中国药科大学生物制药工艺学期末A卷
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中国药科大学生物制药工艺学期末试卷(A 卷)
一、填空题(每空0、5分,共30 分)
1.酶转化法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同,均属酶转化反应。但两者相比,酶转化法所需设备及工艺简单,产物浓度高, 转化率高,生产周期短,
副产物少,酶的利用率也高。
2.多肽的化学合成有液相合成与固相合成,常用的氨基保护基有苄氧羰基、叔丁氧羰基(BOC) 与9-芴甲氧羰基(Fmoc) 。其中Fmoc最常用。
3.到目前为止,多糖的构效关系方面的研究还就是很不完善的,但可以确定多糖的活
性与其高级结构、分支度及其侧链、分子量、及多糖中的取代基等密切
相关。
4、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传质阻力、固定相中传质阻力。
5、写出下列离子交换剂类型:732 强酸型阳离子交换树脂,724 弱酸型阳离子交换树脂,717 强碱型阴离子交换树脂,CM-C 阳离子交换纤维
素,DEAE-C 阴离子交换纤维素,PBE94 阴离子交换剂。
6、常用的吸附剂有活性炭, 硅胶与大孔吸附树脂等。
7、过饱与溶液的形成方法有蒸发法、温度诱导法、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、等电点法、微量扩散法、化学反应结晶、共沸蒸馏结晶(八选七)。
8、根据色谱机理,色谱柱分为:反相色谱、正相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱(或亲与色谱)。
10、透析的方法有:旋转透析器,平面透析器, 连续透析器,浅流透析器。
11、常用的制备型离心机转子有角度转子, 水平转子, 区带转子,垂直转子。
12、克服浓差极化现象的措施有搅拌, 震动, 错流,切流。
13、供体, 受体与载体就是重组DNA技术的三大基本元件
14、写出下列英文缩写的中文名称: IFN 干扰素;IL-2 白介素-2 ;
TNF 肿瘤坏死因子。
15、青霉素属于β-内酰胺类抗生素,它的性质很不稳定,用溶剂萃取法分离时整个提炼过程应在低温, 快速, 准确调节pH 值下进行。
16、四环类抗生素就是一类以四并苯(萘并萘)为母核的一族抗生素;链霉素就是氨基糖苷类抗生素;红霉素就是分子内含有14 元环大环内酯类抗生素。
二、名词解释(每小题3 分,共24分)
1、基因药物:核酸类药物,以遗传物质DNA、RNA 为治疗物质基础的药物(1
分),如核酸疫苗、反义药物。(1 分)与基因工程类药物不同,基因工程药物化学组成上主要就是蛋白质或多肽,但基因药物组成上主要为核酸(1 分)。
2、尼柯尔斯基方程式:
式中m1、m2、C1、C2 分别为树脂上与平衡溶液中A1、A2 两种离子的浓度。Z1、Z2
分别为两种离子的价电数。K 值为“交换常数”。该方程式表达了离子交换平衡时,
两种离子与交换剂吸附强弱的数量关系。当K>1 时表示树脂对A1离子的吸附力大于
A2 离子,反之亦然。(1分)
3、分级分离:将分子量相差不大的大分子物质加以分离,如分离血清球蛋白与白蛋白(2、5 分),分级分离应尽量使待分离各物质的K 值相差大些,并使分子量分布不在凝胶分离范围的一侧(0、5 分)。
4、干涉RNA(RNAi)RNA interference:就是指在生物体细胞内,dsRNA(1 分)引起同源mRNA 的特异性降解(1 分),因而抑制相应基因表达的过程。就是一种在生物体内普遍存在的转录后水平的基因沉默,也就是抵御外在感染的重要保护机制。(1 分)
5、速度区带离心法:又叫速率区带离心法或分级区带离心法。离心操作时将样品液置于连接或不连接线性或非线性密度梯度液上(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl 等)(1 分),控制离心时间,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内
分成一系列区带,达到彼此分离的目的。(2 分)本法适用于分离颗粒大小不同而密度相近或相同的组分,如DNA与RNA 混合物,核蛋白体亚单位及线粒体、溶酶体及过氧化酶体等。
6、渗透压冲击法: 细胞破碎的一种方法(1分)。先把细胞放在高渗溶液中,由于渗透压的作用,细胞内的水分便向外渗出,细胞发生收缩,当达到平衡后,将介质快速稀释或将细胞转入水或缓冲液中,由于渗透压发生突然变化,胞外的水分迅速渗
入胞内,使细胞快速膨胀而破裂,使产物释放到溶液中(2 分)。
7、气泡压力法:就是测定滤膜最大孔径的简易方法(1分)。气体排除微孔滤膜孔隙中的液体并在膜表面形成气泡时,须克服液体的表面张力,孔径与气体压力有
一定的关系,采用此原理测定滤膜孔径的方法称气泡压力法。(2分)
8、DNA 疫苗: 属于基因药物中的一种,指使用能够表达抗原的基因本身即核酸制成的疫苗(2 分)。基因疫苗进入人体后,在人体细胞环境中表达出蛋白质抗原,持续刺激人体免疫系统产生免疫反应,达到预防疾病的目的。(1 分)
三、单项选择题(每小题 1 分,共20 分)
1.利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸,第一步就是用诱变育种的方法筛选缺乏哪种酶的腺嘌呤缺陷型菌株,并在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤。
( A )
A.SAMP 合成酶
B.SAMP 裂解酶
C.PRPP 转酰胺酶
D.IMP 脱氢酶
2、蛋白质类物质的分离纯化往往就是多步骤的,其前期处理手段多采用下列哪类的方法。( B )
A、分辨率高
B、负载量大
C、操作简便
D、价廉
3、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质,一般用下列哪种溶液洗( D )
A、水
B、高盐
C、低pH
D、高pH
4、凝胶层析中,有时溶质的Kd>1,其原因就是( B )
A、凝胶排斥
B、凝胶吸附
C、柱床过长
D、流速过低
5、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量( C )
A、羟型阴
B、氯型阴
C、氢型阳
D、钠型阳
6、亲与层析的洗脱过程中,在流动相中加入配基的洗脱方法称作(C)
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、竞争洗脱
D、非竞争洗脱
7、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度( C )
A.增大B、减小C、先增大,后减小D、先减小,后增大
8、盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点就是( B )
A、分辨率高
B、变性作用小
C、杂质易除
D、沉淀易分离
9、“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附
极性物质(B )
A、极性溶剂
B、非极性溶剂
C、水
D、溶剂
10、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法就是( C)
A、过滤
B、萃取
C、离子交换
D、蒸馏
11、下列哪种方法就是由于细胞内冰晶的形成导致细胞破碎的( C)
A、真空干燥
B、酶解法
C、冻融法
D、渗透压法
12、红霉素在pH 9、8 时的分配系数(醋酸丁酯/水)为44、5,若用等体积的醋酸酯进行单级萃取,则理论收率为( A )
A、97、8%
B、99、32%
C、96、5%
D、95、9%
13、在高效液相色谱中,下列哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用、( D )
A、紫外检测器
B、荧光检测器
C、蒸发光散射检测器
D、示差折光检测器
14、某抗生素以醋酸丁酯为流动相进行pH 纸层析,酸性条件下比移值大,碱性条下比移值小,则该抗生素为( B )
A、弱碱性
B、弱酸性
C、强碱性
D、强酸性
15、环孢菌素A 就是微生物产生的( D )
A、HMG-CoA 还原酶抑制剂
B、β-内酰胺酶抑制剂
C、氨基糖苷类抗生
D、免疫抑制剂
16、选用110 树脂分离纯化链霉素,交换时pH 应为( C )
A.2~4 B、4~6 C、6~8 D、12~14
17、红霉素以游离分子形式存在时,可用吸附法分离,吸附时发酵液的pH应调节
( A)A、大于7 B、小于7C、等于7 D、2~12
18、从四环素发酵液中去除铁离子,可用( B )
A、草酸酸化
B、加黄血盐
C、加硫酸锌
D、氨水碱化
19、用大肠杆菌作宿主表达重组DNA 药物,缺点就是( C )
A、蛋白质表达量低
B、生长慢
C、产物无糖基修饰
D、难以获得工程菌
20、下列药物哪些就是重组DNA 药物( B )
A、蛋白质工程药物
B、基因药物
C、天然生物药物
D、半合成生物药
物
四、论述题(共26分)