生长激素(GH)检测作业指导书 医学检验
高效人生长激素(GH)ELISA
人生长激素(GH)ELISA Kit酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E04567h检测范围：0.8 ng/ml, - 50 ng/ml,最低检测限：0.2 ng/ml,特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人GH，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中GH含量。
说明●试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
●浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
●中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
●刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗GH抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗GH抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的GH.呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）。
7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）。
8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
检测生长激素的流程
检测生长激素的流程引言：生长激素（GH）是一种由垂体腺体分泌的多肽激素，对人体的生长和发育起着重要的调节作用。
为了检测生长激素的水平，科学家们开发了一系列的实验和检测方法。
本文将介绍检测生长激素的流程，包括样本采集、实验室检测和结果解读等环节。
一、样本采集：1.选择合适的样本：生长激素的浓度在不同时间和不同生理状态下会有差异。
通常情况下，早晨的生长激素水平较高，因此建议在清晨采集血液样本进行检测。
2.采集血液样本：使用无菌注射器采集静脉血液样本，并将其放入抗凝剂管中。
确保采集过程中的无菌操作，以避免外界污染对结果的影响。
3.保存和运输样本：采集的血液样本应放置在冰上，尽快送至实验室进行后续处理。
在运输过程中，需避免剧烈震动，以防止血液凝固或样本破坏。
二、实验室检测：1.血清分离：将采集的血液样本置于离心机中，以一定的速度离心，将血液分离为血浆和红细胞。
2.生长激素测定：使用酶联免疫吸附法（ELISA）或放射免疫分析法（RIA）等方法，测定血浆中生长激素的浓度。
这些方法基于生长激素与特定抗体的结合反应，通过测定反应产生的光信号或放射性信号来确定生长激素的浓度。
3.质控检验：为了确保实验结果的准确性和可靠性，实验室通常会进行质控检验。
这包括使用已知浓度的生长激素标准品进行标定，以及进行质控样本的检测，以验证实验结果的准确性。
4.数据分析：根据实验结果，计算生长激素的浓度。
通常情况下，实验室会提供一个参考范围，根据参考范围来判断个体的生长激素水平是否正常。
三、结果解读：1.正常范围：根据不同年龄段和性别，生长激素的正常范围会有所差异。
通常情况下，成年人的正常生长激素水平为0.4-10 ng/mL。
2.异常结果：如果生长激素的浓度超出了正常范围，可能意味着生长激素分泌异常或某种疾病的存在。
进一步的检查和分析可能需要进行，以确定具体的原因和诊断。
结论：检测生长激素的流程包括样本采集、实验室检测和结果解读等环节。
生长激素（GH）激发试验操作方法及注意事项
生长激素（GH）激发试验操作方法及注意事项展开全文秒懂矮小秒懂矮小生长激素(GH)激发试验是评价“下丘脑-GH-IGF1轴”功能的重要指标，下文让我们深入了解一下GH激发试验具体操作、注意事项等细节问题吧！生长激素激发试验原因生长状态下，GH呈脉冲式分泌(图1)。
这种分泌与垂体、下丘脑、神经递质以及大脑结构和功能的完整性有关，有明显的个体差异，并受睡眠、运动、摄食和应激的影响，故测定单次血GH水平不能真正反映机体GH的分泌情况。
图1：受试者的24小时GH曲线，在睡眠状态下GH分泌达到峰值[1]。
生理激发试验、运动试验等有诸多条件限制不被广泛采用。
目前国际公认的方法是药物激发试验。
GH激发试验常用药物生长激素激发试验药物的作用机理主要为两类：•一类是通过促进生长激素释放激素（GHRH）的分泌，来促进生长激素分泌峰的出现，常见药物为可乐定、左旋多巴；•另一类是通过抑制生长激素释放抑制激素（SRIH）的释放，反过来促进生长激素分泌峰的出现，常见药物为胰岛素、精氨酸。
*部分人群可能对一种激发方式的敏感性不够，而另一种激发方式可能正常。
GH激发试验需2种不同作用方式的药物试验，如胰岛素可乐定，或胰岛素左旋多巴。
试验前准备•受试者禁食、禁水6-8小时。
幼童禁食禁水6小时，试验前一日睡前加餐；•准确记录受试者的身高、体重；•提前准备静脉留置针；•卧床休息30-60分钟；•癫痫患者不能接受此实验；•甲状腺功能低下及皮质醇低下者，应提前补充到正常，再做激发试验；•疑为体质性青春期延迟者，激发前补充性激素。
GH激发试验方法及注意激发试验给药途径:口服和静脉，选取2种激发试验的药物分别采用口服和静脉两种用药方式，可减少因消化吸收原因影响口服药迅速起作用的可能。
卫生部《矮小症临床路径》中要求，静脉用药方式必选一种（避免一种药物做激发试验有15%的假阳性）。
表1：生长激素激发试验[2]*表1中30'指30分钟。
以上试验在0分钟和用药后30分钟、60分钟、90分钟、120分钟分别采静脉血测定GH，胰岛素试验需加15分钟采血，同时测血糖、皮质醇，当血糖降至1/2时，才能激发GH释放，所测数据才为有效。
人生长激素(hGH)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求北京联众泰克
人生长激素(hGH)测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中人生长激素（hGH）的含量。
1.1包装规格：50人份/盒、100人份/盒。
1.2主要组成成分试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（hGH-Cal）（选配）组成。
组成及含量见下表：注：1、定标品靶值批特异，详见靶值单。
2、试剂盒条码卡内含主校准曲线。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于0.03 ng/mL。
2.3 准确度用hGH国家标准品（150534）进行检测，其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。
2.4 线性在[0.10，50.0]ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 重复性在试剂盒的线性范围内，测定高、低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间差在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测浓度为高、低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6特异性测定浓度不低于2000mIU/L的泌乳素样本，其测定结果不大于0.5ng/ml。
2.7效期末稳定性本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.8 溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供人生长激素（hGH）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源至国家标准品（150534）。
【指导】生长激素GH检测作业指导书医学检验
【关键字】指导《文件已阅声明表》《Procedure circulation form》文件修改记录页（Procedure amendment form）表号: KM-MP03•02•03文件信息表(Procedure information form)生长激素（GH）检测作业指导书（Standard operation procedure for analysis of Growth Hormone）1. 原理（Test principle）:固相、双位点夹心法化学发光免疫量度检测。
固相（包被珠）包被有鼠单克隆hGH抗体，试剂含有碱性磷酸酶标记的兔抗hGH多克隆抗体。
试剂与样本中的hGH同时与包被有鼠单克隆hGH抗体的包被珠温育，形成抗体夹心复合物。
未结合的酶标记物经离心去除，最终加入化学发光底物，产生与结合酶成比例的光信号。
2. 样本收集和储存（Specimen Collection and Storage）:标本收集（Specimen collection）:类型（Ttype）:血清(Serum);用量(V olume) 抽取0.4mL不抗凝血分离的血清,仪器加样量(Sampling volume) 50μl（样本杯中样本量要超过样本用量至少100μL）。
采集样本前，病人应空腹并休息30分钟。
拒收标本（Specimen rejection）：推荐使用超速离心清除脂血（lipoprotein）样本。
溶血（hemolysis）样本提示样本在送达实验室之前处理不当，因此检测结果将受到影响，应予以注意。
血清（serum）样本在未充分凝集前离心将导致纤维蛋白的存在。
为躲免纤维蛋白对结果的影响必须确保离心处理前样本已经完全充分凝集。
对于正在接受抗凝剂治疗的病人样本，需要延长凝集时间。
源于不同生产商的血样收集试管，由于原材料和添加剂不同，包括凝胶或物理涂层、促凝剂和/或抗凝剂，可能导致得到不同的结果。
本试剂盒没有对所有可能应用的收集管类型进行测试。
关于生长激素的实验报告
一、实验目的1. 了解生长激素的生理功能及其作用机制。
2. 掌握生长激素的测定方法及其应用。
3. 探讨生长激素在生长发育、代谢调节等方面的作用。
二、实验原理生长激素（GH）是由脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌的一种单一肽链的蛋白质激素。
它具有广泛的生理功能，能影响几乎所有的组织类型和细胞。
生长激素主要通过以下两个途径发挥功能作用：1. 诱导肝细胞、肌细胞产生生长激素介质（Somatomedin，SM），再经由SM间接起作用。
2. 直接作用于靶细胞产生生理效应。
生长激素受体（GHR）是一种跨膜糖蛋白，存在于肝脏、脂肪细胞、淋巴细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、软骨细胞、胰岛素细胞和造骨细胞等多种细胞中。
GHR包括三个结构域：质膜外侧N-端246个氨基酸的结构域；中间为25个氨基酸的跨膜结构域；质膜内侧C-端350个氨基酸的结构域，质膜内侧C-端肽段具有大量的酪氨酸残基。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：生长激素标准品、样品、抗生长激素抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体、底物、缓冲液等。
2. 实验仪器：酶标仪、离心机、显微镜、恒温水浴箱、移液器、微量滴定板等。
四、实验方法1. 样品制备：取一定量的生长激素样品，用缓冲液稀释至适当浓度，备用。
2. 标准曲线绘制：取生长激素标准品，按一定比例稀释，分别加入微量滴定板孔中，加入抗生长激素抗体和HRP标记的抗体，室温孵育一段时间后，加入底物，在酶标仪上检测吸光度值，以生长激素浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品检测：将样品按相同步骤进行检测，根据标准曲线计算出样品中生长激素的含量。
4. 数据分析：对实验数据进行统计分析，探讨生长激素在生长发育、代谢调节等方面的作用。
五、实验结果1. 生长激素标准曲线：根据实验数据，绘制生长激素标准曲线，相关系数R²为0.999，表明标准曲线线性关系良好。
2. 样品检测结果：根据标准曲线，计算出样品中生长激素的含量为XX ng/mL。
人生长激素检测流程及生长发育两项的注意事项
IGF-1样本医院常空腹采集，即HGH激发或抑制试验0min样本
IGF-1样本收集后在室温放置不可超过8小时； 如果不在8小时内检测需将样本放置在2-8℃的冰箱中； 若需24小时以上保存或运输，需要将血清或血浆与血细胞分离， 并将血清或血浆保存于≤-20℃的环境，避免反复冻融。
IGF-1试剂盒注意事项
4ug/kg，一次口服 10mg/kg，不超过500mg，一次口服 （GHRH） 1uk/kg，静注 1mg/kg 一次口服同上 同上 同上 同上
吡啶斯的明
注：因任何单因量的激发或试验都有15%失败可能，目前医院常用双项 口服和注射应激。
HGH/IGF-1样本要求
两个试剂盒样本类型均首选血清样本
GHD诊断流程
GH分泌常用药物用法用量
常用的生长激素分泌功能试验 试验用药 方法 采血时间
胰岛素
精氨酸
0.075u/kg，静注
0.5g/kg（不超过30g） 注射用水配成5—10%，30min
0,15,30,60,90,120测GH
0,30,60,90,120min测GH
可乐定 左旋多巴
生长激素释放激素
IGF-1试剂盒专用样品稀释液一旦开盖使用，每次使用完毕后 需要加盖（拧紧）室温保存，下次开盖即可使用 IGF-1试剂盒机外最大稀释倍数可达到1:9； 建议机外稀释倍数为2倍稀释即可满足需求
生长激素（GH）医学百科
⽣长激素（GH）医学百科
(1)升⾼：①垂体肿瘤：肢端肥⼤症、脑垂体性巨⼈症。
②⾮垂体肿瘤：糖尿病、部分肝病、肾功能不全、胰腺癌。
可⽤抑制试验鉴别⾮垂体肿瘤所致GH之增⾼。
(2)降低：①垂体性侏儒及其他原因所致的垂体前叶功能减低症。
②⾮垂体疾病所致GH值降低：肝硬化、垂体附近的脑肿瘤。
可⽤兴奋试验鉴别垂体性和⾮垂体性的降低。
⽣长激素-L-多巴兴奋试验正常值(空腹):峰值＞7µg/L，或较兴奋前上升5µg/L以上(峰值＞7ng/ml，或较兴奋前上升5ng/ml以上)。
⽣长激素-⾼⾎糖素兴奋试验正常值(空腹):兴奋后升到7µg/L以上，或较兴奋前上升5µg/L以上(兴奋后上升到7ng/ml以上，或较兴奋前上升5ng/ml)⽣长激素-精氨酸兴奋试验正常值:空腹值＜5µg/L(＜5ng/ml)，试验30～60min，上升到7µg/L(7ng/ml)以上〔峰值范围8～35µg/L( 8～35ng/ml)〕。
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《文件已阅声明表》《Procedure circulation form》文件名称: 生长激素（GH）检测作业指导书表号: KM-MP03•02•02已阅声明：本人承诺已了解此文件中的相关内容,今后的工作中将严格按照此文件执行,不随意对外传阅此文件,如有因与文件不相符的操作,责任由本人承担。
（I have understood the relevant content of the document.I will keep the document secret and be responsible to properly perform procedure）阅读人签名表姓名（NAME）职务（POSITION）签名（SIGNATURE）签名日期（DATE）S T A N D A R D O P E R A T I O N P R O C E D U R E P A G E1/10S T A N D A R D O P E R A T I O N P R O C E D U R E P A G E 2/10文件修改记录页（Procedure amendment form ）序号 NO.页码(Page)内容更改说明（Description of Modifiedcontents ）审批人 （Approved by ）批准生效日期 （Approved date ）1 换版S T A N D A R D O P E R A T I O N P R O C E D U R E P A G E 3/10文件信息表(Procedure information form)文件名称Title of DOC.(Doc. Code) 生长激素（GH ）检测作业指导书（KM-SOP0300•349） 版本号(Edition No.) Edition 3.0生效日期(Operative date)2008-03-13文控部门(Doc. Control Dept.) 实验室文控室 回顾日期/签名 (Review date /signature )回顾日期(Review date) 回顾人员签名( Signature )替代文件(Replaces) 生长激素（GH ）检测作业指导书(Edition 2.0)存放地点(Location)/持有人（Holder ）No. Location （Holder ） No. Location （Holder ） 1 实验室文控室（陈彬） 2 化学发光室（段学成）作者签名/日期(Author signature/date) 廖巍俊 审批人签名/日期(Authorized by : Signature/Date) 陈建波接收人签名/日期 （Receiptor/Date ） 副本数(Copy No.)生长激素（GH）检测作业指导书（Standard operation procedure for analysis of Growth Hormone）1. 原理（Test principle）:固相、双位点夹心法化学发光免疫量度检测。
固相（包被珠）包被有鼠单克隆hGH抗体，试剂含有碱性磷酸酶标记的兔抗hGH多克隆抗体。
试剂与样本中的hGH同时与包被有鼠单克隆hGH抗体的包被珠温育，形成抗体夹心复合物。
未结合的酶标记物经离心去除，最终加入化学发光底物，产生与结合酶成比例的光信号。
2. 样本收集和储存（Specimen Collection and Storage）:标本收集（Specimen collection）:类型（Ttype）:血清(Serum);用量(Volume) 抽取0.4mL不抗凝血分离的血清,仪器加样量(Sampling volume) 50μl（样本杯中样本量要超过样本用量至少100μL）。
采集样本前，病人应空腹并休息30分钟。
拒收标本（Specimen rejection）：推荐使用超速离心清除脂血（lipoprotein）样本。
溶血（hemolysis）样本提示样本在送达实验室之前处理不当，因此检测结果将受到影响，应予以注意。
血清（serum）样本在未充分凝集前离心将导致纤维蛋白的存在。
为避免纤维蛋白对结果的影响必须确保离心处理前样本已经完全充分凝集。
对于正在接受抗凝剂治疗的病人样本，需要延长凝集时间。
源于不同生产商的血样收集试管，由于原材料和添加剂不同，包括凝胶或物理涂层、促凝剂和/或抗凝剂，可能导致得到不同的结果。
本试剂盒没有对所有可能应用的收集管类型进行测试。
标本储存条件(Sample storage)：冷藏8小时; 冷冻2个月；十天后处理标本。
3、试剂(Reagent)：3.1美国IMMULITE 原装试剂。
3.1.1试剂内组份(Components)：试剂盒组分必须成套使用，条码为实验必需。
hGH 检测单位（LGH1）每个带有条码的检测单位内有一个包被珠，包被有单克隆鼠抗hGH抗体。
2-8℃S T A N D A R D O P E R A T I O N P R O C E D U R E P A G E4/10可稳定至失效期。
(Stored in 2～8℃based on manufacturer insturction) LKGH1：100个，LKGH5：500个打开包装之前应恢复至室温，从包装顶部剪开，完整保留拉链隆起缘。
使用后将拉链重新封好，避免潮湿。
hGH 试剂楔（LGH2）试剂楔带有条码。
7.5mL碱性磷酸酶标记的兔多克隆羊抗hGH抗体缓冲液，含防腐剂。
封盖低温保存：2-8℃可稳定至失效期。
建议打开包装后在提示保存条件下30天内用完。
LKGH1：1个，LKGH5：5个hGH 校正（LGHL，LGHH）两瓶（低、高）冻干的含hGH的非人血清基质，含防腐剂。
使用前至少30分钟复溶，每瓶加3.0mL蒸馏水或去离子水。
轻轻翻转混匀，直到冻干粉全部充分溶解。
复溶后2~8℃可稳定30天，或-20℃可稳定6个月（分装）。
LKGH1：1套，LKGH5：2套3.1.2未随试剂盒提供的组分hGH 样本稀释液：（LGHZ）用于人工稀释病人样本。
每瓶25mL，为不含hGH的非人血清/缓冲液基质，含防腐剂。
开封后，2~8℃可稳定30天，或-20℃可稳定6个月（分装）。
LSUBX：化学发光底物LPWS2：探针清洗液LKPM：探针清洗试剂盒LCHx-y：样本杯架（带条码）LSCP：样本杯（一次性）LSCC：样本杯盖（可选）CON6：三水平，多成分质控。
其它必需：样本加样戏管、蒸馏水或去离子水、质控。
3.2 试剂准备：将试剂从冰箱中取出并平衡至室温；不同批号的试剂不能混用；新试S T A N D A R D O P E R A T I O N P R O C E D U R E P A G E5/10剂与前一批号试剂不同，则需做样本结果的比对，并记录，差异在允许范围内方可使用。
Put reagent from refrigeratory to room temperature for proper time; New reagent lots must be tested in parallel with old lots before or concurrently with being placed in service to ensure that the calibration of the new lot of reagent has maintained consistent results for patient specimens. Recod the results.4 仪器（Instrument）：IMMULITE.仪器准备（Prepare apparatus）：使用前将仪器的液体与固体垃圾清空；加入足够的蒸馏水，清冼液，底物及样本杯。
然后运行仪器操作软件。
而后排水及底物，防止内有残留气柱。
将仪器的试剂盘中加入所需的试剂。
5.安全防范（Safety Precautions）：操作时必须穿戴手套和工作服；工作后的台面应消毒擦洗；用过的加样枪头等耗材应作为医用垃圾处理；为了避免形成气溶胶，所有样品尽可能不要在空气当中暴露太长时间；遇到样本洒出，被污染的区域应立即用次氯酸钠溶液清洗，擦拭用的物品应丢弃在标有生物污染的垃圾筒中。
6校准（Calibration）：6.1校准品储存和使用(Calibration material storage and usage)：美国IMMULITE 原装校准品。
要求在有效期内使用，过期的校准液应停止使用，保存于2-8℃可稳定到有效期。
Stop using overdue calibration e it within expiration date,storage in 2-8℃配制（Calibration material redissolve）：开封后用有盖小子弹头分装600μL/个，标明开封日期，校准品批号，分装人以及有效日期，于－20℃冻存备用。
Label confecting date ,calibration lot,person who confected, expiration date.then 开封后校准品成分的稳定性：保存于15~25℃，可稳定8小时保存于2~8℃，可稳定2天保存于（-15）~（-25）℃，可稳定1个月（不可反复S T A N D A R D O P E R A T I O N P R O C E D U R E P A G E6/10冻融）。
6.2当下列任何一种情况出现时，请重新校准：(If one of the two happens, recalibration )（1）试剂批号改变(Reagent lot changes)（2）根据质控需要进行校准(Recalibration based on quality control problem) （3）校准周期（Frequency of calibration）：两周(Two weeks)。
6.3步骤：在计算机屏幕上选择kit Entry项，用扫码器扫描药盒上的条码，选择Patient Entry项，输入校正信息.然后将两个样本杯中分别加入至少600ul的A，B 校准品，放在加样履带上。
点击GO。
仪器自动识别校准是否通过，但是每次做校准后，必须跟做所有浓度的质控，如质控在控则校准通过。
校准结果判断标准: 仪器自动识别校准是否通过，但是每次做校准后，必须跟做所有浓度的质控，如质控在控则校准通过。
7操作过程 (Procedural Steps) ：7.1 将从标本组取回的带有编号的血清标本离心取血清. 本项目编号为2xxx（一个x 代表一个阿拉伯数字）。