蒲公英有效成分提取
蒲公英中总黄酮提取工艺研究

蒲公英中总黄酮提取工艺研究侯丽【摘要】在查阅、收集国内蒲公英中总黄酮提取工艺文献的基础上,综述近几年蒲公英中总黄酮提取工艺的研究进展,旨在为进一步开展蒲公英相关研究提供参考.【期刊名称】《农业科技与装备》【年(卷),期】2017(000)003【总页数】2页(P52-53)【关键词】蒲公英;总黄酮;提取工艺;超声波【作者】侯丽【作者单位】本溪市化学工业学校,辽宁本溪 117004【正文语种】中文【中图分类】R284.2蒲公英(Dandelion)别名婆婆丁、黄花地丁,为菊科植物蒲公英属多年生草本植物的干燥全草,具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋等功效。
黄酮类成分是蒲公英中的主要有效成分之一,具有抑菌、抗氧化、保肝利胆、抗肿瘤等作用。
国内对蒲公英中总黄酮的提取工艺进行大量研究,在查阅、收集大量文献的基础上,综述近几年来蒲公英中总黄酮提取工艺的研究进展,旨在为相关研究提供参考。
1.1 溶剂提取法溶剂提取蒲公英中总黄酮是较为传统的提取工艺,常用的提取介质有水提、醇提、碱水提等,常用的提取方式有煎煮法和回流法。
其中,水提法成本低,操作简单,但提取物中的蛋白质、多糖、鞣质等杂质比较多,提取液易发霉,现已不常使用。
目前较为常用的是醇提回流法,该法与水提法相比,需消耗大量的有机溶剂且难回收,生产成本高,但提取物中的水溶性杂质少,提取液不易发霉变质,后期处理较为方便。
王廷璞等通过单因素筛选和正交试验优化蒲公英中总黄酮的提取工艺,确定最佳工艺为:乙醇浓度45%、料液比1∶10、提取温度70 ℃、提取时间 1 h,总黄酮提取量可达 26.21 mg /g,总黄酮平均回收率96.5%。
吴秀华等以北方蒲公英全草为原料,采用醇提法提取蒲公英中的粗黄酮,在温度70 ℃、乙醇浓度90%、时间 5 h 的条件下提取率可达 99.61%。
杨春瑜等采用乙醇回流法提取蒲公英黄酮成分,以 25 mL甲醇溶解 2 g 蒲公英黄酮浸膏液中黄酮含量为评价指标,获得的优化提取工艺为:料液比1∶20、提取时间 2 h、乙醇浓度 70%、提取温度75 ℃,蒲公英黄酮提取得率 10.10%。
蒲公英中有效成分的提取工艺

蒲公英中有效成分的提取工艺摘要:蒲公英是一种药食两用的中药材,生物活性成分丰富,有很高的营养价值,且分布广泛,种质资源丰富。
蒲公英黄酮、多酚及多糖类物质具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、提高免疫力、广谱抑菌等保健作用,是医药、食品等优质安全的功能性添加剂。
本文以新疆蒲公英(Taraxacum mongolicum)为主要原料,首先研究了蒲公英活性成分黄酮、多酚及多糖的同步提取工艺,通过单因素和响应面Box-Benhnken实验确定了最佳工艺参数;然后通过与菊花汁进行复合,对其工艺配方进行了研究;同时对蒲公英口服含片的配方进行研究,为蒲公英的开发应用提供依据,并为实际生产提供理论指导。
关键词:蒲公英,乙醇,超声波,连续有机膜。
一.目前中药的提取原理正文:蒲公英黄酮、多酚及多糖同步提取的最佳工艺参数为:乙醇体积分数60%料液比1:40 g/mL,超声时间40 min,超声温度65℃,蒲公英目标产物提取率为21.95%。
此外,目标产物中黄酮的提取率为5.62%,多酚提取率为3.44%,多糖提取率为12.89%。
要做好对中药材的选、洗、润、切、烘干、粉碎的准备工作,目的是为了在提取前除尽中药材中的泥沙、纤维;在提取前后的操作过程中,要严格做好提取时间、提取温度、提取加水量等参数的控制工作,避免提取过程中提取时间过长、提取温度过高,造成淀粉糊化,纤维、鞣质、树脂、蛋白、淀粉等大量无效成分的析出。
二.蒲公英提取工艺流程1.原料预处理将采集的新鲜蒲公英全草去除杂质及腐烂叶片,清洗干净,置于50℃鼓风干燥箱中烘干,粉碎后过60目筛,得到蒲公英干燥粉末于-20℃冰箱密封保存,备用。
2.蒲公英提取液的制备准确称取3.00 g样品于三角瓶中,添加一定体积的乙醇并在一定条件下进行提取,提取后用抽滤泵抽滤去除残渣,于离心机4000 r/min离心 10 min移取上清液,得蒲公英提取待测液[66,67]。
3.单因素实验乙醇体积分数对蒲公英黄酮、多酚及多糖提取效果的影响精确称取备用的蒲公英干燥粉末3.00 g于三角瓶中,按照料液比1:40 g/mL,分别加入体积分数为40%,50%,60%,70%,80%的乙醇溶液,于70 ℃条件下超声辅助提取30 min,抽滤泵抽滤去除残渣,离心取上清液,分别测定黄酮、多酚及多糖的提取率。
蒲公英主要功能性成分提取及其口服液研制

蒲公英主要功能性成分提取及其口服液研制蒲公英主要功能性成分提取及其口服液研制摘要:蒲公英作为一种常见民间传统中药,具有清热解毒、消肿散结等功效,因此被广泛应用于中医临床治疗、保健及美容养颜。
本文在归纳总结了关于蒲公英成分的研究基础上,以蒲公英茎叶为原材料,采用超声波法浸提、乙醇溶剂萃取及柱层析等方法,提取了蒲公英中的主要功能性成分,并对其进行了组分鉴定和定量分析。
通过试验设计和分析,确定了蒲公英精华液的最佳研制工艺,将其稀释制成口服液,考察了口服液的质量和生物活性,得出了较为满意的研究结果。
研究成果表明,蒲公英口服液有很好的治疗效果,可以望广泛应用于中医临床及保健领域。
关键词:蒲公英;功能性成分;提取;口服液;研制1.引言蒲公英是一种常见的民间传统中草药,广泛生长于全球各地,是一种以叶片和花序为食用部分的植物。
中医认为,蒲公英具有清热解毒、消肿散结、排毒、利尿等功效,可用于治疗眼部疾患、消化不良、胃病、肝脾问题、肝炎和黄疸等痛症。
因此,蒲公英在中药临床应用和保健及美容养颜等领域中,有着广泛的使用价值。
随着现代技术的发展,以及对中药研究的深入,越来越多的学者对蒲公英的化学成分和药理作用进行了深入研究。
目前已经分离出了蒲公英中的多种成分,如:蒲公英次酸、苹果酸、氰氨酸、乙酸、杏仁酸、鸟苷、油酸、丙二酸、果糖、柠檬酸等。
这些成分中的很多都具有一定的药理作用和生物活性,如消炎、抗氧化、降血压、改善代谢等作用。
鉴于蒲公英的重要性和这些成分的独特药理作用,提取蒲公英中的主要功能性成分,并进行研发及临床应用,对于促进中药现代化和保健事业的发展,有着重要的意义。
2.实验材料和方法2.1 材料蒲公英茎叶:自然生长于山地野外、采摘新鲜。
2.2 方法2.2.1 超声波法浸提取适量蒲公英茎叶,洗涤干净,将其置于加了适量水的三角瓶中,在超声波器中浸泡1小时,振幅10-20μm,频率40-60kHz,用滤纸将浸出液滤出,留取过滤液。
中药蒲公英有效成分抗结核进展

中药蒲公英有效成分抗结核的研究进展【关键词】蒲公英提取物;化学成分;结核病;研究进展【中图分类号】r282 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484(2013)03-0090-02蒲公英(dandelion)始载于《唐本草》,为菊科多年生草本植物。
多分布于北半球,我国的东北、华北、华东、华中、西北、西南各地均有分布,生于道旁、草地、田间、河岸、荒地、庭园等处。
它不仅使用部位广泛(包括花、叶、茎、根),还有丰富的营养价值,可生吃、炒食、做汤,是药食兼用的植物。
据《本草纲目》记载,它性平味甘微苦,有清热解毒、消肿散结及催乳作用,对治疗乳腺炎十分有效。
近年来发现其有较好的抗结核及抗肿瘤效果而成为研究的热点,已成为国家重点发展的三类药材之一。
1 中药蒲公英的化学成分含蒲公英甾醇(taraxasterol)、胆碱(choline)、菊糖(inulin)、果胶(pectin);蒲公英醇(taraxol)、豆甾醇(stigmasterol)、β-香树脂醇(β-amyrin)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、蒲公英赛醇(taraxerol)、蒲公英素(taraxacerin)、蒲公英苦素(taraxacin)和维生素a、b、c等。
1.1 凌云等[1]用红外光谱法对蒲公英三萜类化学成分进行研究,首次从蒲公英属植物中分得伪蒲公英甾醇,棕榈酸酯。
1.2 姚巍等[2]对蒲公英进行了系统分离,从中得到8个化合物,利用ms, 2d-nmr等现代波谱技术进行了结构鉴定,其中4个为黄酮类化合物,分别为青蒿亭、槲皮素、木犀草素、木犀草素7-o-β-d-葡萄糖苷,其余5个分别为咖啡酸、七叶内酯、豆甾醇、蒲公英甾醇乙酯。
1.3 凌云等[3]用电感耦合等离子体发射光谱法检测了5种蒲公英的66种微量元素含量,结果表明蒲公英中12种元素含量较高,其中有cu、zn、fe、mn、mo5种必需微量元素;蒲公英中还含有大量的na和k,而肺结核患者头发中锌、铁含量明显比健康人低。
蒲公英现代化提取分析

蒲公英基本信息;主要化学成分:蒲公英同属植物中含有多种成分主要有:胡萝卜索类、三萜类、植物甾醇类、倍半萜内酯类、香豆索类、黄酮类、酚酸类、脂肪酸类,此外还有糖、胆碱、氨基酸、维生素、矿物质、果胶、蛋白质等。
此外,蒲公英中还含有大量的微量元素。
研究方法:根据蒲公英中各种化学成分结构不同,可以采用不同的方法进行分析。
A 比色法比色分析是基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的一种分析法。
又称吸光光度法。
比色分析具有简单、快速、灵敏度高等特点,日前是中药成药及其它成分定性、定量分析的常用方法。
据报道,蒲公英含有大量黄酮,且与其药理作用密切相关。
金京玲等利用比色法.以芦丁为对照品,分别测定东北蒲公英和碱地蒲公英的总黄酮含量,结果表明蒲公英含有丰富的黄酮类物质并具有进一步研究和开发利用的价值。
B、分光光度法分光光度法是比色法的发展。
比色法只限于在可见光区,分光光度法则可以扩展到紫外光区和,分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区,而且要求近于真正的单色光。
分光光度法不仅能测定有色物质,还能精确测定有共轭等结构的五色物质可用于定性、定量,属于经典、成熟的方法。
凌云等采用紫外分光光度法对国内常用蒲公英品种进行了鉴别,结果显示17种常用蒲公英品种的紫外光谱图相同C、薄层色谱法(TLC)薄层色谱法鉴别药材是依据药材中有效成分在特定溶剂条件下,在特定的薄层板展开的Rf值具有特异性。
对于成分复杂的中药材,薄层色谱法在适当的条件下,可以使某一成分与其它成分或杂质分离,排除干扰,从而进行定性或定量分析。
其操作简便易行,重现性好,是现代应用最多的分析方法之一L1 。
廉景奎等l3j 采用TLC 法对蒲公英及其掺伪品莱菔叶进行定性鉴别,二者在色谱行为上差异大,此法作为二者鉴别的依据。
陈巧蓉等也用TLC法,结合性状、显微法对臧蒲公英进行系统的尘药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。
D、液相色谱一质谱联用技术(LC—MS)虽然高效液相色谱法是目前分离复杂体系最为有效的分析工具,但目前由于中药分析中运用的HPLC仪器绝大多数与UV或DAD检测器相连接,对于单个色谱峰仅能提供保留时间及紫外图谱等信号,而对未知成分所能提供的结构信息相当有限。
蒲公英提取物的化学成分及其药用价值的研究

蒲公英提取物的化学成分及其药用价值的研究蒲公英是一种常见的野草,生长在世界各地,尤其是北半球。
它以其黄色的花朵和白色的羽毛状飞行种子而闻名。
蒲公英不仅是美丽的花朵,还有广泛的药用价值。
本文将对蒲公英提取物的化学成分及其药用价值进行探讨。
一、蒲公英提取物的化学成分蒲公英根、茎、叶、花都可以提取药用成分,其中以根和叶提取物最为常用。
蒲公英根和叶中主要含有以下化学成分:1.倍半萜类化合物蒲公英中含有大量的倍半萜类化合物,包括贝母皂苷、酮蒲公英素等。
这些化合物具有抗炎、抗菌、抗氧化、降血糖等作用。
同时,它们还可以有效地抑制癌细胞的生长和扩散。
2.多糖蒲公英中含有大量的多糖,这些多糖具有抗炎、抗菌、抗氧化、降血糖、降血脂等作用。
同时,它们还可以增强人体免疫力,促进肝脏的代谢功能。
3.苦味成分蒲公英中含有大量的苦味成分,包括苦味酸、黄酮类、环醚类等。
这些成分具有促进胃液分泌、提高食欲的作用。
同时,它们还可以促进胆汁的分泌,从而调节脂肪代谢。
4.有机酸蒲公英中含有大量的有机酸,包括苹果酸、柠檬酸、酒石酸等。
这些有机酸具有促进肝脏代谢、降低尿液酸度、促进钙的吸收等作用。
二、蒲公英提取物的药用价值1.预防和治疗糖尿病蒲公英中的多糖和倍半萜类化合物可以降低血糖,提高胰岛素敏感度,从而预防和治疗糖尿病。
2.抗氧化蒲公英中的多糖和倍半萜类化合物可以清除自由基,减少氧化应激,预防和治疗各种疾病。
3.抗炎和抗菌蒲公英中的倍半萜类化合物和多糖具有抗炎和抗菌作用,可以预防和治疗各种炎症和感染。
4.促进肝脏代谢蒲公英中的多糖和有机酸可以促进肝脏代谢,调节脂肪代谢,降低血脂,预防和治疗肝病。
5.增强免疫力蒲公英中的多糖具有增强免疫力的作用,可以预防和治疗各种疾病。
综上所述,蒲公英提取物具有广泛的药用价值,可以用于预防和治疗各种疾病。
未来的研究应该继续深入探讨其药理作用机制,从而更好地利用蒲公英提取物的药用价值。
蒲公英中黄酮的提取工艺研究

蒲公英中黄酮的提取工艺研究作者:许乐来源:《现代食品》 2019年第11期◎ 许?乐(西安培华学院,陕西?西安?710125)Xu?Le(Xi’an Peihua University, Xi’an?710125, China)摘?要:蒲公英中含有丰富的黄酮类物质,它是一种很强的抗氧剂,可有效清除体内的氧自由基,且具有杀菌抑菌的功效,本文对蒲公英中黄酮类物质的提取工艺进行了研究,最佳提取条件为以1∶20的料液比与40%乙醇于60 ℃水浴中提取45 min,得到黄酮含量为6.59%。
关键词:蒲公英;黄酮;提取Abstract:Dandelion is rich in flavonoids, it is a very strong antioxidant, can effectively remove oxygen free radicals in the body, and has the effect of sterilization bacteriostasis, in this paper, to study the extraction technology of flavonoids in the dandelion, multitude in the best condition for the materialliquid ratio of 1∶20 extracted with 40%ethanol in 60 ℃ water bath 45 min, yellow ketone content is 6.59%.Key words:Dandelion; Flavonoids; Extract中图分类号:R284蒲公英(拉丁学名:Taraxacum mongolicumHand.-Mazz),菊科,别名黄花丁、婆婆丁、华花郎等。
多年生草本植物。
蒲公英含有多种活性成分,如蒲公英甾醇、黄酮类、蒲公英苦素、咖啡酸、绿原酸和多糖等[1]。
蒲公英片成分

蒲公英片成分蒲公英是一种常见的野草,也是中药材的重要成分。
蒲公英片是以蒲公英为原料制成的药物,其主要成分包括蒲公英硷、蒲公英酒精油、丹参酮及其它生物碱、茶多酚等成分。
1. 蒲公英硷蒲公英硷是一种生物碱,为蒲公英片的主要有效成分之一。
蒲公英硷具有助于化痰、止咳、清热解毒、润肺的功效,还可以抑制病毒和细菌的生长。
此外,蒲公英硷还有利尿、降脂、降血压等作用,可以预防和治疗肾炎、肝炎等疾病。
因此,蒲公英片适用于治疗感冒、咳嗽、胸闷、水肿等症状。
2. 蒲公英酒精油蒲公英酒精油是由蒲公英花中提取的香味成分,具有镇静、止痛、抗炎、调节血糖、降血脂等作用。
蒲公英片中的蒲公英酒精油可以舒缓神经和肌肉紧张,减轻头痛、肌肉疼痛等不适症状。
3. 丹参酮及其它生物碱丹参酮是一种天然生物碱,具有增强心脏功能、降低胆固醇、清除毒素、抗氧化等作用。
蒲公英片中含有的丹参酮可以促进血液循环、改善心脏病、冠心病等疾病的症状。
此外,蒲公英片还含有一些其它生物碱,如卡瓦酮、生物类黄酮、维生素C等,都具有一定的止痛、抗炎、抗菌、解毒等作用。
4. 茶多酚茶多酚是一种具有较强抗氧化作用的物质,广泛存在于茶叶、葡萄酒、水果等食品中,具有保护细胞、增强免疫力、降低血糖、降低血压等作用。
蒲公英片中也含有一定量的茶多酚,可以起到保护细胞、抗衰老、抗氧化的作用,对身体有一定的保健作用。
总之,蒲公英片是一种常用的中药,其主要成分包括蒲公英硷、蒲公英酒精油、丹参酮及其它生物碱、茶多酚等成分。
这些成分具有化痰止咳、清热解毒、润肺、镇静止痛、增强心脏功能、抗氧化等多种作用,可以预防和治疗感冒、咳嗽、水肿、心脏病等疾病。
但是,蒲公英片并不是万能药,应在医生指导下使用,遵照说明书上的用药方法和剂量,以免产生不良反应。
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蒲公英有效成分的提取与分离
1. 蒲公英有效成分的粗提取
1.1 蒲公英多糖的提取和分离
1.1.1热水浸提法提取
1.1.1.1材料预处理
称取蒲公英样品100g,干燥,粉碎至一定粒度,40目筛备用
1.1.1.2脱脂
置于圆底烧瓶中,用石油醚在索氏提取器中回流8h,脱去脂肪(多次长时间)
1.1.1.3单糖和寡糖用80%乙醇回流,以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质的去除
1.1.1.4热水浸提
加入蒸馏水3000ml,80℃提取3h,抽滤,重复2次,合并滤液。
(多层纱布过滤)
1.1.1.5脱蛋白
Sevag法向提取液中加入1/4体积的氯仿-正丁醇(v/v4:1)混合20min,3500r/min 离心5min中层白色絮状沉淀即为蛋白质,取上清,反复重复5、6次,至中间无沉淀为止.
1.1.1.6醇析
脱蛋白完毕,向提取液中缓缓加入95%乙醇,并用玻璃棒缓慢搅拌,使乙醇浓2度达到80%,静置4h,4000r/min离心5分钟,沉淀得粗多糖.离心沉淀物,离心洗涤数次,即得蒲公英多糖.
1.1.1.7纯化
将粗多糖复溶于水,透析36h,用80%乙醇沉淀多糖.4000r/min离心5分钟,多糖沉淀分别用乙醇、丙酮洗3次,真空干燥得精致多糖.
1.1.2 超声波提取
称取蒲公英100g,干燥,粉碎至40目,置于圆底烧瓶中,用石油醚在索氏提取器中回流8h脱去脂肪,残渣按料液比1:30,提取时间4h,提取温度为70℃提取。
超声波提取3次。
提取液用活性炭进行脱色,Sevag法除蛋白,离心,去上清液,浓缩后以95%乙醇沉淀,离心提取沉淀物,无水乙醇洗涤数次,干燥,即得蒲公英粗多糖。
1.2 蒲公英中黄酮的提取
1.2.1 超声波提取
1.2.1.1原料预处理
取出干燥的蒲公英适量,用粉碎机粉碎,过60目筛,得蒲公英干粉备用
1.2.1.2总黄酮提取
取1g蒲公英干粉,在乙醇体积分数65%,料液比1:35,超声时间35min,超声温度60℃,提取次数4次。
然后抽滤,得黄酮提取液。
1.2.2 有机溶剂回流萃取
准确称取干燥蒲公英粉末1g加乙醇浸提。
乙醇浸提法:提取温度为80℃,提取时间3h,乙醇体积分数55%,料液比1:30.提取液抽滤,得滤液为黄酮提取液。
1.3 蒲公英中酚酸的提取
1.3.1 超声波提取
提取工艺流程
蒲公英→干燥粉碎→超声波提取→微孔滤膜过滤→薄层层析→紫外分光光度计测定。
取干燥蒲公英粉末,过100目筛,准确称取2.5g置于25ml锥形瓶中,精密加入5%甲酸的甲醇溶液25ml,振荡,摇匀,称定重量。
然后置超声波提取器中,超声提取30min,取出,冷却,称定重量,用5%甲酸的甲醇溶液补足减失的重量,摇匀。
滤液置25ml容量瓶中,定容,即得绿原酸提取液。
1.3.2 乙醇回流萃取
称取10g蒲公英干草,粉碎(40目),置于500ml烧瓶中,加入10倍量60%的乙醇,调pH为4,80℃水浴回流提取2次,每次2h,合并滤液,12000r/min 离心10min,减压浓缩干燥后溶于10ml刻度试管后定容(试液质量浓度为1g/ml),即为粗提液。
40℃沉淀10min,离心后沉将乙醇回流法提取得到的绿原酸粗提液经ZnCl
2
淀物水洗1次,然后离心物用pH 1.5的盐酸转溶15min,上层澄清液过滤减压浓缩干燥后,溶于蒸馏水,经大孔树脂分离纯化后浓缩干燥,得到分离纯化后的绿原酸。
2. 大孔吸附树脂分离纯化蒲公英有效成分
2.1 黄酮的分离
大孔吸附树脂的预处理:将干树脂用95%乙醇浸泡24h,使其充分溶胀,湿法装柱,用95%乙醇以流速2.0BV/h洗至流出液加适量水(流出液:水=1:5)无白色浑浊,再用蒸馏水反复冲洗至无醇味;然后用5%HCl溶液浸泡3h,用蒸馏水以同样流速洗至流出液为中性;最后用5%NaOH溶液浸泡3h,用蒸馏水以同样流速洗至流出液为中性,备用。
D-101大孔吸附树脂能很好地富集纯化蒲公英花总黄酮,其最佳条件为:上样液浓度为1.24mg/ml,pH为3,上样量为2BV,室温下以流速2.0BV/h吸附饱和,用4BV的50%~70%乙醇以2BV/h的流速洗脱.
2.2 酚酸的分离
在大孔吸附树脂分离纯化过程中,上样参数是:上样液为50 mL绿原酸提取液,调pH 3,加硝酸钠使之终浓度为7%,以12 mL/min的流速通入层析柱(层析柱规格:3.5×80 cm,树脂装填高度:75 cm,树脂体积:721.2 cm3;洗脱参数是:先用蒸馏水以适当流速冲洗2倍床体积,再用体积分数为20%的乙醇以15 mol/min的流速洗脱1.5倍床体积,后改用体积分数为45%的乙醇以适当流速
洗脱1.5倍床体积,洗脱液无色时改用体积分数为95%的乙醇洗脱再生树脂柱,最后用蒸馏水洗树脂柱至无酒精味。
3.有效成分的初步鉴定
3.1黄酮的鉴定
样品提取液在氨水环境下显亮黄色,在三氯化铝存在条件下黄色明显加深,盐酸镁粉反应显黄色,证明样品溶液中含有黄酮类物质。
3.2酚酸的鉴定
样品提取液三氯化铁实验显污绿色,加入重氮盐试剂(加对硝基苯胺,亚硝酸钠)显红色,证明样品溶液中含有酚酸类物质。
4.有效成分含量测定
4.1多糖含量测定
4.1.1 标准曲线的建立
葡萄糖标准曲线的建立所得回归方程为y= 4.82x-0.001(R2 = 0.9995)
4.1.2 换算因子的计算
准确称取精制蒲公英多糖20mg,用蒸馏水溶解,定容到100ml。
蒽酮-浓硫酸法测定该样液中吸光值,并由葡萄糖回归方程计算样液中多糖含量,根据公式F=W/CD 计算换算因子,其中W 为精制多糖重量(mg),C 为精制多糖样液的葡萄糖量(mg),D 为多糖的稀释倍数。
4.1.3 样品中多糖含量测定
准确称取1g 蒲公英粉末,经 1.2.1 法脱脂、除单糖和寡糖等杂质,加入30ml 蒸馏水,80℃提取3h,抽滤,重复2 次,合并滤液,定容到100ml,稀释100倍,蒽酮-浓硫酸法测吸光值。
根据公式X=FCD/W ×100%计算蒲公英根中多糖含量。
4.2黄酮含量测定
将1.2.2.2所得滤液取5ml移至25ml试管中,加入5%NaNO2 1ml,摇匀,放置6min,再放入10%Al(NO3)3 1ml,6min后加入4%NaOH 10ml,再用60%的乙醇定容至刻度,摇匀,放置20min后,在波长510nm处测定吸光度。
根据绘制的总黄酮标准曲线所得回归方程A=0.0091c-0.0068,R2=0.9998。
Y=(V×X)/G×10-6×100% ,式中:Y-总黄酮含量(%);V-提取液体积(ml);X-总黄酮浓度(μg/ml);G-蒲公英样品质量(g)。
4.3酚酸含量测定
采用薄层层析——紫外分光光度法。
采用硅胶G板,以乙酸丁酯:甲酸:水=7.5:2.5:2.5为展开剂,展开剂用量为30ml,每次点样量为6μL。
每块硅胶板板上均点有绿原酸标准品作为对照。
在紫外灯下,样品中与标准品跑样距离相等的蓝色荧光斑点为分离出的绿原酸。
取三次跑板样之和,在330nm处用紫外分光光度法测定绿原酸含量。