大豆食品中异黄酮含量的测定行业标准编制说明
大豆异黄酮说明书
大豆异黄酮说明书篇一：大豆异黄酮大豆异黄酮[编辑本段]大豆异黄酮[中文名称]：大豆异黄酮[English name]：Soybean Isoflavones P.E.[拉丁文学名]：C(cine max (L.) Merr[性状]：浅黄色粉末，气味微苦, 略有涩味。
[来源]：大豆类植物的胚芽[主要成分]：大豆甙（Daidzin），大豆甙元（Daidzein），染料木甙（Genistin），染料木素（Genistein），黄豆黄素（Glycitin），黄豆黄素甙元（Glycitein）[功能]：可防治一些和激素水平下降有关的疾病，延缓女性衰老,改善更年期症状、骨质疏松、血脂升高、乳腺癌、前列腺癌、心脏病、骨质疏松症、心血管疾病等。
对于高雌激素水平者，表现为抗激素活性，可防治乳腺、子宫内膜、结肠、前列腺、肺、皮肤等癌细胞的生长和白血病，及其它心血管疾病。
大豆提取物作为营养补充食品便用，此外，大豆异黄酮显著的降低了乳腺癌的发病率，产生这种结果被认为是与它的产物植物雌激素有关。
研究还指出在平时多食用富含大豆异黄酮的食物有助于抑制前列腺癌细胞的生长，那些多吃低脂肪，富含大豆蛋白食品的人患前列腺癌的概率会更低。
（一）什么是大豆异黄酮？异黄酮是黄酮类化合物中的一种，主要存在于豆科植物中，大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。
由于是从植物中提取，与雌激素有相似结构，因此称为植物雌激素。
大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性，是天然的癌症化学预防剂。
益生大豆异黄酮是从非转基因大豆精制而成的生物活性物质，是一种具有多种重要生理活性的天然营养因子，是纯天然的植物雌激素，容易被人体吸收，能迅速补充营养。
在每100克大豆样品中，含异黄酮128毫克，传统方法生产的分离蛋白含异黄酮102毫克，而豆乳中含9.65毫克，因为豆乳含水93.27%，相当于干物质中每100克也含异黄酮100毫克以上。
大豆引进种质资源异黄酮含量的鉴定
国家 自 然科学基金资助项 目（ １ １４ ） 黑龙江省普通高等学校青年骨干支持计划项 目（ １５ ／ ） 博士后研究人 员落户黑龙江科研 ３０ ４０ ； ７ １５ Ｇ Ｚ ；
启动项 目（ｏ９ Ｂｏ）转基 因生物新 品种培育重大专项子任务 ： ２ｏ Ｈ ０９ ； 抗病虫转基因大豆新 品种培育 （０８Ｘ ８０ ０４ 资助 ２０Ｚ ００４— ０ ）
第 ５期
大豆引进种质资源异黄 酮含量 的鉴定
９５
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＋ｔ一 Ｏ 缺失型］ ｓ ［ Ｏ＋３ 一 ） 、Ｄ （ｔ １ 缺失型 ］ Ｓ 一１ ） 和 Ｆ （ 极少型 ） 稀有大豆种质． Ｂ一 ］
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０ 引 言
大 豆异黄 酮 （ ｏｂ ａ ｓｆ ｖｎ ） 类 黄 酮化 Ｓｙ ｅｎ Ｉ ｌ ｏ ｅ 属 ｏａ
组 成 的分 子量 为 １０ｋ ａ的 三 聚体 化 合 物 ， 有 ５ Ｄ 具 降血脂 和降低 血清胆 固醇 含量 的保健 功 能 ＿ １ ．
目前 的研 究表 明 ， 豆蛋 白亚 基 组成 的不 同将 直 大 接 影 响大豆 的营养 品质 和加工 品质 ． 近年 来 ， 随着
目前 的研 究表 明 ， 豆 异黄 酮 的含 量 与大 豆 籽粒 大 大小 呈 负相关 ， 色 种 皮 的大 豆 品 种异 黄 酮 含量 绿 较低 ， 而黑 色 、 色 种 皮 的 含 量 较 高 褐 ． 外， 另 大豆 异黄 酮含 量受诸 多 因素 的影响 ， 与生 长环境 、
大豆检测标准
大豆检测标准
大豆的检测标准涵盖多个方面，主要包括残留农药的检测、营养成分的测定以及储存品质的判定。
以下是一些具体的检测标准：
1. GB 23200.24-2016：这一国家标准规定了粮谷和大豆中11种除草剂残留量的测定方法，使用的是气相色谱-质谱法。
通过这种检测可以确保大豆产品中农药残留量符合安全标准。
2. GB/T 26625-2011：这个标准是针对大豆中异黄酮含量的测定，采用高效液相色谱法。
异黄酮是大豆中的一种重要营养成分，对人体健康有益，因此对其含量的准确测定非常重要。
3. GB/T 31785-2015：此标准规定了大豆储存品质的判定规则，帮助评估大豆在储存过程中的品质变化，以确保其在储存和运输过程中的品质不受影响。
综上所述，这些标准为大豆的质量安全提供了科学的评价依据，对于生产者、加工商以及消费者来说都是非常重要的参考指标。
同时，这些标准也有助于规范大豆市场，保障公众健康。
soy isoflavone fda标准
大豆异黄酮（Soy Isoflavone）是一种植物雌激素，主要存在于大豆及其制品中。
FDA（美国食品药品监督管理局）对大豆异黄酮的标准主要关注其作为食品添加剂的安全性和有效性。
FDA对大豆异黄酮的使用安全性进行了评估，包括其可能的副作用、与其他食品成分的相互作用以及在特定人群（如孕妇、哺乳期妇女、儿童等）中的使用等。
FDA认为大豆异黄酮作为食品添加剂是安全的，并且没有设定特定的每日摄入量。
此外，FDA还对大豆异黄酮的功能进行了评估，包括其作为营养补充剂的作用，以及在某些情况下对健康的影响等。
FDA批准了大豆异黄酮作为营养补充剂的使用，并认为其具有降低血脂、抗动脉粥样硬化以及改善女性更年期疾病等作用。
总之，FDA对大豆异黄酮的标准主要是基于其对食品添加剂的安全性和有效性的评估，认为其是安全的，并批准其作为营养补充剂的使用。
《大豆食品中异黄酮含量的测定》行业标准编制说明
《大豆食品中异黄酮含量的测定》行业标准编制说明（征求意见稿）一、任务来源年月日，由中国食品工业协会豆制品专业委员会申请行业标准的立项，根据工业和信息化部下达的年第一季度行业标准制修订计划，批准《大豆食品中异黄酮含量的测定》推荐性行业标准的制定本标准由中国食品工业协会豆制品专业委员会组织制定工作。
二、标准的属性本标准是推荐性行业标准。
三、标准的修订原则（一）按照《食品安全法》的相关规定，对现行有关大豆异黄酮含量的测定相关标准进行梳理；（二）结合国内豆制品企业生产实际情况，参考国际相关标准；（三）统筹考虑与《食品安全国家标准豆制品》有效衔接，确保标准的适用性、广泛性、可操作性。
本标准的编写符合《标准化工作导则第部分：标准的结构和编写》。
四、标准主要内容制定情况、大豆异黄酮是一类从大豆中分离出来的具有生理活性的物质，近年来被确定为抗肿瘤作用的功能因子，能够预防和治疗乳腺癌、结肠癌和皮肤癌，改善骨质疏松，能够缓解和减轻女性更年期不适症状，同时可提高机体免疫功能，抗氧化、抗溶血、降低心血管疾病和冠心病的发生。
因此制定科学有效的大豆制品中异黄酮含量的测定方法非常重要。
目前，大豆异黄酮的检测主要有高效液相色谱法（）和高效液相色谱质谱联用法（），液质联用法具有高分辨、高分离能力且灵敏度高等优点，但仪器设备昂贵，难以普及。
法具有分离效果好、准确度高、重现性好、分析速度快和自动化程度高等优点，被广泛采用。
结合我国豆制品行业生产企业现状，采用法实验的可操作性、检测成本费用、应用的广泛性等几方面的问题综合考虑较为实际，且本标准中测定方法与其他分析方法比较具有同时测定种大豆异黄酮单体的含量的优点。
、本标准（国家大豆产业技术研发中心加工研究室）方法：标准品制备：准确称取标准品置于储液瓶中，以的比例（体积比）向其中加入二甲基亚砜()，乙腈，的甲醇溶液，充分溶液标准品，配制成的原始溶液。
单一标准品标准溶液的配制：使用的甲醇溶液将原始溶液稀释成μ 的单标标准溶液。
大豆提取物大豆异黄酮质量标准及检验方法PPT教学课件
取1h，上清液供HPLC检测大豆异黄酮含量， ❖ 注：标准中含量项目为必检项，作为主要的判定依据。
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3
大豆提取物原料检验标准
❖ 【外 观】
❖ 本品为舌状，有胚沟和垄脊，呈黄色，长23mm。
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大豆提取物原料收购标准
❖ 1.生药鉴别 ❖ 1.1基源：本品为豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr的豆胚，为我国传
统农作物栽培植物大豆的深加工副产品。 ❖ 1.2性状：本品为舌状，有胚沟和垄脊，呈黄色，长2-5mm。 ❖ 1.3分布：中国东北,山东等地。 ❖ 2.质量要求 ❖ 2.1干燥度：≧90% ❖ 2.2无霉变，无虫蛀。 ❖ 2.3杂质≦2% ❖ 2.4含量：总黄酮含量（包括大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙、大豆素、黄
❖ 【检 查】
❖杂 质
非豆胚重量不得超过1％，不
允许掺杂泥沙、石块等机械杂质。
❖ 干燥度
≥90％
❖ 【含量测定】
❖ 绝对含量
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≥1.5％ (总黄酮含量) 4
大豆提取物中大豆异黄酮含量测定方法（仅供参考）
一、色谱条件
❖
色 谱 柱：Inertsil ODS-3
❖
流 动 相：乙腈：水：冰醋酸（33：73：4v/v）
❖
流 速：1ml/min
❖
检测波长：276nm
❖
柱 温：25℃
❖
进 样 量：10ul
二、溶液制备
❖
1、对照品溶液的制备 精密称取对照品大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙各约
豆制品中异黄酮成分的提取与含量测定
豆制品中异黄酮成分的提取与含量测定在全球范围内，豆制品是一种非常重要的食品之一。
不仅因为它们是一种丰富的蛋白质来源，还因为它们富含一种被称为异黄酮的天然化合物。
异黄酮是一类具有植物雌激素活性的化合物，许多研究表明它们具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生理活性。
提取和测定豆制品中的异黄酮成分对于研究其健康功效以及产品质量控制具有重要意义。
提取豆制品中的异黄酮成分是一个关键步骤。
首先，我们需要选择一种合适的溶剂来提取。
乙醇、乙醚和丙酮等有机溶剂都适用于异黄酮的提取。
在选择溶剂的同时，还需要考虑提取时间和温度等因素。
一般来说，较长的提取时间和较高的提取温度可以增加异黄酮的提取率，但也可能会导致一些热敏感的化合物的降解。
因此，需要在选择提取条件时进行优化。
提取后，我们需要对提取液进行浓缩和净化。
常见的浓缩方法包括旋转蒸发和真空浓缩等。
净化的方法主要包括液液萃取、固相萃取和高效液相色谱等。
液液萃取是一种简单有效的方法，它基于不同化合物在不同相中的分配差异。
固相萃取则利用固相萃取柱具有特异性吸附特性的原理，可以方便地分离目标化合物。
高效液相色谱是一种非常常用的分析方法，可以将样品中的异黄酮分离并测定其含量。
在测定豆制品中的异黄酮含量时，可以使用不同的分析技术。
常用的分析方法包括紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和质谱等。
紫外-可见吸收光谱是一种简单方便的分析方法，适用于异黄酮的定性和定量分析。
荧光光谱则具有更高的灵敏度和选择性，可以用于低浓度异黄酮的检测。
质谱是一种非常灵敏和准确的分析方法，可以通过测定分子的质量和碎片的质量谱图来确定异黄酮的结构和含量。
除了选择合适的分析方法，还需要建立准确可靠的分析方法。
分析方法的准确性和可靠性依赖于样品的预处理、标准曲线的建立和质控样品的应用等。
因此，在进行异黄酮含量测定前，需要对分析流程进行验证，并建立相应的质量控制措施。
总之，提取和测定豆制品中的异黄酮成分是一项重要的研究工作。
通过选择合适的提取方法和分析技术，可以准确地测定豆制品中异黄酮的含量，并深入研究其健康功效。
大豆食品中大豆异黄酮测定
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《大豆食品中异黄酮含量的测定》行业标准编制说明
（征求意见稿）
一、任务来源
2016年3月22日，由中国食品工业协会豆制品专业委员会申请行业标准的立项，根据工业和信息化部下达的2016年第一季度行业标准制修订计划，批准《大豆食品中异黄酮含量的测定》推荐性行业标准的制定
本标准由中国食品工业协会豆制品专业委员会组织制定工作。
二、标准的属性
本标准是推荐性行业标准。
三、标准的修订原则
（一）按照《食品安全法》的相关规定，对现行有关大豆异黄酮含量的测定相关标准进行梳理；
（二）结合国内豆制品企业生产实际情况，参考国际相关标准；
（三）统筹考虑与《食品安全国家标准豆制品》有效衔接，确保标准的适用性、广泛性、可操作性。
本标准的编写符合GB1.1《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》。
四、标准主要内容制定情况
1、大豆异黄酮是一类从大豆中分离出来的具有生理活性的物质，近年来被确定为抗肿瘤作用的功能因子，能够预防和治疗乳腺癌、结肠癌和皮肤癌，改善骨质疏松，能够缓解和减轻女性更年期不适症状，同时可提高机体免疫功能，抗氧化、抗溶血、降低心血管疾病和冠心病的发生。
因此制定科学有效的大豆制品中异黄酮含量的测定方法非常重要。
目前，大豆异黄酮的检测主要有高效液相色谱法（HPLC）和高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS），液质联用法具有高分辨、高分离能力且灵敏度高等优点，但仪器设备昂贵，难以普及。
HPLC法具有分离效果好、准确度高、重现性好、分析速度快和自动化程度高等优点，被广泛采用。
结合我国豆制品行业生产企业现状，采用HPLC法实验的可操作性、检测成本费用、应用的广泛性等几方面的问题综合考虑较为实际，且本标准中测定方法与其他HPLC分析方法比较具有同时测定12种大豆异黄酮单体的含量的优点。
2、本标准（国家大豆产业技术研发中心加工研究室）方法：
标准品制备：准确称取1 m g标准品置于储液瓶中，以1:1:2的比例（体积比）向其中加入二甲基亚砜(DMSO)，乙腈，80%的甲醇溶液，充分溶液标准品，配制成1 mg/mL 的原始溶液。
单一标准品标准溶液的配制：使用80%的甲醇溶液将原始溶液稀释成100 μg/mL的单标标准溶液。
混合标准品标准溶液的配制：等量吸取各标准品原液混合，加80%的甲醇溶液配制成100 μg/mL混标标准溶液原液，并逐步稀释配制成1～60μg/mL不同浓度梯度溶液以制作标准曲线.
样品处理方法是将样品冷冻干燥制成粉末，准确称取样品粉末，置于离心管中，按1:10（g：mL）的比例向其中加入等体积的乙腈和超纯水，密封后充分混匀，使用摇床在300 r/min室温下震荡提取2h。
然后使用离心机在6000 r/min 条件下室温下离心20 min，上清液通过慢速定量滤纸进行过滤。
滤液通过旋转蒸发仪在35℃条件下蒸发至干，向其中加入5 ml 80%的甲醇溶液以溶解干物质，通过0.22 μm的有机系过滤器过滤处理过后的样品溶液，除去不容物。
在-20℃条件下冷冻保存备用。
试验数据通过LC-Solution 工作站进行记录，数据分析采用Excel进行统计分析。
3、本标准试验方法中色谱条件：
色谱柱：C18 (5μm、4.6 mm * 250 mm)；
流动相A：含有0.1%乙酸的超纯水溶液；
流动相B：含有0.1%乙酸的乙腈溶液；
柱温：35 ℃；
进样量：20 μL；
检测波长：262 nm；
流速：1.2 mL/min。
4、本标准采用的方法的确定过程：
1）对洗脱梯度的确定：试验中发现，丙二酰基染料木苷和乙酰基黄豆黄苷非常难以分离，通过对流动相比例的细微改变，在保证上述两种物质完全分离的情况下，同时也要保证其他的单体峰很好的分离，在进行了大量实验对比，证明图1所示的洗脱梯度较为有效，对12种异黄酮的标品分离如图2所示。
图1 优化后的流动相洗脱梯度
图2 标准品HPLC色谱图
1——大豆苷； 7——丙二酰基染料木苷；2——黄豆黄苷； 8——乙酰基黄豆黄苷；
3——丙二酰基大豆苷； 9——大豆苷元；
4——丙二酰基黄豆黄苷； 10——黄豆黄素；
5——染料木苷； 11——乙酰基染料木苷；6——乙酰基大豆苷； 12——染料木素
2）对流速的确定：在对12种大豆异黄酮单体进行一次分离的同时，分别对流动相流速1.0和1.2 mL/min进行了试验，结果表明：1.2 mL/min 的流速能够
有效的分开各种大豆异黄酮单体而且能够节约单次试验时间。
3）对进样量的确定：试验通过对10 μL 和20 μL不同进样量的对比得出：进样量对出峰时间以及进样器定量环为20 μL，为使试验结果更为精密可靠，试验采用20 μL 为进样体积。
4）定量分析方法的建立：通过对单一标准品的HPLC测定，得到每一种标准品对应的出峰时间，并在混合标准品的色谱图中找出对应的标准品。
出峰的顺序为大豆苷（D）、黄豆黄苷（GL）、丙二酰基大豆苷（MD）、丙二酰基黄豆黄苷（MGL）、染料木苷（G）、乙酰基大豆苷（AD）、丙二酰基染料木苷（MG）、乙酰基黄豆黄苷（AGL）、大豆苷元（De）、黄豆黄素（Gle）、乙酰基染料木苷（AG）、染料木素（Ge）；出峰时间分别为：18.88、21.49、34.42、37.12、42.13、48.87、51.55、52.39、56.63、58.91、59.90和70.03min。
通过对不同浓度梯度混合标准品标准溶液的HPLC检测，能够得出12种大豆异黄酮单体浓度与峰面积具有良好的线性关系，见表1。
表1 大豆异黄酮各组分回归方程
5）精密度与稳定性试验：对12种异黄酮组分混合标准品进行日内稳定性及
日间稳定性测定，本方法具有良好的精密度与较好的稳定性，测定结果见表2。
由表2可知：本标准方法日内与日间稳定性测定结果具有良好的精密度与较好的稳定性。
表2 精密度与稳定性试验
五、国内外标准情况
《保健食品中大豆异黄酮的测定方法高效液相色谱法》方法：
标准品制备：称取大豆苷、大豆黄苷和染料木苷、大豆素、大豆黄素和染料木素（纯度均为98.0%以上）各4 mg，分别置于10 mL容量瓶中，加入二甲基亚砜至接近刻度，超声处理30 min，再用二甲基亚砜定容。
各标准储备液浓度均为400 mg/L。
混合标准使用溶液配制：8.0 mg/L 混合标准溶液配制：吸取大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素、染料木素六种标准储备溶液各0.2 mL 于10 mL 容量瓶中，加入等体积水，用50%二甲基亚砜溶液定容。
依同样方法分别配制16.0 mg/ L、24.0 mg/ L、32.0 mg/L、40.0 mg/L的混合标准使用
溶液。
样品处理：固体样品粉碎、磨细（过80目筛）、混匀，半固体样品混匀，称取样品0.05 g～0.5 g（精确至0.1mg），用80%甲醇溶液溶解并转移至50 mL容量瓶中，加入80%甲醇溶液至接近刻度；液体样品：吸取混匀液体样品0.5 mL～5.0 mL 于50 mL容量瓶中，加入80%甲醇溶液至接近刻度。
将上述样品溶液用超声波振荡器震荡20 min，用80%甲醇定容，摇匀。
取样品溶液置于离心管中，离心机离心15 min（转速大于8000 r/min）。
取上清液用滤膜（孔径为0.45 μm）过滤，收集滤液备用。
在标准品制备以及试验样品处理方面本标准采用的方法相较于《保健食品中大豆异黄酮的测定方法高效液相色谱法》的优点在于大豆异黄酮单体标准品使用量较少，可以节约试验成本，实验操作相对简便，样品处理方法比较统一，检测结果更具有对比性。
《保健食品中大豆异黄酮的测定方法高效液相色谱法》中色谱条件：
色谱柱：C18,4.6 mm × 250 mm，粒度5 μm不锈钢色谱柱（也可使用分离效果相当的其他不锈钢柱）；
流动相A：乙腈（色谱纯）；
流动相B：磷酸水溶液（PH=3.0）；
柱温：30 ℃；
进样量：10 μL；
检测波长：260 nm；
流速：1.0 mL/min。
目前国内外与之相关的标准有：AOAC Official Method 2001.10 Determination of Isoflavones in Soy and Selected Foods Containing Soy Extraction,Saponification,and Liquid Chromatogrphy First Action 2001；国内的《保健食品中大豆异黄酮的测定方法高效液相色谱法》以及《粮油检验大豆异黄酮含量测定高效液相色谱法》专门针对保健食品和粮油中异黄酮含量的测定。
3中方法均采用测定6种标准异黄酮单体的含量来确定大豆异黄酮的总含量。
本标准的一次测定12种大豆异黄酮单体的HPLC方法可以一次性、准确地检测大豆籽粒及制成品中各的异黄酮组分的含量，且各组分浓度与其对应的峰面积具有良好的线性关系（R2在0.9973～0.9997）。
该方法使用样品量较少，检测异
黄酮含量快速、准确，适合大豆原料样品和大豆制食品的异黄酮含量的分析检测。
中国食品工业协会豆制品专业委员会
二零一七年一月十一日。