，并且不会受到其他细菌或真菌的污染。
为了能够观察到细菌和真菌的形态和生长情况，我们需要将样品培养在适当的培养基上。
培养基可以是琼脂培养基或其他适合特定细菌或真菌生长的培养基。
在将样品培养在培养基上之前，我们需要将样品进行适当的稀释，以确保在培养基上形成单个的克隆细菌或真菌。
3.观察和记录将培养好的细菌和真菌样品放置在显微镜下观察，观察时可以调节显微镜的放大倍数以便更好地观察细菌和真菌的形态和结构。
同时，可以使用染色技术，如革兰氏染色、苏丹红染色等来增强观察效果。
观察时要注意每个培养皿上细菌和真菌的分布情况，并及时记录下来。
4.利用分子生物学方法检测除了显微观察外，还可以利用分子生物学技术来检测和鉴定细菌和真菌。
例如，可以利用聚合酶链反应（PCR）来检测细菌或真菌的特定基因序列。
这种方法可以提供更高的灵敏度和特异性，并且可以根据需要选择不同的引物来检测不同的细菌和真菌。
5.使用快速测试方法为了更快速地检测细菌和真菌的存在，还可以使用一些快速测试方法。
例如，可以利用微生物自动化仪器来进行快速的培养和鉴定。
这些仪器可以在较短的时间内提供检测结果，并且可以自动进行分析和解读。
总结起来，要方便观察和检测细菌和真菌，我们可以通过准备样品、培养细菌和真菌、观察和记录、利用分子生物学方法和使用快速测试方法等步骤来实现。
这些方法的选择取决于我们的具体需求和实验目的。
同时，合理使用这些方法和技术可以提高检测的灵敏度和准确性，从而更好地了解和控制细菌和真菌的生物学特性。
真菌检测的质量控制的流程
真菌检测的质量控制的流程一、引言真菌检测是一项重要的质量控制工作，用于确定环境、食品、药品等样品中是否存在真菌污染。
本文将详细介绍真菌检测的质量控制流程，包括样品准备、实验操作、质量控制和数据分析等环节。
二、样品准备1. 样品采集：根据检测对象的不同，选择合适的采样方法，如空气采样、表面刮取、液体培养基等。
2. 样品保存：采集后的样品应及时保存，并在适当的环境条件下避免污染和变质。
三、实验操作1. 样品处理：根据样品类型和检测要求，对样品进行预处理，如研磨、稀释、过滤等。
2. 培养基制备：根据检测需要，准备适当的培养基，包括选择合适的基质、添加适当的抗生素等。
3. 接种和培养：将样品接种到培养基上，并按照一定的条件进行培养，如温度、湿度、pH值等。
4. 检测方法：根据实验目的和要求，选择合适的检测方法，如显微镜观察、菌落计数、PCR等。
四、质量控制1. 阳性对照：在每次实验中，应设置阳性对照样品，以确保实验操作的准确性和可靠性。
2. 阴性对照：在每次实验中，应设置阴性对照样品，以检测实验过程中的污染情况。
3. 平行实验：为了验证实验的重复性和一致性，可以进行平行实验，对同一样品进行多次检测。
4. 质量控制记录：对实验过程中的关键环节进行记录，包括样品信息、操作步骤、实验结果等，以便后续分析和追溯。
五、数据分析1. 结果解读：根据实验结果，判断样品中是否存在真菌污染，并进行定性或者定量分析。
2. 异常处理：对于异常结果，应及时进行排查和处理，如重复检测、重新采样等。
3. 统计分析：根据一定的统计方法，对实验数据进行分析，如平均值、标准差、相关性等。
六、质量控制文件1. 检测方案：编制真菌检测的质量控制方案，包括样品准备、实验操作、质量控制和数据分析等内容。
2. 校准记录：记录校准仪器的日期、方法、结果等信息，确保仪器的准确性和可靠性。
3. 质量控制记录：记录每次实验的关键环节和结果，包括阳性对照、阴性对照、平行实验等。
检测土壤真菌数量操作规程
检测土壤真菌数量操作规程1. 引言土壤真菌数量的检测对于农业生产和环境保护具有重要意义。
本文档旨在提供一份操作规程，以帮助研究人员或实验室技术人员准确地检测土壤中的真菌数量。
2. 实验仪器和试剂准备2.1 实验仪器： - 显微镜 - 离心机 - 反应管或离心管 - 称量器 - 镊子或医用手套（用于样品处理）2.2 试剂： - 高温灭菌的蒸馏水 - 无菌培养基 - 过滤膜3. 样品采集3.1 样品选择： - 选择代表性的土壤样品，可以根据研究目的或采样位置进行选择。
- 避免采集过于湿润或干燥的土壤样品。
3.2 采样工具： - 使用无菌手套、镊子或其他无菌工具进行样品采集，避免外源性污染。
3.3 采样方法： - 在采样点附近挖取一块土壤，深度为10-20厘米。
- 将采样的土壤置于干燥的容器中，并尽快送入实验室进行处理。
4. 样品处理和离心4.1 样品干燥： - 将采集的土壤样品均匀分布在干燥的容器内，放置在通风处晾干。
- 避免土壤样品与其他异物接触，以防止污染。
4.2 样品研磨： - 将干燥的土壤样品研磨成粉末状，并过筛以去除较大的颗粒。
4.3 样品称量： - 取一定量的土壤样品，称量精确记录，并记录样品的湿重。
4.4 样品提取： - 使用高温灭菌的蒸馏水对称量好的土壤样品进行浸泡提取，保持一定时间（例如12小时）。
4.5 离心： - 将提取的土壤悬浊液进行离心，以分离土壤颗粒和真菌孢子。
5. 真菌数量检测5.1 过滤悬浊液： - 将悬浊液通过无菌的过滤膜过滤，以去除土壤颗粒。
5.2 培养基制备： - 准备无菌培养基，并按照制备说明进行培养基的配制。
5.3 填充培养基： - 将过滤后的悬浊液均匀地倒入培养基平板中。
5.4 培养： - 将培养基平板放入恒温培养箱中，在适当的温度下孵育一段时间（例如48小时至72小时）。
5.5 统计计数： - 借助显微镜观察并统计培养基平板上的真菌数量。
- 在视野内随机选择若干个区域，计数并记录每个区域中的真菌数量。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
真菌检查步骤1.采集标本浅部真菌的标本有毛发、皮屑、甲屑、痂等，标本在分离前常先用75%的乙醇消毒。
深部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织，采集标本时应注意无菌操作。
2.检查方法真菌检查的方法主要有：（1）直接涂片：为最简单而重要的诊断方法。
取标本置玻片上，加一滴10%KOH溶液，盖上盖玻片，在酒精灯火焰上稍加热，待标本溶解，轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。
可用于检查有无菌丝或孢子，但不能确定菌种。
（2）墨汁涂片：用于检查隐球菌及其他有荚膜的孢子。
医学教育|网搜集整理方法是取一小滴墨汁与标本（如脑脊液）混合，盖上盖玻片后直接镜检。
（3）涂片或组织切片染色：涂片染色可更好地显示真菌形态和结构。
革兰染色适用于白念珠菌、孢子丝菌等；瑞氏染色适用于组织胞浆菌；组织切片通常用PAS染色，多数真菌可被染成红色。
（4）培养检查：可提高真菌检出率，并能确定菌种。
标本接种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上，置室温或37℃培养1～3周，必要时可行玻片小培养协助鉴定。
菌种鉴定常根据菌落的形态及显微镜下形态判断，对某些真菌，有时尚需配合其他鉴别培养基、生化反应、分子生物学方法确定。
四、真菌学检验的基本技术（一）直接镜检是最简单也是最有用的实验室诊断方法，常用的方法有：①氢氧化钾/复方氢氧化钾法：标本置于载玻片上，加一滴浮载液，盖上盖玻片，放置片刻或微加热，即在火焰上快速通过2～3次，不应使其沸腾，以免结晶，然后轻压盖玻片，驱逐气泡并将标本压薄，用棉拭或吸水纸吸去周围溢液，置于显微镜下检查。
检查时应遮去强光，先在低倍镜下检查有无菌丝和孢子，然后用高倍镜观察孢子和菌丝的形态、特征、位置、大小和排列等。
浮载液：A.10%~20%的KOH。
配方：氢氧化钾10～20g，蒸馏水加至100ml，待氢氧化钾完全溶解后揺匀存放在塑料瓶内，适用于皮屑、甲屑、毛发、痂皮、痰、粪便、组织、耵聍等的检查。
B.复方氢氧化钾溶液配方：氢氧化钾（AR）10g，二甲基亚砜（AR）40ml,甘油50ml, 蒸馏水加至100ml,配制方法：将氢氧化钾先加入30ml蒸馏水中溶解后，再依次加入DMSO、甘油揺匀后，用蒸馏水加到100ml，装入塑料瓶内。
此配方的优点是：配方中加DMSO，能促进角质的溶解，有甘油涂片不易干，不易制成氢氧化钾结晶，氢氧化钾的浓度相对低，腐蚀性亦低，为进行大面积普查或大批量采集标本作镜检带来了方便。
②胶纸粘贴法：用1cm×1.5cm的透明双面胶带贴于取材部位数分钟后自取材部位揭下，撕去复带在上面的底板纸贴在载玻片上，使原贴在取材部位的一面暴露在上面，再进行革兰染色或过碘酸锡夫染色，在操作过程中应注意双向胶带粘贴在载玻片上时不可贴反，而且要充分展平，否则影响观察。
③涂片染色检查法：在载玻片上滴1滴生理盐水，将所采集的标本均匀涂在载玻片上，自然干燥后，火焰固定或甲醇固定。
再选择适当的染色方法，染色后，以高倍镜或油镜观察。
常见镜检染色方法有：①革兰染色。
所有真菌、放线菌均为革兰染色阳性，被染成蓝黑色。
适用于酵母菌、孢子丝菌、组织孢浆菌及诺卡菌、放线菌的感染。
②乳酸酚棉蓝染色：用于各种真菌培养物的镜检。
③印度墨汁：用于检测脑脊液（CSF）中的新生隐球菌。
④抗酸染色：用于抗酸菌及诺卡菌的诊断。
⑤瑞氏染色：用于组织胞浆菌和马内菲青霉的检测。
⑥过碘酸锡夫染色（PAS）：用于体液渗出液和组织匀浆等。
真菌胞壁中的多糖染色后呈红色，细菌和中性细胞偶可呈假阳性，但与真菌结构不同，不难区别。
⑦嗜银染色（GMS）：真菌可染成黑色，主要用于测定组织内真菌。
（二）真菌培养从临床标本中对致病真菌进行培养，目的是为了进一步提高对病原体检出的阳性率，以弥补直接镜检的不足，同时确定致病菌的种类。
真菌培养检查除需要一般细菌检验用到的器具外，还应准备真菌专用的接种针、接种环、或接种钩（用铂丝或镍丝制成）、微型小铲、刀片、针头等，常规分离鉴定使用的培养基为沙氏葡萄糖琼脂（SDA）斜面培养基，加0.05%氯霉素，还有多种性质的培养基（见第二部分）以满足各种不同的需要，可酌情选用接种的方法，根据不同的临床标本，大体可分为点植法和划线法两种。
①点植法：适用于皮屑、甲屑、毛发、痂皮、组织等有形固体标本，将标本直接与培养基表面点状接触。
②划线法：适用于痰、分泌物、脓液、组织液、组织块的研磨液等液体标本，用接种针（环）划线接种在培养基表面。
培养方法有多种，接临床标本接种时间分为直接培养法和间接培养法；按培养方法分为试管法、平皿法（大培养）和玻片法（小培养）。
①直接培养：采集标本后直接接种于培养基上。
②间接培养：采集标本后，暂保存，以后集中接种。
③试管培养：是临床上最常用的培养方法之一，培养基置于试管中，主要用于临床标本分离的初代培养和菌种保存。
④大培养：将培养物接种在培养皿或特别的培养瓶内，主要用于纯菌种的培养和研究。
⑤小培养：主要用于菌种鉴定，大致分为三种：玻片法，方块法和钢圈法。
A.玻片法：在消毒的载玻片上，均匀地浇上熔化的培养基，不宜太厚。
凝固后接种待鉴定菌株，置于平皿中，保湿。
待有生长后，盖上消毒的盖玻片，显微镜下直接观察，常用米粉吐温琼脂培养基观察白念珠菌的顶端厚壁孢子和假菌丝。
B.方块法：适用于霉菌菌落的培养。
取无菌平皿倒入约15ml熔化的培养基，待凝固后用无菌小铲或接种刀划成1cm2大小的小块。
取一小块移在无菌载玻片上，然后在小块上方四边的中点接种待鉴定菌株，盖上消毒的盖玻片，放入无菌平皿中的V形玻棒上，底部铺上无菌滤纸，并加入少量无菌蒸馏水，孵育，待菌落生长后直接将载玻片置显微镜下观察。
C.钢圈法：先将固体石蜡加热熔化，取直径约2cm，厚度约0.5cm有孔口的不锈钢小钢圈，火焰消毒后趁热浸入石蜡油，旋即取出冷却，石蜡油即附着于小钢圈中。
再取一无菌载玻片，火焰上稍加热，将小钢圈平置其上，孔口向上。
小钢圈上石蜡油遇载玻片的热即熔化后凝固，钢圈就会固定在载玻片上。
用无菌注射器经孔口注入熔化的培养基，培养基量约占小钢圈容量的1/2，注意避免气泡。
待培养基凝固后取一消毒盖玻片，火焰上加热后，趁热盖在小钢圈表面，也即固定其上。
最后用接种针伸入孔口进行接种。
这种方法的优点是形成一种封闭式培养，在显微镜下直接观察菌落时可避免孢子吸入人体，而且不易被污染，盖玻片也可取下染色后封固制片保存。
（三）培养检查标本接种后，每周至少检查2次，观察以下指标：①菌落外观：A.生长速度：缓慢生长菌：7～14d，快速生长菌：2～7d。
一般浅部真菌超过2周深部真菌超过4周仍无生长，可报告阴性。
B.外观：a.扁平。
b.疣状。
c.折叠规则或不规则。
d.缠结或垫状。
e.其他。
C.大小：菌落大小用cm来表示，菌落大小与生长速度和培养时间有关。
D.质地：a.平滑状。
b.粉状。
c.粒状。
d.棉花状。
e.粗毛状。
f.皮革状。
g.粘液状。
h.膜状。
E.顔色：不同的菌种表现出不同的顔色，呈鲜艳或暗淡。
致病性真菌的顔色多较淡，呈白色或淡黄色，而且其培养基也可变色，如马尔尼菲青霉等，有些真菌菌落不但正面有顔色，其背面也有深浅不同的顔色。
菌落的顔色与培养基的种类、培养温度、培养时间、移种代数等因素有关。
所以，菌落的顔色虽在菌种鉴定上有重要的参考价值，但除少数菌种外，一般不作为鉴定的重要依据。
F.菌落的边缘：有些菌落的边缘整齐，有些不整齐。
G.菌落的高度和下沉现象：有些菌落下沉现象明显，如黄癣菌、絮状表皮癣菌等，更有甚者菌落有时为之裂开。
H.渗出物：一些真菌如青霉、曲霉的菌落表面会出现液滴。
I.变异：有些真菌的菌落日久或多次传代培养而发生变异，菌落顔色减退或消失，表面气生菌丝增多，如絮状表皮癣菌在2～3周后便发生变异。
②显微镜检查：小培养可置普通显微镜下直接观察，而试管和平皿培养的菌落则需挑起后做涂片检查。
五、组织病理学检查真菌病的组织病理检查与直接镜检培养同样具有相当重要的价值，尤其对深部真菌病的诊断意义更大，如用特殊染色可提高阳性率。
真菌的组织病理反应与其他一些疾病的组织病理反应极其相似，往往只有在仔细研究了病理切片并发现了真菌之后才考虑到真菌病的诊断。
而在这种情况下，标本已被固定，培养有时已不可能进行，组织病理切片就成了真菌感染的主要依据。
所以临床上在送病理标本的同时，要尽可能考虑到真菌感染的可能，以便同时采集标本送真菌实验室进行真菌学检查。
真菌在组织内一般表现为：①孢子：酵母和双相型真菌在组织内表现为孢子。
②菌丝：许多真菌在组织中只表现为菌丝。
组织中发现无色分隔、分支的菌丝多为念珠菌和曲霉。
粗大、不分隔少分支的菌丝为接合菌，多为毛霉、根霉、犁头霉等。
粗大、少分支有隔的菌丝为蛙粪霉菌。
棕色菌丝为暗色丝孢霉病，由暗色孢科真菌引起。
③菌丝和孢子，主要见于念珠菌感染。
④颗粒：为组织内由菌丝形成的团块。
⑤球囊或内孢囊：球囊内含有内孢子，为球孢子菌或鼻孢子菌在组织内的特征性结构。
组织病理片中根据形态和染色能基本确定种名的真菌为：荚膜组织胞浆菌、杜波伊斯组织胞浆菌、副球孢子菌、皮炎芽生菌、链状芽生菌、粗球孢子菌、新生隐球菌和鼻孢子菌等。
根据组织病理中真菌的形态能确定属而不能确定种的病为：放线菌病、奴卡菌病、无绿藻病、念珠菌病、曲霉病和不育大孢子菌病等。
多个属的真菌感染可引起相同的临床表现，在组织病理中真菌的形态无法区别的病有皮肤着生芽生菌病、暗色丝孢霉病、接合菌病、皮肤癣菌病和足菌肿等。
足菌肿的颗粒若染色适当，很易确定为放线菌性或真菌性的，也能区别出细菌性颗粒。
真菌性颗粒中的菌丝又分为无色或暗色两大类。
各种病原菌基本上形成各自顔色、大小、形成和结构的颗粒，可以初步区别，但最后确定必须依靠真菌培养。
六、血清学方法随着诊断技术的进展，以免疫学方法检测真菌病已成为可能，引起深部真菌感染的病原菌主要有白念珠菌、曲霉菌和隐球菌等，传统的检测方法主要为血培养和组织活检，但血培养历时太长，且深部真菌感染的病原菌常不易培养成功，阳性率较低。
而深部真菌感染的临床征象错综复杂，又使得组织活检缺乏典型改变，影响正确诊断，这些都使得这些方法所起的作用极为有限，真菌的抗原、抗体及代谢产物的血清学检查用于深部真菌感染的实验室检测，可取得很好的效果。
目前常用的免疫诊断方法有：①特异性抗原的检测：A.乳胶凝集试验（LA）。
B.酶联免疫试验（EIA）。
C.荧光免疫测定法（FA）。
②特异性抗体检测：由于受检者都为免疫低下患者，因其致阳性率低，故现已少用。
七、分子生物学方法近年来随着分子生物学的发展，已有聚合酶链反应（PCR）扩增、分子探针、限制性酶切片段长度多态性分析（RFLP）、DNA指纹图谱、随机扩增DNA多态性（RAPD）等方法。
用于深部真菌病的诊断和分型研究，形成了以PCR技术为基础的一系列分子诊断方法。