挥发性盐基氮(VBN)测定方法

挥发性基态氮（VBN）的测定

挥发性基态氮，即“V olatile Basic Nitrogen”,简称：VBN。是蛋白质因微生物滋长或本身酵素作用，使其蛋白质分解成较低分子量、具有挥发性的氨、二甲氨和三甲基氨等物质。因此由挥发性物质量的多寡，可判断蛋白质变形的程度。一原理

利用弱碱性试剂氧化镁使试样中碱性含氮物质游离而被蒸馏出来，用硼酸吸收，再用标准盐酸滴定，计算出含氮量。

二仪器和器皿

1. 实验室用样品粉碎机或研钵

2.分析天平：感量0.001g

3.定氮仪

4.振荡机

5.锥形瓶；150ml、250ml具塞

6.滴定管：酸式25ml

7.容量瓶：100ml、1000ml

三试剂

1. 0.1mol/L盐酸标准溶液（无水碳酸钠标定）;吸取分析纯盐酸8.3ml,用蒸馏水定容至1000ml。

2. 0.01 mol/L盐酸标准溶液：用0.1mol/L盐酸标准溶液稀释所得。

3. 混合指示剂：将次甲基蓝乙醇溶液（1g/L）与甲基红乙醇溶液（1g/L）按（1+2）体积比混合即可，在阴凉处保存期为3个月。

四测定

1. 称取10g试样（精确到0.001g）粉碎过60目筛，于250ml具塞锥形瓶中，加蒸馏水100ml，振荡摇匀30min后静置，4000转离心10分钟，上清液为样液。

2.取20ml2%硼酸溶液于250ml锥形瓶中，加混合指示剂2滴，使定氮装置的冷凝管末端浸入此溶液。

3.准确移取10ml样液注入蒸馏装置的反应室中，加入10mL1%的氧化镁溶液，按测粗蛋白的方法进行，但不加氢氧化钠，蒸馏4min，使冷凝管末端离开吸收液面，在蒸馏1min，用蒸馏水洗冷凝管末端，洗液均流入吸收液。

4.吸收氨后的吸收液立即用0.01 mol/L盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变为灰红色为终点，同时进行试剂空白测定。

五计算

VBN（mg/100g）=（V1-V0）×C×140÷M×100

式中：V1：滴定试样时所需盐酸标准溶液体积，ml

V0：滴定空白时所需盐酸标准溶液体积，ml

C：盐酸标准溶液浓度，mol/L

M：试样重量，g

备注：VBN：＜90 新鲜

VBN：90~120 中度新鲜

VBN：120~150不新鲜

VBN：﹥150 腐臭味

此法正确度80%。