HPLC法测定川乌中新乌头碱和次乌头碱的含量
高效液相色谱法测定腰痛丸(Ⅰ)中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的含量
高效液相色谱法测定腰痛丸(Ⅰ)中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的含量朱干红;仇其原;曹桂萍;吴士龙【摘要】目的:建立腰痛丸(Ⅰ)中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量测定方法,进一步提高腰痛丸(Ⅰ)的质量控制.方法:采用CAPCELL PAK C18(4.5 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相A为乙腈-四氢呋喃(V:V=25:15),流动相B为0.1 mol/L 醋酸铵溶液,梯度洗脱,检测波长为235 nm,柱温为30℃,流速为1.0 ml/min.结果:新乌头碱在0.2～1.6 μg/ml范围内线性关系良好,r2=0.999 1,平均回收率为97.69％,RSD为0.86％;次乌头碱在0.2～1.6 μg/ml范围内线性关系良好,r2=0.998 9,平均回收率为98.17％,RSD为0.93％;乌头碱在0.2～1.6 μg/ml范围内线性关系良好,r2=0.999 5,平均回收率为99.50％,RSD为0.45％.结论:本研究测定方法简便、准确、重复性好,可用于腰痛丸(Ⅰ)的质量控制.【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2016(016)009【总页数】3页(P1229-1231)【关键词】高效液相色谱法;腰痛丸(Ⅰ);新乌头碱;次乌头碱;乌头碱【作者】朱干红;仇其原;曹桂萍;吴士龙【作者单位】盐城市中医院药剂科,江苏盐城224001;盐城市药品检验所药物分析室,江苏盐城224001;盐城市中医院药剂科,江苏盐城224001;盐城市药品检验所药物分析室,江苏盐城224001【正文语种】中文【中图分类】R927.2腰痛丸(Ⅰ)是一种中药药丸，主要是由独活、苍术、干姜、肉桂、陈皮、威灵仙、制川乌、制草乌等中药药材加工提炼而成，具有祛风、散寒、温经、通络、止痛等作用，主治风寒腰痛及关节炎等症。
新乌头碱、次乌头碱和乌头碱等乌头类生物碱是存在于川乌、草乌、附子等植物中的主要有毒成分[1]，能使神经和心脏中毒。
乌头碱类生物碱的含量测定方法概述
乌头碱类生物碱的含量测定方法概述陆燕萍;巩晓宇;陈秋燕;邱凤邹【摘要】The content determination methods of single ester alkaloids, diester alkaloids and total alkaloid in radix aconiti, kusnezoff monkshood, aconite and other aconitine drugs are described in this article including HPLC, RP-HPLC, LC-MS, TLCS, High Performance Capillary Zone Electrop- horesis and Spectrophotometry. Based on different mobile phase, HPLC and RP-HPLC is classified. At the same time, the classification of TLCS is carried out studied according to different deployment agents.%总结概括目前川乌、草乌、附子等乌头碱类药物的单酯型生物碱、双酯型生物碱及总生物碱的含量测定方法，主要有高效液相色谱法、反相高效液相色谱法、液－质联用方法、双波长薄层扫描法、高效毛细管电泳法和分光光度法。
该文根据不同的流动相对高效液相色谱法和反相高效液相色谱法进行分类，同时根据不同的展开剂对双波长薄层色谱法进行了分类。
【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2016(025)007【总页数】3页(P1-2,3)【关键词】乌头碱类生物碱;含量测定;高效液相色谱法;反相高效液相色谱法;液-质联用方法【作者】陆燕萍;巩晓宇;陈秋燕;邱凤邹【作者单位】广东省深圳市龙岗区人民医院，广东深圳 518172;广东省深圳市龙岗区人民医院，广东深圳 518172;广东医学院，广东东莞 523808;广东省深圳市龙岗区人民医院，广东深圳 518172【正文语种】中文【中图分类】R282.41;R286.0乌头碱类药物的主要成分是生物碱，包括单酯型生物碱、双酯型生物碱、氨醇型生物碱和其他类型化合物。
乌头类中药有效成分的含量测定研究
【实验研究】乌头类中药有效成分的含量测定研究王丕明摘要：目的探究乌头类中药有效成分，并对其含量进行测定。
方法以乌头类中药中的新乌头次碱作为有效成分，应用高效液相色谱法对其含量进行测定，观察测定结果。
结果新乌头次碱进样量在0.46 10.0μg ，与峰面积积分存在线性关系，在对精准性、稳定性方面测定中，新乌头次碱峰面积分别为ＲSD =0.49%、ＲSD =1.35%，4份不同样品含量的加样回收率分别为101.05%、100.32%、102.14%、103.28%，2批次附子样品中新乌头次碱含量方面，批次1平均含量为0.352mg/g ，ＲSD 值为1.24%，批次2平均含量为0.281mg/g ，ＲSD 值为1.55%。
结论乌头类中药中新乌头次碱采取高效液相色谱法测定操作简单、准确性高，可以广泛的用于乌头类中药含量的测定，具有重要的应用价值。
关键词：乌头类中药；新乌头次碱；高效液相色谱法doi ：10．3969/j．issn．1003-8914．2019．06．019文章编号：1003-8914（2019）-06-0860-03作者单位：山西药科职业学院中药系（山西太原030031）乌头类是临床常用的一种中药，以乌头碱等生物碱为主要毒性成分，如果人类要口服3 5mg 乌头碱，则会导致死亡的发生。
乌头碱以循环系统、中枢神经系统为主要的损害器官，其中心律失常为循环系统损害的主要表现。
目前，临床对于该药物的毒性尚无特效解毒剂，临床多予以患者早期、足量的阿托品、抗心律失常等药物进行治疗，对于中毒较深的患者，则多采取血液灌流治疗。
乌头类中药中含有多种生物碱，例如乌头次碱、乌头碱、新乌头碱等［1］。
在乌头类中药中，生物碱成分既属于活性成分，也属于毒性成分，且该药物多采取炮制方法入药，因此，其质量与临床用药的安全性具有直接关系。
为保证临床用药的安全性，在本次研究中，以乌头类中药中新乌头次碱这一有效成分作为研究指标，并对其含量进行测定，现详细报道如下。
RP-HPLC同时测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量
RP-HPLC同时测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量刘少静;王小库;朱改改;杨黎彬【摘要】Aim To develop an optimal RP-HPLC method for determining the content of mesaconitine and hypaconitine in the aerial part of Radix Aconiti Lateralis Praeparata. Methods Two constituents were analyzed simultaneously with a Venusil ABS C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) by gradient elution using acetonitrile-0. 1％ ethylenediamine as the mobile phase. The column was maintained at 30 ℃ . The flow rate was 1 ml . min -1. The detection wavelength was set at 230 nm. Results Excellent chromatographic separation was achieved for mesaconitine and hypaconitine. The linear ranges of the two constituents were 12. 5 ～ 1 200 mg · L-1 , and 11. 46 ～ 100 mg ～ L-1 respectivety. The extraction recoveries were 99. 72％ ( RSD = 0. 69％ ), and 100. 29％ ( RSD = 1. 07％ ) . Conclusion The method has the advantages of simplicity, acuteness and precision,which is suitable for quantitative analysis of mesaconitine, hypaconitine in Radix Aconiti Lateralis Praeparata.%目的建立RP-HPLC法,测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量.方法采用Venusil ABS C18色谱柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1% 乙二胺溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30 ℃,流速1 ml·min-1,检测波长230 nm.结果新乌头碱、次乌头碱均得到较好分离,分别在12.5～1 200 mg·L-1、11.46～1 100 mg·L-1呈良好的线性关系;加样回收率分别为99.72%(RSD=0.69%),100.29%(RSD=1.07%).结论该方法简便、灵敏、准确,可用于附子中双酯型生物碱的定量分析.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2011(015)009【总页数】2页(P1078-1079)【关键词】附子地上部分;新乌头碱;次乌头碱;RP-HPLC【作者】刘少静;王小库;朱改改;杨黎彬【作者单位】西安医学院药学院,陕西,西安,710021;西安医学院药学院,陕西,西安,710021;西安医学院药学院,陕西,西安,710021;西安医学院药学院,陕西,西安,710021【正文语种】中文附子为毛莨科植物乌头Aconitum carm ichaeli Debx.的子根加工品。
高效液相色谱法测定川产乌头中有效成分含量的研究
高效液相色谱法测定川产乌头中有效成分含量的研究陶宗娅;崔盛;陈蕤;张宏;张晓喻;陈丽萍【期刊名称】《西南大学学报：自然科学版》【年(卷),期】2007(29)10【摘要】运用HPLC测定四川境内乌头中3种酯型生物碱-新乌头碱、鸟头碱和次乌头碱的含量．实验以C8色谱柱为固定相，为乙腈-甲醇-缓冲液（8：39：53），缓冲液为0．2％冰醋酸，用二乙胺调pH值至5．41；流速为1．0mL／min；紫外检测波长为231nm．所得新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的标准曲线范围分别是11．968-299．2μg／mL、5．552-138．8μg／mL和7．168～179．2μg／mL（r=0．999 52,0.999 57,0.999 56,n=7；检测限分别是0．4787μg／mL、0．2776μg／mL和0．7168μg／mL加样回收率为95．36％～101．77％，RSD均小于5％．结论表明该方法准确、灵敏度高，便于乌头类药材质量控制．【总页数】6页(P61-66)【关键词】高效液相色谱法;乌头;鸟头碱;新鸟头碱;次乌头碱【作者】陶宗娅;崔盛;陈蕤;张宏;张晓喻;陈丽萍【作者单位】四川师范大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】S567.79【相关文献】1.高效液相色谱法测定安徽产木通药材中3种有效成分含量 [J], 欧金梅;储晓琴;张虹;2.高效液相色谱法同时测定中药附子中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱的含量 [J], 吴梓春;刘肖林3.高效液相色谱法测定嘎日迪五味丸中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱含量 [J], 王岩;刘欣欣4.高效液相色谱法测定安徽产木通药材中3种有效成分含量 [J], 欧金梅;储晓琴;张虹5.高效液相色谱法在康复新胶囊中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量测定中的应用分析 [J], 张亚飞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RP-HPLC同时测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量
Ｋｅ ｒ ｓ ｅ ａ ａ ｔ ｆＲａ ｉ ｏ ｉ ａ ｅ ａｉ Ｐ ａ ｐ ｒ ｔ ； ｓ ｃ ｎｔ ｅ ｈ ｐ ｃ ｎｔ ｅ； — Ｌ ｙ ｗｏ ｄ ：ａ ｒ ｌ ｒ ｏ ｄｘ Ａｃ ｎ ｔ Ｌ ｔ ｒｌ ｒ ｅ ａ ａａ ｍｅ ａ ｏ ｉ ｎ ； ｙ ａ ｏ ｉ ｎ ＲＰ ＨＰ Ｃ ｉ ｐ ｉ ｓ ｉ ｉ
头碱 、 次乌头碱均得到较好分离 ， 分别在 １ ． ０ ｇ・ ～、１４ ２ ５～１ ０ｍ Ｌ １． ６～１１０ ｍ Ｌ 呈 良好 的线性关 系 ； ２ ０ ｇ・ 加样 回收率 分别为 该方法简便 、 灵敏 、 准确 ， 可用于附子中双酯型生物碱 的定量 分析 。
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ ｆ ｍ ｅ ａ ｏ ｉｉ ｅ ａ ｙ ｃ ｎ ｔｎ ｎ ｔ ｅ ａ ｒ ａ ａ ｔ ｏ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｏ ｓ ｃ ｎ ｔｎ ｎｄ ｈ ｐａ ｏ ｉ ｅ ｉ ｈ ｅ ｉ ｌｐ ｒ ｆ ｉ Ｒａ ｉ ｏ ｉｉＬａ ｅ ａ ｉ ａ ｐ ｒ ｔ ｙ ＲＰ． ｄ ｘ Ａｃ ｎ ｔ ｔ ｒ ｌ Ｐｒ ｅ ａ ａ ａ ｂ ｓ ＨＰＬＣ
ｍ ５Ｉ ； ｍ， ， 流动相为 乙腈－． ％ 乙二胺水 溶液 ， ｚ ｍ） ０１ 梯度 洗脱 ： ０
～
１３ 药材 ．
附子地上部分采 自汉 中洋 县 ， 由西安 医学 院中药
１ ｉ，６ 乙腈 ；７ 叭 ～ ３ ｉ ，２ 乙腈 ； ７ｍｎ ５ ％ １． ０ｍ ｎ ９ ％ 检测 波长 ：
２ ０ｎ 柱 温 ：０ｏ 流 速 ：． ・ ｉ ～； 样 量 ：０ Ｉ。 色 ３ ｍ； ３ Ｃ； １０ｍｌ ｍ ｎ 进 １ ｌ ｘ
ｏ Ｒ ｄ ｃｎｔ Ｌ ｔ ａｉ Ｐａ ｐ ｒｔ．Ｍ ｅ ｏ ｓ Ｔ ｏ ｃｎ ｔｕ ｎ ｅｅａ ａ ｚ ｄ ｓ ｌ ｎ ｏ ｓ ｉ ｅ ｕ ｉ Ａ Ｓ Ｃ８ ｏｕ ｎ （ ５ ｆ ａ ｉ Ａ ｏ ｉ ａ ｒｌ ｒｅ ａａ ｘ ｉ ｅ ｓ ａ ｔ ｄ ｗ ｏ ｓ ｔｅ ｔ ｗ ｒ ｎ ｌ ｅ ｉ ｔ ｅ ｕｌ ｗ ｔ ａＶ ｎ ｓ Ｂ ｃ ｌｍ ２ ０ ｈ ｉ ｓ ｙ ｍｕ ａ ｙ ｈ ｌ ｌ
HPLC同时测定制草乌中三种生物碱质量比
HPLC同时测定制草乌中三种生物碱质量比张智圆;沈志滨;季宇彬【摘要】测定制草乌不同地区炮制品中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱的质量比.采用HPLC法,Kromasil-C18色谱柱,甲醇-水-氯仿-三乙胺(w/w 70: 30: 2:0.1),流速1.0 mL/min,检测波长230 nm,常温.新乌头碱在10～120 μg/mL,次乌头碱在3.9～46.8 μg/mL,乌头碱在10～120 μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.1%、95.8%和95.3%.制草乌中酯型生物碱质量分数均不超过0.15%,符合中国药典规定.【期刊名称】《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(026)001【总页数】4页(P1-3,8)【关键词】制草乌;生物碱;质量比测定【作者】张智圆;沈志滨;季宇彬【作者单位】哈尔滨商业大学,生命科学与环境科学研究中心,药物所博士后科研工作站,哈尔滨150076;国家教育部,抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨,150076;广东药学院,广州,510006;哈尔滨商业大学,生命科学与环境科学研究中心,药物所博士后科研工作站,哈尔滨150076;国家教育部,抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨,150076【正文语种】中文【中图分类】R284制草乌为毛茛科植物北乌头(Aconitum kusnezoffiiReichb).干燥块根的炮制加工品[1],主要含有新乌头碱、次乌头碱和乌头碱等生物碱类成分[2].文献多见对其中两种生物碱及总生物碱进行测定[3-6],同时对3种生物碱质量分数进行测定的文献报道罕见.本文同时测定6个不同地区制草乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的质量分数,为制草乌生产规范化、饮片生产标准化提供质量控制依据.1 仪器与试药高效液相色谱仪(Waters 515,2487 UV检测器,EmPower色谱工作站);对照品购于中国药品生物制品检定所,乌头碱(批号:110720-200410),次乌头碱(批号:0798-9403),新乌头碱(批号:0799-9403).制草乌饮片由广东药学院生药教研室李书渊副教授鉴定为毛茛科植物北乌头(Aconitum kusnezoffiiReichb).干燥块根的炮制加工品.产地及编号见表1.表1 制草乌产地样品名饮片名称产地北京A制草乌北京同仁堂药店北京B制草乌北京康济堂药店哈尔滨A制草乌哈尔滨仁和药店哈尔滨B制草乌哈尔滨人民同泰药店舟山A制草乌舟山存得堂药店舟山B制草乌舟山万民大药房济南A制草乌济南百味堂药店济南B制草乌济南建联中药店秦皇岛A制草乌秦皇岛艾欣药店秦皇岛B制草乌秦皇岛唐人医药汕头A制草乌汕头时珍药行汕头B 制草乌汕头恒青药店汕头C制草乌汕头益群大药房2 方法和结果2.1 色谱条件色谱柱为Kromasi l C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-氯仿-三乙胺(w/w 70∶30∶2∶0.1),流速为1.0mL/min,检测波长为230 nm,柱温为室温[7]. 2.2 溶液制备及色谱检测2.2.1 对照品溶液的制备及色谱检测分别精密称取新乌头碱、次乌头碱及乌头碱,二氯甲烷配制成1.00、1.00、0.39mg/mL对照品溶液.精密吸取1 mL,置于10 mL离心管中,精密加入0.01m L H2 SO4 1mL,涡旋2 min,离心5 min(3 000 r/min),取水层20μL进样.色谱图见图1.图1 对照品HPLC色谱图2.2.2 供试品溶液配制及色谱检测精密称定制草乌粗粉10 g,氨试液4 mL润湿,乙醚50mL浸泡14 h,过滤.乙醚洗涤药渣15m L×3次,合并乙醚液,60℃以下蒸干,二氯甲烷溶解并定量转移残渣至5mL 容量瓶,精密吸取1m L,置于10 mL离心管中,精密加入0.01 m L H2 SO4 1m L,涡旋2 min,离心5 min(3 000 r/min),取水层20μL进样[8].色谱图见图2.图2 供试品HPLC色谱图2.3 实验结果2.3.1 线性关系考察分别精密吸取标准品溶液0.25、0.5、1、2、3 m L,至10 mL尖底具塞试管中,精密加入0.01 mol/LH2 SO4 1m L,涡旋2min,3 000 r/min,离心5 min,取水层20μL进样,按上述色谱条件测定峰面积,以质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,求得相应回归方程,见表2.表2 标准曲线与线性范围)2.3.2 稳定性实验取舟山A制草乌粗粉,按2.4.2.2方法制备供试品溶液,于0、2、4、6、8 h分别测定其相应生物碱的峰面积.由标准曲线求其质量比,新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的RSD分别为2.3%、2.1%和1.5%.2.3.3 精密度实验精密量取乌头碱、次乌头碱、新乌头碱混合对照品溶液1 mL,按标准曲线及线性范围项下进行分析,平行5份,新乌头碱、次乌头碱和乌头碱峰面积的RSD分别为1.8%、2.5%、2.8%.2.3.4 重现性试验取舟山A制草乌粗粉5份[9],按2.4.1.2项下制备供试品溶液,分别测定质量分数,测得新乌头碱、次乌头碱和乌头碱RSD分别为2.9%、3.7%和1.3%.2.3.5 加样回收率试验精密称取舟山A制草乌粗粉,加入一定量的对照品,依上述色谱条件测定峰面积,计算三者的加样回收率分别为96.1%、95.8%和95.3%.其RSD分别为1.8%、1.3%和2.0%.2.3.6 样品质量比测定分别取不同供试品溶液20μL,按上述色谱条件进样,测得供试品中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱相应峰面积,计算质量比,结果见表3.表3 样品中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱质量比注:/为质量比低,-为未检出.样品新乌头碱质量比RSD次乌头碱质量比RSD乌头碱质量比RSD/(mg◦g-1)/%/(mg◦g-1)/%/(mg◦g-1)/%北京A 0.011 4 0.1-0 0.006 7 0.9北京B 0.011 4 2.2-0 0.006 8 1.7哈尔滨A/0-0 0.001 7 3.5哈尔滨B/0-0 0.001 6 3.5舟山A 0.050 6 3.8 0.036 1 1.2 0.012 9 0.4舟山B 0.002 6 2.2 0.004 3 2.3 0.006 1 0.9济南A 0.046 4 5.3 0.002 5 2.4 0.008 5 4.7济南B 0.003 6 2.7 0.002 5 2.3 0.008 1 2.5秦皇岛A 0.012 9 2-0 0.006 2 1.6秦皇岛B 0.004 1.5 0.002 6 3.8 0.002 8 2汕头A 0.004 4 1.3-0 0.001 9 3汕头B 0.020 2 0.8-0 0.002 4 2.4汕头C 0.007 1 1.4 0.002 2.5 0.001 6 3.73 结语本实验采用HPLC法同时检测6个不同地区中制草乌中三种乌头碱的质量比,得到结果:新乌头碱10～120μg/m L,次乌头碱3.9～46.8μg/m L,乌头碱在10～120μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.1%、95.8%和95.3%.其酯型生物碱质量分数均不超过0.15%,符合中国药典规定.参考文献:[1]《中国药典》2005版[M]I部.VOL.26-27;163-164.[2]李文兰,王艳萍.中药乌头的实验研究[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学版,2006,22(4):13-17.[3]李云霞,孙照,郭艳玲.酸性染料比色法测定川乌、草乌中总乌头生物碱的含量[J].中成药,2000,22(9):662-663.[4]王朝虹,何毅,张继宗,等.高效液相色谱法测这下草乌中乌头碱含量[J].刑事技术,2003(1):15-16.[5]孙爱民,陈德华,毕培曦.高效毛细管电泳法测定中草药川乌、草乌中乌头碱的含量[J].色谱,1999,17(1):67-69.[6]邓江,龙丽娜,杜方麓.市售乌头炮制品种中的乌头总碱、酯型生物碱、乌头碱的含量检查[J].中成药,2007,29(12):14-15.[7]LI Y P,TIANSJ,WANG G R.Chem ical compounds and analysis methods of aconitum[M].China J Chin Mater Med,2001,26(10):659-661.[8]正航盛,冯年平.中药饮片制川乌、制草乌中乌头碱、次乌头碱HPLC测定[J].药物分析杂志,2005,25(1):34-36.[9]杨书良,吴亚,杨波,等.HPLC法测定番泻叶滴丸中番泻苷B的含量[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学版,2009,25(11):11-12.。
RP-HPLC法测定草乌中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱
３ ８ 回收 率试 验 ： 已测量 的草 乌样 品粉 末 ０ ２ｇ ． 取 ． ５份 ， 密 称定 ， 份分 别 加入 中乌 头碱 、 头碱 、 精 每 乌 次 乌 头 碱对 照 品适 量 ， 供试 样 品溶 液 的制 备 项 下操 照 作 ， 样测 定 ， 果 中乌头碱 、 进 结 乌头碱 、 乌头碱 的回 次
图 １ 对照 晶（ 和草乌样品 （ Ａ） Ｂ）
ＨＰＬＣ色 谱 图
Ｆｉ ｇ．１ Ｈ ＰＬＣ Ｃｈｒ ｍ ａ ｏｇ ａｍ ｓｏｆｒ ｆ ｒ ｎ ｅ ｓ ｓ ａ ｅ ｏ ｔ ｒ ｅ ｅ ｅ ｃ ｕｂ ｔ ｎｃ ｓ
色 谱 柱 ： ｒ ｓ ８ ２ ０ ｍｍ ×４ ６ｍｍ， Ｋｏ ｍｕ ｉ Ｃ１（ ５ ｌ ． ５ ｍ） 流 动 相 ： 腈一 酸 铵 缓 冲 溶 液 （ Ｈ １ ． ） ； 乙 醋 ｐ ０ ５ （ ０：４ ） 体 积 流 量 ： ． ６ ０； １ ０ｍＬ／ ｎ； 测 波 长 ： ４ ｍｉ 检 ２０
功能， 用于 风寒 湿痹 、 心腹 冷 痛 、 醉 止痛 等口 。 麻 ］ 主要 含 有 中 乌头 碱 、 头 碱 、 乌 头碱 等 二 萜 类 生 物碱 ， 乌 次 它 们既 是其 有效 成分 ， 是其 毒性 成 分 。 实 验采 用 也 本
ＨＰ Ｃ方 法 测 定 ３种 生 物碱 ， 法 简 便 、 速 ， 果 Ｌ 方 快 结 准确 。 １ 仪器 、 品与 试剂 药 Ｓ ｉ ｄ ｕ Ｌ 一 １ Ａ 高 效 液 相 色 谱 仪 ， 括 ｈｍａ ｚ Ｃ Ｏ 包 Ｌ 一 １ＡＴｖ Ｃ Ｏ ｐ溶 剂 输 送 泵 ， Ｃ 一 １ Ａｖ系 统 控 制 Ｓ Ｌ ０ 器 ，Ｐ Ｓ Ｄ一 １ Ａｖ Ｏ ｐ紫 外一 见 检 测 器 ， ＴＯ一 １ Ａｖ 可 Ｃ Ｏ ｐ 柱 温 箱 ， Ｕ一 １ Ａ 在 线 真 空 脱 气 机 ， ｌｓ—ｐ工 ＤＧ ２ Ｃ ａｓｕ 作站； 中船 七 院二 六 所 超 声 波 清 洗 机 ， — Ｏ ９袖 ＫＬ ０ 珍 数 显笔 式 酸度 计 。 中 乌头碱 、 乌头碱 、 次乌 头碱 对 照品 质量 分数 分
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mg，次乌头碱标准品 3． 1 mg，置 10 mL 容量瓶，以色谱级甲醇 定容至刻度，得混合标准溶液。浓度分别为 520，310 μg ﹒ mL － 1 ，置于冰箱备用。
（ 四） 供品溶液的制备。将干燥至恒重的供试样品西昌 布托川乌，过 0． 33 mm 筛，称取约 1． 0 g 样品，置于 50 mL 具 塞三角瓶，加浓氨水润湿 80 min，加入 20 mL 氨水饱和乙醚溶 液，超声波萃取 20 min，置于冰箱冷藏过夜，取出放置常温过 滤，滤渣用氨水饱和乙醚溶液超声波萃取 3 次，每次 约 10 mL，合并滤液，水 浴 挥 干 氨 水 饱 和 乙 醚 溶 液，用 甲 醇 定 容 至 10 mL，用微孔滤膜（ 0． 45μm） 过滤，取续滤液待测。
谢林雨，上海大学环境与化学工程学院学生； 研究方向： 环境分析与检测 林森、边清泉，绵阳师范学院化学与化学工程学院 【通讯作者】边清泉，绵阳师范学院化学与化学工程学院
川乌为常用中药，多年生草本，来自毛茛科植物卡氏乌 头（ Aconitum carmichaeli Debx． ） 的干燥母根，又被称为五毒、 铁花等。常在 灌 木 丛 和 山 地 草 坡 中 生 长，多 分 布 在 我 国 山 东、四川、广西等省，以 及 长 江 中 下 游，用 平 地 肥 沃 的 砂 质 土 壤栽培，以四川栽培为主； 其道地川乌产地在四川西昌。川 乌具有较高的药用价值，祛风除湿，温经止痛； 有扩血管、抗 炎、降压作用； 用于治疗风寒湿痹、心腹冷痛、寒疝作痛、关节 疼痛等病症； 能刺激皮肤，继而有麻木感产生，故可用作镇痛 剂。但其毒性较强，应注意川乌的禁忌。现代研究发现川乌 脂溶性有效成分主要为生物碱化合物： 新乌头碱、次乌头碱 等。本试验以西昌布托川乌中新乌头碱、次乌头碱两种酯溶 性活性成分为研究对象，为西昌布托川乌的开发利用提供科 学依据。
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产业与科技论坛 2012 年第 11 卷第 17 期
（ 四） 线性范围考察。分别精密吸取 1． 0 μL、2． 0 μL、5． 0 法符合要求。在室温条件下，取西昌布托川乌供试品溶液分
一、实验部分 （ 一） 仪器和材料。日本岛津高效液相色谱系统 （ LC － 20AT 输液泵，CLASS － vp5． 0 色谱工站，SPD － M20A 二极管 阵列检测器，CTO － 6A 柱温箱） ； 数显恒温干燥箱（ 101 － 2A 型） ； SZ － 93 型自动双重纯水蒸馏器； AY120 电子天平（ SHIMADZU） ； 新乌头碱、次乌头碱标准品（ 批号： 110799 － 9905； 11079 － 9403） ，均购自中国药品生物制品检定所； 川乌（ 西昌 布托） 购自绵阳天诚大药房。色谱级甲醇，其余所用试剂均 为分析纯，二次重蒸水。 （ 二） 色 谱 条 件。 色 谱 条 件： 色 谱 柱 PLATISILTMODS （ 250 mm × 4． 6 mm，5 μm） ； 流动相： 甲 醇 － 水 － 三 乙 胺 （ 65： 34： 1） 。柱温为 35 ℃ ，流速： 1． 2 mL / min，检测波长： 240 nm，进样量为 20 μL。理论塔板数按新乌头碱、次乌头碱计算 均 ＞ 4500。组分基线分离均大于 1． 5。 （ 三） 对照品溶液制备。准确称取新乌头碱标准品 5． 2
二、方法与结果 （ 一） 检测波长的选择。利用二极管阵列检测器在本实 验条件下对各目标组分进行全波段紫外扫描，两种酯溶性活 性成分的最大吸收波长分别为 230 nm，240 nm。综合考虑杂 质峰与目标成分的最大紫外吸收波长和该波长处待测组分 能够基线分离，以及 DAD 检测器灵敏度等因素，满足分析要 求的波长为 240 nm，因此确定 240 nm 为本实验的检测波长。 （ 二） 流动相的优化。在已有文献方法的基础上，本实验 通过选择、比较、优化流动相，最终确定流动相为流动相： 甲 醇 － 水 － 三乙胺（ 65： 34： 1，V / V / V） 。在该流动相条件下，2 种待测组分之间及与其他组分之间的基线分离 Ｒ 均大于 1． 5，且保留值适宜。 （ 三） 供试品溶液制备条件选择。本实验优化对比了冷 热浸取、加热回流 提 取、索 氏 提 取、超 声 提 取 等 提 取方 法，其 中超声提取速度快、效率高、简便易行，检测其残渣无待测组 分的特征峰，提取完全。用氨水饱和乙醚溶液、无水乙醇、乙 醚为溶剂分别超声提取样品中的目标组分，结果提取效果最 佳的为氨水饱和乙醚溶液。
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HPLC 法测定川乌中新乌头碱和次乌头碱的含量
□徐 辉 谢林雨 林 森 边清泉
【内容摘要】目的： 建立川乌中新乌头碱、次乌头碱含量的高效液相色谱法检测方法。方法： 采 PLATISILTMODS 色谱柱（ 250 mm × 4． 6 mm，5 μm） ，流动相： 甲醇 － 水 － 三乙胺（ 65： 34： 1） ，柱温： 35 ℃ ，流速为 1． 2 mL / min，检测波长为 240 nm。结果： 新乌头碱、次乌头碱的线性范围分别为 0． 52 ～ 5． 2 μg（ r = 0． 9999） ，0． 31 ～ 3． 1 μg（ r = 0． 99999） 。 平均回收率新乌头碱为 98． 6% （ ＲSD 为 0． 96% ） ，次乌头碱为 99． 4% （ ＲSD 为 0． 67% ） 。结论： 该方法简便易行、 准确可靠，可供川乌有效成分含量分析及川乌药材质量控制参考。