《克隆技术》ppt5

合集下载

动物体细胞核移植技术和克隆动物-高二生物课件(人教版2019选择性必修3)

动物体细胞核移植技术和克隆动物-高二生物课件(人教版2019选择性必修3)

二 体细胞核移植的过程
问题8:实际在克隆高产奶牛时, 科学家并没有从供体细胞中取出细 胞核,而是直接将供体细胞注入去 核的卵母细胞。为什么?
卵母细胞,在体 外培养到MⅡ期
通过显微 操作去核
去核的卵母细胞
供体体细胞 供体细胞培养
对卵母细胞损伤较小; 保证供体细胞的细胞核不被破坏, 操作方便。
将供体细胞注入去 核的卵母细胞
第2.2节 动物细胞工程
三、动物体细胞核移植技术和克隆动物
本节聚焦: 什么是动物体细胞核移植技术? 动物体细胞核移植的基本过程是什么? 体细胞核移植技术的应用前景有哪些? 怎样理性看待体细胞核移植技术存在
的问题?
阅读教材P52,回答下列问题: 问题1:克隆猴用到了什么技术?
动物细胞核移植技术 问题2:为什么用供体猴的一个细胞核进行移植 就可以培育出与它几乎一模一样的克隆猴?
在生物学上包含分子、细胞、个体3个层次,即分子克隆、
细胞克隆、个体克隆。
动物细胞培养技术 植物组织培养技术
单克隆抗体技术、 PCR技术
植物细胞培养技术 核移植技术
(2018·全国Ⅲ)2018年《细胞》期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人
灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题:
困难②:对非人灵长类动物胚
2.神奇的速度 胎进行操作的技术尚不完善。
我国科研工作者能在10秒内对卵母细胞进行细胞去核操作,在15秒之内 将体细胞注入到卵母细胞。因为操作越快,卵细胞受损就越小,这一神 速正是实验成功的最重要基础之一。
一 动物细胞核移植技术
1.定义
动物细胞核移植技术是将动物一个细胞 的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这 个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而 发育成动物个体的技术。

高中生物《克隆技术》课件ppt

高中生物《克隆技术》课件ppt
4
想一想:
无性生殖
• 说说你知道的无性生殖实例。
5
无性生殖——分裂生殖
6
无性生殖——出芽生殖
酵母菌
7
无性生殖——孢子生殖
青霉菌
青霉的孢子
8
无性生殖——营养生殖
营养生殖是由高等植物体的营养器官---根、茎、叶 的一部分,与母体脱落后,发育成一个新的个体。
9
嫁接
扦插

接穗



砧木




10
卵细胞 (去核)
体外培养形 成早期胚胎
母羊C
胚胎发育 克隆羊
(代理母亲怀孕)
—多莉
16
想一想: 这两项技术的实施过程中,是否 存在共性呢?
如果根据研究需要停留在该阶段, 是否还属于个体克隆呢?
体外培养 成早期胚胎
都有在体外进行细胞培养的阶段
17
细胞克隆 获得遗传背景相同的细胞群
18
想一想:
•细胞克隆有哪 些用途?
个个体的结合,只由一个模板分子、 母细胞或母体直接形成新一代分子、 细胞或个体,就是无性繁殖,即克 隆。
22
想一想: •个体水平的克隆能够从一个细胞 克隆繁殖出一个生物,它的理论 基础是什么?
23
个体克隆的理论基础 体细胞具有全部遗传信息,即具有细
胞的全能性。
24
想一想: •为什么个体水平克隆较难实现? 尤其是动物个体的克隆? •植物体细胞实现全能性需要什么
得到特定类型 细胞及其产物
单 克 隆 抗 体 制 备
19
想一想: 在获得转基因植物过程中是否
涉及到了克隆?属于什么水平
土壤农杆菌

动物克隆技术2018

动物克隆技术2018
自然界的多态性。
5. 克隆动物若被应用于人类 , 将会导致各种各样
的伦理、法律问题
6.小结
总之,克隆技术尽管存在一些问题,但其有巨大 的发展潜力,我们要用发展的眼光去看待克隆技 术,正确地将这项技术应用于器官移植、拯救濒 危动物等方面,使其真正的造福人类。
THANKS!
2.动物克隆技术原理
克隆技术得以实现的理论基础在于“细胞的 全能性”。细胞的全能性是指细胞包含个体的 全套遗传信息,在特定环境因素的调节下,可 回到受精卵一样的状态,从头开始发育成一个 完整的生物个体。只有具备全能性的动物组织 细胞,才可用于克隆动物。
尚未分化的胚胎细胞具有全能性。基于这种认识, 人们采用胚胎分割及胚胎细胞核移植技术成功克隆出 了许多动物。
胚 胎 细 胞 核 移 植
细 胞 核 移 植 的 方 法
体 细 胞 核 移 植
动物克隆技术分类
3.胚胎干细胞核移植:将胚胎干细胞利用核移植技术导入去除 染色质的成熟卵母细胞内,电融合后发育成胚胎。 4.胎儿成纤维细胞核移植:从早期胎儿分离出单个成纤维细胞, 导入成熟卵母细胞内,电融合后发育成胚胎。
“中中”和“华华”
4.动物克隆技术应用
1.克隆技术与转基因技术结合。体细胞核移植技术和转基因技 术的结合将对解决人类器官移植来源、医药生产和疾病治疗、 生物学基础理论研究等具有非常重要的意义。用基因打靶技术 筛选阳性细胞作供核体进行核移植,得到转基因动物。制备转 基因克隆动物, 进行生物药物生产。 2.动物资源的种质保存包括地球上频危动物的挽救和畜牧业等
3.动物克隆技术历史
目前全世界已经成功克隆的动物有以下几种 蛙(1952 年);鲤鱼(1963 年);绵羊 (1996 年);鼠(1998 年);猕猴、猪 (2000 年);牛、猫(2001 年);兔、骡、 鹿、马(2003 年);狗(2005 年);灰狼 (2005年);骆驼(2009 年);体细胞克 隆猴(2017 年)等。

《单克隆抗体技术》课件

《单克隆抗体技术》课件

单克隆抗体的制备与纯化
单克隆抗体是通过杂交瘤细胞在体外培养或注射到动物体内进行体内培养产生的,经过一系列的分离 和纯化过程,最终获得高纯度、高特异性的单克隆抗体。
制备过程中通常采用各种层析技术、沉淀技术等对抗体进行分离和纯化,以确保获得高质量的单克隆 抗体。
单克隆抗体的鉴定与质量控制
鉴定是通过对单克隆抗体的免疫学特 性、生物学活性和分子结构等方面进 行检测和评估,以确定其特异性和质 量。
总结实验过程和结果,分析存在的问题和改 进方向,为后续实验提供参考和依据。
感谢您的观看
THANKS
生物标记物
用于研究细胞生物学、分子生物学 等领域。
03
02
生物药物
用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病等 。
免疫分析
用于检测生物样品中的抗原、抗体 等。
04
02 单克隆抗体技术的原理
杂交瘤细胞系的建立
杂交瘤细胞系的建立是单克隆抗体技 术的核心步骤之一,通过将免疫脾细 胞与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细 胞。
通过抗原-抗体反应检测杂交瘤细胞产生的 抗体特异性。
克隆筛选
通过选择性培养基筛选出能够产生所需抗体 的杂交瘤细胞克隆。
细胞培养与抗体纯化
将筛选出的杂交瘤细胞进行培养,并采用蛋 白质纯化技术获得单克隆抗体。
实验结果分析与总结
结果分析
对实验结果进行统计分析,评估杂交瘤细胞 的抗体产生能力和特异性。
总结
这些杂交瘤细胞既具有脾细胞无限增 殖的能力,又具有产生特异性抗体的 能力,从而为单克隆抗体的制备提供 了稳定的细胞源。
杂交瘤细胞的筛选与克隆化
在筛选过程中,通过抗原-抗体反应检 测杂交瘤细胞产生的抗体,筛选出能 够产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞 。

新克隆技术不用酶切位点,直接克隆

新克隆技术不用酶切位点,直接克隆
CD101, 2799-bp PCR Product Sense 5′-CAGAGAGAAGTAACAGTTCAGAAA-3′ Antisense 5′-GGCCGAGGAGCAGATCCTGGAA-3′
Murine IgG3 with Overlaps to CD101 and SalI-Digested Vector, 771-bp PCR Product Sense 5′-ATCTGCTCCTCGGCCCCTAGAATACCCAAGCCCAGTACC-3′ Antisense (SalI underlined) 5′-AGTAACGTTAGTCGACTCAGTGTCTTGTAAGACCCGAGGA-3′
x μl**
dH2O μTol tal Volume
x 10 μl
Linearized vector : Purified PCR fragment(摩尔比)=1:2 *<0.5 kb: 10-50 ng, 0.5 to 10 kb: 50-100 ng, >10 kb: 50-200 ng **<10 kb: 50-100 ng, >10 kb: 50-200 ng
29 In-Fusion克隆技术介绍
9/24/2020

In-Fusion®应用文献
1. Comparative Epigenomic Analysis of Murine and Human Adipogenesis
Tarjei S. Mikkelsen, Zhao Xu, et al. Cell, Oct 2010 ; 143 : 156–169
In-Fusion 克隆技术介绍
宝日医生物技术(北京)有限公司
September 24, 2020

动物克隆技术

动物克隆技术

• 克隆步骤 • 体细胞克隆的主要技术程序与胚胎细胞基本克隆相同, 主要差别在供体细胞的选择。
• 随着克隆技术的发展和人们对核质关系认识的深 入,自然状态的 G0 期细胞(如卵丘细胞)和 G1 期细胞(胎
儿成纤维细胞),可直接移入去核卵母细胞中生产克隆胚 胎。 • S期的细胞核进入受体卵母细胞后会发生碎片化,而M期 和G2期容易造成多倍体。G0/G 1期细胞的获得常用的方法 是靠血清饥饿培养诱导,但长时间的血清饥饿会导致细胞 凋亡。
• 细胞核移植:
• 常用的核移植方法显微注射有两种,即胞质内注射和 透明带下注射。
பைடு நூலகம்
• 胞质内注射:用一个外径5~8μm 的注核针吸取供体核后直 接注射进卵母细胞胞质内。 • 透明带下注射:把供体细胞核注射在透明带与卵母细胞之 间的卵周隙中,核移植后用电刺激进行细胞融合。 • 细胞融合法。用仙台病毒或PEG介导融合,这种方法效果 很不稳定而
• 2.核受体动物的选择与细胞核的移出。 • 3.供体核的移入及原核的取出。 • 4.胚泡的体外试管培养。 • 5.代母的选择与胚泡移入子宫。 • 6.克隆动物的体内发育与出生。

去核卵母细胞常常作为核移植的受体细胞。这是因 为在卵母细胞的细胞质含有某种特定的因子,可以使移植 核中所含有的基因表达程序发生重新排列,使已经分化了 的细胞重新回到发育过程的原点,同受精卵一样开始个体 发育过程。 • 卵母细胞的来源有两种方式:一是用激素对雌体进 行超排处理,从输卵管冲出体内成熟的MⅡ卵母细胞。二是 从屠宰场收集卵巢,吸出滤泡中的卵丘—卵母细胞复合体 (COCs),在体外培养成熟后作为受体。 • MⅡ期的卵母细胞已经成熟,维持的时间长,并且 有较高MPF(促成熟因子maturation promoting factor)活 性有利于供体细胞核的重编程。

T-A基因克隆的技术要点.ppt

T-A基因克隆的技术要点.ppt
8)在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇,擦干桌面。
Page ▪ 14
外源DNA的重组与转化
▪DNA的体外连接重组
▪ 其本质是一个酶促反应过程,即在一定的条件下,DNA连接酶 催化两个双链DNA片段的5’端磷酸和3’端羟基之间相互作用, 形成磷酸二酯键的过程。
▪ DNA连接酶有两种:T4噬菌体DNA连接酶 大肠杆菌DNA连接酶。
▪ lacZ 编码半乳糖苷酶的N端,它可以和宿主菌株产生的半乳糖苷酶C端互
补,形成有活性的β-半乳糖苷酶。
▪ Xgal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷 ,β–半乳糖苷酶的底物,水解后呈
蓝色
▪ IPTG 异丙基硫代半21
蓝白斑
Page ▪ 22
T-A基因克隆的技术要点.ppt
Page ▪ 2
Page ▪ 3
3’-A突出的PCR产物
▪ 使用不同的Taq酶,在PCR扩增循环结束后,加上72℃10分钟 一个过程,Taq酶可以在扩增产物的3末端加上A 。
▪ 使用高保真的DNA聚合酶,如pfu酶,其不能在扩增产物的3 末端加上A,得到的DNA序列为钝端,因此,在回收纯化后进 行加A的过程,通常是以PCR回收产物为模板,加上一定量的 普通Taq酶和反应液,加入dATP(或dNTP), 72℃ 10分钟 。
混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物黏附于细 胞表面,经42˚C短时间热击处理,促进细胞吸收DNA复合物 。将细菌放置在非选择性培养基中保温一段时间,促使在转化 过程中获得新的表型(如Amp+等)得到表达,然后将此细菌 培养物涂在含有氨苄青霉素的选择性培养基上进行培养获得阳 性克隆。
Page ▪ 17
▪ 如果使用ddTTP,效果会更好。

In-fusion技术.ppt

In-fusion技术.ppt


• 1、Genius only means hard-working all one's life. (Mendeleyer, Russian Chemist) 天才只意味着终身不懈的努力。20.8.58.5.202011:0311:03:10Aug-2011:03
• 2、Our destiny offers not only the cup of despair, but the chalice of opportunity. (Richard Nixon, American President )命运给予我们的不是失望之酒,而是机会之杯。二〇二〇年八月五日2020年8月5 日星期三
• 5、You have to believe in yourself. That's the secret of success. ----Charles Chaplin人必须相信自己,这是成功的秘诀。-Wednesday, August 5, 2020August 20Wednesday, August 5, 20208/5/2020
•必须进行限制性内切酶酶切和连接 •需要独一无二、兼容的酶切位点 •极少的合适酶切位点
•亚克隆繁琐 •多片段不能同时克隆
•对于大片段克隆效率较低 •对于插入片段有限制
•非定向克隆需要筛选目的片段插入方向 正确的克隆
•会附加多余碱基序列
•不适合中型和大规模克隆工程
In-Fusion解决方案
只要载体末端和插入片段末端具有15个同源碱基, In-Fusion就可以将任意PCR片段插入任意线性化载 体中。
In-Fusion不受限制性酶切位点的限制,因此在目的 片段及使用的载体中是否存在合适的酶切位点并不 妨碍克隆。
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
毛泽东 名人名言激励励志名言名语名句100句 (励志 古诗词 篇,附 出处) 51、错误和挫折教训了我们,使我们 比较地 聪明起 来了, 我们的 情就办 得好一 些。任 何政党 ,任何 个人, 错误总 是难免 的,我 们要求 犯得少 一点。 犯了错 误则要 求改正 ,改正 得越迅 速,越 彻底, 越好。
克隆
克隆技术应用2:制造基因工程药物, 用于治疗疾病
克隆技术应用3:保护和拯救濒危 动物
二、克隆技术与伦理
正方: 可以 克隆人
反方:
不可以 克隆人
克隆人体的器官可以用于器官的移植或治疗一 些疾病,克隆整个人恐怕是不可行的,是社会 伦理所不容的。恐怕谁都不愿意克隆出和自己 几乎一样的人来吧。
第二节 克隆技术
寄语:同学们对克隆技术比较感 兴趣,有所耳闻但不知所以然, 这部分教学只靠讲述恐怕效果不 好,为此我搜集了一些有关的图 片和资料。来与同学们分享,希 望大家能有所收获!
学习目标
1、说出克隆技术的实质及应用。 2、概述克隆羊“多莉”的培育过程。 3、分析克隆技术与伦理。 4、通过辩论活动,提高自己的语言表达能力。
38、傲不可长,欲不可纵,乐不可极 ,志不 可满。 —— 魏 徵 39、不傲才以骄人,不以宠而作威。 —— 诸葛亮
40、人生的旅途,前途很远,也很暗 。然而 不要怕 ,不怕 的人的 面前才 有路。 —— 鲁 迅 名人名言激励励志名言名语名句100句 (励志 古诗词 篇,附 出处)
41、人生像攀登一座山,而找寻出路 ,却是 一种学 习的过 程,我 们应当 在这过 程中, 学习稳 定、冷 静,学 习如何 从慌乱 中找到 生机。 席慕蓉 42、我们活着不能与草木同腐,不能 醉生梦 死,枉 度人生 ,要有 所作为 。 —— 方志敏
我学会了吗?
•克隆和试管婴儿有何不同?
试管婴儿是有性生殖产生的后代,子代继承了双亲的遗 传特性;而多莉则是无性生殖产生的后代,只有一个亲本的 遗传特性。 多莉羊有三个母亲;一是提供去核卵细胞的母 亲,二是提供细胞核的母亲,三是代孕母亲,但没有一个是 真正意义上的母亲。若克隆技术被用于人类,则克隆出的后 代在伦理上将会出现问题。试管婴儿技术被滥用,如用于性 别决定、同一个人的精子被过多的使用、出现代孕母亲、保 密制度不好等,也会给人们带来一系列伦理上的问题。
43、做人也要像蜡烛一样,在有限的 一生中 有一分 热发一 分光, 给人以 光明, 给人以 温暖。 —— 萧楚女 44、所谓天才,只不过是把别人喝咖 啡的功 夫都用 在工作 上了。 鲁 迅
45、人类的希望像是一颗永恒的星, 乌云掩 不住它 的光芒 。特别 是在今 天,和 平不是 一个理 想,一 个梦, 它是万 人的愿 望。 —— 巴 金 46、我们是国家的主人,应该处处为 国家着 想。— — 雷 锋
多莉羊
思考一:
1、在进行克隆实验时,维尔穆特选用不同品 种绵羊的目的是什么?
作为对照,增强结论的说服力。
2、“多莉”的遗传物质与那只羊相同?请说 明你的理由。
与白脸绵羊的遗传物质相同。
3、与普通绵羊的繁殖相比, “多莉”的产生 有什么特殊之处?
普通绵羊是有性生殖,多莉是无性生殖。
思考二:
1、重组细胞是如何形成的?采用了什么技术? 细胞核移植技术 2、为什么用去核卵细胞作为受体细胞?卵细胞大易操作 3、将早期胚胎植入代孕母羊采用什么技术?胚胎移植技术 4、为什么要植入代孕母羊的子宫? 胚胎发育的条件 5、多利的培育与哪些羊有关?各有什么作用? 6、多利的性状大多数与谁一致? 白脸绵羊 7、有没有与黑脸绵羊一致的地方? 8、有没有与代孕绵羊一致的地方?
CC
第 一 只 克 隆 宠 物 猫
克隆马及其 “母亲兼姐 姐”
克隆的荧光 小猪(左)和正 常小猪(右)
克隆技术应用1:快速培育优良品 质的家畜,并可以保证家畜的优良 性状不会丢失
英国罗斯林研究所利用基因工程培育 出了一只奶中含治疗血友病药物原料 的转基因羊,一家公司以50万英镑的 高价买去。如果利用体细胞大批复制 这只羊,就可以挽救更多患者的生命。
2、克隆技术的应用
最好的办法
克隆

骡子个大,具有 驴的负重能力和 抵抗能力,有马 的灵活性和奔跑 能力,力量也比 马大,而且省草 料,是一种省吃 能干的役畜然而 骡不能繁殖后代, 那么优良的骡如 何扩大繁殖呢?
2001年11月3日和6日在山东莱阳农学院降生了 我国首例和第二例健康成活的体细胞克隆牛 “康康”和“双双”的。目前,它们生长发育 正常。
47、我们爱我们的民族,这是我们自 信心的 源泉。 —— 周恩来 48、路是脚踏出来的,历史是人写出 来的。 人的每 一步行 动都在 书写自 己的历 史。 —— 吉鸿昌
49、春蚕到死丝方尽,人至期颐亦不 休。一 息尚存 须努力 ,留作 青年好 范畴。 —— 吴玉章 50、学习的敌人是自己的满足,要认 真学习 一点东 西,必 须从不 自满开 始。对 自己,“ 学而不 厌”, 对人家 ,“诲人 不倦”, 我们应 取这种 态度。 ——
毛泽东 52、一分钟一秒钟自满,在这一分一 秒间就 停止了 自己吸 收的生 命和排 泄的生 命。只 有接受 批评才 能排泄 精神的 一切渣 滓。只 有吸收 他人的 意见。 我才能 添加精 神上新 的滋养 品。— —
克隆动物和亲本一模一样吗?
同所有生物一样,人的性状也是由基因控 制的。控制人类性状的基因绝大多数位于细胞 核内,极少数存在于细胞质中。因此,通过细 胞核移植产生的克隆动物,仍有少数性状与亲 本不同。
【自查自纠】
做互动,看谁做的又对又快
Thank you for listening
6、真者,精诚之至也,不精不诚,不 能动人 。—— 《庄子 •渔夫 》 37、勿以恶小而为之,勿以善小而不 为。惟 贤惟德 ,能服 于人。 刘 备
重点
1.概述克隆羊“多莉”的培育过程。 2.克隆技术的应用。
植物克隆
有意栽花花不开, 无心插柳柳成荫
无性生殖
一、克隆技术及其应用
多利
你知道克隆羊Dolly 的诞生过程吗?
A母绵羊
B母绵羊

卵细胞

乳腺细胞

细胞质
细胞核

培 育
细胞核移植
融合后的卵细胞
卵裂
早期胚胎
胚胎移植


C母绵羊子宫
妊娠 分娩
相关文档
最新文档