常见临床标本的细菌学检验
化脓及创伤感染标本细菌学检验知识
化脓及创伤感染标本细菌学检验知识化脓及创伤感染标本细菌学检验知识脓液及创伤分泌物是传染过程中最常见的，对其标本的采集和送检，检验人员与执业医师网临床医师应密切配合，以确保正确的采集和快速送检。
从脓液及创伤分泌物中能够检出的细菌种类很多，最优先考虑的致病菌为金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌，其次为假单胞菌、肠杆菌科细菌等。
下面是yjbys店铺为大家带来的化脓及创伤感染标本细菌学检验知识，欢迎阅读。
一、脓液及创伤感染标本中可能发现的细菌在临床化脓及创伤感染标本的细菌学检验中可能发现的细菌：1.革兰阳性球菌葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、四联球菌。
2.革兰阴性球菌卡他布兰汉菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、干燥球菌、黄色球菌。
3.革兰阳性杆菌破伤风芽胞梭菌、炭疽芽胞杆菌、产气荚膜芽胞梭菌、白喉棒状杆菌、类白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌。
4.革兰阴性杆菌大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、产气肠杆菌、鼠疫耶尔森菌、土拉热弗朗西斯菌、肺炎克雷伯菌、厌氧杆菌。
5.其他伊色列放线菌、星形奴卡菌、白色假丝酵母菌。
二、标本的采集(一) 操作1.首先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。
2.对已破溃脓肿一般以无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物，而瘘管则以无菌方法采取组织碎片，放入无菌试管中送检。
3.对未破溃脓肿最好用2.5 %～3 %碘酊和75 % 酒精消毒患部皮肤后，以无菌注射器抽取脓汁及分泌物，也可于切开排脓时，以无菌棉拭采取。
4.有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。
5.对放线菌的标本，常用无菌棉拭挤压瘘管，选取流出脓汁中的“硫磺样颗粒”盛于试管内送检，也可将灭菌纱布塞入瘘管内。
次日取出送检。
(二) 注意事项1.如果患者局部伤口已用抗生素磺胺类药物治疗，则应在培养基内加入相应的物质(如青霉素酶、对氨基苯甲酸等) 以避免假阴性结果的出现。
2.当创伤出血时或敷有药物在2 小时以内及烧伤在12 小时内均不应采集标本，此时获得阳性结果的机会甚少。
临床标本的细菌检验
痰标本临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道，上呼吸道定植有大量的正常菌群，而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道，通常无菌或仅有少量细菌侵入。
在呼吸道标本细菌学检验中，上呼吸道标本（咽拭子）由于有正常菌群的存在，不易判断出何为与疾病有关的细菌，进行普通培养无特别意义《插入表上呼吸道存在的正常菌群》。
下呼吸道感染是最常见的呼吸道感染症，临床常取痰液标本进行细菌学检验，以明确感染病原及其药敏结果，有助于疾病治疗、流行病学调查和医院感染的监测。
痰标本须经上呼吸道排出，常受该处正常菌群的污染，因此，判断下呼吸道分泌物中是否有病原菌存在，须对上呼吸道的正常菌群有所了解。
上呼吸道的正常菌群有α、γ链球菌、微球菌、拟杆菌、梭杆菌、厌氧球菌、表皮葡萄球菌、奈瑟菌、嗜血杆菌、棒状杆菌。
标本的验收遇有不合格标本，应及时与临床联系，报告不合格标本拒收的具体理由。
拒收标准：a.肉眼观察痰标本呈水样或唾液样。
b.标本涂片白细胞数＜10/低倍镜和鳞状上皮细胞数＞25/低倍镜，表示该标本已污染正常菌群，建议重送标本。
c.容器错误标本容器必须符合规定，溢漏、无盖者拒收。
分离培养1．痰标本培养前处理（均质化）2．分离培养（1）一般细菌培养应同时划区接种（痰半定量原则）痰半定量方法：用接种坏将痰液在血平板和巧克力平板上作三区划线接种标本，进行培养。
痰半定量培养的临床意义三区划线法：首先用无菌棉签挑取痰液的脓或血性部分（或将接种坏通过火焰灭菌，冷却后挑取标本少许，尽量取有脓或血部分）然后将其涂布在平板第一区，并作数次划线，再在二、三区依次用接种环划线，每划一个区域，应将接种环烧灼一次，待冷却后再划下一区域。
1）血平板（5%CO2环境）适用于分离肺炎链球菌和其他细菌。
2）巧克力平板（5%CO2环境）适用于分离嗜血杆菌。
3）麦康凯/中国蓝平板（需氧环境）适用于分离革兰阴性杆菌。
（2）分离培养血平板和巧克力平板置5%CO2环境，麦康凯平板/中国兰平板置普通孵箱，35℃孵育。
临床常见标本的细菌学检验
痰液的采集
采集指征
下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰 可伴有胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；
X线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液 严重可致感染性休克和呼衰。
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痰液的采集和运送
采集方法
自然咳痰法 支气管镜采集法 防污染毛刷采集 法 支气管肺泡灌洗法 胃内采痰法 小儿取痰法
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痰液的采集和运送
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
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尿液的检验
菌落计数
定量接种尿液培养标本 根据细菌在平板上的生长情况 定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/ml）
31
尿液标本常见的病原菌
病原菌
正常 菌群
G+
金葡 化脓性链球菌 肠球菌 结核分枝杆菌 葡萄球菌 枯草杆菌 非致病性棒状杆菌
注意培养时间
加做无菌对照
涂片染色检查
结合培养细菌的生长特点对照判断
8
（四）检验程序
标本选择 采集（保存运送）
观察、前处理
直接 涂片
报告
快速 检验
报告
分离培养 （需、厌氧、CO2培养）
可疑菌落 (必要时先做培养)
增菌(需氧、厌氧、 CO2培养)
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
难辨梭菌
杆菌
G-
沙门菌 大肠埃希菌
志贺菌 霍乱弧菌 副溶血弧菌
弯曲菌 小肠结肠炎耶尔森菌
变形杆菌
41
粪便检验的临床意义
肠道致病菌
霍乱弧菌-霍乱，志贺菌-细菌性痢疾，伤寒沙门菌-伤寒；
食物中毒
沙门菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。
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第二节 临床常见标本的细菌学检验
临床微生物学检验技术(85页)
应用：常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别，如大肠埃希菌和产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。肠杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性，而沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。
4．β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 原理：乳糖发酵过程中需要乳糖通透酶和β－半乳糖苷酶才能快速分解。有些细菌只有半乳糖苷酶，因而只能迟缓发酵乳糖，所有乳糖快速发酵和迟缓发酵的细菌均可快速水解邻硝基酚-β-D-半乳糖苷（O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG）而生成黄色的邻硝基酚。用于枸橼酸菌属、亚利桑那菌属与沙门菌属的鉴别。 方法：将待试菌接种于ONPG肉汤中，35℃水浴或孵箱孵育18~24h，观察结果。
3．甲基红（MR）试验 原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解为甲酸、乙酸和琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下时，加入甲基红指示剂呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在 5.4以上，加入甲基红指示剂呈桔黄色。 方法：将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中，35℃孵育48~96h后，于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示剂，立即观察结果。
二、染色标本
细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类，因此染色标本的检查在细菌的初步鉴定中应用最广，起着非常重要的作用。 （一）常用染料：酸性染料、碱性染料、复合染料。 （二）常用的染色方法：革兰染色、抗酸染色、 荧光染色。
革兰染色
二、培养接种
（一）划线接种 1.方法 斜线法 、曲线法 、方格法 、放射法 、四格法。
斜线法
《医学微生物学》三大常规的微生物学检查
《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断，或查找与疾病相关的微生物，以及对抗生素的敏感性，这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。
因此，对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。
1．临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。
病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。
对血液、脑脊液或穿刺液等标本，应严格按照无菌技术进行采集；对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本，虽无须严格无菌操作，但也应尽量避免杂菌混入。
2．采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签，连同检验单一起尽早送检验室。
若路途较远，应冷藏保存送检；对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本，送检时应35℃～37℃保温。
3．人体很多部位与外界相通，存在有正常菌群，但不致病，故在涂片检查或分离培养时，应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。
另外，对某些无菌的部位，如血液、骨髓、脑脊液等，如检查出细菌应视为致病菌，但必须要排除采样及操作中的污染。
4．根据标本来源和可能存在的病原菌，选定各种分离培养基和孵育环境。
如痰标本一般选用血平板，用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。
【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。
当细菌侵入血流并在其中生长繁殖，产生毒素等，可引起菌血症或败血症。
细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。
一、标本采集l．标本采集必须严格遵守无菌操作，即应去除皮肤上的细菌，又应注意空气中的细菌。
穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒，用干燥的灭菌注射器抽取血液，立即注入选定的液体培养基瓶内，充分混匀以防凝固。
2．采血一般应在治疗前，并在高热、寒战时作培养。
伤寒在发病一周内即菌血症期间采血；化脓性脑膜炎，鼠疫应在发热1～2d内采血；亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血，且每隔1～2h采血一次，连续3～4次，可获较高的阳性率。
3．采血量应相当于培养液的1／10，通常是50ml培养液采血5ml，这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释，使之减弱或失去抑制作用。
临床标本的细菌学检验
病种
标本
鼠 疫 痰，腺穿刺液
霍 乱 水样便
炭 疽 痰，渗出物
白 喉 假膜，咽拭子 淋 病 尿道/阴道分泌物 流 脑 脑脊液、瘀血癍 肺结核 痰 梅 毒 病变渗出液
方法
GS，亚甲兰染色 GS，制动试验 GS，亚甲兰染色/ 串珠试验 GS，亚甲兰染色 GS GS 抗酸染色 暗视野
结
果
G-两极浓染，多形态
——
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• 标本的采集和运送
腰椎或脑室穿刺，将脑脊液分别收集于3 只无菌试管内， 1-2ml/管 细菌学检查
化学和免疫学检查 细胞计数和分类 标本采集后置于无菌容器中立即送检，不 能保存于冰箱中。
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• 实验室检查
脑脊液离心沉淀，取其沉淀物接种于巧克力琼 脂平板、血琼脂平板和厌氧琼脂平板，分别置 需氧和厌氧环境中培养，对疑有真菌和结核分 枝杆菌感染的还应分别接种于相应专用培养基 上。孵育后根据菌落性状、生化反应作细菌学 鉴定。在细菌培养同时，取其沉淀物作涂片、 染色、镜检，以早期诊断感染的病原。
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Step4. 初次培养基上的分离物，可能存在
多种细菌： 区分正常菌群与致病菌 确定优势菌群
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化脓性链球菌菌落特征（β溶血）
铜绿假单胞菌菌落特征（血琼脂平板）
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• 快速
涂片检查
• 是“指南针”
• 对确诊报告提供参考意义
• 不要过分依赖、过分夸大它的作用
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血液、分泌物、排泄物、穿刺液、脑脊液等标本和 液体培养物可直接涂片镜检，有些细菌可做出初步诊断。
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脑膜炎类型
观察物
细菌性的 结核性的 真菌性的 病毒性的
优势白细 胞类型
血液及骨髓标本的细菌学检验
血液及骨髓标本的细菌学检验一、标本采集（一）操作方法1．将患者拟采血部位放平，扎以止血带，选好静脉穿刺点，以皮点为中心用2．5 ％～3 ％碘酊从内向外周擦拭，待干后再以同法用75 ％乙醇脱碘。
消毒范围不得过小。
2．以无菌手续由静脉取血5 ml ，立即注入适当的液体增菌培养基内，迅速轻摇，使充分混合，以防止凝固。
（二）注意事项1．血液标本应在病人发热1 ～2 天内或发热高峰采集培养为宜，此时阳性率较高。
2．培养基与血液的比例为10∶1 。
3．培养一般细菌用普通肉汤或酚红葡萄糖肉汤，培养对营养要求较高的细菌用肝浸液或胰胨肉汤等。
4．采血和接种时应严格注意无菌操作，避免污染杂菌。
5．磺胺和抗生素可影响细菌检出的结果。
故在采集标本时应力争在抗菌药物治疗之前。
如果病人曾服用磺胺类药物，应在每100 ml 培养基内加对氨苯甲酸5 mg ，以防止磺胺类药物对细菌的抑制作用。
如果病人已用青霉素治疗，应在培养基中加入青霉素酶100 U／50 ml （青霉素酶不耐热，应在临用时加入）。
若病人已用其他抗生素治疗时，可用硫酸镁肉汤增菌。
6．标本的采取应以提高阳性检出率为目的。
二、检验程序血液标本的细菌学检验程序见下图。
三、检验方法及报告方式（一）一般细菌的检验1．标本接种于肉汤培养基后，立即置35 ±1 ℃温箱内孵育，每天取出一次观察有无细菌生长，应特别注意观察肉汤内有无混浊、沉淀、菌膜、色素、血液变色、指示剂变色等现象，并记录之。
如有细菌生长，肉汤可呈现各种不同的生长现象，若发生混浊，大多可疑为革兰阴性杆菌；若均匀混浊有绿色荧光，则可疑为绿脓杆菌；上面澄清，下面有沉淀，可疑为链球菌；若见自下而上的溶血现象，可疑为溶血性链球菌；若呈现肉冻样凝固现象，疑为葡萄球菌；若表面有灰白菌膜，疑为枯草杆菌或类白喉杆菌。
2．当疑有细菌生长时，应以无菌操作挑取培养物涂片进行革兰染色镜检。
一旦见有细菌生长，并能排除污染，应及时转种于血平板或其他培养基进行药物敏感试验或分离培养。
尿液标本的细菌学检验
实验室外部质量控制
01
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03
04
参与外部比对实验
与其他实验室进行比对实验， 确保检验结果的一致性。
外部质控数据
收集并使用外部质控数据，监 控检验过程的准确性。
定期评估
定期评估实验室的检验能力， 提高检验水平。
反馈与改进
根据外部质控结果，及时反馈 并改进检验过程。
检验结果的分析与解读
结果判断
根据检验结果判断是否存在细 菌感染。
CHAPTER 04
尿液标本细菌学检验的质量 控制
实验室内部质量控制
仪器校准
确保所有用于检验的仪 器都经过校准，以保证
结果的准确性。
试剂质控
使用经过验证的试剂， 并定期进行质控，确保
试剂质量。
操作规范
实验室人员需遵循标准 操作程序，避免操作失
误影响结果。
室内质控
定期进行室内质控，监 控检验过程的稳定性。
解读误差
了解可能出现误差的原因，正 确解读结果。
临床意义
结合临床情况，分析检验结果 的意义。
结果报告
准确、及时地报告检验结果， 为临床提供依据。
CHAPTER 05
尿液标本细菌学检验的临床 意义与价值
泌尿系统感染的诊断与治疗
诊断
尿液细菌学检验是诊断泌尿系统 感染的重要手段，通过检测尿液 中是否存在细菌，可以判断是否 存在尿路感染。
要点一
指导用药
尿液细菌学检验结果可以为医生提供用药指导，避免抗生 素滥用和无效治疗。
要点二
疗效评估
通过尿液细菌学检验，可以评估治疗效果，为后续治疗提 供依据。
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耶尔森氏菌属
肥杆菌属 致病性杆菌属 克沃尔氏菌属 拉思氏菌属
K/d
K K A A
A
A A A A
d/+ （+）
（+）/+
-
+ +/（+） -
西地西菌属
塔特母氏菌属
K/d
-
A
A
-
-
-
注：A 产酸； K 产碱； + 90-100%菌株阳性；（+）76-89%菌 株阳性 ；d 26-75%菌株阳性； - 0-10%菌株菌阳性
AD
15
1N
16
SO
1
-
4
-
2
-
1
+
4
-
2
-
1
-
4
-
1
0
0
细菌编码052100 摩根氏变形杆菌
查编码鉴定手册得
操作步骤：取3-4个同细菌菌落用 4mlNS制成悬液，每孔加0.2ml，加 盖。35℃ 4h 观察结果（某些项目要 加入相应试剂）。
H2S N PD I LD OD M U VP E ONPG SKA AR AD 1N SO
序号 1
实验名称 H2S
英文缩写 H 2S
阴性 无色
阳性 棕色、黑色
2
3
硝酸盐还原
苯丙胺酸
N
P
淡黄/白色
白色
粉红
绿色
4
吲哚
I
白色
粉红
序号 实验名称 英文缩写 5 赖胺酸 LD 6 乌胺酸 OD 7 丙二酸盐 M 8 尿素 U 9 V—P VP 10 七叶苷 E 11 ONPG ONPG 12 蔗糖 S 13 阿拉伯糖 A 14 侧金盏花醇 AD 15 肌醇 1N 16 山梨醇 SO
七、肠杆菌微量快速鉴定
一、机理：不同种细菌有不同酶系。首 先获得待测菌的纯培养物，制成悬液， 将其示为酶 予成酶 酶+低物+显色剂（或其他添加剂）→观察现象
二、装置：反应板16孔内含16和底物等径真空，
低温干燥，密封保存备用。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
常见临床标本的细菌学检验
一、常见临床标本 1、血液 2、尿液 3、粪便、肛拭子 4、脓汁及脓拭子 5、穿刺液（胸水、腹水、心包液、关节液、 脑脊液、鞘膜液） 6、痰 7、胆汁 8、咽拭子 9、空气
二、标本采集的一般原则
1、应在病程的一定阶段（一般为发病早期）尽 可能在施实抗生素疗法、化学方法、血清学疗 法之前采集标本。 2、方法要恰当,标本应来自真正的感染部位，避 免其它微生物特别是正常微生物的污染。 3、所有采集的标本均应置于无菌容器中（灭菌 不能使用消毒剂）加入适当保存液 。 4、标本应尽快接种（最好是床边接种），若必 须传送时，应根据培养目的作保温、冷藏、厌 氧运送。防止污染及扩散。 5、检样不宜过少，否则易干燥死亡。
6、粪便 （含肛拭子） 增菌（一般不进行）
可疑菌落 （透明/半、 无酸色）
T.T增菌液（四硫磺酸盐肉汤）
M.M增菌液(MgCL2孔雀绿肉汤) 沙门氏菌
S.F增菌液（亚硫酸盐肉汤）
煌绿增菌液 亚硒酸盐增液
沙—志 志贺氏菌
霍乱弧菌
G.N
碱性蛋白胨水
革兰氏染色
球菌 G+杆菌:根据菌落特征,细 菌染色性,形态排列选择恰当 生化反应,免疫学反应及动物 试验 报告 G-杆菌 KIA
3、厌氧菌：一定要由伤口深 处取样，半小时内接种完毕。
（四）咽拭子： 1、由咽部扁桃体处采集分泌 物（注意部位、方式） 2、如凝为白喉患者，则应先 除去咽不表层分泌物去深层组织分泌物， 再取样。 3、凝为百日咳患者，可采用 咳碟法。
（五）痰： 1、先让病人用清水嗉口数次， 以除去口腔内大量杂菌。 2、取清晨第一口咳出的痰， （晨痰） 3、作结核杆菌培养可收集24h 痰。（冰箱保存）
4、痰
TB培养
BA（直径=9.0cm，接种量0.01ml）
注：将标本充分划开
5、尿液 集菌（3000n/min 15`） 革兰氏染色 无菌落 BA 有菌落 沉渣
报告：无菌生长 染色镜检
菌落计数
报告：检出***菌
**个/ml
<1万/ml（或2种以上菌）污染，1-10万/ml可疑 无可疑菌落 >10万/ml感染 报告：无致 SS、MaC（强弱各1个） 病菌生长
3、肾盂尿，应标明右、 左，每侧分3份留联 （导尿管插入输尿 管。） 4、通常宜取清晨第一 次尿。
5、采集后应立即送检， 接种，一般不得超 过1h，冰箱保存， 不过6h。
四、常见临床标本鉴定程序
• 染色镜检 变浊、色、 质→ BA→酚红葡萄糖肉汤
4 、如病人已实施治疗，应在酚红葡萄糖肉汤 中加入相应对抗剂。 磺胺类药物→对氨基苯甲酸5mg/100ml.
青霉素→2u青霉素酶/ml
其他抗生素→MgSO4 5mg/100ml
（二）粪便：
1、应尽量在用药前自然排便；取 有胧血、粘液部分2-3 g（新鲜）液壮便应取絮 壮物1-2ml于无菌广口瓶中。
斜面 A/K K K d A A K/A K/A K/A K 底层 A A A A A A A A A A 产气 H2S 动力 +/（+）/+/d/+ + + d + + + + -/+ +/+/+/-/d + +/+/d +/+
斜面
低层
产气
H2S
动力
变形杆菌属
普罗菲登斯菌属 摩根氏菌属
K
K K
A
阴性 黄色 黄色 黄缘色 黄色 白色 白色 白色 紫色 紫色 紫色 紫色 紫色
阳性 紫兰色 桔色 湖兰色 粉红 粉红 棕黑色 黄色 黄色 黄色 黄色 黄色 黄色
1
H2S 4
2
N 2
3
PD 1
4
I 4
5
LD 2
6
OD 1
7
M 4
8
U 2
-
0
-
+
5
+
-
+
2
9
VP
10
E
11
ONPG
12
SAK
13
AR
14
A· t
XX个/M3=
N
A· t 100*5
*10
*1000=
50000N
→39.32N A· t （49.0；20’）
结果报告应注明 “普通琼脂平板培养”/“血 琼
肠杆菌科各属KIA结果
埃希氏菌属 志贺氏菌属 沙门氏菌属 枸橼酸盐菌属 克雷伯氏菌属 肠杆菌属 欧文氏菌属 沙雷氏菌属 哈夫尼亚菌属 爱得华氏菌属
三、常见标本的采集（一般由 临床医师执行）
（一）血液： 1、一般在发热高峰期采集（发热初 期1-2天，此时阳性率较高）尽量在实施血清疗 法、化学疗法和抗生素疗法之前进行。 2、采血部位：一般为静脉（动脉阳 性率更高些）。 3、采血量：5-1ml，直接加入酚红 葡萄糖肉汤中（血/肉汤=1：10）（防止血凝、 稀释Ab等因子）如不能直接接种应置入已灭菌 适量20%枸橼酸盐瓶中。尽快送检。
菌落描述:颜色,大小,溶血性,透明度,硬度,润 湿度,表面光滑度,粘稠度,凸起度,边缘整齐度
+/+
根据KIA结果选择适当生化反应项目 I M Vi C 七叶
+ —
-/+
I _
+ —
MAN
— +
SUC _ C
— +
U _
— +
PA _
I项“+”非沙门氏菌 I项“+”非志贺氏菌 +
变+普
-/- → I
葡
C 不动杆菌 绿脓杆菌
+/- → 一般不会出现，可考虑接种不当，空 气污染
根据生化反应结果，结合相应血清学实验 报告结果
五、空气细菌计数
将直径9 .0cm/普通琼脂平板/血琼脂平板 按五点法/三点法打开盖暴露20’，盖好 →37℃ 24h计数菌落数，称出平均每个板 菌落数N
奥梅梁斯基法则：
100cm2 5’→10L A t →100*50 *10L
2、如无法获取粪便，应用直肠拭子， 小儿入肛门2-3cm。成人入肛门4-5cm. 取直肠粘液入无菌试管/保存液。
3、如需保送运送测量PH7.0甘油PSB 中（0.033mol/L PSB与等体积甘油混 匀。PH7.0)
( 三）、脓汁 1、创伤：先以无菌N· S清洗创 口周围，再以棉签来取脓汁/分泌物→脓 拭子置无菌试管。 2、脓肿：先消毒患部表面皮 肤，再以注射器抽吸/切开脓时接留脓汁12ml置无菌试管。
无改变→BA 报告：无菌生长 无菌落 BA
无菌落
有菌落→染色镜检 变浊、色、质→BA→菌落→染色镜检
2穿刺液→
血肉汤→
无改变→BA→ 报告：无菌生长 染色
有菌落
无菌落
BA 3，拭子（咽、脓）
菌落分类、 编号、染色 镜检
染色镜检 注：接种血平板时，拭子作原划线、接种 环划开
BA
菌落分类、编号、染色 罗氏斜面（先消化处理） 4%NaOH 6%H2SO4
（六）胆汁：
1、行十二指肠引 流水收集“胆汁乙”1015ml。
（ 胆汁甲—胆总管 ）