纤维素酶提取甜菊糖苷的工艺优化
超声辅助纤维素酶提取甜菊糖及其抑菌活性研究

超声辅助纤维素酶提取甜菊糖及其抑菌活性研究作者:郎青云李慧祝谢民来源:《安徽农学通报》2019年第21期摘要:以甜叶菊为原料,采用超声辅助纤维素酶法提取甜菊糖,以甜菊糖提取率为指标,在单因素试验的基础上,通过响应面法分析得出最佳工艺条件;再用滤纸片法测定甜菊糖的抑菌活性,用液体培养法测定甜菊糖的最小抑菌浓度(MIC)。
结果表明:最佳提取工艺条件为纤维素酶量0.5%,超声时间35min,超声温度50℃,在此条件下,甜菊糖的提取率为18.86%;甜菊糖对4种供试菌均有抑制作用,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、毛霉、根霉的最小抑菌浓度分别为20、40、10、80mg/mL。
关键词:甜菊糖;响应面法;抑菌活性;最小抑菌浓度(MIC)中图分类号 TS201.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2019)21-0030-06Abstract:Stevia rebaudiana was used as raw material to extract stevioside by cellulase assisted by ultrasound.With the extraction rate of stevioside as the index,the optimum technological conditions were obtained by response surface methodology on the basis of single factor experiments.Then the antimicrobial activity of stevioside was determined by filter paper method,andthe minimum inhibitory concentration (MIC) of stevioside was determined by liquid culture method.The results showed that the optimum extraction conditions were cellulase 0.5%,ultrasonic time 35min and ultrasonic temperature 50 ℃. Under these conditions,the extraction rate of stevioside was 18.86%.Stevioside inhibited all the four tested bacteria,and the minimum inhibitory concentration of stevioside on Escherichia coli,Bacillus subtilis,Mucor and Rhizopus were 20,40,10 and 80 mg/mL,respectively.Key words: Stevioside;Response face method;Bacterial activity;Minimum inhibitory concentration(MIC)甜叶菊[Stevia rebaudiana (Bertoni) Hemsl.]是一种菊科甜叶菊属的多年生草本植物。
甜菊糖苷提取新方法

甜菊糖苷提取新方法丰雪;付娟娟;温辉梁【摘要】以甜叶菊为基本原料,对甜叶菊中的甜菊糖苷的提取工艺条件进行优化,以提高甜菊糖苷的提取率,同时确定纤维素酶对甜菊糖苷提取率的影响.依据单因素和正交试验得出了获得最高甜菊糖苷提取率的条件是:料液比1∶10,纤维素酶质量浓度0.2%,提取温度50℃,提取时间90 min,溶液pH为5,该条件下的提取率为13.98%,比优化前高出了1.94%.%With Stevia as the basic raw material,we optimized the stevioside extraction conditions,for the purpose of enhancing the extraction yield of stevioside,and at the same time,to determine the effect of cel-lulase on the extraction yield of stevioside. Based on a single factor and orthogonal test,the conditions a-bout maximum extraction rate of stevia were obtained, where the solid-liquid ratio and the cellulase enzyme concentration were 1:10 and 0. 2% respectively,at the temperature 50 "C and under pH = 5 for 90 mins. The extraction rate of stevioside under the optimal conditions was 13. 98% , which was 1. 94% higher than before.【期刊名称】《南昌大学学报(理科版)》【年(卷),期】2012(036)001【总页数】4页(P69-72)【关键词】甜菊糖苷;纤维素酶;提取;工艺;正交试验【作者】丰雪;付娟娟;温辉梁【作者单位】南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌 330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌 330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌 330047【正文语种】中文【中图分类】TS245.9甜菊糖苷是从菊科草本植物甜叶菊中精提的新型甜味剂。
酶法改性甜菊糖甙的工艺研究

数显式电子 p H 计、数显式电热恒温水浴锅、旋转 蒸发仪、搅拌器、折光计、玻璃层析柱、真空抽滤 机、喷雾干燥塔、Waters 1525 高效液相色谱仪及 Wa- ters 液质联用色谱仪。 1.3 工艺流程
淀粉水解 →酶法改性→活性碳脱色脱味→树脂纯化 →喷雾干燥 1.4 操作要点
1.4.1 淀粉水解 配制一定浓度的淀粉溶液( 5 % ~1 5 % 为宜) ,调 p H
的多少以及终产品的口感而定。
1.4.3 活性碳脱色脱味 向上述酶反应溶液中加入反应体系总重量 1 % 的活
性炭,煮沸 3 0 m i n ,冷却后离心过滤去除活性炭。
1.4.4 树脂纯化 将上述经活性炭脱色脱味的溶液以两倍流速流经装
填有 A B - 8 的大孔吸附树脂层析柱,待树脂吸附饱和 后,再以层析柱 3 倍有效柱体积的 70% 食用酒精洗脱树 脂,用旋转蒸发仪回收酒精并浓缩洗脱液至折光度 20% 左右。
甜菊糖的生物合成、转化与糖基化

中国糖料,2018,40(2):58-60综述doi :10.13570/ki.scc.2018.02.021甜菊糖的生物合成、转化与糖基化吴则东1,马龙彪1,周艳丽2*,张文彬1(1.黑龙江大学农作物研究院/中国农业科学院甜菜研究所,哈尔滨150080;2.黑龙江大学农业资源与环境学院,哈尔滨150080)摘要:综述了甜叶菊中甜菊糖的生物合成,生物体内甜菊糖苷糖基化为莱鲍迪苷A 及甜菊糖代谢转化,并展望微生物工厂糖基化的未来发展方向。
关键词:甜叶菊;甜菊糖;甜菊糖苷;莱鲍迪苷;生物合成;转化;糖基化中图分类号:S566.9文献标识码:B 文章编号:1007-2624(2018)02-0058-03甜叶菊是产于巴拉圭与巴西的多年生主要的保健用草本植物,含有的调节和维持人体内各种代谢过程所必需的重要营养素和矿物质[1]。
甜菊糖(steviol glycosides ,SGs )以纯天然、零卡路里、热稳定、对血糖无影响、非可发酵、酸碱性稳定、比普通糖甜150~300倍、防龋齿、无褐变反应和无脂肪与碳水化合物十大优点,受到全球消费与开发者的青睐[2]。
甜叶菊叶片的天然成分主要是贝壳杉烯二萜苷:甜菊糖苷(stevioside ,STV ),莱鲍迪苷A (Reb A )、B 、C 、D 、E ,杜尔可苷A 和甜菊双糖苷。
其中较甜的四环二萜甜菊糖是STV 和Reb A ,这些苷是由一个二萜贝壳杉烯骨架连接大量葡萄糖单元组成。
几乎30种贝壳杉烯二萜苷已从不同种甜叶菊植物中提取,通常被称为甜菊醇糖苷(steviol glycosides ),即以甜菊醇(steviol ,ent-13-羟基贝杉壳烯酸)为基础配糖苷,C19酯键参与C19安息香酸功能和葡萄糖单元之间连接,C13羟基团与葡萄糖、木糖、鼠李糖结合形成乙醚键。
Reb A 比STV 有更多的葡萄糖[3]。
葡萄糖和槐糖基残基存在于STV ,与糖苷配基甜菊醇连接,最后呈现环戊烷多氢菲的骨架。
甜菊糖苷提取新方法

现随着 料液 比的增 加 , 提取 率 也 增 加 。在 料 液 比从
1: 4到 1: 0倍 的过程 中 , 取 率增 长 趋 势 明 显 , 1 提 但在 料液 比达到 1: O后 , 增加 料液 比 , 1 再 甜菊 糖苷 的提 取率增 长趋 势 明显 下 降 。这 是 由于 当料 液 比达 到 1: 0 , 1 后 甜菊 糖苷 基本 全部浸 出 , 增加 料 液 比 再 只会增 加 实验过 程 中 的能 耗 , 不会 大 幅 度 的 提 高 而
摘
要 : 甜 叶 菊 为 基 本 原 料 , 甜 叶 菊 中 的 甜 菊 糖 苷 的 提 取 工 艺 条 件 进 行 优 化 , 提 高 甜 菊 糖 苷 的 提 取 率 , 时 以 对 以 同
确 定 纤 维 素 酶 对 甜 菊 糖 苷 提 取率 的影 响 。 依 据 单 因 素 和 正 交 试 验 得 出 了获 得 最 高甜 菊 糖 苷 提 取 率 的 条 件 是 : 液 料
b utm a i u e r c i a e o t v a we eob a n d, h r h old l i a i nd t e l a ee z me o x m m xt a ton r t fs e i r t i e w e e t e s i —i d r to a he c luls n y qu
素酶 对甜 菊糖 苷提 取率 的影 响 。
1 实 验 部 分
1 1 仪 器与试 剂 . TU~9 0紫外 可见分 光 光 度计 ( 海 精 密科 学 10 上
有 降低血 压 、 进代 谢 、 促 治疗 胃酸过多 等作 用[ 7。 4 3 -
纤 维 素 酶具 有 极 高 的 活性 和 高 度专 一 性 , 可在 常温 、 常压 和温 和 的酸碱 条件 下 , 效地 进行 催化 反 高
功能性甜菊糖苷的酶法制备

《文献检索与利用》综述功能性甜菊糖苷的酶法制备学院:化学与材料工程学院班级:应化1001学号:0501100111功能性甜菊糖苷的酶法制备摘要:甜菊糖苷是一种天的非常营养型高倍甜味剂,其甜度是蔗糖的200~300倍,但热量仅为蔗糖的1/ 250 左右。
传统生产工艺由于添加大量防腐剂,絮凝剂,使得生产环境很差,并且生产中离子交换和大孔树脂的大量使用,耗费掉大量的水资源和化工原料资源,同时大量树脂洗脱有毒的废水很难用生化处理,给企业带来沉重的经济负担和环保压力。
而酶法制备不添加任何絮凝剂和防腐剂,完全可以满足食品添加剂生产要求。
其主要通过α- 环糊精葡萄糖基转移酶催化甜菊苷(St)的转糖苷反应,以此克服其后苦涩味这一致命缺点。
关键词:甜菊糖苷,酶催化,环糊精葡萄糖基转移酶三检索结果1.篇名:甜菊糖苷研究进展作者:孙传范,李进伟文献来源:食品科学,2010,31(9),338摘要:甜菊糖苷是一种低热能的高倍甜味剂。
本文综述了甜菊糖苷的来源、提取分离、结构、安全性及其检测方法等方面的国内外研究进展,在此基础上,提出了今后甜菊糖苷研究发展方向。
2.篇名:脱苦甜菊糖的酶法制备作者:万会达,夏咏梅文献来源:食品与发酵工业,2012,38(8)摘要:甜菊糖是一类被广泛使用的天然高倍甜味剂。
本文研究了一种新的来源于PaneibacillusmaceransJFB05- 01 的α- 环糊精葡萄糖基转移酶催化甜菊苷(St)的转糖苷反应,以此克服其后苦涩味这一致命缺点。
最终优化条件为:60 ℃下,以水为溶剂,淀粉水解液作为糖基供体,浓度为15 mg/mL,甜菊苷浓度为10 mg/mL,加酶量为15 U/g St, 3 h 后可到平衡,甜菊苷的转化率可达59. 2%,St- Glu1 的产率为32. 4%。
转苷产品经淀粉糖化酶水解0. 75 h,St- Glu 1 含量提高至43. 1%。
转苷产物的溶解度提高60 倍以上,后苦涩味明显改善。
甜菊糖苷的提取纯化工艺研究

独创性声明
本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方 外,论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为 获得西北师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的资料。 与 我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示了谢意。 签名: 日期: 2010.06.01
I
硕士研究生毕业论文
甜菊糖苷的提取纯化工艺研究
2.4.1 色谱条件 .................................................................................................... 22 2.4.2 对照品溶液的制备 .................................................................................... 22 2.4.3 甜菊糖苷提取率的测定 ............................................................................ 22 2.5 结果与讨论 ....................................................................................................... 23 2.5.1 不同提取方法实验结果 ............................................................................ 23 2.6 几种甜菊糖苷提取方法的比较 ....................................................................... 26 2.7 结论 ................................................................................................................... 26 参考文献: .................................................................................................................... 27 第三章 甜菊糖苷除杂工艺的研究............................................................................ 28 3.1 前言 ................................................................................................................... 28 3.2 仪器与材料 ....................................................................................................... 28 3.3 提取液不同除杂方法考察 ............................................................................... 29 3.3.1 化学絮凝剂絮凝除杂 ................................................................................ 29 3.3.2 改性凹凸棒石吸附除杂 ............................................................................ 29 3.3.3 乙醇沉淀除杂 ............................................................................................ 29 3.4 样品测定 ........................................................................................................... 29 3.4.1 损失率的测定 ............................................................................................ 29 3.4.2 除杂率的测定 ............................................................................................ 30 3.5 结果与讨论 ....................................................................................................... 30 3.6 结论 ................................................................................................................... 31 参考文献: .................................................................................................................... 32 第四章 甜菊糖苷的纯化和精制工艺研究................................................................ 33 4.1 前言 ................................................................................................................... 33 4.2 仪器、试剂与材料 ........................................................................................... 33 4.3 甜菊糖苷纯度和提取率的测定 ....................................................................... 34 4.3.1 对照品溶液的制备 .................................................................................... 34 4.3.2 供试品溶液的制备 .................................................................................... 34 4.4 甜菊糖苷的纯化工艺研究 ............................................................................... 34 4.4.1 大孔吸附树脂的选择 ................................................................................ 34 4.4.2 大孔吸附树脂的前处理 ............................................................................ 35
莱茵生物甜菊糖苷提取工艺

莱茵生物甜菊糖苷提取工艺哎呀,说起莱茵生物甜菊糖苷提取工艺,这事儿可真不是一两句能说清楚的。
你知道,甜菊糖苷这玩意儿,甜得很,但热量又低,现在不是流行健康饮食嘛,这玩意儿可受欢迎了。
先说说甜菊糖苷是啥吧。
它是一种从甜菊叶里提取出来的天然甜味剂,比糖甜几百倍,但热量几乎可以忽略不计。
这玩意儿,简直就是甜食爱好者的福音啊!提取这玩意儿,得从甜菊叶开始。
首先,你得有一堆新鲜的甜菊叶,最好是那种绿油油的,看起来就生机勃勃的那种。
然后,得把这些叶子清洗干净,不能有泥巴,也不能有虫子,这可是食品安全的第一步。
接下来,就是把叶子晾干。
这可不是随便找个地方一扔就完事儿了,得找个通风好、阳光充足的地方,还得注意别让叶子发霉。
晾干的叶子,摸起来得是脆脆的,一捏就碎那种。
然后,就是提取工艺的关键步骤了。
得把这些干叶子磨成粉末,越细越好。
这粉末,就是甜菊糖苷的藏身之地。
接下来,得用溶剂,比如水或者酒精,把这粉末里的甜菊糖苷给“洗”出来。
这个过程,得控制好温度和时间,太热了不行,太冷了也不行,得刚刚好。
提取出来的液体,得经过过滤,把那些不溶于水的杂质给去掉。
然后,就是浓缩和干燥的过程了。
这步骤,得用到一些高科技的设备,比如真空浓缩器,把液体里的水分给抽干,最后得到一种白色的粉末,那就是我们想要的甜菊糖苷了。
这整个过程,说起来简单,做起来可不简单。
得有精确的控制,还得有耐心,毕竟,好东西都是需要时间打磨的。
最后,这甜菊糖苷,可以用在各种食品里,比如饮料、糖果、糕点,甚至是一些药品里。
它不仅甜,还能帮助控制血糖,对糖尿病患者来说,也是个不错的选择。
所以说,这莱茵生物甜菊糖苷提取工艺,虽然听起来挺高大上的,但其实,它就是一门手艺,一门需要细心、耐心和技巧的手艺。
就像我们平时做蛋糕一样,每一步都得小心翼翼,最后才能做出让人满意的成品。
这甜菊糖苷,就是食品工业中的艺术品,既实用,又健康。
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o h ig e fco n r o o a e t w o h p i lc n i o st a el ls n y o c nr t n w s0 2 . n t e sn l a tra d o t g n lts . e g tt e o t h ma o dt n h tc l a e e z me c n e t i a . % i u ao
a d e ta t d 9 mi ttmp r t r 0 C u d rp . h xr cin r t f s vo i ewa 3 9 % u d r t e o t l n x rc e 0 n a e e au e 5 o n e H 5 T e e ta t ae o t isd s 1 . 8 o e n e h p i ma
甜菊 糖苷 是从菊 科 草 本 植 物甜 叶菊 中精 提 的 新型 甜味 剂 。它是一 种无 热量 的食 品甜 味剂
用 一 。
中¨
。本 工作拟 采用单 因素 和正交 两种试 验方
,
法 来研究 纤维 素酶对 提取 甜菊 糖苷得 率 的影响 。
兼 有 降 低 血 压 、促 进 代 谢 、治 疗 胃 酸 过 多 等 作
T c n lg p i z t n o t vo ie e h oo y o t mia i fse isd o
e ta t t e s x r c i wi c l l e on h la u
F NG e U J a - a ,WE iin E Xu ,F u nj n u N Hu-a g l ( t eK yL b rt yo o dSineadT c n l y ac a gU i r t,N n h n 30 7 Sa e aoao f o c c n eh oo ,N n h n nv s y ac a g 0 4 ) t r F e g ei 3
1 材 料 与 方 法
1 1 材料 、试 剂与 主要设 备 . 1 1 1 实 验材料 .. 甜 叶菊 :江西赣 县 的甜 叶菊干 叶。 1 1 2 实 验试剂 ..
纤维 素酶具 有 极 高 的 活性 和 高 度 专一 性 ,可 在常 温 、常压 和温 和 的 酸碱 条 件 下 ,高 效 地进 行
Ab t a t I r e mp o e t e e t c in y ed o t vo i e a d d tr n h f c fc l ls o h xr cin sr c : n o d rt i rv h xr t il fse i sd n ee mi e t e ef to e l a e f rt e e t t o a o e u a o yed o tv o i e t i p p ro t z d t e s v o i ee t ci n c n i o sw t t va a h a i a tra. B s d il fse i s , h s a e p i e h t i s xr t o d t n i S e i st e b scr w ma ei1 d mi e d a o i h ae
c n i o s . 4% h g e h n b fr h p i z t n o d t n .1 9 i ih rt a e e t e o t o mi i . ao
Ke r s se isd ; c l ls ; e ta t n;t c n l g y wo d : t vo i e el o e x r ci u o e h o o y; ot o o a e t rh g n lts
纤维 素酶提取甜菊糖苷的工艺优化
丰 雪 ,付 娟 娟 ,温辉 梁
( 昌大学 食 品科学 与技 术 国家重点 实验 室 ,南 昌 3 04 ) 南 307
摘 要 :以甜叶菊为基 本原料 ,对甜叶菊中的甜菊糖苷 的提取 工艺条件进 行优化 ,以提高 甜菊糖苷 的提
取率 ,同时确 定纤 维素酶对 甜菊糖苷提取 率的影响。依 据单因素和 正交试验得 出了获得最高甜 菊糖苷提取 率 的条 件是 :纤 维素酶质量浓度 0 2 ,提取温度 5 ℃ ,提取时 间 9 mi,溶液 p .% 0 0 n H为 5 ,该 条件下 的提取率 为 1. 8 ,比优化前高 出了 19 % 。 39 % .4 关键 词 :甜菊糖苷 ;纤维素 酶;提取 ;工艺 ;正交试验 中图分类号 :T 2 59 S4 . 文献标识 码 :A 文章编 号 :10 2 1 (0 10 0 3 0 6— 53 2 1 )5— 19—0 4
收稿 日期 :2 1 0 0 1— 7—0 4 { 通讯作者
纤维素酶 ( 酶活力 ug 10 00 、氧化钙、 / I 5 0. ) > 硫酸铝钾 、浓硫酸 、乙酸 、蒽酮等试验 中所用试
作者简介 :丰雪 ( 9 7一) 18 ,女 ,在校研究生 ,研究方 向为植物中添加剂的分离纯化 。
剂均 为化 学分析 纯 ,购买 于上海 国药 集 团。
0 3Βιβλιοθήκη 1 1 3 实验 设备 ..
T U一10 90紫外 可见 分光 光 度计 ,S Z—m型 H 循环 水真 空泵 ,D G一 10型 电热恒 温 鼓 风 干燥 H 94
催化反应_ 。甜菊叶在高温蒸煮过程中会产生 8
多种 类 型 的 杂 质 J 卜” ,如 蛋 白 质 、果 胶 、鞣 质
等 , 影响甜 菊糖 苷 的析 出,并 给分 离带 来 困 会 难 。纤维素酶可以破坏 细胞壁结构 ,从而可以使
叶片 中 的 甜 菊 糖 苷 在 较 低 的 温 度 下 溶 于 溶 剂