基因工程期末考试复习题

一、名词

基因工程（遗传工程）、基因操作、基因分离、DNA重组、Tm值、分子杂交、探针、Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、Western印迹杂交、选择标记基因、报告基因、α-互补、转化、受体细胞、转染、转导、复制子、转基因沉默、启动子、增强子、终止子、绝缘子、反义子、SD序列、外显子、内含子、融合蛋白、包涵体、同裂酶、同尾酶、基因组文库、cDNA文库、载体、多克隆位点（MCS）、基因克隆、亚克隆、cosmid、噬菌粒载体、T-DNA、反式作用因子、顺式作用元件、定位整合克隆载体、基因打靶、穿梭载体、基因芯片、基因治疗、SSH、RDA、DDRT-PCR、ESTs、PCR、RT-PCR、反向PCR、巢式PCR、识别位点、限制性核酸内切酶、限制性（物理）图谱、严紧性质粒、松弛型质粒、结合型质粒、非结合型质粒、质粒不亲和性、迁移作用、显性质粒、隐蔽质粒、RNA干扰（RNAi）、MicroRNA、转化子、重组子、目的基因、目标生物、人工染色体载体、连接酶、T/A克隆、定向克隆、限制修饰系统、杂交探针、复制子、感受态细胞、酵母附加体质粒、酵母复制质粒、酵母整合质粒、DNA聚合酶、蓝白斑筛选

二、简答与问答题

1 简述乳腺生物反应器的原理。

2 简述基因工程研究发展历史。

3 简述基因工程研究的主要内容。

4 举例说明浓缩DNA或RNA的方法。

5 说明限制性核酸内切酶产生Star活性的原因及其克服措施。

6 DNA修饰酶有哪些？各有何功能？

7 按介质分，DNA片段凝胶电泳可分为哪几类？各自的主要分离范围是什么？

8 按来源可将基因克隆载体分为哪几类？并说明各自的主要特点。

9 作为克隆载体必须具备的主要条件是什么？

10 作为基因工程宿主必须具备的主要条件是什么？

11 列举外源基因表达系统中的载体和宿主。

12 特殊用途克隆载体有哪些？

13 简要说明目的基因制备的主要方法。

14 特殊用途PCR有哪些？

15 简述转基因生物的主要鉴定方法的原理和过程。

16 简述基因工程的主要应用领域。

17 简述转基因产品尤其是转基因食品潜在危险的原因及应该采处的安全措施。

18 简述在基因工程主要表达受体中提高表达效率的策略。

19 简述外源基因在受体细胞中的主要表达形式及各自的优缺点。

20 如何实现定向克隆？

21 简述不同生物的转基因方法。

22 说明原核与真核生物基因表达调控的特点。

23 如何区别转基因生物、转化子、重组子？

24 列举启动子、终止子和相应的宿主。

25 表达载体必须具备哪些功能元件？

26 简述构建基因文库的基本步骤。

27 简述在各类生物中实现高效表达的措施。

28 基因工程诞生的理论基础和技术基石是什么？

29 构建cDNA文库涉及哪些基本过程？

50 简述酵母人工染色体的工作原理。

三、论述与综合应用题

1 试述PCR的原理和主要过程。

2 试述基因分离的主要方法和原理。

3 试设计一个方案，将拟南芥生长素反应因子9转入油菜中进行异源表达（拟南芥基因组测序已完成）。

4 现分离得到一个青霉菌的单基因的抗高温突变体，试设计一个方案克隆和分离该基因（青霉菌基因组测序尚未进行）。

考试题型说明：

一、名词解释（每题3分, 共30分）

二、观察载体，在横线上填出相应内容。（每空2分，共10分）

1________________________; 2__________________ _____

3________________________; 4________________________

5________________________; 6 博来霉素（zeocin）抗性基因

四、匹配题(有的可以与多个匹配, 有的可能没有匹配，画线连接)（10分）

1．启动子受体细胞

35S 大肠杆菌

T7 猴

SV40早期启动子小麦

AOX1 毕赤酵母

2. 载体或载体源受体细胞

Ti质粒烟草

pYES2 人类

反转录病毒大肠杆菌

pUC19 酵母

3. 计划扩增下图所示的两段序列之间的DNA，选出合适的PCR引物。

5’－cgggattgatgccatac————————————aagcgctgagacctgtgg－3’

3’—gccctaactacggtatg————————————ttcgcgactctggacacc－5’

Fordward primers Reverse primers 5’－cgggattgatgccatac－3’ 5’－ctggacaccttcgtgga－3’

5’－tacggtatgccctaac－3’ 5’－cgaaggtgtccagcaat－3’

5’－gccctaactacggtatg－3’ 3’－aagcgctgagacctgtgg－5’

5’－gtatgccctaaccgaa－3’3’－ttcgcgactctggacacc－5’

四、问答题（每题5/10分，共30分）

五、试设计一个方案，将水稻IAA4基因转入菠菜中进行异源表达（水稻基因组测序已完成）（20分）