水稻内生放线菌类群及其对宿主病原菌的抗性研究
药用植物内生菌促生与生防作用研究进展
药用植物内生菌促生与生防作用研究进展作者：徐源清朱越韩佳妮徐桂雯黄轶勉周芳美来源：《农业灾害研究》2024年第02期摘要：我国幅员辽阔且气候多样，药用植物资源丰富的同时，蕴含着多样的内生菌资源。
药用植物内生菌和其宿主植物作为一个共生体，在长期协同进化的过程中，已经形成互惠共存的关系。
在药用植物生长过程中，内生菌既能通过促进植物对氮、磷、钾、铁等无机营养元素的吸收利用和生长激素的合成直接促进药用植物的生长，也能通过生物防治功能间接促进药用植物的生长。
综述了近年来药用植物内生菌促生与生防作用的研究及应用，并对药用植物内生菌的发展趋势进行了展望。
关键词：药用植物；内生菌；促生作用；生物防治中图分类号：S567 文献标志码：B 文章编号：2095–3305（2024）02–00-03植物内生菌是指其生活史的部分或全部阶段生活于健康植物表皮细胞层间隙或组织器官内部的一类微生物，不易受环境条件的影响，可以在宿主植物体内独立地分裂繁殖和传递，在与宿主植物长期协同进化过程中逐渐形成互惠共存的关系。
研究表明，从草本植物、木本植物到藤本植物，这些植物体的根、茎、叶、花、果实等组织器官都普遍存在内生菌，而我国药用植物资源极其丰富，内生菌资源更为多样[1]。
此外，药用植物内生菌的价值极高，在医药、农业等领域可以发挥重要作用。
综述了药用植物内生菌如何发挥促生作用，帮助宿主植物获取生长所需的资源和调节宿主植物生长发育及产生生物防治的效果，为解决某些药用植物繁殖率低、生长困难，致使资源日益枯竭和缓解其他珍稀药用植物生长困境及其他常见农作物供应不足等问题提供理论指导。
1 药用植物内生菌的种类随着对植物内生菌的深入研究，人们对内生菌资源的多样性及价值性认知不断提高，开发和利用不断广泛，这为促植物生长和植物疾病生物防治工作提供了新思路。
近年来，药用植物内生菌也越来越受到国内外研究者的关注。
研究表明，药用植物内生菌种类繁多，主要包括内生细菌、真菌和放线菌，在各种药用植物中分布广泛[2]。
药用植物内生真菌研究现状和发展趋势
药用植物内生真菌研究现状和发展趋势一、本文概述药用植物内生真菌是一类在植物组织内部定居，而不引起明显病害的真菌。
这些真菌与宿主植物之间形成了复杂而微妙的共生关系，对药用植物的生长发育和次生代谢产物的产生具有重要影响。
近年来，随着生物技术的发展和人们对药用植物资源的深入开发利用，药用植物内生真菌的研究逐渐成为一个热点领域。
本文旨在综述药用植物内生真菌的研究现状，包括内生真菌的多样性、生物活性物质的发现与应用、以及内生真菌与宿主植物的相互作用机制等方面，并探讨其未来的发展趋势。
通过对药用植物内生真菌的深入研究，我们可以更好地理解和利用这一自然资源，为新药创制和农业可持续发展提供新的思路和方法。
二、药用植物内生真菌的多样性药用植物内生真菌的多样性表现在多个层面，包括种类多样性、生态多样性和功能多样性。
在种类多样性方面，药用植物的内生真菌涵盖了多个属和种，这些真菌与宿主植物之间形成了复杂而稳定的共生关系。
例如，某些药用植物中的内生真菌可能属于子囊菌门、担子菌门或半知菌门等多个门类。
这些真菌种类的多样性不仅反映了植物与微生物之间的相互作用，也为开发新型药物和生物活性物质提供了丰富的资源库。
在生态多样性方面，药用植物内生真菌在植物的不同组织、器官和生长阶段中分布广泛，它们可能存在于叶片、茎干、根部甚至花器中。
这些内生真菌对宿主植物的生长和发育具有重要的促进作用，如提高植物对逆境的抵抗力、促进植物生长等。
不同地理分布的药用植物中的内生真菌也具有显著的生态差异，这种生态多样性为研究和利用内生真菌提供了丰富的选择。
功能多样性是药用植物内生真菌多样性的另一个重要方面。
许多研究表明，药用植物内生真菌具有产生多种生物活性物质的能力，如次生代谢产物、酶和抗生素等。
这些物质在植物防御机制、抗病虫害以及药用价值等方面发挥着重要作用。
一些内生真菌还具有合成特殊代谢产物的潜力，这些代谢产物在医药、农业和生物技术等领域具有广阔的应用前景。
关于植物内生菌的研究
常少 ， 甚 至没有害处 ， 它们和宿主植物之 间形成共生关 系。内生放线菌 是一 类新的生防微生物资源 ， 其 主要生活在健康 的植物体 内， 产生系列
活性 物质并和宿主植物共 同生活 ， 是土壤中重要的一种原核生 。 内生 细
经过相关研究表 明， 从植物中提取出来的内生菌可以产 生许多活性
行 固氮 。 通过对 内生菌 的不断研究 ， 有人发现在甘蔗的根 、 叶和茎 之中 有许多的新型 内生 固氮菌 ， 该种 内生菌拥有较强 的抗酸能力 ， 它是重 氮
一
、
植物 内生菌概述
（ 一） 有关植物 内生 茵的概念及其种 类 对 于植 物内生菌的概念有许多不 同的定 义 ， 其 中被公认 的定 义是指 那些 在其生 活过程 中的一 定阶段或 者全部 阶段 生活于活体植 物 的组织 内部 的微生物 ， 这些微生物并不会 对宿主植物产生显著 的病害 。 植 物内
２ ０ １ ４年 第 ９ 期
医疗 与电子技术
关 于植 物 内生 菌 的研 究
■李金旭
近年来 ，有关植物 内生茵的研 究 已经成为我 国微生物学领 域研究的 热点， 由于植物内生菌具有较高的潜在可开发 利用价值 ， 使得其越来越受
五种植 物激素 ， 它们分别是吲哚 乙酸 、 玉米素 、 脱落酸 、 赤霉素和玉米
核苷 ， 这些激素能促进兰花 的生长 。 沈德龙等人研究 出水稻 的内生成 团
到人们 的重视 。植物 内生菌作 为植物微生 态系统 中的重要 组成部 分，在 其长 时间的协 同进化 中，和植物等进化 为了相互依赖的关 系，其具有 产
生活性物质 的功能 ，因此可以用来作 为生物 的防治 资源和外源基 因的载 体及新 药的原料。本文针对植物 内生茵进行 了分析 ，重点突 出了植物 内
放线菌资源及其活性物质研究概述
放线菌资源及其活性物质研究概述杨勇;李昆太【摘要】放线菌是一类(G+C)含量高的革兰氏阳性细菌,以丰富的次级代谢产物出名,在医药、农林业等方面具有重要利用价值.简要概述了放线菌的资源分布、分类方法及其代谢产物生物学功能,讨论了目前放线菌开发领域存在的问题及解决办法,以期为放线菌的开发应用研究提供参考.【期刊名称】《生物灾害科学》【年(卷),期】2019(042)001【总页数】8页(P7-14)【关键词】放线菌;次级代谢产物;资源分布;分类方法;生物学功能【作者】杨勇;李昆太【作者单位】江西农业大学生物科学与工程学院/江西省农业微生物资源开发与利用工程实验室,江西南昌 330045;江西农业大学生物科学与工程学院/江西省农业微生物资源开发与利用工程实验室,江西南昌 330045【正文语种】中文【中图分类】S476.1我国是一个人口资源众多的农业大国，农业发展具有十分重要的经济基础地位，关系着国计民生与社会稳定[1]。
然而，随着植物病害的频发，农作物生长受阻、产量和品质降低，再加上人口资源不断增加，可耕地面积急剧减少，导致全世界粮食的供给问题日益突出。
植物病害主要包括细菌、真菌和病毒性病害3种，其中真菌性病害占主导地位[2]，是影响世界农作物产量的重要因素。
随着工业科学的进步，化学农药对农业生产带来巨大经济效益的同时，却也导致了诸多问题，如：环境污染、人类健康日益恶化、病虫耐药性增强和破坏生态平衡等。
这些危害的恶性循环，不仅增加了农业生产成本，破坏环境生态系统，还给病虫害防治带来了极大的困难。
微生物农药是指利用微生物及其代谢物和基因产物作为防治病虫草等有害生物、促进植物生长的生物制剂，利用其进行植物病害生防具有高效、无污染、无残留等优点，且不易产生抗性，是生物防治的重要手段[3]。
放线菌是一类（G+C）含量高的生防菌，广泛分布于自然界中，具有复杂的次级代谢系统，能产生诸多结构新颖、生物活性显著的代谢产物，是新医药和新农药研制的源头，在植物病害生防中具有重要意义。
内生菌的分离方法及其次级代谢产物研究
内生菌的分离方法及其次级代谢产物研究张鑫;孟国庆;刘新利【摘要】植物内生菌是一个多样性十分丰富的微生物类群,分布于没有外在感染症状的健康植物组织内.随着研究领域的不断拓宽和研究方法的不断深入,越来越多的植物内生菌被分离出来,并从这些内生菌的代谢产物中发现了很多重要的生物活性物质.本文综述了不同种类的内生菌的分布和分离方法,以及植物内生菌次级代谢产物的生理作用及其在抗菌、抗虫、抗肿瘤等方面的应用研究进展.【期刊名称】《山东轻工业学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2011(025)002【总页数】5页(P23-26,34)【关键词】植物内生菌;次级代谢产物;生物活性物质;抗肿瘤;抗菌活性【作者】张鑫;孟国庆;刘新利【作者单位】山东轻工业学院山东省微生物工程重点实验室,山东济南250353;山东轻工业学院山东省微生物工程重点实验室,山东济南250353;山东轻工业学院山东省微生物工程重点实验室,山东济南250353【正文语种】中文【中图分类】Q93植物内生菌是一个多样性十分丰富的微生物类群，分布于没有外在感染症状的健康植物组织内，并与宿主植物协同进化，其存在和作用长期以来一直为人们所忽视。
最初内生菌(Endophyte)的概念是针对病原菌(Pathogen)提出来的［1］。
1833年，人们发现从小麦叶片中可长一种性质不明的锈状物，将它形象地称为Outgrows。
经进一步研究，到1846年Leveille确定，这种Outgrows是真菌的一种结构，即现在所说的锈菌夏孢子，这是最早的植物内生菌报道。
而目前，植物内生菌(Endophytes)是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物各种组织和器官内部或细胞间隙的真菌或细菌，被感染的宿主植物(至少是暂时)不表现出外在症状［2］。
内生菌一般会产生一些在微生物－宿主关系中发挥作用的生物活性物质(如抗细菌、抗真菌、抗病毒物质等)，这些物质在医药、农业、工业领域越来越受到人们的关注。
植物内生菌研究新进展
植物内生菌研究新进展一、本文概述植物内生菌，作为一种独特的微生物群体，它们在植物内部生存并与其建立紧密的联系。
这些微生物在植物的生长、发育和抗逆性等方面起着重要作用。
近年来，随着分子生物学和基因组学等技术的发展，植物内生菌的研究取得了显著的进展。
本文旨在综述这些研究进展，重点关注植物内生菌的多样性、生态功能、应用前景及其与宿主植物的相互作用机制。
通过总结和分析近年来的相关文献，本文旨在为读者提供关于植物内生菌研究的新视角和深入理解，为推动该领域的进一步发展提供参考。
二、植物内生菌的生态学特性植物内生菌，即生活在植物组织内部而不引起明显病害的微生物，它们与宿主植物形成了复杂而微妙的共生关系。
这种共生关系的生态学特性表现在多个方面，包括内生菌的多样性、空间分布、种群动态以及与宿主植物的相互作用等。
植物内生菌的多样性丰富，包括细菌、真菌、放线菌等多个类群。
这些内生菌的种类和数量因植物种类、生长环境、生长阶段等因素而异。
例如，某些植物可能携带大量的内生细菌，而其他植物则可能以内生真菌为主。
这种多样性不仅反映了植物内生菌的适应性，也为其在植物生态系统中发挥重要功能提供了可能。
植物内生菌在植物体内的空间分布也具有一定的规律性。
一般来说，内生菌更倾向于定殖在植物的营养组织，如叶片、茎秆等，而不是生殖组织，如花、果实等。
这种空间分布特点与内生菌的生理功能和代谢特性有关，也反映了其与宿主植物的共生策略。
再者，植物内生菌的种群动态受到多种因素的影响，包括宿主植物的生理状态、环境条件、微生物间的相互作用等。
在植物的不同生长阶段，内生菌的种群结构和数量也会发生变化。
例如，在植物幼苗期，内生菌的种类和数量可能较少，而随着植物的生长和发育，内生菌的多样性和数量逐渐增加。
植物内生菌与宿主植物之间的相互作用复杂而多样。
一方面，内生菌可以通过产生抗生素、竞争营养等方式抑制病原菌的生长和繁殖，从而增强宿主植物的抗病性。
另一方面，内生菌也可以促进宿主植物的生长和发育，提高其对环境胁迫的适应能力。
水稻细菌性病害发生特点及防治方法
水稻细菌性病害是指由于病原菌侵染而导致的一种疾病。
最近几年，因为耕作制度、品种组合、栽培管理以及天气情况的改变，导致了以条斑病和基腐病为主要特征的水稻细菌性病害在金寨县许多地区都有发生，而且发病范围在逐年增大，病情也在逐渐加重，此病害具有暴发性强、流行快、一旦发生难以控制等特点，对金寨县的水稻生产和粮食安全造成了极大的威胁。
因而，深入认识和掌握该病害的发生规律和危害特征，并制定相应的防治措施显得十分必要。
一、细菌性病害发病环境病原菌具有侵染性，其传播和侵染均与水分、温度有关，主要指由于病原微生物引起的软腐病、溃疡病、青枯病等。
侵染植物的菌株均为杆状，多数只有一至几条鞭毛，能从天然的孔隙及创伤处进入，并首先破坏宿主的细胞，然后吸收宿主的营养物质进行繁殖。
在农田里，病原菌通过流水、雨水和昆虫传播。
暴雨可造成大量的宿主裂口，为病原菌的入侵和疾病的扩散提供了有利的条件。
病原菌主要寄生在病残体、种子和土壤中，在高温高湿的环境中极易发生病害。
二、水稻细菌性条斑病1、发病症状在发病早期，患病部位呈现深绿色的水渍状病斑，随后慢慢变成黄棕色条斑，并有黄色的菌脓，在外界空气的流动及温度的影响下，慢慢变成干燥的胶状小粒。
随着病原菌的侵染，病原菌引起的稻叶卷曲、病原菌枯萎、不能抽穗，或即使抽穗，因水稻叶片受损，不能充分进行光合作用，导致籽粒不够充实、稻米品质下降。
一般病害发生后，产量损失达15%～20%，最严重的可达40%～60%。
细菌性条斑病是一种常见的细菌性条斑病，其病原是稻生黄单胞杆菌稻细条斑病变种，病菌体分单生和双链两种，经培养后呈球形菌落，表面光滑光亮。
条斑病病原菌可在受病害的水稻籽粒中越冬，是重要的病原菌，其在籽粒、病稻草也可被携带，并可远距离扩散。
该病害主要危害水稻叶片、叶鞘部，还可随降水、降雨等水流传播病菌，直接危害水稻，并从水稻的气孔、伤口等部位侵入，引起病害。
2、发病条件在温度26～30℃，相对湿度均大于85%的条件下，水稻细菌性条斑病的发生几率较高，特别是多雨少光照条件下。
放线菌769对水稻抗稻瘟病的诱导抗性研究的开题报告
放线菌769对水稻抗稻瘟病的诱导抗性研究的开题报告一、研究背景：水稻是我国重要的农作物之一，也是全球粮食中最重要的作物之一。
在生长过程中，水稻常常遭受各种病害的侵袭，其中稻瘟病是最为严重的一种，造成了较为严重的经济损失。
因此，研究水稻对稻瘟病的抗性机制，对于提高水稻的产量和质量具有重要意义。
放线菌是一种微生物，可以抑制植物病原菌的生长和繁殖，具有生物防治作用。
放线菌769是一种特殊的放线菌，可以有效抑制稻瘟病的侵扰，并且对水稻植株健康无害。
因此，利用放线菌769诱导水稻抗稻瘟病的研究将有可能为有效控制稻瘟病提供新的治理方法。
二、研究目的：本研究旨在对放线菌769对水稻诱导抗稻瘟病的效果进行评估，并探究其诱导抗性的机制，以期为有效控制稻瘟病提供新的思路和方法。
三、研究内容和方法：本研究拟通过以下步骤进行：1. 空心菌液混合法制备放线菌769发酵液；2. 选取多个水稻品种，分别在含有放线菌769发酵液的培养基中进行处理，观察稻瘟病的病情变化，并测定其诱导抗性的程度；3. 通过RNA测序技术分析受到放线菌769处理的水稻品种在分子水平的抗病机制，筛选相关的差异表达基因并对其进行功能分析；4. 对诱导抗病效果显著的水稻品种进行GUS荧光转基因实验，验证抗病相关基因的功能。
四、预期成果：本研究预计可以获得以下成果：1. 确定放线菌769对水稻抗稻瘟病的诱导效果；2. 探究放线菌769诱导水稻抗稻瘟病的分子机制；3. 筛选出参与水稻抗稻瘟病的差异表达基因，并进行功能分析。
五、研究意义：本研究的结果有助于深入了解水稻对稻瘟病的抗性机制，同时也为开展水稻的抗病育种提供有益的思路和参考。
此外，利用放线菌769诱导水稻抗稻瘟病的方式对生产具有现实意义，可以提高水稻的产量和质量，减少农药使用量，保护环境。
水稻内生放线菌降解酶活性的分析
内生放 线菌 能产生 多种 多样 的酶 以适 应 其 独 特 的生 活环 境 ，ｔ ｆｄ从 薯 蓣 块茎 中分 离 的 内生 拟 诺 卡 Ｓａ ｏ ｍ ｒ 氏菌 （ ｏ ｒｉ ｓ ｐ ） Ｎ ｃ ｄｏ ｉｓ．产生 的 ａ ａ ｐｓ 一淀 粉酶在 ７ ￣条件 下活性达 到最 大值 … ； 玉米 叶 中分离 的内生 链孢 囊 菌 ０（ ３ 从 （ｔｐｏ ｏａｇｕ ｓ．产生 最适 温度 为 ７ ￣的葡 萄糖淀 粉酶 ．ｒｏ ｓａａ研究 表 明 ： Ｓｅｔｐｒｎｉ ｐ ） ｒ ｓ ｍ ０（ ３ Ｔｅ —Ｅｔｄ ｊ ｒ 内生放线 菌可 在植 物 组 织 中产 生抗 生素 、 溶解酶 或铁 载体 等拮 抗物质 ． ａ ｉ从 悬 钩子 的根上 分 离 的一株 放 线菌 可产 生 葡萄 糖 】Ｖｌｓ ｏ 苷酶 ， 接种至悬 钩子 幼苗可 降低 根部 发病 率 口． ］ 内生放线 菌与植 物 的关 系 也很 复杂 ， 在弗 兰 克 氏菌 中 ， 多数 菌 株 可 以耐 受 Ｐ２ ６～８ｍ ｏ Ｌ 、 一 大 ｂ （ ｍ ｌ ）ｃ ／
１１３ 培养基 ： 列培养 基 均 为 １１２２ ｉ ．． 下 ２￣ ，０ｍｎ灭菌 的培 养基 ． （ （） １纤维 素酶 活性 检测 培 养基
（ Ｈ ）ｓ ４ ． ， Ｈ Ｐ ４ ． ， ￣Ｉ ０ ・ Ｎ ４ Ｏ ０ｇ Ｋ ２ ０ ０ｇ Ｎ － ４ ２ ４ Ｉ Ｐ
试验地 的水 稻 中分 离 、 定 的 内生 放线 菌 ． 鉴
收 稿 日期 － ０ —０ —２ ＇ ６ ７ ９ ２ ０
生防菌对土壤微生物群落结构影响的研究进展
引用格式：涂 镜，魏宝阳，付 威，等. 生防菌对土壤微生物群落结构影响的研究进展[J]. 湖南农业科学，2023（6）：96-100. DOI:DOI:10.16498/ki.hnnykx.2023.006.019在农业生产过程中，植物病害是影响作物产量和质量的主要因素，全世界每年病害导致的作物损失约占作物产量的25%[1]。
如何防治作物病害、提高生产效益在农业生产领域备受关注。
目前，防治植物病害的方法主要可划分为物理、化学、生物和农艺4大类。
其中，化学防治是传统、常用的手段，具有成本低、见效快、杀菌谱广、操作简便等优点[2]，但化学药剂的滥用带来了土壤和大气环境污染、生态平衡破坏、药物残留等一系列问题，长期大量施用化学药剂不利于农业的可持续发展，目前许多国家和地区采取了限制使用化学制剂的措施以确保食品安生防菌对土壤微生物群落结构影响的研究进展 涂 镜1,2，魏宝阳1，付 威3，莫长安4，曾粮斌2（1. 湖南农业大学生物科学技术学院，湖南长沙 410128；2. 中国农业科学院麻类研究所，湖南长沙 410205；3. 岳阳县植保植检站，湖南岳阳 414100；4. 桃江县植保植检站，湖南桃江 413400）摘 要：生物防治是近年来新兴的植物病害防控技术，具有绿色环保、安全高效的特点，能更好地实现农业可持续发展以及社会、经济和生态效益的统一，已经成为农业生物工程领域研究的重点。
生防菌对植物的防病促生作用与其对根际土壤微生物群落结构的调整作用密切相关。
主要综述了生防细菌、生防真菌以及生防放线菌对土壤微生物群落结构影响的研究进展，以期为生防菌的合理利用提供参考。
总体来看，生防菌施入后可以在土壤中定殖，增加作物根际土壤土著微生物中有益（促进植物生长、减少植物病害发生）菌（属）的数量，或减少有害（导致植物病害发生、抑制植物生长）菌（属）的数量，改变土壤微生物多样性、丰富度以及土壤中酶的活性、有机碳含量，从而改善根际土壤微生物群落结构，达到缓解作物连作障碍、降低作物发病率、提高作物品质、增加作物产量的效果。
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见报导。本文对水稻内生放线菌的类群分布及其在 植物体内定植情况进行了研究， 并对所分离到的内 生放线菌对几种水稻病原菌的颉抗活性进行了检测 研究。
基金项目： 国家自然科学基金 （1$12$$1$） ； 广东省自然科学基金 （$%%%#!）
" 通讯作者。 3.(：456#$64!%%$#14；789：456#$64!$15#%"；:6;8<(：(==>=(? >=@ ) .A@ ) +B
生放线菌最早主要集中于非豆科植物内生弗兰克氏 菌 （ /#012,0 ） 固氮作用的研究上， 后来 G8/A< 等 从多 种植 物 根 内 部 分 离 到 放 线 菌， 大 多 数 为 链 霉 菌， 3/.R’6:=,/8A8, 等 研究发现内生放线菌可在植物组 织中 产 生 抗 生 素、 溶 解 酶 或 铁 载 体 等 拮 抗 物 质。 0<=I<;@/8 等 从月桂树上分离到一株具有抗菌活 ［ ］ 性的链霉菌， 能够颉抗五种病原真菌， GI<;<>@ 等 ! 在杜鹃花中分离到链霉菌， 用其接种杜鹃花的组培 苗后， 可增强对多种病害的抗病性。最近澳大利亚 E’’;-= 研究小组从小麦根部分离的 5$ 多株放线菌 中筛选到防治小麦全蚀病的菌株， 在温室试验中可 使小麦全蚀病的危害降低 2$O ， 但其它农作物内 生菌用来防治宿主病害的研究目前少见报道。
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! 番禺、 五山水稻中内生放线菌的类群及其分离频率 （ "）
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水稻内生放线菌类群及其对宿主病原菌的抗性研究
田新莉% 曹理想% 杨国武% 黄炳超# 周世宁%"
（% 广州中山大学 生命科学学院生物防治国家重点实验室 （ 广东省农业科学院植物保护研究所
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广州
"%$#2"）
广州
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摘
要： 采用常规方法对广东省番禺和五山两地种植的水稻内生放线菌进行分离、 鉴定和分析， 结果表明水稻内生
放线菌多属于链霉菌属 （ !"#$%"&’()$* ） ， 其中灰褐类群链霉菌 （ ! ) +#,*$&-.*).* ） 的分离频率最高为 15N%O P 5CO ， 是水 稻植株中的优势内生放线菌类群。研究了内生放线菌在水稻植株各器官中的分布， 结果表明根中内生放线菌的多 样性高于茎叶。番禺地区种植的水稻中分离出的内生放线菌种类较多。从感病品种及生长不良水稻植株中分离 出的内生放线菌种类比较丰富。通过回接分离试验及利用扫描电镜观察内生菌在植物体内分布发现， 水稻优势内 生放线菌回接无菌组培苗后， 不仅能够定殖在水稻植株的根表和根内部， 而且存在于茎杆和叶片中。通过平板颉 抗及代谢物的活性测定试验， 发现所分离的内生放线菌 "$O 对水稻某些病原菌有颉抗活性， 其中灰褐类群链霉菌 成为所分离的水稻内生放线菌类群中具有颉抗活性的最大群体。 的比例达到 ""N!O ， 关键词： 水稻，内生放线菌，体内定殖，颉抗活性 中图分类号： QC1 文献标识码： K 文章编号： $$$%65#$C（#$$!）$"6$5!%6$5
作者简介： 田新莉 （%C2! D ） ， 女， 新疆人， 博士研究生， 研究方向为微生物生化与分子遗传学。 :6;8<(：,69(? %51 ) +’; 其他作者： 陈 明% ， 肖汉翔# 收稿日期： #$$16%#6%C，修回日期： #$$!6$!6#C
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材料和方法
培养 ! 周后无菌落长出。同时取 $" 株已分离的代 表性放线菌菌株， 分别经表面消毒过程处理后接种 没有观察到生长。表 到 ’ 平板上， !&3 培养 ! 周后， 明经过表面消毒过程， 样品表面附生菌的影响已经 消除， 分离的菌株来自于样品内部。 #"# 内生放线菌的类群鉴定和分析 #"#"! 类群鉴定： 从五山种植的 5 个水稻品种中共 大多数属于链霉菌属 分离出 内 生 放 线 菌 !+5 株， （ !"#$%"&’()$* 9: ; ） ， 进一步鉴定为以下 # 个类群： 灰 、 吸水类群 （ /(+#&*)&%,).* ） 、 灰红 褐类群 （ +#,*$&-.*).* ） 紫类群 （ +#,*$&#.0#&1,&23)$.* ） 、 烬灰类群 （ ),4$#$.* ） 、 白 、 金色类群 （ 3.#$.* ） 。从番禺采集 孢类群 （ 320&*%&#.* ） （根 的一个水稻品种中共分离到内生放线菌 $-$ 株， 内分离到 $$" 株， 茎叶中 ,$ 株） ，种类较为丰富， 经 ， 对链霉菌属 鉴定多数属于链霉菌属 （ !"#$%"&’()$* ） 吸水类群 的放线菌进一步鉴定， 归为以下 - 个类群： （ /(+#&*)&%,).* ） 、 灰褐类群 （ +#,*$&-.*).* ） 、 金色类群 （ 3.#$.* ） 、 球孢类群 （ +2&0,*%&#.* ） 、 灰红紫类群 （ +#,*$5 、 白孢类群 （ 320&*%&#.* ） 、 粉红孢类群 &#.0#&1,&23)$.*） （ #&*$&*%&#.* ） 、 烬灰类群 （ ),4$#$.* ） 、 青色类群 （ +23.5 （表 $） 。 ).* ） 在 灰褐类群的链霉菌 （ <=>0: >? ! ; +#,*$&-.*).* ） 五山和番禺、 及不同水稻品种中均被分离到， 分离频 是水稻植株中分离频率 率为 %,@!A 8 +"@$A 不等， 最高的放线菌类群， 因而是水稻中的优势放线菌类 群， 其在水稻生长发育过程中的作用值得重视和进 一步研究。吸水类群链霉菌 （<=>0: >? ! ; /(+#&*)&%,5 分离频率也较高， 但在金凤占品种中未分离到。 ).* ） #"#"# 品种间差异： 在五山种植的不同水稻品种 中， 齐粒思苗与华粳粘是相对比较抗病的品种， 华杂 金凤占是广西品种， 在广东生长不 %& 是感病品种， 适宜， 生长性状较差。从齐粒思苗与华粳粘两个抗 性较好的品种中分离出内生放线菌的种类较少 （仅 ， 从感病品种华杂 %& 和生长性状较差的 % 个类群） 金凤占品种上分离出的内生放线菌种类较多 （# 个 。 类群以上） （表 $） #"#"$ 同品种不同种植区差异： 在两地种植的同一 水稻品种 （齐粒思苗） 植株体内分离到内生放线菌的
［%# P %!］ 固氮细菌方面 ， 对内生放线菌的研究目前尚未
、 提高植物的生
［2］
、 抗逆抗虫
［"， 5］
、 具有除草剂活性 等。发挥
这些作用是由于内生菌在植物体内繁殖和生长， 并 在体内产生有生物活性的次生代谢产物。因此， 内 生菌可能成为生物防治中有潜力的生物因子，在生
［4］ 态农业和生物农药研制方面具有重要的用途 。内
不同的植物体内都存在大量的内生菌， 迄今的 研究表明， 植物内生菌与宿主发生联系时， 对宿主有 以下影响： 可增强宿主的抗病性 产力
［1， !］ ［%， #］
水稻是世界上最重要的农作物之一， 包括大多 数发展中国家在内约占 !$O 的人口， 其主要营养来 源于 水 稻。 但 在 水 稻 生 产 中， 由于受稻瘟病菌 （ 30+10%4&#"40 &#(50$ ） 、 纹枯病菌 （ 64,5&)"&1,0 *&701, ） 、 白叶枯病菌 （ 801"4&’&10* &#(50$ ST ) &#(50$ ） 、 水稻恶 等病害的危害影响， 严 苗病菌 （ /.*0#,.’ ’&1,7,-&#’$ ） 重影响了水稻的高产、 稳产， 从而直接威胁到人类的 生产发展。当前， 生产上这些病害的控制仍然是使 用化学农药。大量使用化学农药会破坏生态平衡， 造成农产品农药污染， 不但损害了人和动物的健康， 而且引起土壤微生物的种群数量减少， 土壤肥力降 低； 另一方面引发病原菌产生耐药性， 令防治效果难 度加大。因此， 我们迫切需要使用对自然生态无危 害的生物防治方法来减少化学农药使用量。由于定 植于植物内部， 所以水稻内生菌是理想的候选生物 防治菌。国内外对水稻内生菌的研究多集中在内生