脑缺血动物模型研究.. PPT课件
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大鼠缺血模型
大鼠和小鼠的优势
1. 大鼠品种多，易于饲养，价格低廉 2. 纯种鼠属近亲交配，基因型相似，脑血管解剖和生理机能也相 似 3. 大鼠脑血管解剖和生理机能接近于人类 4. 脑血管损伤部位恒定，实验重复性好 5. 动物存活时间长，利于脑缺血相关病理改变过程的研究 6. 脑体积大小适宜，易施低温固定技术和组织生化分析 7. 有关系列大鼠的生理、药理和生化方面的实验资料可供分析比 较 8. 克服了体外实验无法实施再灌流的缺陷 9. 沙土鼠缺乏后交通动脉及完整的基底动脉环，两侧大脑供血相 对独立，通过闭塞一侧或双侧CCA即可复制效果明显的同侧或 双侧脑缺血模型
栓线法
由 ECA 插入 4 -0 尼龙线进入 ICA , 阻断 MCA起 始端而导致局灶性脑缺血。通过提拉插线可以造成 再灌流损伤模型。
优点：该法手术创伤小, 动物易长时间存活血栓形
成过程与人类相似可选择皮层梗塞部位
缺点：较早地导致终末动脉及微血管永久性闭塞 ,
不利于扩血管及促进侧支循环作，切开皮肤， 暴露颅骨，静脉注射光敏材料虎红酸钠，用特 定冷光源(500--600nm)照射切口处颅骨，光 线透过颅骨与血管内的光敏物质接触，激发光 化学反应而产生单线态氧，直接损伤血管内皮 细胞而诱导血栓形成。 优点：不开颅，手术创伤小，动物易长时间存 活，血栓形成过程与人类近似，适用于抗血小 板、抗血栓及内皮细胞保护药物的急慢性动物 实验研究。 缺点：较早地导致终未动脉及微血管永久性闭 塞，不利于扩血管及促进侧支循环作用的研究
开颅法、光学法、栓塞法、栓线法。
开颅法
麻醉动物，耳眼连线的中点垂直切开皮肤，通过钝
性分离颞肌，开颅后暴露MCA，用电凝器横过嗅束旁 的MCA使其凝闭，用10号手术丝线结扎MCA，造成MCA 支配区局灶性脑缺血模型。
慢性间歇性缺氧合并脑缺血再灌注动物模型的研究
ｔ ｎ ｂ ｐ ｘａ ｖ ｒ ｄ ｙ，ａ ｄ ｈ ｓ ｉ ＵＣ ｅ ｔ ｙ ｅ ｉ ｅ ｅ ｙ ａ ｎ ｔ ｏ ｅ ｎ
ｇ ｏ ｐ 、ｈａ ｏ ｅ ａｉ ｎ ｇ ｏ ｐ 、 Ｈ ｏ ｒ ｕ ｓ ｍ ｐ ｒ ｔｏ ｒ ｕ ＣＩ ｃ ｍｂｉ ｎ ｎｉｇ ＣＩ ｇ ｏ ｐ ｗｅ ｅｒ ｉｉ ｇｎｏ ｍａ ． Ｒ ｕ ｒ ａ ｓｎ ｒ １ Ｔｈｅｍ ｏ ｌｏ ｒ ｄｅ ｆ
我们 参 照 文 献 方 法 一 ， 备 Ｃ Ｈ 制 Ｉ
Ｓ Ｄ大鼠模 型和 ＣＲ Ｓ Ｉ Ｄ大 鼠模型 ， 将 Ｃｔ ｌ ｔ＋ＣＲ组 大 鼠置 于 间歇性 缺 Ｉ 氧箱 中 ， 使其 中每个循环 各种 气体 吹入时 间顺 序为 ： 气 １０秒 ， 息 ３ 氮 ２ 静 Ｏ秒 ， 氧气 ６ ０秒 ， 空气 ３ ０秒。每一 间歇性 缺氧循 环 时 问为 ４分 钟。每 ｝ ８ ０ Ｊ ：０～１ ：０时 实 ６０
李植 灿
洪志林
蔡 若 蔚
只 ， 重 １０— ０ ｇ 体 ８ ２ ０ 。所 有大 鼠均进食标 准的普通 大 鼠饲 料块 ， 饮用 清洁 水 ， 饲养
于 福 建 医 科 大 学 动 物 实 验 中 心 ， 温 控 制 室 在 ２ １ ， 应 １ 后 开 始 实 验 。 随 机 ５４ ℃ 适 －
ａ ｄ ｎ ｕｒｌ ｇｃ ｌｄｅ ｃｔｓ ｏ ｅｉ Ｈ ｏｍｂ — ｎ ｅ ｏｏ ｉａ ｆ ｉ ｃ ｒ ｎ ＣＩ ｃ ｉ ｉ
Ｓ ｒｇｅ ｅ ｌ （ Ｄ） 鼠 ３ ｐａｕ —Ｄ ｗｅ Ｓ 大 在 缺 氧 箱 中行 血 氧 检 测 ， 随 机 余 分成 ４组 ： 白 对 照 组 （ Ｃ ｎ＝６ ， 手 空 Ｕ ， ）假
３ ２ ０ 建 医科 大 学 附属 第 二 医 院 神 经 ６ ０ ０福
内科
急性脑缺血实验动物模型制作
Ｗａｓｎ等 ［ ｔ ｏ ６ １ 建立 了光 化学 法 诱 导脑 皮层 梗 首次 塞 的动物 模 型 ． 法是 在 尾静 脉 注射 光 敏材 料荧 光 该
常用 的有两 血 管 闭塞 法［ 四血管 闭 塞 法［ 两 ２ １ 和 ３ １ ． 血管 闭塞 法 通过 夹 闭双 侧颈 总 动脉 ，同时结合 降压
动 物 脑缺 血 模 型 的 经验 ， 以和 同行 们 交 流， 时为 基 础 性研 究提 供 更 稳 定 的模 型 制 作 方 法 ． 同 关键词 ： 实验 动 物 脑缺血 模 型
中图 分 类 号 ： ９ — Ｑ ５３
文 献标 识码 ： Ａ
文章 编 号 ：６４ ０７ （０ ８ ４ Ｏ ６ 一 ４ ｌ７ — ８ ４２ ０ ） 一 ＯＯ ０ ０
脑血管病 、 癌症 、 心血管病为现今人类死 亡率
最 高 的三 大疾 病 ． 中脑 血 管病 发 病最 快 ， 死 致 其 致 残率最 高， 居 三大疾 病 之首 ． 位 因此 ， 拟 临床 疾 病 ， 模 制作较 为可 靠 的脑缺 血 动物模 型 ， 系统研 究 其发 对 病 机 理 ， 理 、 理 学 改变 ， 病 生 以及 药 物 疗效 、 治措 防 施 等 ， 有重 要指导 意义 ． 都具
第 ２ 卷第 ４ ４ 期
２０ ０ ８年 ８月
山西大 同大学学报（ 自然科学版）
Ｊｕ ａ ｏ ｈｎｉＤ ｔｎ ｎｖｒｉ（ ａ ｒｌ ｃ ｎｅ ｏ ｒ ｌ ｆ ａｘ ａ ｇＵ ｉ ｓｔ Ｎ ｔ ａ Ｓｉ ｃ） ｎ Ｓ ｏ ｅ ｙ ｕ ｅ
Ｖ０ ． ４ Ｎｏ４ １ ． ． ２
Ａｕ ．０ ８ ｇ２ ０
性脑 缺 血研 究 ．
价抗脑缺血药物的疗效等有价值． 但该模型不能在
清醒 动物 上 复制 ， 法研 究 血 管狭 窄后 行 为学 的变 无
常用 的有两 血 管 闭塞 法［ 四血管 闭 塞 法［ 两 ２ １ 和 ３ １ ． 血管 闭塞 法 通过 夹 闭双 侧颈 总 动脉 ，同时结合 降压
动 物 脑缺 血 模 型 的 经验 ， 以和 同行 们 交 流， 时为 基 础 性研 究提 供 更 稳 定 的模 型 制 作 方 法 ． 同 关键词 ： 实验 动 物 脑缺血 模 型
中图 分 类 号 ： ９ — Ｑ ５３
文 献标 识码 ： Ａ
文章 编 号 ：６４ ０７ （０ ８ ４ Ｏ ６ 一 ４ ｌ７ — ８ ４２ ０ ） 一 ＯＯ ０ ０
脑血管病 、 癌症 、 心血管病为现今人类死 亡率
最 高 的三 大疾 病 ． 中脑 血 管病 发 病最 快 ， 死 致 其 致 残率最 高， 居 三大疾 病 之首 ． 位 因此 ， 拟 临床 疾 病 ， 模 制作较 为可 靠 的脑缺 血 动物模 型 ， 系统研 究 其发 对 病 机 理 ， 理 、 理 学 改变 ， 病 生 以及 药 物 疗效 、 治措 防 施 等 ， 有重 要指导 意义 ． 都具
第 ２ 卷第 ４ ４ 期
２０ ０ ８年 ８月
山西大 同大学学报（ 自然科学版）
Ｊｕ ａ ｏ ｈｎｉＤ ｔｎ ｎｖｒｉ（ ａ ｒｌ ｃ ｎｅ ｏ ｒ ｌ ｆ ａｘ ａ ｇＵ ｉ ｓｔ Ｎ ｔ ａ Ｓｉ ｃ） ｎ Ｓ ｏ ｅ ｙ ｕ ｅ
Ｖ０ ． ４ Ｎｏ４ １ ． ． ２
Ａｕ ．０ ８ ｇ２ ０
性脑 缺 血研 究 ．
价抗脑缺血药物的疗效等有价值． 但该模型不能在
清醒 动物 上 复制 ， 法研 究 血 管狭 窄后 行 为学 的变 无
脑缺血动物模型动物选择研究
中 图分类 号 ： ２ ４ ２ Ｒ ８ ．
文献标 识码 ： Ｂ
文 章编号 ：０ ８ ）０ （ ０ ０ Ｏ —３ ２ １０ ４８ ５ ２ １ ）９２ ７ ￣２
缺血 性 脑 血 管病 （Ｃ Ｄ） 占 全部 脑 血 管 病 的 ８ ％ ， 有 解 剖生 理 特 点 符 合 实 验 目的 ； 意人 与 实 验 动 物对 同一 刺 激 的 反 ＩＶ 约 ０ 具 注 发病率 、 致残率 、 病死率高的特点 ， 已成 为严重危害人类健康的疾 应 差 异 ， 用 具 有 明显 反 应 的动 物 ； 用 患有 类 似 人 类 疾 病 的 近 选 选 病之 一 。因此 模 拟 人 类 缺 血性 脑 血 管 病 发病 过 程 ， 立 一 种 生 理 亲系或突变系动物 ； 建 结构功能简单 又能反映研究指标 ； 选用与实 指标控制严格 、 操作 简便 、 稳定可靠且重复性好 、 与人类脑缺血相 验设计 、 技术条件 、 实验方法等条件相适应的标准化动物 ； 在不影 似 理 想 脑 缺血 动 物 模 型对 于研 究 脑 缺 血 的病 理 生 理 变 化 、 病 机 响实 验 质 量 的前 提 下 选 用 易 获 得 、 经 济 、 易 饲养 管理 的动 物 。 发 最 最
制及防治措施至关重要。本文 就制备脑缺血模 型的常用动物进 ３ 常用 实 验 动 物 的 特征 行一综述。 ３ １ 啮齿类 目前大多 数实验 室选 择 啮齿类 动物作 为研究 对 ． １ 脑 缺 血 动物 模 型 的 分 类 象 ， 其 是 大 鼠 和沙 土 鼠 应 用 较 多 。 因其 具 有 以 下 优 点 ： 鼠 脑 尤 大 根据 是 否 全 脑缺 血 分 为 全 脑 缺血 模 型 和 局 灶缺 血 模 型 。 血 管解 剖 接 近 人 类 ； 管 性 损 伤部 位 恒 定 ， 血 实验 重 复 性 好 ； 于 常 便 全 脑 缺 血模 型制 备 方 法 主 要有 ： 支 动 脉 阻 断 法 ； 血 管 闭 规 指标 监 测 ， 施 低 温 固定 技 术 和组 织 生 化 分 析 ； 鼠品 种多 ， 二 三 易 大 成 塞 法 ； 支 动脉 阻 断 法 ； 脏猝 停 法 ； 扎 臂 头 主 动 脉 总干 等 。此 本 低 ， 够 为动 物 保 护 者 接受 ； 系 纯 和性 好 ， 血 管 解 剖 和 生理 四 心 结 能 种 脑 外 沙土 鼠缺 乏后 交 通 动 脉 及 基 底 动 脉 环 （ ｉｉ环 ） 两 侧 大 脑 供 机 能相似 ， ｗｌｓ ｌ ， 梗死部 位相对 容易控 制 ， 实验重 复性好 ； 抗感 染能力 血 相 对 独 立 ， 过 夹 闭双 侧 颈 总 动 脉 即可 造 成 效果 明显 的全 脑 缺 强 ， 活 时 间长 ， 于 脑 缺 血 后 急性 、 急性 和慢 性 相 关 病理 改 变 通 存 利 亚 过程的研究 ； 有关系列大 鼠的生理 、 药理和生化方 面的实验资料 局 灶性 脑 缺 血 模 型包 括 永 久 性 或 暂 时性 动 脉 闭 塞 ， 要 制备 可 供 分 析 比较 ； 土 鼠缺 乏 后 交 通 动 脉 及基 底 动 脉 环 （ ｉｉ环 ） 主 沙 ｗｌｓ ｌ ， 方法有 ： 栓 法； 囊 导管法 ； 线 球 内皮 素 一１灌 注 诱 导血 管 收 缩 法 ； 两侧大脑供血相对独立 ， 闭塞一侧 或两侧颈总动脉即可复制效果 光化学诱导法 ； 栓塞法 ； 皮层压迫法 ； 开颅机 械闭塞法； 缺氧诱导 明显的同侧或双侧脑缺血模 型。Ｃ ７ Ｌ ６小 鼠和沙土鼠类似 ， ５Ｂ ／ 亦 法； 促凝血酶法等 。另外 ， 易卒 中型 自发性高血压模型大 鼠的育 缺 乏 后 交 通 支 ， ｌ ｏ Ｏ ｓ ｎ等 通 过 暂 时 性 结 扎 双 侧 颈 总 动 脉 １ ｓ ２ 成 为脑 梗 塞 研 究 提供 了新 的模 型 材 料 ， 其 卒 中性 质 不 可 控 制 ， ｍｉ， 立 了 Ｃ ７ Ｌ ６小 鼠 稳 定 的 全 脑 缺 血 模 型 。 啮 齿 类 缺 点 但 ｎ建 ５Ｂ ／ 可 能为 局 灶 性 缺血 ， 可 能是 局 灶 性 脑 出血 。 也 是： 鼠颅内外血管吻合网发达 ， 在仅阻断颅 内血管而不相应处理 ２ 脑缺 血 模 型 的 动 物选 择 原 则 颅 外 血 管 时 ， 皮 层 的 缺 血不 严 重 ； 些 临 床 不 常见 症 状 ： 吸 困 脑 一 呼 选用与人体结构 、 功能 、 代谢及疾病特征相似的动物； 动物的 难 、 癫痫发 作、 意识障碍难 以恢 复等 ， 啮齿类 中却十分常见 ， 在 致
《疾病动物模型》课件
03
疾病动物模型的应用
药物研发与筛选
01
02
03
药物作用机制研究
通过疾病动物模型，可以 研究药物对特定疾病的疗 效及作用机制，为新药研 发提供理论依据。
药物筛选
利用动物模型进行药物筛 选，可快速筛选出具有潜 在治疗作用的候选药物， 提高研发效率。
药效评估
在动物模型上评估药物的 治疗效果，为临床试验提 供参考依据。
种属差异与个体差异
种属差异
不同种属的动物在生理、代谢和免疫 等方面存在显著差异，导致某些人类 疾病在动物模型中难以完全复制。
个体差异
即使同一种属的动物，由于遗传背景 、营养状况和环境因素等影响，个体 间也存在差异，影响实验结果的可靠 性。
伦理与法律问题
伦理问题
使用动物进行实验涉及到动物福利和伦 理问题，需要遵循相关伦理规范和法律 法规。
THANKS
感谢观看
VS
法律问题
不同国家和地区对动物实验有不同的法律 规定和监管要求，需要遵守相关法律法规 。
实验条件与操作难度
实验条件
动物实验需要特定的实验设施、设备和环境条件，以保证实验的准确性和可靠 性。
操作难度
动物实验涉及到复杂的操作和实验设计，需要专业知识和技能，操作难度较大 。
05
未来展望与研究方向
新型疾病动物模型的研发
疾病治疗与预防策略的制定
治疗方法探索
通过疾病动物模型，可以探索各种治疗方法的有效性，为临床治 疗提供参考。
预防策略制定
利用动物模型可评估各种预防措施的效果，为制定有效的预防策略 提供依据。
个体化治疗与精准医疗
通过疾病动物模型，可深入了解疾病的异质性，为个体化治疗和精 准医疗提供支持。
全脑缺血再灌注动物模型建立方法
全脑缺血再灌注动物模型建立方法引言全脑缺血再灌注是一种临床上常见的危重症，常见于心脏骤停、溺水等情况下，出现全脑缺血缺氧，随后通过复苏措施进行再灌注。
建立全脑缺血再灌注动物模型对于深入研究相关疾病的发病机制，评估治疗方法具有重要意义。
本文将介绍一种常用的全脑缺血再灌注动物模型的建立方法。
动物模型选择建立全脑缺血再灌注模型时，主要选择小鼠或大鼠作为实验动物。
一般情况下，小鼠更为常用，因其易于操作、成本较低，且其脑血管结构与人类相似，因此具有较高的可比性。
对于大鼠，其相对较大的体积能够更好地模拟人体情况，但操作相对较为复杂。
手术操作准备在进行全脑缺血再灌注动物模型的建立前，需要进行手术操作的准备工作。
首先需要进行动物的麻醉和固定，确保手术操作的安全性。
其次需要准备全脑缺血再灌注模型所需的仪器和设备，包括导管、监测仪器等。
在手术操作前，还需要对实验动物进行术前处理，包括禁食、定时给予抗生素等。
手术操作步骤1. 麻醉和固定：将实验动物置于麻醉箱内，使用合适的麻醉药物使其达到麻醉状态。
随后将其固定在手术台上，以确保手术操作的稳定性。
2. 手术部位暴露：在麻醉状态下，对实验动物进行皮肤消毒，随后进行手术部位的切开，暴露出颅骨表面。
3. 血管结扎：通过显微外科手术操作，对实验动物的颅骨表面的动脉和静脉进行结扎，以模拟全脑缺血的状态。
4. 缺血时间控制：根据实验设计的需要，控制全脑缺血的时间，一般为15至20分钟。
5. 再灌注：在全脑缺血一定时间后，通过解开血管结扎，使血液重新灌注至大脑。
6. 术后处理：对实验动物进行术后处理，包括给予液体、保暖、饲养等。
检测指标和评价方法建立全脑缺血再灌注模型后，需要对实验动物进行一系列的检测和评价，以评估其神经功能恢复情况。
常用的评价指标包括神经行为学评分、脑组织病理学检测、神经元凋亡检测、脑组织炎症因子检测等。
通过对这些指标的检测和评价，可以全面地评估全脑缺血再灌注模型的建立效果，为后续的实验研究提供可靠的依据。
缺血性脑卒中的动物模型完整版
缺血性脑卒中的动物模型HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】缺血性脑卒中研究中的动物模型想要进行一项基础研究，动物模型必不可少。
缺血性脑卒中研究如火如荼，动物模型也多种多样，有哪些常用的动物模型，以及它们各自的特点就成了研究人员在选择模型时十分关注的问题。
在缺血性卒中过程中，最终的梗死体积和神经功能预后受到多种因素的影响，例如缺血的持续时间、缺血的严重程度、侧枝循环、系统的血压以及梗死产生的原因和位置。
此外，年龄、性别和相对复杂的药物遗传背景也会对其产生影响。
因为卒中是如此复杂的一个疾病，因而动物模型也往往只能覆盖其中个别方面的特点。
虽然中风是一种复杂的疾病，但其存在一些共同的特点，这使得我们有机会用实验来模拟卒中的发生。
缺血性脑卒中的一个重要特点是进展，这也解释了缺血半暗带的存在。
当血流量降至基线值的15-20%以下时，只要几分钟就会产生不可逆的脑损伤核心，并且迅速相周围发展。
其周围的脑组织血流减少得相对较轻，所以此时神经功能缺失而组织结构却是完整的。
但如果脑血流不能恢复，那么这些所谓的半暗带组织就会被纳入梗死核心区。
最常用的一种模型是啮齿动物的线拴法大脑中动脉闭塞模型（MCA），方法是将普通的血管内缝线或特制的线拴放入大脑中动脉开口处，从而达到阻塞血管造成血流量减少的目的。
这种方法的优点是：不需要开颅的手术，并且通过拔出线拴的方法还可以达到在特定时间再通血管的目的，虽然瞬间的血管开通与人体一般的病理生理过程相去甚远，但与近来应用越来越广泛的机械取栓治疗的病理过程不谋而合。
因此，虽然在模型的制作上存在一些问题，但仍是目前最广受认可的一种脑卒中动物模型。
另一种常用的方法是用各种方式直接地闭塞血管，分为永久地闭塞血管（如凝断）和暂时闭塞血管（如结扎），但大多都需要开颅的手术操作。
使用内皮素－1（一种强血管收缩剂）可以诱导短暂的局灶性脑缺血，其产生的病灶可以分布于脑组织任何位置，常常被用于制作腔隙性梗死的模型制作。
脑缺血动物模型检测指标研究进展
时珍国医国药 ２０ ０ ８年第 １ ９卷第 １ 期 １
ＬＳ ＩＨ ＮＭ ＤＣＮ Ｎ Ａ Ｅ Ｉ Ｅ ＩＡＲ Ｓ Ａ Ｃ ０８ Ｏ ．９Ｎ ．１ ＩＨＺ Ｅ Ｅ ＩＩＥＡ ＤＭ Ｔ ＲＡＭ ＤＣ ＥＥ Ｒ Ｈ２０Ｖ Ｌ １ Ｏ １
脑 缺 血 动 物模 型检 测 指标 研 究进 展
周 霞 ， 军 ， 国钧 董振 国 万 黄 ，
（． １西南 交通 大学生命 科学 与工程 学院 ， 四川 成 都 ６０３ ； ２ 成都 中医药大学 ， １０ １ ． 四川 成都 ６０７ ） １０ ２
摘 要 ：综述了脑缺血动物模型常用的检测指标研究概况， 为研究脑缺血机制及动物模型评价提供依据， 同时便于实验
研 究 时选 择使 用 。
关键词 ： 脑缺血； 动物模型； 检测指标
Hale Waihona Puke 中 图分 类号 ：２ ５５ Ｒ ８ ．
文 献标识码 ： Ｂ
文 章编号 ：０ ８００ （０ ８ １－８２０ １０ －８５ ２０ ）１２０ －１
脑缺血是 以脑循环血流量减少为特征的 中枢神经 系统疾病 ， ７ 兴奋性氨基酸毒性及含量 具有发病率高 、 残率高和死亡 率高 的特 点 ， 致 严重地 影响人类 的 氨基酸作 为重要 的神经递质 ， 对正常大脑 的生理活动有调节 生 存 质 量 。选 用 准 确 的脑 缺 血 检 测 指 标 是 脑 缺 血 机 制 研 究 及 动 作用 。脑缺血 时， 神经元释放 的谷氨酸是引起神经元死亡的重要 Ｇｕ 具有损 伤效应外 ， 甘氨 酸 （ ｌ） 有协 同 Ｇｙ 也 物模型建立 的关键环节之一 。本文 就脑 缺血动物模 型常用 的检 原 因。除谷氨酸（ ｌ） 作用 ， 释放增加能扩 大脑缺血损 害。 一 基丁酸 （ Ａ Ａ） 其 氨 Ｇ Ｂ 能 测指标作一总结 。 抑制兴奋性氨基酸释放或对抗 氨基酸毒性 。傅 建华 等” 采用结 １ 血 小 板 聚 集 性 血液 内血小板 的高聚性是 脑缺血 的主要致病机制之 一。对 扎小 鼠双侧颈总动脉进行反复缺血再灌注 ， 造成小 鼠血管性学习 采用花生 四烯酸诱导 的大 鼠急性 脑缺 血模型 研究 表明 ， 型 记忆 障碍模型 ， 模 测定小 鼠大脑皮 层和海马 区递质性 氨基酸含量的 组加入诱导剂 Ａ Ｐ 终浓度 ２ｔ ｏ Ｌ ， Ｄ（ ｍ ｌ ） 分别在 １２４ｈ后测定 ５ 变化 。结果表 明， ｘ ／ ， ， 与对照组相 比 ， 模型组 海马区天 门冬 氨酸含量 ａ ｒｎ最大 聚 集 率 （ Ａ Ｔ ａ％）和 １ ｎ最 大 聚集 速 度 （ Ａ Ｖ 降低 ， ｉ Ｐ ｇｍ ｘ ｍｉ Ｐ ｇ— 脑皮层的 一氨基丁酸的含量升高。 ｍ ｘ ） 较对 照 组 升 高 。 ａ％ 均 ８ 血液流变学指标 ２ 脑 梗 塞部 分 百 分 比 血液粘稠度较高 、 血流 速度缓慢致血栓 形成 ， 缺血性脑血 是 采用线栓法制作 大鼠局灶性脑缺血再灌 注模 型， 模拟人类缺 管疾病发病 的又一重要机制。殷 凤等 采用高 分子右旋糖酐制 血性脑血管病的状态 ， 通过红四氮唑 （ Ｔ ） Ｔ Ｃ 染色的方法计算缺血 成大 鼠血瘀症模型 ， 测定结果表 明， 模型组全血粘度 、 血浆粘度 、 面积。结果大 鼠造模后 ２ ｈ内出现程度不 同的神经损伤症状 ， ４ 与 血细胞 比容及红细胞 电泳时问均有所升高 。 对照组相 比， 缺血部分 占整个脑组织切片 面积的百分比有极显著 ９ 脑能荷 （ Ｃ） Ｅ 及磷酸肌酸（ Ｃ ） Ｐ ｒ 的含量 差 异 ， 。 脑缺血后 ， 能量衰竭 主要 表现 在高 能磷 酸化 合物 Ａ Ｐ Ｐ ｒ Ｔ ， Ｃ ３ 脑 含 水 量 的耗竭上 ， 为检测缺 血早 期脑 组织 的 Ａ Ｐ Ａ Ｐ， ＭＰ及 Ｐ ｒ Ｔ ，Ｄ Ａ Ｃ 含 脑血管堵塞后 ， 缺血 中心 区神经细胞很快 发生死亡 ， 而缺血 量 ， 可采用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ仪观察 大脑 的能荷值 ， 以下公 式计算 ： Ｃ＝ 用 Ｅ 后再灌注可挽救濒死细胞。脑组织含水量 测定可观 察脑缺血损 （ 一 ． Ｐ／ Ｃ ｆ ＡＰ ＡＰ 。王秋华 等 阻断雄性 Ｃ ０ ５Ｃ ） （ ＭＪ ＋Ｃ Ｄ ＋Ｃ Ｍ） 伤后胶原组织 水肿 情况 ， 般用 以下公 式 计算 ： 水 量 （ 一 含 ％）＝ 小 鼠双侧颈总动脉血流 ， 复制低血压伴 急性脑缺 血模 型 ， 现在 发 （ 重 一干 重 ） 湿 重 ×１０ 。 湿 ／ ０％ 缺血 １ ，０ ３ ｍｎ时模型组 Ｅ Ｐ ｒ Ｏ ２ ，０ ｉ Ｃ，Ｅ 含量均较假手术组 降低 。 ４ 线 粒 体 呼 吸 功 能 １ 超 氧化 物歧 化 酶 （ Ｏ 及 丙二 醛 （ Ｄ 水 平 Ｏ Ｓ Ｄ） Ｍ Ａ） 局灶性脑缺血引起脑损伤 的重要 原因之一 即脑能量代谢 功 脑缺血后生成 的大量氧 自由基攻击细胞膜和亚细胞膜， 引发 能障碍 ， 因此 ， 检测线粒体功能对 于评 价药物 的脑保护作用具 有 脂质过氧化反应 ， 导致细 胞代谢及 功能 障碍 。张博生等 发现 重要意义。采用插线 法 制备 大 鼠脑 缺血再 灌注 模型后 ， 出 脑缺血和再灌注后 鼠红细胞 、 取 脑组 织及线粒 体 中的 Ｓ Ｄ水 平降 Ｏ 缺血 区脑组织制备线粒体 ， 进行呼吸功能测定 。结果表明模型组 低 ； 鼠血浆 、 而 脑组织和亚细胞器 中红细胞 内的 Ｍ Ａ水平升高。 Ｄ 线粒体功能受 到明显损 伤 ， 表现为 ３态呼 吸速率 降低 ， 呼吸 １ Ｎ ４态 １ Ｏ及 一 氧 化氮 合 酶 （ Ｏ ） 性 Ｎ Ｓ活 速率 提 高 。 脑缺血晚期 ， 机体代谢生成大量 的 Ｎ 且 Ｎ Ｓ活性 升高 ， Ｏ， Ｏ 可 ５ 脑 组织 结 构 诱导谷氨酸兴奋毒性 ， 重缺血再 灌注损伤 。李 建生等… 究 加 研 脑缺血后 ， 内神 经细胞代谢紊 乱 ， 脑 以致神 经细胞损 伤。在 发现 Ｎ Ｏ含量 降低和 Ｔ Ｆ增高与老龄 大鼠脑缺血再灌 注脑 组织 Ｎ 形态学上表现为体积变小 ， 细胞质 和细胞 核 固缩 ， 胞浆和 血管周 损伤有关 ； 大黄提 高血清 Ｎ Ｏ含量 和脑 组织 Ｎ Ｓ活 性的作 用可 Ｏ 围空化 ； 另外还可因毛细血管通透性增加 ， 导致血浆渗出 ， 出现脑 能是 其拮抗脑组织损伤的机制之一 。 水肿 。可采用 光学显微镜 、 电子显微镜研究镜下 的组织细胞形态 １ Ａ Ｐ酶 活 性 ２ Ｔ 学改 变 。 能量 的衰竭首先是离子泵 的功能受 到影响 ， ａ Ｋ Ｎ ， 一Ａ Ｐ Ｔ ６ 脑 电 图 ］ 酶主要存在于细胞膜上 ， 对维 持细胞 的机能 、 代谢 和细胞内外 的 通过脑电图波幅的改变可判断脑 缺血症状 。在大 鼠冠状缝 离子平 衡 中起 重要作 用。脑缺 血时 ， 能量 匮乏 ， ａ Ｋ Ｎ ， 一Ａ Ｐ Ｔ 前相 当于皮层感觉运动 区（ 额顶 区） 部位和顶叶后部 （ 顶枕 区） 的 酶不能正常运行 。而 Ａ Ｐ依赖 的 ｃ “ 一Ａ Ｐ酶也在 Ａ Ｐ减少 Ｔ ａ Ｔ Ｔ 左右两侧对称地分别 放置脑 电极各 一 ， 连接 多道生 理记 录仪记 时活性降低 ， 不能将 ｃ “泵出胞外 ， ａ 造成细胞 内 Ｃ “超载。刘志 ａ 录 ， 以反映阻断侧大脑 中动脉供 血区和非供血 区 ， 可 以及对侧相 龙等 采用沙土鼠双侧 颈总动脉夹 闭脑缺血再 灌注模 型， 于缺 应部位的脑 电变化。缺血 区脑 电图出现波幅降低 ， 频率减慢 。 血再灌注后 ４ ｈ取脑组织测定 Ｎ ， 一Ａ Ｐ酶 、 ａ 一 Ｔ ８ ａ Ｋ Ｔ ｃ Ａ Ｐ酶 活性 ， 果 发现 脑 缺 血再 灌 注后 脑 组 织 Ｎ ， 一Ａ Ｐ酶 和 结 ａ Ｋ Ｔ ｃ “ 一Ａ Ｐ酶 活性均降低。 ａ Ｔ 作者简介 ： 周 霞（９ ０） 女（ １８ ． ， 汉族） 黑龙江勃利人 ， ， 现任 西南交通 大学 １ 神经 肽 Ｙ（ Ｐ 与 神 经 降 压 素 （ Ｔ） 量 ３ Ｎ Ｙ） Ｎ 含 药学院助教 ， 博士学位 ， 从事中药教学与研 究工作． 主要 血小 板 合 成 释 放 的 Ｎ Ｙ 可 引 起 血 管 收 缩 、 肌 抑 制 和 血 栓 Ｐ 心 通讯作者简介 ： 万 军（ ９０ ） 男（ １８ － ， 汉族 ） 四川 自贡人 ， ， 现任 西 南交通 形成 ， Ｎ 而 Ｔ在体 内可拮抗 Ｎ Ｙ 的生物 学效应 ， 于两者含量异 Ｐ 对 大学药学院助教， 士学位 ， 博 主要从事 中药教学与研 究工作． 常在老年脑梗塞发病 中所起的作 用不容忽视 。杨风杰等 通过
ＬＳ ＩＨ ＮＭ ＤＣＮ Ｎ Ａ Ｅ Ｉ Ｅ ＩＡＲ Ｓ Ａ Ｃ ０８ Ｏ ．９Ｎ ．１ ＩＨＺ Ｅ Ｅ ＩＩＥＡ ＤＭ Ｔ ＲＡＭ ＤＣ ＥＥ Ｒ Ｈ２０Ｖ Ｌ １ Ｏ １
脑 缺 血 动 物模 型检 测 指标 研 究进 展
周 霞 ， 军 ， 国钧 董振 国 万 黄 ，
（． １西南 交通 大学生命 科学 与工程 学院 ， 四川 成 都 ６０３ ； ２ 成都 中医药大学 ， １０ １ ． 四川 成都 ６０７ ） １０ ２
摘 要 ：综述了脑缺血动物模型常用的检测指标研究概况， 为研究脑缺血机制及动物模型评价提供依据， 同时便于实验
研 究 时选 择使 用 。
关键词 ： 脑缺血； 动物模型； 检测指标
Hale Waihona Puke 中 图分 类号 ：２ ５５ Ｒ ８ ．
文 献标识码 ： Ｂ
文 章编号 ：０ ８００ （０ ８ １－８２０ １０ －８５ ２０ ）１２０ －１
脑缺血是 以脑循环血流量减少为特征的 中枢神经 系统疾病 ， ７ 兴奋性氨基酸毒性及含量 具有发病率高 、 残率高和死亡 率高 的特 点 ， 致 严重地 影响人类 的 氨基酸作 为重要 的神经递质 ， 对正常大脑 的生理活动有调节 生 存 质 量 。选 用 准 确 的脑 缺 血 检 测 指 标 是 脑 缺 血 机 制 研 究 及 动 作用 。脑缺血 时， 神经元释放 的谷氨酸是引起神经元死亡的重要 Ｇｕ 具有损 伤效应外 ， 甘氨 酸 （ ｌ） 有协 同 Ｇｙ 也 物模型建立 的关键环节之一 。本文 就脑 缺血动物模 型常用 的检 原 因。除谷氨酸（ ｌ） 作用 ， 释放增加能扩 大脑缺血损 害。 一 基丁酸 （ Ａ Ａ） 其 氨 Ｇ Ｂ 能 测指标作一总结 。 抑制兴奋性氨基酸释放或对抗 氨基酸毒性 。傅 建华 等” 采用结 １ 血 小 板 聚 集 性 血液 内血小板 的高聚性是 脑缺血 的主要致病机制之 一。对 扎小 鼠双侧颈总动脉进行反复缺血再灌注 ， 造成小 鼠血管性学习 采用花生 四烯酸诱导 的大 鼠急性 脑缺 血模型 研究 表明 ， 型 记忆 障碍模型 ， 模 测定小 鼠大脑皮 层和海马 区递质性 氨基酸含量的 组加入诱导剂 Ａ Ｐ 终浓度 ２ｔ ｏ Ｌ ， Ｄ（ ｍ ｌ ） 分别在 １２４ｈ后测定 ５ 变化 。结果表 明， ｘ ／ ， ， 与对照组相 比 ， 模型组 海马区天 门冬 氨酸含量 ａ ｒｎ最大 聚 集 率 （ Ａ Ｔ ａ％）和 １ ｎ最 大 聚集 速 度 （ Ａ Ｖ 降低 ， ｉ Ｐ ｇｍ ｘ ｍｉ Ｐ ｇ— 脑皮层的 一氨基丁酸的含量升高。 ｍ ｘ ） 较对 照 组 升 高 。 ａ％ 均 ８ 血液流变学指标 ２ 脑 梗 塞部 分 百 分 比 血液粘稠度较高 、 血流 速度缓慢致血栓 形成 ， 缺血性脑血 是 采用线栓法制作 大鼠局灶性脑缺血再灌 注模 型， 模拟人类缺 管疾病发病 的又一重要机制。殷 凤等 采用高 分子右旋糖酐制 血性脑血管病的状态 ， 通过红四氮唑 （ Ｔ ） Ｔ Ｃ 染色的方法计算缺血 成大 鼠血瘀症模型 ， 测定结果表 明， 模型组全血粘度 、 血浆粘度 、 面积。结果大 鼠造模后 ２ ｈ内出现程度不 同的神经损伤症状 ， ４ 与 血细胞 比容及红细胞 电泳时问均有所升高 。 对照组相 比， 缺血部分 占整个脑组织切片 面积的百分比有极显著 ９ 脑能荷 （ Ｃ） Ｅ 及磷酸肌酸（ Ｃ ） Ｐ ｒ 的含量 差 异 ， 。 脑缺血后 ， 能量衰竭 主要 表现 在高 能磷 酸化 合物 Ａ Ｐ Ｐ ｒ Ｔ ， Ｃ ３ 脑 含 水 量 的耗竭上 ， 为检测缺 血早 期脑 组织 的 Ａ Ｐ Ａ Ｐ， ＭＰ及 Ｐ ｒ Ｔ ，Ｄ Ａ Ｃ 含 脑血管堵塞后 ， 缺血 中心 区神经细胞很快 发生死亡 ， 而缺血 量 ， 可采用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ仪观察 大脑 的能荷值 ， 以下公 式计算 ： Ｃ＝ 用 Ｅ 后再灌注可挽救濒死细胞。脑组织含水量 测定可观 察脑缺血损 （ 一 ． Ｐ／ Ｃ ｆ ＡＰ ＡＰ 。王秋华 等 阻断雄性 Ｃ ０ ５Ｃ ） （ ＭＪ ＋Ｃ Ｄ ＋Ｃ Ｍ） 伤后胶原组织 水肿 情况 ， 般用 以下公 式 计算 ： 水 量 （ 一 含 ％）＝ 小 鼠双侧颈总动脉血流 ， 复制低血压伴 急性脑缺 血模 型 ， 现在 发 （ 重 一干 重 ） 湿 重 ×１０ 。 湿 ／ ０％ 缺血 １ ，０ ３ ｍｎ时模型组 Ｅ Ｐ ｒ Ｏ ２ ，０ ｉ Ｃ，Ｅ 含量均较假手术组 降低 。 ４ 线 粒 体 呼 吸 功 能 １ 超 氧化 物歧 化 酶 （ Ｏ 及 丙二 醛 （ Ｄ 水 平 Ｏ Ｓ Ｄ） Ｍ Ａ） 局灶性脑缺血引起脑损伤 的重要 原因之一 即脑能量代谢 功 脑缺血后生成 的大量氧 自由基攻击细胞膜和亚细胞膜， 引发 能障碍 ， 因此 ， 检测线粒体功能对 于评 价药物 的脑保护作用具 有 脂质过氧化反应 ， 导致细 胞代谢及 功能 障碍 。张博生等 发现 重要意义。采用插线 法 制备 大 鼠脑 缺血再 灌注 模型后 ， 出 脑缺血和再灌注后 鼠红细胞 、 取 脑组 织及线粒 体 中的 Ｓ Ｄ水 平降 Ｏ 缺血 区脑组织制备线粒体 ， 进行呼吸功能测定 。结果表明模型组 低 ； 鼠血浆 、 而 脑组织和亚细胞器 中红细胞 内的 Ｍ Ａ水平升高。 Ｄ 线粒体功能受 到明显损 伤 ， 表现为 ３态呼 吸速率 降低 ， 呼吸 １ Ｎ ４态 １ Ｏ及 一 氧 化氮 合 酶 （ Ｏ ） 性 Ｎ Ｓ活 速率 提 高 。 脑缺血晚期 ， 机体代谢生成大量 的 Ｎ 且 Ｎ Ｓ活性 升高 ， Ｏ， Ｏ 可 ５ 脑 组织 结 构 诱导谷氨酸兴奋毒性 ， 重缺血再 灌注损伤 。李 建生等… 究 加 研 脑缺血后 ， 内神 经细胞代谢紊 乱 ， 脑 以致神 经细胞损 伤。在 发现 Ｎ Ｏ含量 降低和 Ｔ Ｆ增高与老龄 大鼠脑缺血再灌 注脑 组织 Ｎ 形态学上表现为体积变小 ， 细胞质 和细胞 核 固缩 ， 胞浆和 血管周 损伤有关 ； 大黄提 高血清 Ｎ Ｏ含量 和脑 组织 Ｎ Ｓ活 性的作 用可 Ｏ 围空化 ； 另外还可因毛细血管通透性增加 ， 导致血浆渗出 ， 出现脑 能是 其拮抗脑组织损伤的机制之一 。 水肿 。可采用 光学显微镜 、 电子显微镜研究镜下 的组织细胞形态 １ Ａ Ｐ酶 活 性 ２ Ｔ 学改 变 。 能量 的衰竭首先是离子泵 的功能受 到影响 ， ａ Ｋ Ｎ ， 一Ａ Ｐ Ｔ ６ 脑 电 图 ］ 酶主要存在于细胞膜上 ， 对维 持细胞 的机能 、 代谢 和细胞内外 的 通过脑电图波幅的改变可判断脑 缺血症状 。在大 鼠冠状缝 离子平 衡 中起 重要作 用。脑缺 血时 ， 能量 匮乏 ， ａ Ｋ Ｎ ， 一Ａ Ｐ Ｔ 前相 当于皮层感觉运动 区（ 额顶 区） 部位和顶叶后部 （ 顶枕 区） 的 酶不能正常运行 。而 Ａ Ｐ依赖 的 ｃ “ 一Ａ Ｐ酶也在 Ａ Ｐ减少 Ｔ ａ Ｔ Ｔ 左右两侧对称地分别 放置脑 电极各 一 ， 连接 多道生 理记 录仪记 时活性降低 ， 不能将 ｃ “泵出胞外 ， ａ 造成细胞 内 Ｃ “超载。刘志 ａ 录 ， 以反映阻断侧大脑 中动脉供 血区和非供血 区 ， 可 以及对侧相 龙等 采用沙土鼠双侧 颈总动脉夹 闭脑缺血再 灌注模 型， 于缺 应部位的脑 电变化。缺血 区脑 电图出现波幅降低 ， 频率减慢 。 血再灌注后 ４ ｈ取脑组织测定 Ｎ ， 一Ａ Ｐ酶 、 ａ 一 Ｔ ８ ａ Ｋ Ｔ ｃ Ａ Ｐ酶 活性 ， 果 发现 脑 缺 血再 灌 注后 脑 组 织 Ｎ ， 一Ａ Ｐ酶 和 结 ａ Ｋ Ｔ ｃ “ 一Ａ Ｐ酶 活性均降低。 ａ Ｔ 作者简介 ： 周 霞（９ ０） 女（ １８ ． ， 汉族） 黑龙江勃利人 ， ， 现任 西南交通 大学 １ 神经 肽 Ｙ（ Ｐ 与 神 经 降 压 素 （ Ｔ） 量 ３ Ｎ Ｙ） Ｎ 含 药学院助教 ， 博士学位 ， 从事中药教学与研 究工作． 主要 血小 板 合 成 释 放 的 Ｎ Ｙ 可 引 起 血 管 收 缩 、 肌 抑 制 和 血 栓 Ｐ 心 通讯作者简介 ： 万 军（ ９０ ） 男（ １８ － ， 汉族 ） 四川 自贡人 ， ， 现任 西 南交通 形成 ， Ｎ 而 Ｔ在体 内可拮抗 Ｎ Ｙ 的生物 学效应 ， 于两者含量异 Ｐ 对 大学药学院助教， 士学位 ， 博 主要从事 中药教学与研 究工作． 常在老年脑梗塞发病 中所起的作 用不容忽视 。杨风杰等 通过
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脑缺血动物模型 的制备和评价
同济大学附属东方医院神经内科
黄东雅
急性期脑梗塞治疗理念的演变
改善或增加缺血区的供血: 稀释血液，
降低血粘度，改善循环 “时间窗”治疗 溶解血栓、恢复血供、 挽救半暗带区脑组织: 3-6h内溶栓治疗 抗血小板聚集治疗 卒中单元（stroke unit） 神经保护剂
脑梗塞治疗理念的演变历程
在过去的15年中被世界所公认：
3小时内静脉溶栓 卒中单元 阿斯匹林 开颅减压术
动物试验
临床随机对照试验
概 述
缺血性脑血管病 ( I CVD) 约占全部脑血
管病的 80%, 具有发病率、致残率、病死率 高的特点 , 已成为严重危害人类健康的疾病 之一。由于临床研究的种种限制 , 脑缺血动 物模型已成为研究脑血管病损伤机制和防治
5. 动物存活时间长，利于脑缺血相关病理改变过程的研究
6. 脑体积大小适宜，易施低温固定技术和组织生化分析 7. 有关系列大鼠的生理、药理和生化方面的实验资料可供分析比较
8. 克服了体外实验无法实施再灌流的缺陷
9. 沙土鼠缺乏后交通动脉及完整的基底动脉环，两侧大脑供血相对 独立，通过闭塞一侧或双侧CCA即可复制效果明显的同侧或双侧
物种的分类
常用模式动物
常用模式动物
尽管一些体积较大的动物，如猩猩、猴、 猫、狗、兔、猪 都曾用于脑缺血研究，但是 大多数实验室选择大鼠或沙土鼠作为研究对 象。
大鼠和小鼠作为模式生物的优势
1. 大鼠品种多，易于饲养，价格低廉
2. 纯种鼠属近亲交配，基因型相似，脑血管解剖和生理机能也相似
3. 大鼠脑血管解剖和生理机能接近于人类 4. 脑血管损伤部位恒定，实验重复性好
特征时，发育的普遍原理也就得以建立。 5. 这些生物帮助我们理解生命一般规律的生物被称为 “模式生物”
脑缺血动物模型的意义
宗旨： 为人类疾病（脑缺血性疾病）研究服务 要求： 基因 脑和血管解剖 繁殖力强 操作简单，重复性好
物种的概念和动物分类的等级
物种（Species）是动物分类的基本单位，在动物分 类学上，为了将数量众多的物种进行鉴定、研究，便建 立了一个科学的系统，设立了很多的等级或阶元（ Category），用以表示各种动物间类似的程度和亲缘关 系的远近。从上至下则为界、门、纲、目、科、属和种 ，形成了一个科学的动物分类系统。
措施不可缺少的工具。因此 , 建立最接近人
类脑缺血的理想动物模型 , 具有重要意义。
脑血流供应
模式生物
1. 研究生命现象过程中长期和反复作为研究材料的物种 2. 细胞生命在发育的基本模式方面具有相当大的同一性 3. 用较低级位置上在有不同发育特点的生物中发现共同形态形成和变化
发部位，MCA闭塞（Middle cerebral
至缺血和能量代谢紊乱的程度。
大鼠全脑缺血模型
- 二血管阻断法
优点： 该法手术简单, 失败率低 模拟了临床上休克、心功能不全、脑血管严重狭窄或 阻塞合 并血液低灌流引起的脑循环障碍 缺点： 脑缺血时限长，有时导致脑缺血后抽搐、癫痫等并发症的发生 由于全身低血压严重干扰其他器官的血供及实验结果 模型不能在清醒动物进行, 无法进行神经行为的观察
大鼠全脑缺血模型
- 四动脉阻断法
优点：检验缺血是否成功的指标明确 并能进行灌注实验 海马损伤明显，可显示记忆功能的减退 缺点：操作较复杂 椎动脉和脊管前动脉间的交通支存在个体差异较大
操作的熟练程度直接影响实验效果
适用：该模型用于特殊领域的研究
大鼠局灶性脑缺血（MCAO）模型
大脑中动脉( MCA)是人群脑卒中的多
适用： 探讨不完全性脑缺血对能量代射的影响，缺血性脑损伤的发病
机理、 评价抗脑缺血药物的疗效更有价值。
大鼠全脑缺血模型
- 四动脉阻断法
方法：Pulsinelli 等在1979年通过阻断双侧
CCA及椎动脉血流成功建立了四血管闭塞 法大鼠全脑缺血模型。以1 %戊巴比妥钠按
40 mgP kg 进行腹腔麻醉, 腹卧固定大鼠于恒温
急性期脑梗塞治疗理念的演变
神经保护剂：
（1）钙离子拮抗剂: 具有选择性扩张脑血管作用， 改善脑缺血区的低代 谢状态，抑制缺血“瀑布效应”启动，改善再灌注损伤。 （3）细胞稳定剂: 常用胞二磷胆碱，有神经元保护作用 （4）兴奋型氨基酸拮抗剂: 迄今综合评价最好的氨基酸受体损坏拮抗剂Mg 2+ 是其中之一。硫酸镁1.0-2.5g稀释成1%浓度静滴1次/日，连用3日，应尽 早应用。 （5）阿片受体拮抗剂: 阿片受体拮抗剂纳洛酮能改善脑缺血后的神经损伤症 状，促进神经功能恢复，降低死亡率。 （6）神经节苷脂制剂（GM）：改善预后 （7）GABA增强剂：吡拉西坦 ，结果不一 （8）其它:神经生长因子（NGF）
手术台 ,颈后正中切开 , 暴露第一颈椎的两侧翼 板小孔, 用单极电凝针插入其中 ,烧灼双侧推动 脉 , 使之永久闭塞 , 24 h后再仰卧位 , 局麻喉
部 , 在喉头与胸骨间 3 cm处正中切口 ,分离暴露
二侧CCA ,手术缝合线打活结 结扎 , 阻断两侧 CCA使缺血 30 min , 松开活结 ,造成大鼠全脑缺 血再灌流模型。
“没有物种的概念，整个科学便没有了”
恩格斯
物种的概念和动物分类的等级
界： 动物界 Animalia 门： 脊索动物门 Chordata 纲： 哺乳纲 Mammalia 下纲： 真兽下纲 Eutheria 总目： 灵长总目 Euarchontoglires 目： 啮齿目 Rodentia 兔形目 树鼩目 亚目： 松鼠形亚目 Sciuromorpha 河狸亚目 Castorimorpha 鼠形亚目 Myomorpha 鳞尾松鼠亚目 Anomaluromorpha 豪猪亚目 Hystricomorpha 发现
脑缺血模型
脑缺血模型的制备
永久性闭塞
全脑缺血模型
局灶性脑缺血模型
｝ 缺血/再灌注
大鼠脑血管解剖示意图
大鼠全脑缺血模型
- 二血管阻断法
方法：Smith等通过夹闭双侧颈 总动脉(CCA)合并低血压以减少 脑血流量，造成急性脑缺血。 单纯结扎双侧 CCA而不降低血压
, 则不足以使脑血流量(CBF)降低
同济大学附属东方医院神经内科
黄东雅
急性期脑梗塞治疗理念的演变
改善或增加缺血区的供血: 稀释血液，
降低血粘度，改善循环 “时间窗”治疗 溶解血栓、恢复血供、 挽救半暗带区脑组织: 3-6h内溶栓治疗 抗血小板聚集治疗 卒中单元（stroke unit） 神经保护剂
脑梗塞治疗理念的演变历程
在过去的15年中被世界所公认：
3小时内静脉溶栓 卒中单元 阿斯匹林 开颅减压术
动物试验
临床随机对照试验
概 述
缺血性脑血管病 ( I CVD) 约占全部脑血
管病的 80%, 具有发病率、致残率、病死率 高的特点 , 已成为严重危害人类健康的疾病 之一。由于临床研究的种种限制 , 脑缺血动 物模型已成为研究脑血管病损伤机制和防治
5. 动物存活时间长，利于脑缺血相关病理改变过程的研究
6. 脑体积大小适宜，易施低温固定技术和组织生化分析 7. 有关系列大鼠的生理、药理和生化方面的实验资料可供分析比较
8. 克服了体外实验无法实施再灌流的缺陷
9. 沙土鼠缺乏后交通动脉及完整的基底动脉环，两侧大脑供血相对 独立，通过闭塞一侧或双侧CCA即可复制效果明显的同侧或双侧
物种的分类
常用模式动物
常用模式动物
尽管一些体积较大的动物，如猩猩、猴、 猫、狗、兔、猪 都曾用于脑缺血研究，但是 大多数实验室选择大鼠或沙土鼠作为研究对 象。
大鼠和小鼠作为模式生物的优势
1. 大鼠品种多，易于饲养，价格低廉
2. 纯种鼠属近亲交配，基因型相似，脑血管解剖和生理机能也相似
3. 大鼠脑血管解剖和生理机能接近于人类 4. 脑血管损伤部位恒定，实验重复性好
特征时，发育的普遍原理也就得以建立。 5. 这些生物帮助我们理解生命一般规律的生物被称为 “模式生物”
脑缺血动物模型的意义
宗旨： 为人类疾病（脑缺血性疾病）研究服务 要求： 基因 脑和血管解剖 繁殖力强 操作简单，重复性好
物种的概念和动物分类的等级
物种（Species）是动物分类的基本单位，在动物分 类学上，为了将数量众多的物种进行鉴定、研究，便建 立了一个科学的系统，设立了很多的等级或阶元（ Category），用以表示各种动物间类似的程度和亲缘关 系的远近。从上至下则为界、门、纲、目、科、属和种 ，形成了一个科学的动物分类系统。
措施不可缺少的工具。因此 , 建立最接近人
类脑缺血的理想动物模型 , 具有重要意义。
脑血流供应
模式生物
1. 研究生命现象过程中长期和反复作为研究材料的物种 2. 细胞生命在发育的基本模式方面具有相当大的同一性 3. 用较低级位置上在有不同发育特点的生物中发现共同形态形成和变化
发部位，MCA闭塞（Middle cerebral
至缺血和能量代谢紊乱的程度。
大鼠全脑缺血模型
- 二血管阻断法
优点： 该法手术简单, 失败率低 模拟了临床上休克、心功能不全、脑血管严重狭窄或 阻塞合 并血液低灌流引起的脑循环障碍 缺点： 脑缺血时限长，有时导致脑缺血后抽搐、癫痫等并发症的发生 由于全身低血压严重干扰其他器官的血供及实验结果 模型不能在清醒动物进行, 无法进行神经行为的观察
大鼠全脑缺血模型
- 四动脉阻断法
优点：检验缺血是否成功的指标明确 并能进行灌注实验 海马损伤明显，可显示记忆功能的减退 缺点：操作较复杂 椎动脉和脊管前动脉间的交通支存在个体差异较大
操作的熟练程度直接影响实验效果
适用：该模型用于特殊领域的研究
大鼠局灶性脑缺血（MCAO）模型
大脑中动脉( MCA)是人群脑卒中的多
适用： 探讨不完全性脑缺血对能量代射的影响，缺血性脑损伤的发病
机理、 评价抗脑缺血药物的疗效更有价值。
大鼠全脑缺血模型
- 四动脉阻断法
方法：Pulsinelli 等在1979年通过阻断双侧
CCA及椎动脉血流成功建立了四血管闭塞 法大鼠全脑缺血模型。以1 %戊巴比妥钠按
40 mgP kg 进行腹腔麻醉, 腹卧固定大鼠于恒温
急性期脑梗塞治疗理念的演变
神经保护剂：
（1）钙离子拮抗剂: 具有选择性扩张脑血管作用， 改善脑缺血区的低代 谢状态，抑制缺血“瀑布效应”启动，改善再灌注损伤。 （3）细胞稳定剂: 常用胞二磷胆碱，有神经元保护作用 （4）兴奋型氨基酸拮抗剂: 迄今综合评价最好的氨基酸受体损坏拮抗剂Mg 2+ 是其中之一。硫酸镁1.0-2.5g稀释成1%浓度静滴1次/日，连用3日，应尽 早应用。 （5）阿片受体拮抗剂: 阿片受体拮抗剂纳洛酮能改善脑缺血后的神经损伤症 状，促进神经功能恢复，降低死亡率。 （6）神经节苷脂制剂（GM）：改善预后 （7）GABA增强剂：吡拉西坦 ，结果不一 （8）其它:神经生长因子（NGF）
手术台 ,颈后正中切开 , 暴露第一颈椎的两侧翼 板小孔, 用单极电凝针插入其中 ,烧灼双侧推动 脉 , 使之永久闭塞 , 24 h后再仰卧位 , 局麻喉
部 , 在喉头与胸骨间 3 cm处正中切口 ,分离暴露
二侧CCA ,手术缝合线打活结 结扎 , 阻断两侧 CCA使缺血 30 min , 松开活结 ,造成大鼠全脑缺 血再灌流模型。
“没有物种的概念，整个科学便没有了”
恩格斯
物种的概念和动物分类的等级
界： 动物界 Animalia 门： 脊索动物门 Chordata 纲： 哺乳纲 Mammalia 下纲： 真兽下纲 Eutheria 总目： 灵长总目 Euarchontoglires 目： 啮齿目 Rodentia 兔形目 树鼩目 亚目： 松鼠形亚目 Sciuromorpha 河狸亚目 Castorimorpha 鼠形亚目 Myomorpha 鳞尾松鼠亚目 Anomaluromorpha 豪猪亚目 Hystricomorpha 发现
脑缺血模型
脑缺血模型的制备
永久性闭塞
全脑缺血模型
局灶性脑缺血模型
｝ 缺血/再灌注
大鼠脑血管解剖示意图
大鼠全脑缺血模型
- 二血管阻断法
方法：Smith等通过夹闭双侧颈 总动脉(CCA)合并低血压以减少 脑血流量，造成急性脑缺血。 单纯结扎双侧 CCA而不降低血压
, 则不足以使脑血流量(CBF)降低