汗腺三维重构模型中EGFR的作用
EGFR简介(2012年3月26)
IMC-225单克隆抗体的作用机制 IMC-225单克隆抗体的作用机制
抑制受体酪氨酸激酶活性 将细胞阻断在G1期 将细胞阻断在 期 诱导某些肿瘤进入凋亡 抑制肿瘤血管生成 抑制某些肿瘤的远地转移 诱导免疫反应 抑制放-化疗后受损肿瘤细胞的恢复 抑制放 化疗后受损肿瘤细胞的恢复
IMC-225单克隆抗体临床前体外研究： IMC-225单克隆抗体临床前体外研究： 单克隆抗体临床前体外研究
ZD1839 ( Iressa 易瑞沙) 易瑞沙)
阻断信号转导途径，抑制了EGFR磷酸化作 阻断信号转导途径，抑制了EGFR磷酸化作 EGFR 用，而有抑制肿瘤细胞增殖的作用 具有抗血管生成和增加凋亡的作用 与放疗和化疗联合应用有协同作用。 与放疗和化疗联合应用有协同作用。
参考文献
The Epidermal Growth Factor Receptor: A New Target for Anticancer Therapy.Curr Probl Cancer 2002.26:109-164. Targeted therapies for cancer – from tamoxifen to gefitinib (‘Iressa’).Cancer 2004.4(1):411-416
2012.3.26
表皮生长因子受体(EGFR)是一种酪氨 表皮生长因子受体(EGFR)是一种酪氨 (EGFR) 酸激酶受体(RTK) 位于第7号染色体， (RTK)， 酸激酶受体(RTK)，位于第7号染色体， 由28个外显子组成，编码1186个氨基 28个外显子组成，编码1186个氨基 个外显子组成 1186 其糖蛋白分子量约170kDa 170kDa。 酸，其糖蛋白分子量约170kDa。
EGFR广泛分布于哺乳动物上皮细胞、 EGFR广泛分布于哺乳动物上皮细胞、 广泛分布于哺乳动物上皮细胞 成纤维细胞、胶质细胞、 成纤维细胞、胶质细胞、角质细胞等 细胞表面，EGFR信号通路对细胞的生 细胞表面，EGFR信号通路对细胞的生 长、增殖和分化等生理过程发挥重要 的作用。 的作用。 EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其 EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其 相关信号通路中关键因子的活性或细 胞定位异常，均会引起肿瘤、糖尿病、 胞定位异常，均会引起肿瘤、糖尿病、 免疫缺陷及心血管疾病的发生。 免疫缺陷及心血管疾病的发生。
egfr参考值
egfr参考值EGFR参考值是指表皮生长因子受体的正常范围。
EGFR是一种受体酪氨酸激酶，它在人体内起着重要的调节作用，参与细胞生长、分化和重建等过程。
EGFR参考值的测定可以帮助医生判断患者是否存在EGFR异常活跃的情况，从而指导临床诊断和治疗。
EGFR参考值的测定通常通过血液或组织样本进行。
一般来说，正常情况下，成年人的EGFR参考值范围在60-90 mL/min/1.73m²之间。
这个范围是通过大量人群的实验测定得出的，具有一定的可靠性。
当EGFR的测定结果超出正常范围时，可能提示患者存在肾脏功能异常或其他疾病。
EGFR参考值的测定在临床中具有重要的意义。
首先，它是评估肾脏功能的重要指标之一。
肾脏是人体的重要排毒器官，通过滤过、重吸收和分泌等过程，清除体内代谢产物和毒素。
当肾脏功能异常时，会导致EGFR参考值的改变。
因此，通过监测EGFR参考值的变化，可以及早发现和评估肾脏疾病。
EGFR参考值的测定还可以用于评估某些疾病的严重程度和预后。
例如，在慢性肾脏疾病患者中，EGFR参考值的下降速度可以反映疾病的进展情况。
一般来说，EGFR参考值的下降速度越快，疾病的进展越快，预后越差。
因此，通过监测EGFR参考值的变化，可以及早发现疾病的进展，并采取相应的治疗措施。
EGFR参考值的测定还可以用于指导药物的使用和剂量的调整。
一些药物在体内的代谢和排泄过程中，受到肾脏的调节。
当肾脏功能异常时，药物的代谢和排泄可能发生改变，从而影响药物的疗效和安全性。
通过监测EGFR参考值的变化，可以评估药物的代谢和排泄情况，从而指导药物的使用和剂量的调整。
EGFR参考值的测定在临床中具有重要的意义。
它可以帮助医生评估肾脏功能、疾病的严重程度和预后，指导药物的使用和剂量的调整。
因此，合理使用EGFR参考值的测定结果，可以提高临床诊断和治疗的准确性和效果，促进患者的健康恢复。
同时，我们也要注意，EGFR参考值的测定结果只是辅助诊断和治疗的工具，最终的诊断和治疗决策还需要结合临床症状和其他检查结果来综合判断。
EGFR信号通路
EGFR信号通路主要通过3条通路将信号从胞质传导到细胞核 1.Ras／Raf／MEK／ERK/MAPK通路 2.PI3K／Akt(PKB)通路 3.JAK／STAT通路
• 硕士
各信号通路之间的交联
PI3K 通路中的PKB 参与到Ras-MAPK 通路中， PKB 的酶活性受到了Raf 的磷酸化程度的抑制； 负调控PI3K 通路的PTEN 又可抑制EGF 诱导的 MAPK 通路。 c-Src 通路中的c-Src 同时参与到MAPK 通路和 PI3K通路中：c-Src特异性酪氨酸磷酸化后可结合 Shc 的SH2 结构域激活Shc ，结合Grb2 后活化Erk2 ， 增强了MAPK通路；Src 激酶可通过抑制PTEN 的 作用提高PKB 的磷酸化程度增强PI3K 通路.
EGFR通路与肿瘤
EGFR 的信号传导关乎细胞的凋亡、增殖、分 化、迁移和细胞周期循环，与肿瘤的形成和恶化息 息相关。
基于肿瘤细胞中EGFR高水平表达的特点， 已经开发出一系列抗肿瘤药物。EGFR靶向药物的作用机 制主要分为5类：①针对EGFR胞外域部分的单 克隆抗体，如西妥昔(Cetuximab，Erbitux，IMC— C225)、Matuzumab(EMD72000)和ABX—EGF，可 封闭配体分子对EGFR的激活；②针对EGFR激 酶区的小分子激酶活性抑制剂，如吉菲替尼(Ge— fitinib／Iressa／ZDl839)、Erlotinib／Tarceva／OSI 一774，作为ATP的类似物竞争结合 予EGFR的TK区，抑制EGFR激酶活性；③利用 RNAi作用机理，特异性降解EGFR；③能识别EG FR的细胞毒素、细胞杀伤因子、放射性粒子等，选 择性杀死富含EGFR肿瘤细胞；⑤阻碍EGFR的 二聚化／寡聚化进而抑制EGFR的激活。
EGFR详解
EGFR详解来源：⼩试⽜⼑EGFR信号通路EGFR:epidermal growthfactor receptor，简称为EGFR、ErbB-1或HER1，是表⽪⽣长因⼦受体(HER)家族成员之⼀。
该家族包括HER1(erbB1，EGFR)、HER2(erbB2，NEU)、HER3(erbB3)及HER4(erbB4)。
HER家族在细胞⽣理过程中发挥重要的调节作⽤。
EGFR分为三区:胞外配体结合区，跨膜区和胞内激酶区。
EGFR位于细胞膜表⾯，靠与配体结合来激活，激活后，EGFR由单体转化为⼆聚体，EGFR还可能和ErbB受体家族的其他成员聚合来激活，例如ErbB2/Her2/neu。
EGFR与⾮⼩细胞肺癌在⾮⼩细胞肺癌和患者中，EGFR酪氨酸激酶区域的突变主要发⽣在18-21外显⼦，如下表所⽰：其中19和21号外显⼦的突变覆盖突变的 90%。
其中19-del和L858R属于常见敏感突变；G719X，S768I及L861Q因为突变率较低，属于稀有敏感突变；20号外显⼦的20-ins及T790M属于耐药突变。
PIONEER研究[1]的亚组分析结果证实中国⼤陆地区的晚期肺腺癌，总体EGFR突变率是50.2%，敏感突变率是48%，即使是吸烟患者其突变率也达到了35.3%。
在⼥性不吸烟的腺癌患者总这⼀突变率可达60%。
EGFR-TKIs家族成员⼀代TKI通过氢键可逆性竞争结合EGFR ATP结合位点：⼀代TKI喹唑啉环中的氮与EGFR ATP 结合⼝袋中Met793形成氢键，可逆性竞争性抑制ATP结合，从⽽抑制下游信号通路开放。
⼆代TKI通过共价键不可逆结合EGFR ATP结合位点：⼆代TKI除喹唑啉结构外具有亲电的迈克尔受体系统侧链，可与EGFRATP结合⼝袋中C797氨基酸形成共价键，不可逆抑制ATP的结合。
第⼀代和第⼆代EGFR-TKI治疗已成为EGFR突变阳性晚期NSCLC患者的标准⼀线治疗。
遗憾的是，⼏乎所有EGFR-TKI治疗有效的患者最终均产⽣获得性耐药。
egfr 计算方式
EGFR计算方式科普一、引言EGFR（Estimated Glomerular Filtration Rate，估算肾小球滤过率）是衡量肾脏功能的重要指标，能够反映肾脏对血液中废物的清除能力。
本文将详细介绍EGFR的计算方式，帮助读者更好地了解肾脏功能评估的基本知识。
二、EGFR的定义与意义EGFR是指单位时间内肾脏对血液的滤过能力，通常以毫升/分钟/1.73平方米体表面积（ml/min/1.73m²）表示。
EGFR能够反映肾脏对代谢废物和多余水分的清除能力，是评估肾脏功能的重要指标。
EGFR的降低可能意味着肾脏疾病的存在，如慢性肾脏病（CKD）等。
三、EGFR的计算方式目前常用的EGFR计算方式主要有两种：基于血清肌酐的MDRD公式和基于血清胱抑素C的CKD-EPI公式。
1.MDRD公式MDRD公式是根据血清肌酐（Scr）、年龄、性别和种族等因素计算EGFR的常用方法。
具体公式如下：EGFR（ml/min/1.73m²）= 186 × (Scr)^-1.154 × (年龄)^-0.203 × (0.742女性) ×(1.210非裔美国人)其中，Scr为血清肌酐浓度（mg/dl），年龄以岁为单位，性别和种族根据个体情况选择相应的系数。
需要注意的是，MDRD公式在血清肌酐浓度较低时可能存在较大误差。
2.CKD-EPI公式CKD-EPI公式是基于血清胱抑素C（CysC）、血清肌酐、年龄、性别和种族等因素计算EGFR的方法。
相比MDRD公式，CKD-EPI公式在血清肌酐浓度较低时具有更高的准确性。
具体公式如下：EGFR（ml/min/1.73m²）= 141 × min(Scr/κ, 1)^α × max(Scr/κ, 1)^-1.209 ×0.993^年龄 × 1.018（女性） × 1.159（黑人）其中，Scr为血清肌酐浓度（mg/dl），κ为血清胱抑素C浓度（mg/l），年龄以岁为单位，性别和种族根据个体情况选择相应的系数。
EGFR
表皮生长因子受体(EGFR)信号
转导途径在调节肿瘤细胞的生长、 损伤修复和生存、新生血管生成、 侵袭和转移中具有重要的作用， 同时在相当一部分的人类肿瘤中 都有表达。
EGFR的生理作用
EGFR剔除小鼠：胚胎发育延迟，出生死亡率很 高。表现为脑发育不全，呼吸道、泌尿道、消化 道上皮及皮肤 发育障碍。 表皮EGFR剔除小鼠：皮肤及毛囊发育障碍。
EGFR的作用机制：
EGFR 与其配体结合后在细胞表面形成二 聚体。这种二聚体包括与其本身形成的同 源二聚体和与erbB 家族其它成员形成的异 源二聚体。
表皮生长因子受体(EGFR)在肿瘤生长和分化中起重要作
用,其结构如图a,当其被配体EGF活化时,通过二聚化使胞 内酪氨酸激酶结构域被激活,从而受体被活化(图b、c)。
EGFR家族与癌症：
EGFR的结构：170
kDa糖蛋白
细胞膜外部分：与配体结合（NH2- 端） 穿膜部分
细胞膜内部分：酪氨酸激酶活性（COO
表皮生长因子（EGF) 转化生长因子α（TGFα) 双调蛋白（AR） 上皮调节蛋白（Epiregulin) 肝素结合的表皮生长因子（HB-EGF) BTC(betacelluin) 表皮素（epiregulin，EPR)
受体二聚体化后，内在的蛋白激酶活 化，TK 磷酸化从而激活其下游的3 条 主要信号通路：Ras2/Raf2/MAPK 通路、磷脂酰三磷酸肌醇( PI3K)和丝 苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路、JAK 和 STAT通路。
3条信号转导通路最终介导细胞分化、 生存、迁移、侵袭、黏附和细胞损伤 修复等一系列过程。
单克隆抗体(MAb)
egfr结构特点
egfr结构特点EGFR（表皮生长因子受体）是一种膜受体酪氨酸激酶，属于受体酪氨酸激酶（RTK）家族成员，包括EGFR（也称为HER1/ErbB1）、HER2/ErbB2、HER3/ErbB3和HER4/ErbB4等。
EGFR在细胞生长、分化、增殖和存活等许多生物学过程中起着重要作用。
以下是EGFR结构特点的详细描述：1.膜受体：EGFR是一种跨膜受体，由一个细胞外结构域、一个跨膜域和一个细胞内激酶结构域组成。
细胞外结构域由四个区域组成，包括一个L1区、一个CR1区、一个CR2区和一个L2区。
2.细胞外结构域：EGFR的细胞外结构域对识别和结合表皮生长因子（EGF）和其他相关成分具有重要作用。
EGF结合于L1区和L2区之间的结合口袋中，使EGFR二聚化，激活其酪氨酸激酶活性。
3.跨膜域：EGFR的跨膜域包含一个氨基酸序列，通过该序列EGFR定位于细胞膜上。
跨膜域通过调节EGFR在细胞膜上的定位和稳定性，并在EGFR信号传导过程中起到重要作用。
4. 细胞内激酶结构域：EGFR的细胞内酪氨酸激酶结构域包含一个激酶结构和一个耦联结构。
激酶结构通过磷酸化和酪氨酸磷酸酶反应调节下游信号传导分子的活性。
耦联结构通过调节EGFR dimerization并激活其酪氨酸激酶活性。
5.激酶活性：EGFR的激酶活性是其功能的关键所在。
当EGFR与其配体结合后，其酪氨酸激酶结构域会自磷酸化，并磷酸化其他蛋白质，触发一系列信号传导路径，参与细胞增殖、生长和分化等重要生物学过程。
6. 配体：EGFR可与EGF、转换生长因子α（TGF-alpha）等配体结合并激活。
激活后的EGFR会形成二聚体或多聚体，嵌入细胞膜，并通过激酶活性调节多种下游信号通路。
总结起来，EGFR是一种膜受体酪氨酸激酶，由细胞外结构域、跨膜域和细胞内激酶结构域组成。
EGFR的激酶活性在细胞增殖和生长等生物学过程中起着重要作用。
通过与EGF和其他配体结合，EGFR能够激活信号传导通路，并调节各种生物学功能。
ERK与NF-κB信号通路在汗腺发育过程中作用的研究进展
及其受体对胎儿皮肤附件（汗腺、毛囊、皮脂腺等）的形成有 诱导作用，除８周胎儿缺乏典型的皮肤组织学结构、ＦＧＦ－１０ 和Ｂｅｋ蛋白表达外，Ｂｃｌ－２、角蛋白（ＣＫｌ９）、ＦＧＦ－１０、Ｂｅｋ和增 殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在１１周以后的胎儿皮肤中都有阳性
表达‘‘“。 １．２．３肝细胞生长因子（ＨＧＦ） ＨＧＦ是来源于间充质的
ＫＫＫ、ＭＡＰＫＫ、ＭＡＰＫ）构成的蛋白激酶反应链，即上游激活
ＦＧＦ－１０是ＦＧ—
Ｆｓ家族成员，其激活途径也是激活Ｒａｓ－Ｒａｆ－ＭＥＫ—ＥＲＫ信号 途径，最初激活是鸟嘌呤核苷酸交换因子Ｓｏｓ被移至胞膜使 其靠近小Ｇ蛋白Ｒａｓ，促进鸟嘌呤核苷酸在Ｒａｓ上的交换而 使Ｒａｓ成为ＲａｓＧＴＰ，Ｒａｓ被激活，进而引起ＥＲＫ通路的激 活［“］。在已发现２３个成员的脊椎动物ＦＧＦｓ家族中，ＦＧＦ－ １０是新发现且研究较多的一类ＦＧＦ，是促进上皮细胞生长 的特定旁分泌介质［１“。它主要由间充质来源的成纤维细胞 分泌，结合于上皮细胞表面的受体ＦＧＦＲ２ｂ，通过问充质－上 皮细胞相互作用的方式发挥生物学功能，它能有效刺激上
１
顶浆汗腺的分泌部，且顶浆汗腺比外泌汗腺的分泌细胞具有 更强的反应性；外泌汗腺的肌上皮细胞的肌丝则广泛标记有 ＥＧＦ抗体；免疫组织化学染色后电镜下显示顶浆汗腺细胞内 线粒体样小颗粒中ＥＧＦ抗体呈阳性反应。Ｓａｇａ等［５１应用免 疫组织化学方法定位了人类外泌汗腺及璜浆汗腺ＥＧＦ一表皮 生长因子受体（ＥＧＦＲ）系统中活化的ＥＧＦＲ，冰冻切片应用 单克隆抗体特异性显示酪氨酸磷酸化蛋白质被激活，其中含 有激活和未激活的ＥＧＦＲ｝在外分泌汗腺的分泌部，分泌细 胞的胞核抗活化ＥＧＦＲ单克隆抗体染色阳性；在汗腺旋管 腔、直管腔及周围细胞核抗体对活性ＥＧＦＲ染色特异；内层 导管细胞的腔细胞膜和胞浆则存在未激活的ＥＧＦＲ。上述
EGFR、IGF1R、Ki67及Weiss评分对肾上腺皮质肿瘤诊断和预后预测的价值
EGFR、IGF1R、Ki67及Weiss评分对肾上腺皮质肿瘤诊断和预后预测的价值徐烈雨;徐云泽;廉建坡;林登强;沈周俊;祝宇【摘要】目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)及胰岛素样生长因子受体(IGF1R)在肾上腺皮质肿瘤中的表达,分析EGFR、IGF1R、细胞增殖抗原标记物(Ki67)及Weiss评分与肾上腺皮质癌(ACC)总体预后的关系.方法选取ACT标本37例(其中良性腺瘤17例,恶性皮质癌20例),采用免疫组化及蛋白免疫印迹法检测其中EGFR 和IGF1R的表达,并通过生存曲线分析各项指标与恶性组预后的关系.结果 EGFR在恶性组中表达阳性率明显高于良性组(15/20 vs.3/17;P＜0.01),恶性组中IGF1R的表达亦高于良性组(14/20 vs.4/17;P＜0.01),两者在恶性组中的蛋白水平高于良性组;预后分析发现Ki67＞10％的皮质癌患者预后明显差于＜10％的患者(P＜0.01),而＞6分的ACC生存期明显短于Weiss＜6分的患者(P＜0.01).结论EGFR和IGF1R表达有助于鉴别肾上腺肿瘤良恶性,而Ki67指数及Weiss评分可以作为ACC预后预测指标.【期刊名称】《现代泌尿外科杂志》【年(卷),期】2016(021)006【总页数】5页(P414-417,426)【关键词】肾上腺皮质癌;EGFR;IGF1R;Ki67;Weiss评分【作者】徐烈雨;徐云泽;廉建坡;林登强;沈周俊;祝宇【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025【正文语种】中文【中图分类】R736.6目前肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma，ACC)发病机制尚未完全阐明，早期诊断困难[1]；目前主要依靠Weiss评分，其通过细胞形态学、肿瘤结构及侵袭特征来分析鉴别，但敏感度和特异度并不十分理想[2]。
egfr蛋白作用
egfr蛋白作用EGFR（表皮生长因子受体）是一种蛋白质，它在细胞生长和分化中起着重要的作用。
EGFR是一种受体酪氨酸激酶，它可以与表皮生长因子（EGF）结合，并通过激活多个信号传导途径来调节细胞的生理功能。
EGFR蛋白的作用可以从多个方面来讨论。
首先，EGFR在细胞增殖和分化中起着重要的调节作用。
EGF结合到EGFR上时，EGFR会发生构象变化，进而激活其酪氨酸激酶活性。
激活的EGFR会通过磷酸化作用，激活下游的信号传导蛋白，如Ras/MAPK和PI3K/AKT等。
这些信号通路的激活将促进细胞的生长和分化，从而维持组织和器官的正常功能。
EGFR蛋白在细胞迁移和侵袭中也起着重要的作用。
EGFR的激活可以导致细胞骨架的重组和细胞间连接的变化，使细胞具有迁移和侵袭的能力。
此外，EGFR的激活还可以促进细胞外基质的降解，进而促进细胞的浸润和转移。
EGFR蛋白还参与了细胞的存活和凋亡调节。
EGFR的激活可以通过PI3K/AKT信号通路抑制细胞凋亡，从而增加细胞的存活。
而当EGFR的信号过度激活时，会导致细胞的凋亡途径被抑制，从而促进肿瘤的发生和发展。
EGFR蛋白的异常表达和突变与多种疾病的发生和发展密切相关。
例如，EGFR的过度表达与多种肿瘤的发生和预后不良相关。
一些研究表明，EGFR的突变会使其激活过程异常，导致细胞的异常增殖和侵袭。
因此，EGFR成为了一种重要的肿瘤治疗靶点。
EGFR抑制剂已经成为临床上治疗某些肿瘤的重要药物。
这些药物通过抑制EGFR的酪氨酸激酶活性，从而阻断EGFR信号通路的传导。
这些药物可以用于治疗EGFR过度表达或突变的肿瘤，如非小细胞肺癌、结直肠癌等。
EGFR蛋白在细胞生长、分化、迁移、侵袭、存活和凋亡等多个方面发挥着重要的作用。
对于理解其功能和调控机制，以及与疾病的关系具有重要意义。
未来的研究还需要深入探究EGFR蛋白的调控机制，以及开发更有效的药物来治疗与EGFR相关的疾病。
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汗腺三维重构模型中EGFR的作用外泌汗腺的主要功能是泌汗，排汗是人类调节体温的重要方式。
严重大面积深度烧（创）伤愈合后，由于大部分汗腺毁损，机体散热调节体温能力下降，在盛夏季节，患者多感闷热、瘙痒等全身不适，严重影响了患者的身心健康与生活质量[1]。
为了解决汗腺的修复与再生，学者们从不同的途径对汗腺的发育、修复与再生进行了研究，也取得了一定的进展[2, 3]。
我们先前对骨髓间充质干细胞（MSCs）转分化为汗腺细胞的研究显示，MSCs在一定条件下可以转分化汗腺，转分化来的汗腺细胞表达泌汗相关功能蛋白，并且能够促进汗腺功能的修复。
但MSCs在体内的低转分化率（约0.5~1‰）与MSCs促进汗腺功能恢复的结果并不十分吻合，我们进一步研究发现，大鼠足垫汗腺组织BrdU标记滞留细胞明显高于表皮基底层的BrdU标记滞留细胞，这一公认的表皮干细胞位点[4]。
我们推测除了转分化作用，MSCs的旁分泌效应——促进汗腺内源干细胞激活在MSCs 促进汗腺功能恢复中起着重要作用[5]。
既然汗腺细胞具有丰富的干细胞来源，利用汗腺自身的细胞促进汗腺的修复与再生可能会是更直接、有效的途径。
既往对汗腺损伤修复和再生的体外研究，多建立在单层组织细胞培养技术（2D）基础上，单层培养的组织细胞，能够快速分裂增殖，但细胞在体外改变的环境下增生，逐渐丧失了原有的性状，同时调控细胞增殖、代谢、分化和死亡的重要信号丧失，而这些信号负责形成组织特异性结构和功能，因此，在很多情况下，单层细胞组织培养技术所得到的研究结果和体内的情况并不符合[6-8]。
在生命科学和医学科学研究领域，我们更关注的是体外培养的组织细胞能否模拟体内组织细胞的性状。
三维培养模式（3D），是与生理相关的培养模式，在此模式系统中生长的细胞能形成更高级的结构，表现出更生理的表型、相互作用及反应，因此，三维培养模式捕获了建立和维持组织具体形态发生过程中动态和交互信号的关键方面，开辟了一系列新的细胞反应和可能[6-8]。
三维培养细胞技术的先行者——Bissell利用细胞外基质（ECM）——matrigel 成功地构建了乳腺癌上皮细胞的组织培养模型，利用乳腺癌的三维模型，他们在乳腺癌的形成、作用机制和药物治疗方面取得了重大进展[7-10]。
参照Bissell的方法并对其进行改进，我们构建了汗腺细胞的三维培养模型，我们的研究显示：体内/外情况下，汗腺细胞在细胞外基质中可以形成具有腔的单层或复层管状结构；有基底膜形成；表达汗腺的系列标志抗原、泌汗相关的功能蛋白，与细胞功能密切相关的细胞连接蛋白，表明在细胞外基质中重构的汗腺三维结构类似于在体汗腺的结构和功能[11] (图1)。
该模型对于进一步研究汗腺重建的分子机制具有重要的作用。
图1重构汗腺与在体汗腺的对比研究受体酪氨酸激酶（RTK）是最大的一类细胞表面受体，由细胞外结构域、单次跨膜的疏水α螺旋区、含有酪氨酸蛋白激酶活性的细胞内结构域三部分组成。
受体酪氨酸激酶决定各种细胞功能，如细胞增殖、分化、存活、迁移和凋亡[12, 13]。
受体酪氨酸激酶的EGFR家族是正常细胞发育和功能的关键调节子，以及各种病理生理现象的关键作用者[14-22]：①对胎儿皮肤及附属器发育的研究显示：发育早期的胎儿皮肤中, EGFR基因表达较弱，随着胎龄的增长，特别在皮肤汗腺诱导形成阶段，EGFR基因表达量增加最明显；在胎儿皮肤及附属器发育完成后，表达量增加缓慢[14, 15]。
②成熟汗腺的导管部腔细胞膜和胞浆有无活性的EGFR；分泌部细胞和导管部细胞的细胞核有活化的EGFR表达[16, 17]。
③先天性外胚层发育不良综合征（一组外胚层发育缺损的先天性疾患，累及皮肤及其附属）患者的上皮细胞EGFR mRNA和有免疫活性的EGFR蛋白减少[18]。
④通过同源重组灭活EGFR导致小鼠在孕期或出生时死亡，或者仅能存活8~20天。
出生后存活的小鼠存在上皮性器官，如皮肤、肺和胃肠道的发育受损。
⑤EGFR敲除小鼠模型显示，从胚胎植入到出生后的发育存在广泛的发育缺陷，表明EGFR信号通路参与各种发育事件[19]。
⑥鸟类和哺乳类耳蜗的再生性增生需要EGFR信号通路，EGFR信号通路通过下调细胞周期抑制剂p27(Kip1)使细胞重新进入细胞周期[20]。
⑦EGFR的过表达，与汗腺肿瘤及其它上皮性肿瘤密切相关[21, 22]。
本项目的预实验显示：重构的汗腺三维结构表达EGFR；当在汗腺培养基中加入EGFR特异性酪氨酸激酶抑制剂——AG1478，浓度大于0.5μmol/L，汗腺细胞在细胞外基质中不能形成三维结构，呈单个散在细胞，表明EGFR在汗腺三维结构的形成中起着重要作用。
综上所述，我们提出以下假说：EGFR是细胞外基质诱导汗腺细胞重构汗腺三维模型的核心成份。
EGFR活化后，又激活下游的信号通路，引起基因转录，细胞增殖、分化、凋亡和极性，从而重构汗腺三维结构（图2）。
图2 本假说可能的机制：EGFR激活的通路：①通过经典的受体-配体途径；我们前期去除汗腺细胞培养基中的EGF，对汗腺3D的形成并无影响，表明外源性EGF并不是EGFR激活所必须的；但不排除汗腺细胞有自分泌EGF的能力，通过自分泌方式激活EGFR。
②非经典的受体-配体途径（integrin依赖途径）激活，细胞粘附到细胞外基质（ECM）主要由integrin介导，是连接细胞外基质和细胞的主要的细胞，我们前期研究在汗腺培养基中加入integrin功能阻断剂，汗腺同样不能形成3D结构，表明Integrin有可能通过某种方式激活EGFR。
激活的EGFR，激活下游信号通路，引起基因转录，细胞增殖、分化、存活、凋亡，形成汗腺3D结构。
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