原核生物的基因结构特点

原核生物的基因结构特点

①为一条环状双链DNA；②只有一个复制起点；③具有操纵子结构；④绝大部分为单拷贝；

⑤可表达基因约50%，大于真核生物小于病毒；⑥基因一般是连续的，无内含子；⑦重复序列很少。

PCR技术的主要用途

1.目的基因的克隆

2.基因的体外突变

3.DNA的微量分析

4.mRNA含量分析

5.基因突变分析

探针的种类

1. DNA探针主要优点：①这类探针多克隆在质粒载体中，可以无限繁殖，取之不尽，制备方法简便。②DNA探针不易降解（相对RNA而言），一般能有效抑制DNase活性。③DNA 探针的标记方法较成熟，有多种方法可供选择，如缺口平移法，随机引物法，PCR标记法等。

2. cDNA探针主要用途：1.从已构建的cDNA文库中筛查和分离目的基因。2.cDNA探针不含有内含子序列，因此适用于基因表达检测。

3. RNA探针：具有DNA探针所不能比拟的高杂交效率，但RNA探针也存在易于降解和标记方法复杂等缺点。

4. 寡核苷酸探针主要优点：（1）杂交时间短。（2）可用于点突变的检测。（3）价格低

八.巨噬细胞在固有性免疫和适应性免疫中的桥梁作用。

巨噬细胞在固有免疫中的作用主要是在感染的早期起到吞噬、杀伤病原体的作用。如果无法彻底清除抗原则会启动适应性免疫应答，作为抗原提呈细胞来加工、提呈抗原，分泌细胞因子。在适应性免疫方面巨噬细胞通过分泌多种细胞因子可以增强杀伤靶细胞能力，如活化巨噬细胞增强其吞噬杀伤作用，可以借助ADCC效应杀伤靶细胞。还可以进行免疫调节如1.激活的巨噬细胞高表达B7和MHC II类分子从而具有更强的提呈抗原和激活CD4+T细胞的能力分泌IL-12使Th0向Th1分化进一步扩大Th1的细胞应答能力，2.IL-1和IFN-r可以促进T细胞和B细胞活化，3.TNF-a可以促进CTL活化增殖和分化，4.IL-10可以抑制巨噬细胞和NK细胞活化，抑制巨噬细胞抗原提呈作用