检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
PCR荧光检测试剂盒生产质控规程
PCR荧光检测试剂盒生产质量控制规程一. 微量加样器的使用规定1．微量加样器校正：: 使用微量加样器吸10μl 10次是否为100μl。
2．加样前吸头润湿：当吸头排空时，仍会有一些残留的液体以薄膜的形式吸附在吸头里面，所以，在加样时先吸打液体数次，充分润湿吸头管腔,以保证加样的一致性。
3．加样时吸头应靠试管壁：加样时吸头的液体顺着管壁流出，防止液滴的形成由于其表面张力的作用而阻止样本的释放。
4．吸头是否与加样器上吸头套筒密封：样器上吸头与套筒密封完好。
5．加样时注意第一停点和第二停点：吸液是应注意大拇指按下按钮至第一停点，缓慢慢慢吸入液体。
停留1s，然后将吸头提离液面。
用吸纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。
放液时经过第一停点，停1-2s后，继续按压到第二停点，排出残余液体。
6．PCR反应原液由于有甘油在冷的状态较黏稠,易于1次吸取数人份，慢一些。
7．边加边看,直观估计,防止跳管。
8．低温冷藏批量DNA提取液、PCR反应液A和B取出时是否充分混匀后,分装使用，PCR反应液A和B是否避光低温冷藏和使用。
9．配PCR反应液应先加缓冲液再加PCR反应液充分混匀,必要时倒置混匀,再离心,或用灭菌吸头上下吸几次。
10．PCR反应液（包括样品）应充分混匀:保证PCR反应曲线呈S形，全阴性样品呈近似水平曲线。
二．PCR试验操作规程**血清稀释液：全阴性血清再加2倍HBV DNA提取液混匀, 5000rpm，离心1分钟，混匀血清98℃ 5分钟变性,12000rpm，离心10分钟,吸取上清液。
三.超净工作台的使用、维护保养与清洁标准操作规程1.目的建立一个超净工作台的使用、维护保养与清洁标准操作程序，使操作过程标准化。
2.职责质量部QC负责本文件的起草，质量部及QC检验人员负责本标准的实施。
3.范围本标准适用于超净工作台的使用、维护和保养与清洁。
4.内容4.1超净工作台的主要组成部分：高效过滤器、中效过滤器、通风机、电气控制及排气管道部分。
国家荧光pcr检测标准
国家荧光pcr检测标准
荧光PCR 检测是一种常用的核酸检测方法，它可以快速、准确地检测出病原体的存在。
以下是国家荧光PCR 检测标准的一些基本要求：
1. 检测设备：荧光PCR 检测设备应符合国家相关标准，并经过严格的质量控制和校准。
2. 检测方法：荧光PCR 检测方法应经过严格的验证和优化，以确保检测结果的准确性和可靠性。
3. 检测试剂：荧光PCR 检测试剂应符合国家相关标准，并经过严格的质量控制和验证。
4. 检测人员：荧光PCR 检测人员应经过专业培训和考核，具备相关的专业知识和技能。
5. 检测环境：荧光PCR 检测环境应符合国家相关标准，并经过严格的质量控制和验证。
6. 检测结果：荧光PCR 检测结果应准确、可靠，并经过严格的质量控制和验证。
国家荧光PCR 检测标准是确保荧光PCR 检测结果准确、可靠的重要保障，检测机构应严格按照国家相关标准进行检测，以确保检测结果的准确性和可靠性。
广东省临床检验质量控制中心PCR验收标准
广东省临床检验质量控制中心PCR验收标准
一、PCR技术必须具备的基本条件：
1、规范的PCR实验室。
2、编写适合本PCR实验室的质量手册。
3、经PCR专业知识培训的技术人员（PCR上岗证）。
4、使用有生产批文的PCR试剂，具备条件的二级以上医院可向卫生部或省临床检验中心申请技术验收。
二、PCR实验室验收标准细则：
1、填写PCR实验室技术验收申请表。
2、申报PCR实验室的基本情况，包括检验科基本情况和基因扩增检验实验室基本运行情况，必要性与可行性，着重分析开展项目运行情况、人员配置现状、内部质量管理体系执行情况与效果分析。
3、医疗机构执业许可证。
4、拟设置PCR实验室医院的医疗卫生资源状况，对PCR实验室的需求情况以及实验室运行的预测分析。
5、拟设PCR实验室的设置平面图。
6、PCR实验室主要负责人简历表。
7、PCR实验室工作人员一览表（附实验室工作人员简历）。
8、提供PCR实验室的主要仪器设备表。
9、拟开展的PCR实验室诊断项目。
10、PCR实验室质量手册。
11、检验报告单2份。
12、根据本PCR实验室建设进展情况和试运行进展，提出大致的现场技术验收时间。
13、志愿申请，承担两义务：遵守有关规定；不论能否获准通过验收，预付验收阶段的全部费用。
14、卫生部或省临床检验中心预审，对申报文件和现场进行预验收，初步确定是否进行现场验收和验收时间。
15、卫生部临床检验中心PCR实验室技术任务书现场技术专家组成员组成到现场进行技术验收。
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则1、目的规范了本中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收方法，以确保检测试剂盒的质量符合检测技术的要求；确保检测结果的准确、有效。
2、使用范围适用于本中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收。
3、职责由动物疫病监测室相关人员负责荧光定量PCR试剂盒的验收。
4、验收内容4.1 荧光定量PCR检测试剂盒选用规定荧光定量PCR检测试剂盒的选用以政府招标的方式进行，由具有相关资质的供应商提供试剂盒。
所提供的试剂盒的保质期必须在半年以上，否则予以退货。
每一批号检测试剂盒都必须进行验收，符合要求后方可使用4.2 验收标准及方法4.2.1 荧光定量PCR检测试剂盒的验收按照《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》（GB/T19438.2-2004）与《新城疫病毒中强毒株检测方法荧光RT-PCR法》（SN/T1686-2005）中的规定执行。
试剂盒中提供的试剂有荧光RT-PCR反应液、转录酶、反转录酶和Taq 酶。
验收指标就是使用试剂盒的反应体系，按照GB/T19438.2-2004中的反应程序，使质控阴性对照无Ct值且无扩增曲线；阳性对照Ct值≤30.0，且出现特定的扩增曲线。
4.2.2 主要使用仪器荧光定量PCR扩增仪，生物安全柜4.2.3 验收步骤按照GB/T19438.2-2004以及SN/T1686-2005中的规程对质控阴、阳性对照进行核酸提取，再进行荧光RT-PCR反应。
质控阴性对照无Ct值且无扩增曲线；阳性对照Ct值≤30.0，且出现特定的扩增曲线。
这两个参数同时满足，表明试剂盒符合要求，可以使用。
5、相关记录FNAJ/BG-B-406-05 日常采购（包括易耗品）验收记录表GB/T19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法SN/T1686-2005 新城疫病毒中强毒株检测方法荧光RT-PCR 法。
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则一、引言荧光定量聚合酶链反应（PCR）是一种常用的分子生物学技术，广泛应用于医学、生物学和农业等领域。
在检测中心中，正确使用和验收PCR试剂盒对确保检测结果的准确性和可靠性至关重要。
本细则旨在规范检测中心对PCR试剂盒的验收工作。
二、验收前的准备工作1.阅读试剂盒说明书，了解试剂盒的基本信息、存储条件和使用方法。
2.确保试剂盒未过期，检查试剂盒上的生产日期和有效期限。
三、试剂盒物品清点1.打开试剂盒包装，对照说明书上的清单，确认试剂盒所含物品是否齐全。
2.检查试剂盒内的试剂、标准品和控制品的外观是否正常，如颜色、透明度、凝聚物等。
3.检查试剂盒内的试剂、标准品和控制品的容量是否符合标注要求，比较标贴上的容量和体积。
四、试剂盒存储条件和有效期检查1.检查试剂盒包装上的存储条件是否符合实验室的存储环境。
2.检查试剂盒上的有效期是否仍在有效期范围内，避免使用过期试剂进行实验。
五、试剂试验1.使用空白样品（无样本）进行试剂试验，检查试剂盒的表现如何。
2.检查试剂盒的放大效果，使用适当的阳性对照进行检测，并与实验室标准结果进行比对。
六、数据分析1.将试剂盒试验结果录入实验数据管理系统，并与试剂盒说明书和实验室标准结果进行比对。
2.检查试剂盒试验结果的准确性和可靠性，评估试剂盒在实验室中的适应性和性能。
七、实验记录1.记录试剂盒的验收日期、试验结果和验收结论。
2.如有问题或异常情况，记录并及时向上级主管报告。
八、试剂盒处置1.将已经使用完毕的试剂盒及时处理，按照实验室的废弃物管理规定进行处置。
2.未使用的试剂盒按照包装说明妥善保存，避免存放环境受潮、暴露于阳光直射等不良条件。
九、验收报告1.编写试剂盒验收报告，包括试剂盒信息、试验结果和验收结论等内容。
2.将验收报告归档并交由实验室主管保存。
总结：以上是对检测中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收细则进行规范的一份详细说明。
pcr实验室验收标准
pcr实验室验收标准一、设备和仪器1. 实验室应配备PCR仪、电泳仪、离心机、移液器等必要的设备和仪器。
2. 设备和仪器的数量和规格应符合实验室规模和检测项目的要求。
3. 设备和仪器应放置在合理、方便操作的位置，并标明名称和用途。
4. 设备和仪器应定期进行维护和保养，保证其正常运转。
5. PCR仪应配备有实时荧光检测系统，并应定期进行校准。
二、实验材料和试剂1. 实验室应配备PCR反应液、引物、DNA模板等必要的实验材料和试剂。
2. 实验材料和试剂的种类和数量应满足实验室常规检测项目的需求。
3. 实验材料和试剂应按照规定的储存条件进行保存，并定期进行检查和更换。
4. 实验材料和试剂应有质量保证，如购买凭证、合格证明等。
5. 实验材料和试剂应有明确的标识，包括名称、浓度、生产日期等信息。
三、实验操作方法和流程1. 实验室应有标准的PCR实验操作流程，包括样品处理、PCR反应液配置、PCR扩增等步骤。
2. 实验操作方法和流程应科学、合理，并符合实验室检测项目的特点。
3. 实验操作人员应经过培训和考核，能够熟练掌握实验操作方法和流程。
4. 实验操作过程中应严格遵守实验室安全规范，防止交叉污染和实验室事故的发生。
5. 实验操作完成后，应进行数据分析和结果报告的编写，确保结果的准确性和可靠性。
四、实验室环境与安全1. 实验室应保持整洁、卫生，实验台面和地面应清洁、无尘。
2. 实验室应具备适宜的照明和通风条件，保证实验的准确性。
3. 实验室应设置专门的试剂储存区域，并按照试剂的特性进行分类存放。
4. 实验室应配备消防设施和急救箱等安全设备，并定期进行检查和更新。
5. 实验过程中，应遵守相关的安全操作规程，佩戴必要的个人防护用品。
6. 实验室应设立安全出口和应急照明设施，确保在紧急情况下人员能够安全撤离。
7. 实验室应定期进行消毒和清洁，防止细菌和病毒的传播。
8. 实验室应建立严格的样品管理制度，确保样品的采集、存储和使用过程符合规范。
CBJY-PCR-SOP-020试剂、耗材购买验收和储存作业指导书
1 目的保证基因室检测所使用的试剂及耗材供货渠道和质量的稳定可靠。
2 范围适用于基因室试剂和耗材的供应。
3 内容3.1 试剂耗材的选择3.1.1 PCR检测试剂选择3.1.1.1 选取与扩增仪或检测项目配套的试剂。
3.1.1.2 经有关机构检定批准上市的商品化学试剂盒，商品试剂应三证（生产许可证、经营许可证、产品注册证）齐全。
3.1.2 标本制备区移液器吸头必须使用有滤芯的PCR专用吸头。
3.1.3 离心管、一次性手套等耗材的选购由实验室统一购买。
3.2 试剂及耗材的申购：定期（每月初）由试剂管理员按盘点情况申购下个月的试剂及耗材。
3.3 试剂及耗材的初步验收：由本科室上班人员接收并验收，验收合格后按要求贮存。
3.3.1 外包装检查：包装应完整无损无污，标识清楚（厂家名称、品名、批准文号、生产日期、有效期等）。
3.3.2 内包装检查：内包装是否有破损、泄漏，内容物是否齐全，是否有相应的使用说明书等。
3.3.3 上述验收在接收时完成，同时进行入库记录。
3.3.4 如以上验收不合格，则拒收该批试剂或耗材。
3.4 基因室严格执行试剂和耗材的性能质检、入库、领取、出库及试剂库存量记录，对新批号的试剂和耗材，使用前进行相关性能质检，以确认新批号试剂和耗材对实验结果无影响，对同一批号不同货运号的试剂和耗材，初步验收时发现包装损坏或冰袋融化，则应对此批试剂和耗材进行性能质检。
3.4.1 试剂和耗材的性能验证：见基因室试剂和耗材的质检操作程序。
3.4.2 试剂和耗材的领取：每周一由试剂管理员根据库存和上周使用量，到仓库领取所需试剂和耗材。
3.4.3 出库时应先出近效期的试剂或耗材，并填写《试剂出入库登记表》，试剂出库登记时应将所有阳性对照（包括临界值）、标准品取出，放入标本制备区对应项目的试剂盒内保存。
3.5 基因室试剂及耗材不符合以下要求时，应拒收：3.5.1 不符合试剂及耗材的初步验收要求时。
3.5.2 不符合试剂和耗材质检的性能验证要求时。
新型冠状病毒荧光定量PCR检测试剂盒性能验证
· 医学诊疗技术 ·1452020年 第24期自2019年底新型冠状病毒爆发以来，各地积极响应政府号召，在不断增强各地防护措施的同时，增加对于新型冠状病毒的认知[1]。
在临床检验诊断中实时荧光定量PCR 检测核酸更是目前已知的检测新型冠状病毒最为准确、广泛的方法[2]。
本实验室选用高灵敏度的湖南圣湘生物有限公司提供的检测试剂盒，在最低200拷贝浓度时即可检出病毒，因此对于检测试剂盒的性能质量，显得尤为重要。
1 材料和方法1.1检测样本：所有阳性样本和阴性样本均采用试剂盒配套的阳性对照和阴性对照（批号：2020129）1.1.1试剂：湖南圣湘生物生产的2019新型冠状病毒2019-nCoV 核酸检测试剂盒（荧光PCR 法），检测扩增试剂批号：2020129；仪器：扩增仪-ABI QuantStudio5；1.2操作程序：将PCR 反应管放入扩增仪样品槽。
荧光检测通道选择：选择FAM 和ROX 通道检测2019-nCoV 病毒核酸；选择HEX 通道检测内标。
推荐的循环参数设定如下表1：表1 推荐的循环参数设定步骤温度时间循环数1逆转录50℃30分钟12cDNA 预变性95℃1分钟13变性95℃15秒45退火，延伸及荧光采集60℃30秒4仪器冷却25℃10秒11.3结果曲线判定标准：（1）ORF 与N 基因为典型的S 型扩增曲线，且Ct ≤40的样本，报告为病毒阳性；（2）ORF 与N 基因未检测到典型的S 型扩增曲线，或Ct ＞40，内标有扩增曲线，且Ct ≤40的样本，报告为病毒阴性；（3）对于三通道均未检测到典型的S 型扩增曲线（No Ct），或Ct ＞40，该样本的检测结果无效。
1.4性能验证及提取仪适配性评估方法及指标1.4.1精密度：用模拟阳性样本和阴性样本。
分5天检测，每次4个复孔，计算每通道的符合率及CV 值，要求CV 值≤5%。
1.4.2最低检出限：用已知浓度的模拟阳性标本，通过倍比稀释的方法，复孔实验，直至无法检测出阳性基因为止，要求最低检测限满足200copies/ml。
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检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
一、科学选材
1.测序级合成核苷酸：合成产品应经全长光谱比色检测，确认无肽键
断和错义残基；
2.反应相关试剂：应经分子生物学检测，确认无污染情况；
3.其他活性物质：无反应性活性物质，可保证活性物质以及荧光活性
物质的稳定性；
4.荧光活性物质：其荧光活性物质的滴度必须稳定，没有偏离正常谱
线的情况；
5.合成核苷酸扩增片段：应确保试剂盒所使用的合成核苷酸扩增片段
的序列准确性及效率；
6.唯一性：检测试剂中所用活性物质的唯一性，比如它的荧光量子产
量在一些符合的范围内，可保证检测试剂的性能稳定，可以准确检测出检
测物质；
二、检测实验
1.合成核苷酸的检测：应在实验所用的检测试剂中检测它的质量，通
过GC/MS、全长光谱比色法，检测出来的结果要符合产品质量要求；
2.反应相关试剂的检测：通过分子生物学检测，检测每种试剂的活性，并定量测定；
3.荧光活性物质的检测：确保各种荧光活性物质的谱线分布正常，以
及它们的滴度稳定，没有异常偏移的情况；
4.核苷酸扩增片段的检测：通过质控检测，确保序列的准确性和扩增片段的效率；。