临床免疫学自身抗体检测及应用
自身抗体的检测操作方法
自身抗体的检测操作方法自身抗体的检测是一种用于确定人体是否产生特定抗体的实验方法。
它在临床诊断、免疫学研究以及药物疗效评估等领域起着重要作用。
下面我将详细介绍自身抗体检测的操作方法。
首先，自身抗体检测需要从患者的血液中提取血清。
一般情况下，采用静脉采血的方式获取血样。
为了提取血清，可以将采集到的静脉血样置于无菌离心管中，接着通过离心操作，将红细胞和血液中的其他细胞沉淀下来，留下含有抗体的上清液。
接下来，提取到的血清样本需要存储在低温条件下，储存在零下20摄氏度或更低的冰箱中。
这是因为高温会导致抗体的变性和降解，从而影响后续检测的准确性。
在进行自身抗体检测之前，需要选择适当的实验方法。
常见的自身抗体检测方法包括免疫荧光法（IFA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫印迹法（Western blotting）等。
这些方法各有特点，在不同的情况下选择合适的方法进行检测。
以ELISA为例，操作方法如下：首先，将含有抗体的血清样本加入到固相底物的微孔板中，使血清中的抗体与固相底物结合。
然后，用稀释液对样本进行稀释，以减少非特异性背景信号的干扰。
接着，加入特异性的酶标记抗体，使其与固相底物结合形成免疫复合物。
经过洗涤，去除非特异性结合的物质。
随后，加入含有受体物质的底物，使底物与酶标记抗体发生反应，产生比色或荧光信号。
最后，根据比色或荧光信号的强度，通过光度计或荧光计测定样本中特定抗体的浓度。
将测量结果与标准曲线进行比较，可以得出样本中抗体的相对含量。
除了ELISA，还有其他的自身抗体检测方法。
例如，免疫荧光法是一种通过观察荧光信号来确定特定抗体的存在与否的方法。
在这种方法中，将血清样本与特定抗原结合，然后加入荧光标记的抗体，通过观察标本下荧光信号的出现来确定抗体是否存在。
在进行自身抗体检测时，还需要注意一些技术细节。
比如，选择合适的控制组设置，以确保实验的准确性和可靠性。
同时，实验前需要对试剂进行质量控制，如检查试剂是否过期、是否发生了结冰等，以避免对实验结果的影响。
自身免疫病和自身抗体检测详解演示文稿
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IIF法检测ANA阳性常见荧光染色模型
细胞核 细胞浆 细胞骨架 细胞周期
均质型 核糖体型 肌动蛋白型 中心体型
• 自身免疫：是指机体免疫系统对自身抗原
发生免疫应答，产生自身抗体和（或）致 敏淋巴细胞的现象。
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与自身免疫性疾病相关的基本概念
• 自身免疫病：
是指在各种内外因素的作用下， 自身免疫反应过强，超过了生理性自 身免疫反应的强度且持续相当长时间， 造成对正常细胞、器官的功能与结构 的破坏，呈现与此损伤相关的临床表 现及免疫学异常。
的人群中发生强直性脊柱炎的可能仅为
2%，而第一级HLA--B27阳性的亲属
中，发生强直性脊柱炎的危险性达
20%。
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自身免疫病的基本特征
系统性红斑狼疮（SLE）的家族发病率也 较高，在SLE第一代亲属中发病率达3%-5%，同胞姐妹发病率更高，特别是单卵 双胎更为常见 。在1980年的调查中35组 单卵双胎的患者中，有22组患SLE，共患 病率达62.9%，而双卵双胎8组中仅1组患 病，为12.5%。
免疫印迹法(IB）：
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自身免疫病常规实验室检查
• 血常规：
• RA：80%贫血，活动期PLT升高。 SLE：WBC，PLT，Hb均可能降底。 免疫血管炎：WBC增高。 对药物引起的骨髓抑制的监测。
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自身免疫病常规实验室检查
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自身抗体的检测方法
金标免疫斑点法
临床免疫学检验项目
临床免疫学检验项目一、引言临床免疫学检验项目是通过检测人体免疫系统的功能和免疫相关指标，以辅助临床诊断和监测疾病进展的一种重要实验室检查方法。
免疫学检验项目广泛应用于各个领域，包括感染病、自身免疫病、肿瘤、器官移植、过敏性疾病等。
二、常见的临床免疫学检验项目1. 免疫球蛋白检测免疫球蛋白（Immunoglobulins，Ig）是人体内最重要的抗体，可分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等不同类型。
通过检测免疫球蛋白的水平，可以评估人体免疫系统的功能状态，判断是否存在免疫缺陷或免疫异常。
2. 细胞免疫功能检测细胞免疫功能检测主要包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子检测和免疫细胞功能评价等。
淋巴细胞亚群分析可通过检测CD4+和CD8+T 细胞的比例，评估免疫系统对感染和疾病的应答能力。
细胞因子检测可以检测IL-2、IL-6、IFN-γ等细胞因子的水平，用于评估炎症反应和免疫调节功能。
免疫细胞功能评价可以通过检测免疫细胞的增殖、杀伤力和吞噬功能等指标，评估免疫细胞的功能状态。
3. 自身抗体检测自身抗体是指机体免疫系统异常产生的针对自身组织或器官的抗体。
自身抗体检测可以帮助诊断自身免疫病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。
常见的自身抗体检测项目包括抗核抗体（ANA）、类风湿因子（RF）、抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCAs）等。
4. 过敏原检测过敏原检测是通过检测人体对特定过敏原的免疫反应，帮助诊断和治疗过敏性疾病。
常见的过敏原检测方法有皮肤划痕试验、血清特异IgE抗体检测和免疫球蛋白E（IgE）介导的组织释放试验等。
5. 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测是通过检测体液或血清中特定蛋白质的水平变化，辅助肿瘤的早期诊断、疾病进展监测和预后评估。
常见的肿瘤标志物检测项目包括癌胚抗原（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）、甲胎蛋白（AFP）等。
三、临床意义和应用临床免疫学检验项目在临床诊断和治疗中具有重要意义。
通过对免疫学指标的检测，可以辅助诊断免疫缺陷病、自身免疫病、感染病等，并评估疾病的严重程度和预后情况。
临床免疫学检验方法与应用
临床免疫学检验方法与应用免疫学是一门研究机体对抗病原体、维持免疫平衡的科学，其在临床诊断中起着举足轻重的作用。
免疫学检验方法多种多样，能够准确地检测机体的免疫状态，有助于诊断和治疗各种疾病。
本文将介绍几种常见的临床免疫学检验方法及其应用。
1. ELISA法ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种常用的免疫学检验方法，通过酶标法测定抗体或抗原的存在量。
ELISA法可用于检测HIV、乙肝、梅毒等疾病的抗体水平，也可用于测定药物浓度或病毒载量。
由于ELISA法操作简便、灵敏度高，因此在临床诊断中得到广泛应用。
2. 免疫荧光法免疫荧光法是一种通过检测抗体或抗原在细胞或组织中的荧光信号来进行免疫检测的方法。
免疫荧光法被广泛用于自身免疫性疾病的诊断，如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
通过观察免疫荧光信号的强度和分布，可以判断患者的免疫状态和疾病程度。
3. 免疫印迹法免疫印迹法（Western Blot）是一种通过检测抗体与特定抗原结合而形成的免疫复合物来进行检测的方法。
免疫印迹法主要用于检测蛋白质的表达水平和鉴别不同蛋白质。
在临床上，免疫印迹法常用于肿瘤标记物的检测和分析，有助于早期发现恶性肿瘤。
4. 细胞免疫学方法细胞免疫学是研究机体免疫细胞及其功能的学科，其方法主要包括细胞毒活性测定、淋巴细胞亚群分析、细胞因子测定等。
这些方法在免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反应的诊断和治疗中起着关键作用。
5. 其他免疫学检验方法除了上述几种常见的免疫学检验方法外，还有许多其他方法，如流式细胞仪、PCR法、化学发光法等。
这些方法在特定疾病的诊断和治疗中有其独特的应用价值，为临床医生提供了更多的诊断手段和治疗选择。
总结免疫学检验方法在临床诊断中发挥着不可替代的作用，能够帮助医生准确判断患者的免疫状态和疾病情况，指导治疗方案的制定和调整。
不断发展的免疫学技术为医学进步提供了强大的支持，相信随着科学技术的不断创新和进步，免疫学检验方法将在临床应用中发挥越来越重要的作用。
免疫学检测技术及应用
划痕法
细胞因子的检测技术
一、 生物学检测技术 二、 免疫学检测技术 三、分子生物学检测技术
依赖细胞株测定法 ELISA法
分子杂交、PCR 等检测mRNA
细胞因子检测的特点
• 样品含量低 •样品具有时效性 •生物效应特异性差
Figure 14-12
细胞因子的功能
Cell activation
／immunogold staining)
（一）免疫荧光技术(又称荧光抗体技术) 原理：用荧光素(如异硫氰酸荧光素、罗
丹明B200等) 标记抗体(荧光抗体)，用荧光 抗体浸染细胞或组织切片，抗原与荧光抗体 结合，于荧光显微镜下观察荧光，确定被检 抗原的存在。
免疫荧光技术包括：
直接法
间接法
间接补体增强法
ELISA法： 直接法 间接法 双抗体夹心法(双位点法) 竞争法
ELISA
(三) 同位素标记技术(isotope-labelling technique) 放射免疫分析(radioimmunoassay,
RIA) 是一种用放射性同位素分析抗原抗体反应 相结合方法。 优点：灵敏度高, 可检测0.001pg／mL
Direct and indirect immunofluorescence staining of membrane antigen (mAg).
（二）免疫酶技术(immunoenzymatic techniques)
是将抗原抗体反应与酶催化底物的作用 相结合的一种方法。
主要有两种类型： 1.免疫酶染色 2.酶免疫测定（enzyme immunoassay, EIA）
•3H-胸腺嘧啶核苷参入法（3H-TdR）: 间接观察DNA 合成含量。灵敏度高，具有放射性。 •四甲基偶氮唑盐法（MTT）: MTT商品名为噻唑蓝。 原理：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶可将外源性 MTT还原成蓝紫色结晶-甲瓒（formazan）, DMSO使 其溶解，酶标分析仪检测。简便，灵敏度高，稳定性 差。
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第二十四章 自身免疫性疾病及其免疫检测(附答案解析 )
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测（附答案解析）一、A1型题1、可检出RF免疫球蛋白类别的方法是（）。
A、胶乳凝集B、速率散射比浊法C、ELISA法D、电泳法E、TRUST2、RF免疫球蛋白的主要类别是（）。
A、IgGB、IgAC、IgMD、IgEE、IgD3、关于RF描述错误的是（）。
A、以变性IgG为靶抗原的自身抗体B、抗人或动物IgGFab片段的抗体C、与人或动物变性IgG结合D、不与正常IgG发生凝集E、多见于类风湿关节炎患者4、自身抗体的特征不包括（）。
A、是自身免疫性疾病的主要标志B、高效价自身抗体是自身免疫性疾病的特点C、自身抗体是临床确诊的重要依据D、自身抗体是指导临床用药的重要依据E、自身免疫性疾病可不伴有特征性自身抗体谱5、下列哪一种自身免疫病患者最可能检出抗自身IgG抗体（）。
A、恶性贫血B、重症肌无力C、自身免疫性溶血D、类风湿性关节炎E、肺肾出血性综合征6、下列哪种疾病是非器官特异性自身免疫疾病（）。
A、重症肌无力B、慢性甲状腺炎C、慢性溃疡性结肠炎D、系统性红斑狼疮E、特发性血小板减少性紫癜7、不属于自身免疫性溶血性贫血特点的是（）。
A、体内出现抗红细胞自身抗体B、抗人球蛋白试验阳性C、红细胞寿命缩短D、多见于青年男性E、多继发于淋巴系统恶性病、结缔组织病、感染和药物应用后8、以下叙述正确的是（）。
A、ANA无器官特异性，有种属特异性B、ANA无器官特异性，无种属特异性C、ANA有器官特异性，无种属特异性D、ANA无器官特异性，有种属特异性E、ANA既有器官特异性，又有种属特异性9、下列说法错误的是（）。
A、抗核抗体（ANA）是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称B、ANA的性质主要是IgG，也有IgM、IgA和IgDC、ANA主要存在于血清中，也可存在于胸腔积液、关节滑膜液和尿液中D、ANA阳性一定患有自身免疫性疾病E、正常老年人也可有低效价的ANA10、下列哪种疾病是非器官特异性自身免疫疾病（）。
抗体实验应用
抗体实验应用
抗体的实验应用包括以下几个方面：
1. 抗原检测：抗体能与特定的抗原结合，利用这种特性，抗体可以被用于检测特定抗原。
这种方法可以用于诊断疾病，也可以用于抗体在体外培养和检测中的定量和定性研究。
2. 免疫学检测：抗体可以被免疫学检测所利用，如酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫分析（RIA），以检测样本中的特定抗体。
3. 疫苗研发：抗体可以通过研究来理解免疫反应，从而开发出更好的疫苗。
例如，科学家可以通过研究人体对疫苗的反应来优化疫苗的设计。
4. 自身免疫病诊断：抗体在自身免疫病患者体内大量产生，可以利用这些抗体进行疾病的诊断。
5. 物种识别：某些抗体能够识别特定的细胞或组织，这使得它们在物种识别中有应用。
6. 癌症免疫治疗：抗体可用于识别和增强免疫反应，以对抗癌症。
此外，抗体还可以用于研究细胞信号传导、药物输送等领域。
在临床试验中，抗体被用来治疗许多不同类型的疾病，包括病毒感染、炎症和自身免疫疾病等。
以上仅是部分介绍，进行相关实验时，还需要根据具体实验目的和样本类型选择合适的实验方法。
实验诊断学：临床常用免疫学检测
各种免疫复合物性疾病等。
二、补体C3 、C4检测
C3：含量最高，是补体系统经典激活途径与旁路激活途径的 汇合点和关键物质，为急性时相反应蛋白。
C4：参与经典途径，多种生物学功能。 临床意义： （1）增高：急性炎症、传染病早期、组织损伤、移植排斥反应
(一)正常血清免疫球蛋白（五大类） ：有抗体活性
IgG---含量最多、比例最高、唯一通过胎盘的主力抗体。 IgA---分泌型IgA（SIgA）主控黏膜局部免疫，存在于外
分泌液中（如唾液、泪液、母乳等）。 IgM---分子量最大、凝集和溶解力最强。 IgD---含量很低功能不祥。 IgE---含量最低、亲细胞、参与变态反应（如寄生虫感染、
NK细胞活性：减低见于血液系统肿瘤、实体瘤、免疫缺 陷病、艾滋病和某些病毒感染等；升高见于宿主抗移植 物反应。
抗体依赖性细胞介导的细胞毒（ADCC）:由细胞表面的抗 体Fc受体介导。
四、细胞因子（cytokine,CK）检测
概念：细胞因子是一类由免疫细胞和相关细胞产生的调节细胞功能的 高活性、多功能、低分子的分泌性蛋白质，属于微量免疫调节因子。
参考值：形态学法的转化百分率为（60.1±7.6）%。 临床意义：同前，但Down综合征时明显升高。
（三）T细胞分化抗原（CD）测定
1.T细胞分化抗原主要类别： CD3+ —代表总T细胞、 CD4+ —代表T辅助性 细胞（Th）、 CD8+ —代表T抑制性细胞（Ts）。
2.临床意义： CD3+降低：自身免疫性疾病（AID），如SLE、RA等。 CD4+降低：恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、 AIDS、应用免疫抑制剂者
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第二十章自身抗体检测及应用本章考点1.概念2.自身抗体的特性、概念3.常见自身抗体的检测4.自身抗体检测的临床应用自身免疫：当机体免疫系统受某种因素作用使自身免疫耐受削弱或破坏时，免疫系统会对自身成分包括：正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原产生免疫应答反应，出现自身抗体或致敏淋巴细胞的这种现象称为自身免疫。
自身免疫性疾病：当某种原因使自身免疫应答过分强烈时，也会导致相应的自身组织、器官损伤或功能障碍，这种病理状态称为自身免疫性疾病。
自身抗体；血循环中针对自身组织、器官、细胞及细胞内成分的抗体称为自身抗体。
正常人血清中可有多种微量的自身抗体或致敏淋巴细胞，它能清除体内衰老细胞而起到免疫稳定的效应。
第一节自身抗体的特性自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志。
每种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱。
患者血液中存在高效价自身抗体是自身免疫性疾病的特点之一，也是临床确诊自身免疫性疾病的重要依据。
产生自身抗体的抗原包括以下几种：化学修饰的组织抗原；与自身组织成分存在交叉反应的外来抗原；隐蔽抗原；自身细胞HLA-DR抗原的表达以及低分化的组织抗原等，在一定条件下，均可刺激机体产生自身抗体。
自身抗体与疾病的关系：某些自身抗体对某种疾病的诊断具有高度特异性，已经成为该病的血清标记性抗体或特异性抗体；某些自身抗体与疾病的活动性有相关性；少数自身抗体参与了免疫病理性损伤。
测定自身抗体的意义：自身免疫性疾病的诊断；疾病活动性的判断；疗效的观察；指导临床用药等。
第二节常见自身抗体的检测自身抗体种类很多，这里只是简单介绍几种常见的自身抗体的检测。
一、类风湿因子（一）概念类风湿因子（rheumatoid factor，RF）是一种抗人或动物IgG分子Fc片段抗原决定簇的抗体，是以变性IgG为靶抗原的自身抗体。
可与人或动物的变性IgG结合，而不与正常IgG发生凝集，最多见于类风湿性关节炎患者。
Rose等1984年在RA（rheumatoid arthritis）患者血清中发现RF。
RF有IgM、IgG、IgA和IgE型，IgM型为主要类型。
（二）检测方法1.胶乳凝集试验：以IgG吸附于聚苯乙烯胶乳颗粒上，如血清中含有RF，可与乳胶颗粒出现凝集反应。
该法只能定性或半定量，灵敏度及特异性不高，只能检测IgM型RF。
2.速率散射比浊法：定量检测、准确、快速，准确性和敏感性高于胶乳凝集实验。
也只能检测IgM型RF。
3.ELISA法：可检出不同Ig类型的RF，在酶标记抗体时，分别标记IgG、IgA或IgM。
（三）临床应用RF主要见于类风湿，在类风湿性关节炎患者中的检出率很高，RF阳性支持早期RA的倾向性诊断，对年轻女性应进行RA和风湿热的鉴别；而对非活动期RA的诊断，需参考病史。
但RF也像ANA一样，并不是RA独有的特异性抗体。
在SLE患者约有50%RF阳性，在其他结缔组织病如SS、硬皮病、慢性活动性肝炎以及老年人中均可有不同程度的阳性率。
部分正常人也可出现。
但RF滴度或含量一般较低（<40IU／ml）。
RF无严格特异性，不是RA的唯一诊断标准。
RF阴性不能排除RA。
IgM型RF：>80IU／ml伴严重关节功能障碍者，提示预后不良。
IgG型RF：与患者滑膜炎、血管炎和关节的症状密切相关。
正常人以及非RA患者中很难检出。
IgA型RF：10%RA可检出，为RA临床活动的指标，与骨质破坏以及关节炎症状的严重程度显著相关。
IgE型RF：在关节液、胸水中高于血清水平。
二、抗核抗体抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）是以自身真核细胞成分作为靶抗原的一组自身抗体的总称，泛指各种核成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体。
迄今已发现20余种。
性质主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE，可与不同来源的细胞核起反应，无器官特异性和种属特异性。
ANA主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液以及尿液等体液中。
ANA可见于多种疾病，主要存在于自身免疫性疾病患者血清中，如SLE、SS、MCTD、类风湿性关节炎等。
也可见于慢性肝病、病毒感染以及正常老年人、妊娠妇女等。
ANA阴性不能排除自身免疫性疾病的诊断；阳性也不一定是自身免疫性疾病。
由于细胞核成分的复杂性，不同成分的抗原性也不同；因此就会有多种不同类型的ANA。
ANA在不同的疾病中呈现不同的组合，不同的疾病有自己的抗核抗体谱。
有些ANA只是针对某一特定成分，只在某一疾病中出现，成为该病的血清标志性抗体。
ANA是一个重要的筛选试验。
分类：按理化特性和抗原分布部位分为四大类。
包括抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体。
命名：1.根据抗原化学名称命名：例如抗dsDNA、抗RNP。
2.以第一位检出患者命名：例如抗Sm、抗Ro、抗La抗体。
3.以相关疾病命名：例如抗SSA、抗SSB抗体。
（一）检测方法由于ANA的复杂性及多样性，故测定方法繁多。
目前ANA常用的方法有免疫荧光法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹技术等。
常用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence，IIF）作为总的ANA筛选试验。
鼠肝常用于检测抗核抗体，但近十年来多被HEp-2细胞所代替，这是因为HEp-2细胞具有以下特点：人源性；细胞核大；分裂期细胞多；可大批量培养。
当然，单个细胞不可能替代组织切片，所以鼠组织切片仍继续用于自身抗体的检测。
放射免疫法：常用于检测抗DNA抗体，有Farr法及过滤法。
①Farr法的原理为用同位素标记DNA，被标记的DNA和被检血清的抗DNA抗体结合，经50%硫酸铵饱和液沉淀，然后比较沉淀物和上清液中的放射活性，从而得出DNA结合活性，一般结合率大于20%为阳性。
②过滤法是在分离结合物时用纤维素酯薄膜滤器（孔径为0.45μm）进行过滤，游离的DNA被滤去而与抗体结合的复合物被阻留在滤膜上。
ELISA法：临床上主要是应用间接ELISA检测抗dsDNA抗体，其重复性及敏感性均较对流免疫电泳及双扩散为高。
目前已有试剂盒供应。
免疫印迹（immunoblotting）法：先将混合抗原作凝胶电泳，分离开不同的区带，然后将这些带转印到硝酸纤维素膜上，最后用酶标抗体或放射性同位素标记抗体进行检测和分析。
由于该试验不需纯化的单个抗原，可在同一固相上作多项分析检测，灵敏度高，特异性强。
故目前已广泛用于自身免疫病患者血清中多种自身抗体的检测，如检测抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SS-A抗体及SS-B抗体等。
另外，还可用传统的琼脂双向扩散法、对流免疫电泳法、间接血凝法和补体结合试验等。
这些试验要求的实验条件比较低，但敏感性也比较低。
均质型斑点型核仁型核膜型（二）常见ANA荧光图形及临床意义1.均质型：多是由抗DNP抗体所引起。
也可由核小体抗体和抗双链DNA抗体引起。
主要见于SLE，药物性狼疮。
2.斑点型：是由抗ENA抗体所引起。
主要见于SLE、MCTD、PSS、SS等。
高滴度的斑点型常见于MCTD。
3.周边型（又称核膜型）：主要由抗dsDNA的抗体所引起。
主要见于SLE。
特别是活动期患者。
4.核仁型：主要见于硬皮病。
相关抗体是抗核仁特异的低分子量RNA等。
5.着丝点型：主要见于局限性硬皮病及CREST综合征。
主要的靶抗原是着丝点B抗原。
（三）抗双链DNA抗体的检测方法检测抗DNA抗体的方法有多种，如ELISA、IIF、金标法、免疫印记法、放免法等。
其中最特异敏感的是应用锥虫或血鞭毛虫（如绿蝇短膜虫）作基质测定抗dsDNA抗体。
因为这些血寄生虫的动基体内含大量的纯dsNDA，无其他抗原干扰；在阳性结果时，可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。
因此该试验用于测定抗dsDNA抗体具有特异性强和敏感性高的优点。
另外，短膜虫对人畜无害，可以人工养殖，来源方便，值得推广。
抗dsDNA抗体是SLE的特征性标记抗体，是SLE活动期的重要指标。
抗体滴度的动态检测对疗效的监测提供了有价值的实验室手段。
抗dsDNA抗体对诊断SLE特异性较高；可达95%以上，但敏感性较低，仅为30%～50%，因此，抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。
抗dsDNA抗体在SLE的发病机制中起到重要作用。
如狼疮肾炎；血管炎；皮肤的蝶形红斑等均与该抗体有关。
三、抗ENA抗体谱（一）概述ENA（extractable nuclear antigens）是可提取性核抗原的总称。
ENA是细胞内许多小分子的RNA和多肽组成的非组蛋白的酸性核蛋白颗粒。
ENA主要包括Sm、RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scb-70等抗原。
不同的自身免疫病可以产生不同的抗ENA抗体。
ENA抗体的检测对自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
（二）检测方法检测方法有多种，如免疫印迹法（immunoblotting，IBT）、ELISA、对流免疫电泳、双扩散、金标法等。
这里主要介绍免疫印迹技术。
免疫印迹技术属于膜载体酶免疫技术，其固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。
其基本原理为从小牛或兔胸腺提取ENA，经过SDS-PAGE电泳分成区带，然后转印至硝酸纤维膜上，将待检血清（含抗ENA抗体）加在硝酸纤维膜上，抗ENA抗体与ENA抗原结合，形成Ag-Ab复合物，加入酶标抗人IgG，形成Ag-Ab-酶标Ab复合物，然后加入底物显色。
与标准条带对比判读，可以确定不同的抗ENA抗体。
免疫印迹技术不需纯化抗原，灵敏度高，特异性强，操作简便，是广泛采用的检测抗ENA抗体的技术。
图1 ENA自身抗体谱标准对照带（三）抗ENA抗体的临床意义1.抗Sm抗体：是SLE的血清标志抗体，阳性率30%～40%。
阴性不能排除SLE的诊断。
抗Sm抗体水平与SLE活动性没有相关性，也不与临床表现相关，治疗后的SLE患者也可呈现抗Sm抗体阳性。
抗Sm抗体的检测对早期或不典型的SLE以及治疗后的SLE的回顾性诊断具有帮助。
2.抗核RNP抗体：高滴度的抗核RNP（nRNP）抗体是MCTD诊断的重要依据。
因其抗原为含有U1RNA的核蛋白复合物，故称U1RNP。
MCTD阳性率可高达95%。
也可见于其他自身免疫性疾病。
因为Sm与RNP为同一分子复合物（RNA-蛋白质颗粒）中的不同抗原位点，因此两种抗原具有相关性，常伴随出现，单一的抗Sm抗体阳性者较少见。
3.抗SSA／Ro／抗SSB／La：是干燥综合征（SS）最常见的自身抗体，抗SSB特异性较SSA高。
两者同时检测可提高SS的诊断率，抗SSA抗体也可见于SLE和其他自身免疫病，亚急性红斑狼疮患者、补体缺陷的SLE患者、新生儿狼疮患者可以出现抗SSA抗体。
IgG类抗SSA抗体通过胎盘进入胎儿后，可引起新生儿狼疮综合征，出现典型的SLE皮损。