临床微生物实验室必须进行规范化革命
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• 2. 闭锁性脓肿：如淋巴脓肿、肺脓肿、肝脓肿、 腹腔脓肿、盆腔脓肿等，对封闭的脓肿常采用穿 刺或引流的的方法采样，应在用药前采集，应注 意脓液的气味、性状、颜色注意厌氧菌存在的可 能。不能及时送检应应用输送培养基。
Βιβλιοθήκη Baidu
便标本采集规范
• 1.采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采集； 沙门菌感染、肠热症应在2周内采；厌氧菌出现症 状即采集。
NCCLS M40 标 准 DIN 58942 标 准
COPAN Amies 运 送 培 养 基
▪多用途运送系统 – 需氧 + 厌氧 ▪低 氧 化 的 环 境 –不会 对标本的微生物造成损害 ▪拭 子 是 深 入 培 养 基 中来保护苛养菌与厌 氧菌 ▪两面是以塑料密封,不透水和 漏气 – 减少污染和维持缺氧 环境
• INVESTIGATION OF BLOOD CULTURES (FOR ORGANISMS OTHER THAN MYCOBACTERIUM SPESIES)
• 参编单位：
• 医学微生物协会, 临床微生物协会 苏格兰微生物协会, IBMS, Welsh微生物协会
• 统一由卫生防护署 （Health Protection Agency）领导
流感嗜血杆菌在三种不同的运送基的存活率
ASM 2004
泌尿标本采集的规范
• 1．采集后的标本应立即送检。 • 2．采集时间：多数药物从尿道排泄，所以
不管用哪种方法都应在用药前采集。应采 集早晨第一次的尿。 • 3 标本管不应含防腐剂和消毒剂。 •
泌尿标本采集的规范
• 1.采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴 和男性的外生殖器包括包皮内，然后用清 水冲洗。
• 但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人 自己完成,所以也是最不容易做好的事情，而且不 知道问题所在之处,造成的后果是:
• 临床医生最不能接受的问题:阳性率低
棉花纤维 +竹 /木 条
抑菌区是因为： 植物分泌出来的： ▪ 脂肪酸； ▪ 树脂； ▪ 福尔马林
氯气，重金属与胶水的影响
美国与欧洲对实验室的新要求
厌培养标本采集规范
• 1.痰标本的厌氧培养标本采集：必须用气管 穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不 能用于厌氧培养。
• 2.尿标本的厌氧培养标本采集：耻骨上膀胱 穿刺获得尿标本可用于厌氧菌培养 3．便标本厌氧培养标本采集： 可用排出的 便做厌氧培养但也应少与空气接触。
CLSI血培养的原则和操作程序推荐 指南 （Proposed）
临床微生物实验室必须进行 规范化革命
卫生部医政司
• 2004年制定中国第一版抗菌药物合理应用指南.国务院副 总理吴仪也做出了重要批示
• 05年卫生部提出星火培训项目:包括临床医生和细菌实验 室
• 06年，耐药菌监测网正式成立包括128家医院。 • 马晓伟提出了“药师管理，合理用药”的指导思想。 • 目前，基层用药尤其是抗生素情况不很乐观。社区医院情
• 2.采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有脓血 和黏液的部位的粪便2-3克，如液状粪便取絮状物 盛于无菌的、密封的、不吸水的、容器内或直接 盛于增菌液或保存液中；对不易获得粪便患者及 幼儿，可用直肠拭子采集后置保存液或输送培养 基中送检。
便标本采集规范
• 3. 注意事项： • ⑴虽然粪便标本本身含很多细菌但也要用
况也十分让人担忧。三级医院规模虽然大，但是数量太少。 不能满足绝大多数看病者的需求。 • 07年完成了培训教材由人民卫生出版社出版, • 08年10月启动培训,在北京.
您可能每天面临以下问题的挑战
• 同时做需氧血培养和厌氧血培养时血液先注入需 氧瓶或厌氧瓶？
• 脓标本有时涂片见到细菌为什么培养阴性？ • 非上班时间需要做厌氧培养怎么办？ • 明显细菌性脑膜炎为什么培养阴性？ • 痰标本分离出4种细菌做哪一种细菌的药敏试验？ • 数量很多的凝固酶阴性葡萄球菌在痰里分离出来
是否要做药敏?
参考CLSI M2 M7 M42 M47从以下 7方面提出建议
• 标本采集和运送的规范； • 培养前标本质量检测规范； • 标本接种规范； • 细菌鉴定基本流程规范； • 细菌药物敏感试验规范； • 实验室质量控制； • 无菌体液细菌报告规范；
标本采集和运送
• 标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关 键
和解释不要弃去初段血，不用抗凝剂冲洗 4.不推荐静脉血直接入瓶 5.不主张换针头入瓶 6.有血的培养瓶不可放入冰箱和冻箱保存
• 2.长期留置导尿管的患者应在更换新管时留 取尿标本。
• 3. 做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。
分泌物采集规范
• 1. 对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、 扁桃体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、 瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶。 应先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的 分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也 可取感染部位下的组织送检。
无菌容器。 • ⑵在患者病情许可的条件下应在用药前采
集标本。 • ⑶应床边接种或置输送培养基送检。 • ⑷厌氧细菌（难辩梭菌）培养的标本应尽
量减少与空气接触。
痰标本的采集和运送
• 1. 标本采集时间：用抗生素前 • 2. 采集方法： • 自然咳痰：必须用请水漱口3次，应包括咽
喉部，立即用力咳出痰，于灭菌容器中或 输送培养基中。 • 支气管镜或支气管毛刷:由医生采集，建议 直接种入输送培养基
• 2006年10月出版：M47-P • 只是协商后的推荐稿（consensus proposed） • 收集来自全球的评论和建议 • 收集截止日期：2007年1月29日 • 下一步要出版投票通过的试行指南
英国HPA 的血培养的研究及操作程序
• 2005-09-08出版：BSOP 37 Issue 5
优质的实验室操作
• 取血合适的时间
– 尽可能抗菌药使用前 – 寒颤和发热初起；心内膜炎（持续性菌血症）例外
• 标本类型和取血方法
– 不要和测血气及血沉的取血同时进行（或在先） – 穿刺点消毒：
以醇类、洗必泰为好
血标本的收集优质的实验室操作
1. 从静脉取血 2. 不宜从静脉导管或静脉留置口取血 3. 若导管设施取血*，必需同时静脉取血，以求对比
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便标本采集规范
• 1.采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采集； 沙门菌感染、肠热症应在2周内采；厌氧菌出现症 状即采集。
NCCLS M40 标 准 DIN 58942 标 准
COPAN Amies 运 送 培 养 基
▪多用途运送系统 – 需氧 + 厌氧 ▪低 氧 化 的 环 境 –不会 对标本的微生物造成损害 ▪拭 子 是 深 入 培 养 基 中来保护苛养菌与厌 氧菌 ▪两面是以塑料密封,不透水和 漏气 – 减少污染和维持缺氧 环境
• INVESTIGATION OF BLOOD CULTURES (FOR ORGANISMS OTHER THAN MYCOBACTERIUM SPESIES)
• 参编单位：
• 医学微生物协会, 临床微生物协会 苏格兰微生物协会, IBMS, Welsh微生物协会
• 统一由卫生防护署 （Health Protection Agency）领导
流感嗜血杆菌在三种不同的运送基的存活率
ASM 2004
泌尿标本采集的规范
• 1．采集后的标本应立即送检。 • 2．采集时间：多数药物从尿道排泄，所以
不管用哪种方法都应在用药前采集。应采 集早晨第一次的尿。 • 3 标本管不应含防腐剂和消毒剂。 •
泌尿标本采集的规范
• 1.采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴 和男性的外生殖器包括包皮内，然后用清 水冲洗。
• 但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人 自己完成,所以也是最不容易做好的事情，而且不 知道问题所在之处,造成的后果是:
• 临床医生最不能接受的问题:阳性率低
棉花纤维 +竹 /木 条
抑菌区是因为： 植物分泌出来的： ▪ 脂肪酸； ▪ 树脂； ▪ 福尔马林
氯气，重金属与胶水的影响
美国与欧洲对实验室的新要求
厌培养标本采集规范
• 1.痰标本的厌氧培养标本采集：必须用气管 穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不 能用于厌氧培养。
• 2.尿标本的厌氧培养标本采集：耻骨上膀胱 穿刺获得尿标本可用于厌氧菌培养 3．便标本厌氧培养标本采集： 可用排出的 便做厌氧培养但也应少与空气接触。
CLSI血培养的原则和操作程序推荐 指南 （Proposed）
临床微生物实验室必须进行 规范化革命
卫生部医政司
• 2004年制定中国第一版抗菌药物合理应用指南.国务院副 总理吴仪也做出了重要批示
• 05年卫生部提出星火培训项目:包括临床医生和细菌实验 室
• 06年，耐药菌监测网正式成立包括128家医院。 • 马晓伟提出了“药师管理，合理用药”的指导思想。 • 目前，基层用药尤其是抗生素情况不很乐观。社区医院情
• 2.采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有脓血 和黏液的部位的粪便2-3克，如液状粪便取絮状物 盛于无菌的、密封的、不吸水的、容器内或直接 盛于增菌液或保存液中；对不易获得粪便患者及 幼儿，可用直肠拭子采集后置保存液或输送培养 基中送检。
便标本采集规范
• 3. 注意事项： • ⑴虽然粪便标本本身含很多细菌但也要用
况也十分让人担忧。三级医院规模虽然大，但是数量太少。 不能满足绝大多数看病者的需求。 • 07年完成了培训教材由人民卫生出版社出版, • 08年10月启动培训,在北京.
您可能每天面临以下问题的挑战
• 同时做需氧血培养和厌氧血培养时血液先注入需 氧瓶或厌氧瓶？
• 脓标本有时涂片见到细菌为什么培养阴性？ • 非上班时间需要做厌氧培养怎么办？ • 明显细菌性脑膜炎为什么培养阴性？ • 痰标本分离出4种细菌做哪一种细菌的药敏试验？ • 数量很多的凝固酶阴性葡萄球菌在痰里分离出来
是否要做药敏?
参考CLSI M2 M7 M42 M47从以下 7方面提出建议
• 标本采集和运送的规范； • 培养前标本质量检测规范； • 标本接种规范； • 细菌鉴定基本流程规范； • 细菌药物敏感试验规范； • 实验室质量控制； • 无菌体液细菌报告规范；
标本采集和运送
• 标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关 键
和解释不要弃去初段血，不用抗凝剂冲洗 4.不推荐静脉血直接入瓶 5.不主张换针头入瓶 6.有血的培养瓶不可放入冰箱和冻箱保存
• 2.长期留置导尿管的患者应在更换新管时留 取尿标本。
• 3. 做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。
分泌物采集规范
• 1. 对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、 扁桃体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、 瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶。 应先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的 分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也 可取感染部位下的组织送检。
无菌容器。 • ⑵在患者病情许可的条件下应在用药前采
集标本。 • ⑶应床边接种或置输送培养基送检。 • ⑷厌氧细菌（难辩梭菌）培养的标本应尽
量减少与空气接触。
痰标本的采集和运送
• 1. 标本采集时间：用抗生素前 • 2. 采集方法： • 自然咳痰：必须用请水漱口3次，应包括咽
喉部，立即用力咳出痰，于灭菌容器中或 输送培养基中。 • 支气管镜或支气管毛刷:由医生采集，建议 直接种入输送培养基
• 2006年10月出版：M47-P • 只是协商后的推荐稿（consensus proposed） • 收集来自全球的评论和建议 • 收集截止日期：2007年1月29日 • 下一步要出版投票通过的试行指南
英国HPA 的血培养的研究及操作程序
• 2005-09-08出版：BSOP 37 Issue 5
优质的实验室操作
• 取血合适的时间
– 尽可能抗菌药使用前 – 寒颤和发热初起；心内膜炎（持续性菌血症）例外
• 标本类型和取血方法
– 不要和测血气及血沉的取血同时进行（或在先） – 穿刺点消毒：
以醇类、洗必泰为好
血标本的收集优质的实验室操作
1. 从静脉取血 2. 不宜从静脉导管或静脉留置口取血 3. 若导管设施取血*，必需同时静脉取血，以求对比