酶相关实验总结
酶 生化试验报告

生物大分子·酶——相关生化实验报告小组成员:王书洋张斌贾官斐杨翀左天宇单位:武警后勤学院临床医学系四队四班邮编:300162关键词淀粉酶; 活性; 温度; 抑制剂; 激活剂; 专一性【前言】目前临床主要以检测指标作为依据对疾病的诊断作出较为准确的判断。
其中,酶学上的应用占了相当一部分。
所以,从临床疾病诊断以及治疗的角度去对酶学知识的具体化了解和应用深化是十分有必要的。
酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白,几乎所有的生化反应都离不开酶的催化。
因此,一切对蛋白质活性有影响的因素都影响酶的活性。
酶与底物作用的活性,受温度、pH值、酶液浓度、底物浓度、酶的激活剂或抑制剂等许多因素的影响。
对酶活性的测定对临床诊断以及基础医学的研究都有着重要意义。
很多酶其实包含几种具有同样催化效用的蛋白质,但它们的分子组成、理化性质与免疫学特性却有明显差异,这类蛋白质统称为该酶的同工酶。
同工酶在组织和器官中的分布不同,通过测定不同同工酶的含量与活性的变化,可以推算出改组织和器官的变化。
本综述旨在对后文的三次实验作为基础医学和临床医学的一次应用上的联系。
实验一影响酶促反应速度的因素【实验原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。
淀粉溶液与碘反应呈蓝色;糊精根据分子大小,与碘反应分别呈蓝、紫、红、无色等不同的颜色;麦芽糖不与碘呈色。
唾液淀粉酶的活性受温度、酸碱度、抑制剂与激活剂等的影响。
温度:温度降低,酶促反应减弱或停止;温度升高,反应速度加快。
当上升至某一温度时,酶促反应速度达最大值,此温度称为酶的最适温度。
由于酶的化学本质是蛋白质,温度过高会导致蛋白质构象的改变,因此如果温度继续升高,反应速度反而会迅速下降甚至完全丧失。
酸碱度:唾液淀粉酶最适pH为pH6.9,高于或低于酶的最适pH值,都将引起酶活性的降低,过酸或过碱的反应条件可使酶活性丧失。
抑制剂与激活剂:酶的活性常受某些物质的影响,能增加酶的活性称为酶的激活剂:降低酶活性且不使酶蛋白变性的称为酶的抑制剂。
“酶工程”_暑期科研实践_实习_报告_总结 2100字 - 总结范文

三一文库()〔“酶工程”_暑期科研实践_实习_报告_总结 2100字 - 总结范文〕“酶工程”暑期科研实践总结报告生物科学与工程学院生物工程2班黄义林20xx30742333这次暑期科研实践,我和李洋、黄文潘都参加了有张俊辉师兄所负责的酶分子改造的项目,实际参加实验的时间是7月13至29号,以及8月16至19号。
在此之前,我们还参加了有郑穗平老师和林影老师讲授的关于酶的发展、现状以及前景的讲座,以及内容为负责各个项目的师兄对其项目讲解的培训。
参加实践前的讲座和培训都让我对酶的发展概况、研究方向有了更深刻全面的认识。
实验中,张俊辉师兄让我们从实验的开头开始,逐步学习实验过程中各阶段的实验操作,同时对专业知识进行讲解,让我们更好地掌握实验操作的原理。
在实验流程中,我们的操作都没有出现能直接导致实验失败的失误,但实验最后并没有得到想要的产物,原因应该是多方面的,也和我们的实验操作有很大关系。
实验没有得到很好的成果,但在实践过程中,我学习和掌握了一些基本实验操作技能及操作规范,并对实验室内的规章制度有了更多的了解。
下面说一下我在实验中学到的知识和其他心得体会。
首先是酶分子改造实验的思想:获得待改造酶分子的三维结构后,对其进行分析,从而确定可能改善酶某一方面性能的突变位点,通过反编译获得改造后的酶的基因,把这段基因再表达出来,就得到改造后的酶分子。
思想比较直接,但是实际操作却比较迂回,因为某些步骤看起来不复杂,但在现实中要实现就没有那么简单,比如要确定突变位点和突变的方向,目前的理论对蛋白质结构和功能的研究还达不到可以直接指导酶分子改造的那个层次,所以在改造的时候需要结合理性突变和随机突变,即理性确定突变位点,然后在那个位点进行全突变,或者增加突变位点;要获得反编译后的酶的基因,直接合成成本太高(1bp 要几块钱),所以需要对原来的基因进行操作(设计引物,通过PCR对酶基因进行全突变);对改造后的酶的基因进行表达,需要利用基因工程技术,我们在实际操作中是先把基因和质粒连接,先转化大肠杆菌以增殖质粒,再从大肠杆菌中提取质粒,转化毕赤酵母进行最终的表达;因为设置多个突变位点以及每个突变位点都有二十种氨基酸,所以需要进行大量的筛选(筛选量随着突变位点的增长而呈指数增长);基因既看不见有摸不着,在实验过程中需要对每一步的成果进行检测,比较多的就是依靠跑胶来检测DA分子的长度,确定是否得到目的基因,与突变后的酶基因进行连接的质粒上面要有抗生素抗性标记,转化后的大肠杆菌或毕赤酵母要用含抗生素的平板进行培养,以筛选出成功转化的菌落。
高中生物关于酶的实验

高中生物关于酶的实验酶是生物体内一类具有生物催化作用的蛋白质,对于高中生物学习而言,了解酶的性质和作用具有重要意义。
以下是一份关于酶的实验文档,旨在帮助高中生更好地掌握酶的相关知识。
一、实验目的1.了解酶的特性和作用机理;2.掌握酶的催化效率及其影响因素;3.培养学生的实验操作能力和观察能力。
二、实验原理酶是一种具有高效、专一、可逆等特性的生物催化剂,能显著降低化学反应的活化能。
酶的活性受温度、pH值等因素的影响。
三、实验材料与仪器1.材料:新鲜肝脏、过氧化氢溶液、碘液、淀粉溶液、唾液、蔗糖溶液等。
2.仪器:烧杯、量筒、滴定管、试管、温度计、磁力搅拌器等。
四、实验步骤1.酶的提取(1)将新鲜肝脏洗净,剪碎,放入烧杯中;(2)加入适量生理盐水,用玻璃棒搅拌,使肝细胞破裂;(3)用纱布过滤,收集滤液,备用。
2.过氧化氢酶活性测定(1)取3支试管,分别加入2mL过氧化氢溶液;(2)向1号试管中加入2滴提取的肝酶液,2号试管中加入2滴唾液,3号试管中加入2滴蒸馏水;(3)观察各试管中气泡产生的速度,记录实验结果。
3.淀粉酶活性测定(1)取3支试管,分别加入2mL淀粉溶液;(2)向1号试管中加入2滴提取的肝酶液,2号试管中加入2滴唾液,3号试管中加入2滴蒸馏水;(3)将各试管放入热水中加热,观察各试管中淀粉消失的速度,记录实验结果。
4.蔗糖酶活性测定(1)取3支试管,分别加入2mL蔗糖溶液;(2)向1号试管中加入2滴提取的肝酶液,2号试管中加入2滴唾液,3号试管中加入2滴蒸馏水;(3)将各试管放入热水中加热,观察各试管中蔗糖消失的速度,记录实验结果。
五、实验结果与分析1.过氧化氢酶活性测定:1号试管中气泡产生速度最快,说明肝酶液中含有过氧化氢酶,具有催化分解过氧化氢的作用。
2.淀粉酶活性测定:1号试管中淀粉消失速度最快,说明肝酶液中含有淀粉酶,具有催化分解淀粉的作用。
3.蔗糖酶活性测定:1号试管中蔗糖消失速度最快,说明肝酶液中含有蔗糖酶,具有催化分解蔗糖的作用。
酶性质实验报告结果现(3篇)

第1篇一、实验目的本次实验旨在通过一系列的实验操作,观察和分析不同因素对酶活性的影响,探究酶的专一性、激活剂与抑制剂的作用以及酶的最适温度。
二、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、葡萄糖酶、果糖酶、淀粉、葡萄糖、果糖、磷酸盐缓冲液、氯化钠、硫酸铜、碘液、苯酚、乙醇等。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、离心机、分光光度计、移液器、容量瓶、试管等。
三、实验方法1. 酶的专一性实验(1)将淀粉酶分别与淀粉、葡萄糖、果糖混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应一定时间。
(2)将反应后的溶液进行离心,取上清液。
(3)用碘液检测上清液中淀粉的含量,用苯酚-硫酸法检测葡萄糖和果糖的含量。
2. 激活剂与抑制剂实验(1)将淀粉酶分别与磷酸盐缓冲液、氯化钠、硫酸铜混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应一定时间。
(2)将反应后的溶液进行离心,取上清液。
(3)用碘液检测上清液中淀粉的含量。
3. 酶的最适温度实验(1)将淀粉酶分别置于不同温度的恒温水浴锅中,反应一定时间。
(2)将反应后的溶液进行离心,取上清液。
(3)用碘液检测上清液中淀粉的含量。
四、实验结果与分析1. 酶的专一性实验结果实验结果显示,淀粉酶对淀粉的催化效果明显,而对葡萄糖和果糖的催化效果较差。
这表明淀粉酶具有高度的底物专一性,只能催化淀粉的水解反应。
2. 激活剂与抑制剂实验结果实验结果显示,氯化钠对淀粉酶的活性有促进作用,而磷酸盐缓冲液和硫酸铜对淀粉酶的活性有抑制作用。
这说明氯化钠可以作为淀粉酶的激活剂,而磷酸盐缓冲液和硫酸铜可以作为淀粉酶的抑制剂。
3. 酶的最适温度实验结果实验结果显示,淀粉酶在40℃时的活性最高,而在其他温度下,酶的活性逐渐降低。
这表明淀粉酶的最适温度为40℃。
五、讨论与心得1. 酶的专一性是酶催化反应的一个重要特点,本实验验证了淀粉酶对淀粉的专一性,为后续研究酶的应用提供了理论依据。
2. 激活剂和抑制剂在酶催化反应中起着重要作用。
本实验发现氯化钠可以作为淀粉酶的激活剂,而磷酸盐缓冲液和硫酸铜可以作为淀粉酶的抑制剂,为酶的调控提供了参考。
DNS法测定纤维素酶活实验方法总结及优化方案

DNS法测定酶活实验方法总结及优化方案
目前纤维素酶没有统一的测定方法,诸多因素影响纤维素酶酶活测定大小的比较。
选择适宜的酶活测定条件,提高测定结果的准确性,可根据有关资料中采用的测定条件,以及通过控制变量法对酶活力测定中的主要影响因素进行研究。
目前实验室采用测酶活方法:
1、葡萄糖标准曲线制作:
530nm比色。
2、酶活测定方法:
考虑到酶液中培养基成分会对吸光值造成一定的影响,所以空白管0还是采用先将酶高温灭活的方法,后面保持实验条件一致,显色时间与标准曲线的显色时间保持一致。
单位酶活的计算:T n k OD ml U 1000
1
)/(⨯⨯⨯=酶活力 n :稀释倍数; K :曲线斜率; T :反应时间,min ; 1000:mg 换算成ug.
以下是近期所做的实验结果:
葡萄糖标准曲线
两种产纤维素酶细菌不同测试结果
测定结果
实验结论:从以上几种对酶液的处理方法来看,183的酶活要比R2高,两种菌都是以胞外酶为主。
目前尚没找到有关于加缓冲溶液并且超声破碎的文献,所得测量结果与前面三种方法均不符,这一步需另外探索。
根据《纤维素酶活力测定条件研究》(夏服宝等,《饲料工业》2005年第26卷第16期)和《影响纤维素酶活力测定的几个因素》(刘妙莲等,中国食品发酵工业研究所)这两篇文献,实验室可先从底物浓度、温度、DNS用量、显色时间以及对菌体的超声破碎时间这几方面进行探索,进而优化实验方法。
酶及其相关实验2020.2.7

3ml
3ml
3ml 有专一性。
1ml 1ml
蔗糖酶只能分解蔗糖,不 能分解淀粉,蔗糖酶具有
1ml 1ml 专一性。
37 ℃水浴保温
5.试管3与5或者4与6对照, 15 min 15 min 15 min 15 min 能不能说明酶具有专一性 ?
本尼迪特试剂, 并水浴加热 实验结果
2 mL
2 mL 2 mL 有红黄 色沉淀
/ 2 mL
/ 2 mL
0 ℃ 37 ℃ 100 ℃ 0 ℃
2
温度
37 ℃
水浴保温5 min
3
A和D、B和E、C和F混合,水浴保温10 min
100 ℃
4 加碘—碘化钾溶液 /
/
/
2滴
2滴
2滴
5
观察并记录
/
/
/
蓝色 没有蓝色或蓝色很浅 蓝色
3.为什么要在加入淀粉酶溶液之前控制好各自的温度?
答案 酶具有高效性,若在控制好各自的温度之前加入淀粉酶溶液,会使淀粉酶与淀粉的接触发 生在同一种温度的环境下,不利于观察不同温度条件下,酶的活性高低的区别。
15 min
2 mL
1. 实 验 中 设 置 试 管 1 、 2 的 目 的是什么?对照组还有哪几 组?自变量时什么?
起对照作用,用以证明淀粉和蔗糖 溶液中是有非还原糖。 4、6; 酶与底物
2. 为什么先做试管1、2,等 结果不出现红黄色沉淀再做 3、4、5、6试管?
不出现红黄色沉淀证明淀 粉和蔗糖溶液中不含还原 糖,才能继续。
一.酶的特性
1.高效性: (原因)酶能显著降低反应所需的活化能。
解释:中间产物学说
E+S 酶 底物
琥珀酸脱氢酶实验报告

琥珀酸脱氢酶实验报告琥珀酸脱氢酶实验报告引言:琥珀酸脱氢酶是一种重要的酶类,广泛存在于生物体内,参与着多种生物化学反应。
本实验旨在通过测定琥珀酸脱氢酶的活性,探究其在生物体内的功能和作用机制。
实验材料与方法:1. 实验材料:琥珀酸脱氢酶提取物、琥珀酸、NAD+、乙醇、磷酸盐缓冲液、pH 7.4的缓冲液、紫外可见分光光度计等。
2. 实验方法:(1)制备琥珀酸脱氢酶提取物:将适量的生物组织(如动物肝脏)切碎,加入磷酸盐缓冲液中,用离心机离心,收集上清液,即为琥珀酸脱氢酶提取物。
(2)测定琥珀酸脱氢酶的活性:将琥珀酸脱氢酶提取物与琥珀酸、NAD+等试剂按一定比例混合,加入pH 7.4的缓冲液中,反应一段时间后,用紫外可见分光光度计测定反应液的吸光度变化。
结果与讨论:通过实验测定,我们得到了琥珀酸脱氢酶的活性数据,进一步分析和讨论如下:1. 酶的活性与底物浓度的关系:我们在实验中分别使用了不同浓度的琥珀酸作为底物,测定了相应的酶活性。
结果显示,随着底物浓度的增加,酶活性呈现出逐渐增加的趋势,但当底物浓度达到一定水平后,酶活性趋于稳定。
这说明琥珀酸脱氢酶的活性受到底物浓度的调控。
2. 酶的活性与pH值的关系:我们在实验中调整了反应体系的pH值,并测定了相应的酶活性。
结果显示,酶活性在不同pH值下呈现出不同的变化趋势。
在一定范围内,酶活性随pH值的增加而增加,但当pH值超过一定范围后,酶活性开始下降。
这说明琥珀酸脱氢酶的活性受到pH值的影响,存在最适宜的pH值。
3. 酶的活性与温度的关系:我们在实验中调整了反应体系的温度,并测定了相应的酶活性。
结果显示,酶活性在一定温度范围内呈现出逐渐增加的趋势,但当温度超过一定范围后,酶活性开始下降。
这说明琥珀酸脱氢酶的活性受到温度的影响,存在最适宜的温度。
结论:通过本次实验,我们成功测定了琥珀酸脱氢酶的活性,并探究了其与底物浓度、pH值和温度的关系。
我们发现琥珀酸脱氢酶的活性受到这些因素的调控,这与其在生物体内参与多种生物化学反应的功能密切相关。
生物选修一实验总结

生物选修一实验总结引言生物选修一实验是作为生物学专业课程中的一部分,旨在帮助学生通过实验了解和掌握生物学的基本理论和实际应用。
本文将总结我在生物选修一实验中的主要经历和收获。
实验一:细胞观察实验一旨在通过显微镜观察细胞结构,以及掌握细胞染色和细胞计数的基本方法。
在实验过程中,我首先通过染色技术对细胞进行着色,然后使用显微镜观察细胞结构,并学会了准确进行细胞计数。
通过这个实验,我深入了解了细胞的基本结构和组成,掌握了常用的细胞观察方法。
实验二:酶的活性测定实验二的目的是通过测定酶的活性来研究酶的催化作用。
在实验中,我们选择了过氧化氢酶作为研究对象,使用比色法测定酶的活性。
从实验中,我了解到酶对化学反应的促进作用,以及如何利用比色法进行酶活性测定。
这个实验扩展了我的实验技术和实验思维,让我更加深入地了解了酶的特性和功能。
实验三:DNA提取与鉴定实验三旨在通过提取和鉴定DNA来了解DNA的结构和特性。
在实验中,我们采用了细胞裂解和酶解的方法提取DNA,然后使用凝胶电泳进行DNA的鉴定。
通过这个实验,我学会了DNA提取的方法和DNA的凝胶电泳分析技术。
这个实验让我更加深入地理解了DNA的结构和功能,以及DNA在生物学中的重要性。
实验四:细胞培养实验四的目的是通过细胞培养来研究细胞的生长和分化。
在实验中,我学会了细胞培养的基本操作和细胞培养液的配制方法。
通过观察细胞的生长和形态变化,我对细胞分化和细胞培养技术有了更加深入的理解。
这个实验不仅扩展了我的实验技术,还让我认识到细胞培养在生物学研究和医学应用中的重要性。
实验五:光合作用的测定实验五旨在通过测定光合作用速率来研究植物光合作用的特性和影响因素。
在实验中,我们使用光度计测定光合作用速率,并研究不同条件下对光合作用速率的影响。
通过这个实验,我了解了光合作用的基本原理和测定方法,以及光合作用与环境因素的关系。
这个实验让我更加深入地了解了植物的光合作用过程和机制。
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(3)综合分析试管2、3和5的实验结果,说明在该实验中GA的作用 是__诱__导__种__子__产__生__α__淀__粉__酶______________。
2、(2013·课标全国理综Ⅱ,29)已知大麦在萌发过程中可以产生α淀粉酶, 用GA(赤霉素)溶液处理大麦可使其不用发芽就产生α淀粉酶。为验证这一 结论,某同学做了如下实验。
试管 号 1 2 3 4
5
GA溶 液
缓冲 液
水
半粒 种子 10个
实验步骤 步骤1 步骤2
实验结果
0
1 1 带胚
++
0
1 1 去胚
1、对照原则 2、单一变量原则 3、等量的原则 4、平行重复原则 5、科学性原则
实验基本的步骤
1、分组编号 2、施加实验条件(对照组和实验组)
3、观察实验现象 4、得出结 论
一、鉴定酶的本质
1、设计思路
标准蛋白液 待测酶液
双缩脲试剂 紫色反应
标准RNA样液 吡罗红染液
待测酶液
红色
该酶是 蛋白质
该酶是 RNA
得出 结论
2、设计方案(举例)
项目
材料 试剂 现象 结论
方案一
方案二
实验组
对照组
底物相同
(等量)
实验组 与酶相对应 的底物
对照组 另外一种 底物
与底物相对 另外一种酶 应的酶溶液 溶液(等量)
同一种酶 (等量)溶液
发生反应
不发生 发生反应 不发生反应 反应
酶具有专一性
酶具有专一性
材料:淀粉溶液,α-淀粉酶(最适PH为7,最适温度为60 ℃ )蔗糖溶液,碘液,斐林试剂
酶
同种底物
比较反应 速率
得出 结论
2、设计方案(举例)
项目 材料
实验组 等量的同种底物
对照组
试剂 现象
与底物相对应的“酶溶液”等量的“无机催化剂”
反应速率很快,或反应用 反应速率缓慢,或
时短
反应用时长
结论
酶具有高效性
三、验证酶的专一性
1、设计思路
A物与、A酶B酶 A物B物与、A酶
观察酶 促反应 能否进 行
α-淀粉酶
60℃保温5分钟
50-65 ℃水浴加热2分钟
若用唾液淀粉酶,则保温温度为37℃
四、探究酶的最适温度和pH(举例)
(2)实验设计思路。
①探究酶活性的最适温度
反应物t1温度下+酶溶液t1温度下
反应物t2温度下+酶溶液t2温度下
⋮
⋮
⋮
检
测
反
应
物
的
分
解
速
率
反应物tn温度下+酶溶液tn温度下
25 ℃ ++++
25 ℃ 保温10
0.2 1 0.8 去胚 保温24 min后 h后去 各试管
++
除种子,中分别
0.4 1 0.6 去胚 在各试 加入1
+
管中分 mL碘液,
别加入 混匀后
0.4
1
0.6
不加 1 mL淀 种子 粉液
观察溶 液颜色
++++
深浅
注:实验结果中“+”越多表示颜色越深,表中液体量的单位均 为mL。 回答下列问题。 (1)α淀粉酶催化____淀__粉________水解可生成二糖,该二糖是 _____麦__芽__糖_________。
或反应物的剩余量(或生成物的生成速度或生成量) ②探究过氧化氢酶的最适 pH 的实验设计思路如下:
H2O2溶液+酶溶液pH1下 H2⋮O2溶液+⋮ 酶⋮溶液pH2下―检―测→O2的产生速率 H2O2溶液+酶溶液pHn下
三类实验的总结
一、鉴定实验 二、验证实验 三、探究实验
课堂练习
1、(2013·江苏改编)为了探究温度、pH对酶活性的影响,下列实验设
计合理的是( B )
实验编 号
探究课题
选用材料与试剂
① 温度对酶活性的影响 过氧化氢溶液、新鲜的肝脏研磨液
② 温度对酶活性的影响 新制的淀粉酶溶液、可溶性淀粉溶液、碘液
③
pH对酶活性的影响 新制的蔗糖酶溶液、可溶性淀粉溶液、碘液
新制的淀粉酶溶液、可溶性淀粉溶液、斐林
④
pH对酶活性的影响
试剂
A.实验① B.实验② C.实验③ D.实验④
酶相关的实验总结
对照实验
除了一个因素以外,其余因素都保持不变的实验叫做对照实验
名称
内容
自 人为改变的变量称为自变量。(举例)
变
量Байду номын сангаас
因
变 随着自变量的变化而变化的变量称为因变量。
量
无关 变量
除自变量外,实验过程中可能还会存在一些可变因素, 对实验结果造成影响,这些变量称为无关变量。
对照实验遵循的原则:
(4)综合分析试管2、3和4的实验结果,说明 __G_A_溶__液__浓__度__高__对__α__淀__粉。酶的诱导效果好
2、设计方案(证明酶是蛋白质)
项目 材料 试剂 现象
结论
实验组
对照组
待测酶溶液
已知蛋白液(等量)
分别加入等量的双缩脲试剂
是否呈现紫色
呈现紫色
呈现紫色说明该酶为蛋白质类,否则
该酶不属于蛋白质类
同理,也可利用吡罗红能使RNA呈红色来设计实验验证 酶是RNA。
二、验证酶的高效性
1、 设计思路 无机催化剂