脑组织
《脑组织铁沉积神经变性病诊治专家共识》要点
《脑组织铁沉积神经变性病诊治专家共识》要点脑组织铁沉积神经变性病（neurodegeneration with brain iron accumulation，NBIA）是一组由基因突变导致的以锥体外系症状为主，伴有其他复杂临床症状，在脑组织特定部位可见异常铁沉积的罕见的神经遗传变性疾病，发病率在（1～3）/1 000 000。
尽管NBIA疾病谱系具有很高的临床和遗传异质性，但此类疾病在影像学尤其是磁共振（MRI）上因铁离子异常沉积而具有特征性的异常征象。
分子遗传学检测致病基因可以确诊。
NBIA疾病谱系中10个亚型已经明确了致病基因。
各亚型的命名推荐采用“突变蛋白相关性神经变性病”的模式来统一命名。
铁属于顺磁性物质，异常沉积在MRI上有特征性的表现。
在常规序列T2加权像及磁敏感系列，铁沉积部位显示低信号，在T1像铁沉积显示等信号。
常见铁沉积部位为苍白球、黑质、红核、丘脑等脑深部灰质核团。
但不是所有的NBIA疾病都会在MRI上显示铁沉积，也不是任何显示铁沉积的病例都属于NBIA疾病谱系。
一、NBIA疾病谱系（一）泛酸激酶相关性神经变性病（PKAN）根据发病年龄，PKAN可分为早发典型PKAN和晚发不典型PKAN。
1. 典型PKAN：10岁以前发病，90%病例在3～6岁发病。
首发症状多为步态障碍及姿势异常，少数病例以精神行为异常或视力障碍为首发症状。
2. 不典型PKAN：发病年龄跨度大，平均13～14岁，但也可成年发病，临床症状不典型。
常见表现为语言障碍、神经精神症状及运动障碍。
3. PKAN影像学特点：PKAN病例T相上可见苍白球部位铁沉积显示低信号，而在苍白球的前内侧由于神经元死亡、胶质增生而显示高信号，这一影像学表现被称为“虎眼征”。
（二）非钙依赖型磷脂酶A2相关性神经变性病（PLAN）PLAN有3个临床亚型1. 婴儿神轴索营养不良（INAD）：发生于婴儿和儿童早期，通常在6月龄至3岁发病。
首发症状多为精神运动发育迟滞或倒退，继而出现肌无力、严重的躯干张力低下、小脑性共济失调、减反射减弱或消失、视神经萎缩致视力障碍、斜视、眼球震颤。
脑组织的生理特点
脑组织的生理特点
脑组织是人体中最复杂和重要的器官之一，具有以下生理特点：
1. 高代谢：脑组织的代谢率非常高，是全身代谢最活跃的器官之一。
它需要大量的能量和营养物质来维持正常的功能。
2. 高氧耗：脑组织对氧气的需求很大，是全身耗氧量最多的器官之一。
因此，脑组织对缺氧非常敏感，缺氧会导致脑组织功能障碍甚至死亡。
3. 电活动：脑组织能够产生和传导电信号，这是大脑思考、感知和控制身体运动的基础。
脑组织中的神经元通过放电来传递信息，这些电信号的频率和强度可以反映出大脑的活动状态。
4. 血脑屏障：血脑屏障是指脑组织与血液之间的一种生理屏障，它可以防止有害物质和病原体进入脑组织，同时也限制了某些药物进入脑组织。
5. 可塑性：脑组织具有很强的可塑性，即它能够通过学习和经验来改变其结构和功能。
这种可塑性是大脑学习和记忆的基础。
脑组织的生理特点使其成为人体中最复杂和重要的器官之一。
了
解这些特点对于研究脑组织的生理和病理过程以及开发治疗相关疾病的药物和疗法具有重要意义。
端脑发育来的脑组织名称
端脑发育来的脑组织名称人类的大脑是一个复杂而精巧的器官，它由各种各样的脑组织构成。
这些脑组织在人脑功能的发挥中起着重要作用。
下面，我们将介绍一些与端脑发育相关的脑组织名称。
第一，大脑皮层：大脑皮层是人类大脑的外层，它是大脑最重要的组织之一。
大脑皮层具有复杂的褶皱结构，这使得它能够容纳更多的神经元，从而提高大脑的功能。
大脑皮层在人类认知、感知、运动控制等方面发挥着关键作用。
第二，海马体：海马体是位于大脑内侧的一个脑结构，将大脑皮层与其他部分连接起来。
海马体与学习和记忆功能密切相关，它对于长期记忆的形成和存储至关重要。
第三，杏仁核：杏仁核是大脑内侧的一个小核团，它负责情绪的处理和情绪记忆的形成。
杏仁核在人类的情绪体验、情绪反应和情绪记忆中起着重要作用。
第四，小脑：小脑位于大脑后下方，它主要负责协调和精细调节运动。
小脑通过与其他脑部结构的联络，使得人体运动更加协调和精确。
第五，丘脑：丘脑是位于大脑深部的一个重要结构，它负责传递感觉信号和调节意识。
丘脑在人类感知、注意力集中等方面发挥重要作用。
第六，基底节：基底节是位于大脑深部的一组脑区，它参与运动控制和动作规划。
基底节对于协调和调节人体运动特别重要。
以上是与端脑发育相关的一些脑组织名称。
这些脑组织在大脑功能的发挥中扮演着重要的角色，它们的协调运作使人脑拥有了出色的认知、感知、情绪和运动能力。
深入了解和研究这些脑组织对于理解人类大脑的运作和改善相关疾病具有重要意义。
大脑结构-解剖学
在顶枕沟下方有一距状裂， 裂上为楔叶，裂下为舌回。
胼胝体沟绕过胼胝体后端向前
伸至颞叶前端，称海马沟。其腹 内侧有海马旁回，其前湍弯曲成 钩形，称钩。
扣带回、海马旁回和钩三者 连成一环，称为边缘叶, 它是边 缘系统的一部分， 后者还包括：
• 多数男性方向感天生就比女性强。
大脑“吃”什么： • 大脑最喜欢吃糖。因为只有糖能顺利透过脑障碍
而进入脑组织被脑细胞利用。
• 大脑还喜欢“吃”蛋白质中的谷胱甘肽。动物的 肝脏和血肉中有丰富的谷胱甘肽，是健脑的佳品。
• 大脑还要吃一些卵磷脂。卵磷脂在蛋黄，黄豆内 含量很多，人应多吃些蛋黄和黄豆等食品。
3、大脑半球的底面
额叶底面有短小 多变的眶沟，形成 若干眶回。
其内侧有一条嗅 束，前端为嗅球， 与嗅神经相连。
嗅束向后连于海 马旁回和钩等嗅觉 高级中枢。
二、大脑的内部结构
（一）、大脑皮质
一）、概述
约有有140亿个神经细 胞，按照一定规律分层排 列。
分为传出和联络两类神 经元。
总面积为2200平方厘米。
中央沟之后方有中央后回，顶 叶被一纵行的顶间（内）沟分为沟 上方的顶上小叶，其下为顶下小叶。 由于大脑外侧沟和颞上沟伸入顶下 小叶，故又分为缘上回和角回。
在颞叶上，有两条与大脑外侧 沟平行的纵沟，称颞上、下沟，分 颞叶为颞上、中、下回。另在颞上 回中部，有些皮质卷入大脑外侧沟 内称颞横回。
2.大脑半球的内侧面
大脑
大脑被大脑纵裂分为左、右 两个半球。
主要包括大脑皮质、大脑髓质
和基底核等三个部分。
大脑解剖图谱
9.
颞前动脉：布于颞上回、颞 中回前部。
10. 颞极动脉：起源常有变异， 可发自大脑中动脉主干、脉 络丛前动脉，或与颞前动脉 共干，分2~3支布于颞极。
部及缘上回。
5. 顶后动脉：越缘上回至顶 间沟或其附近，布于缘上 回及顶上小叶下部。
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脑池
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正常解剖 脑池
小脑延髓池：位于后颅窝的后下部，小脑和 延髓之间，向前通第四脑室，向下通脊髓的 蛛网膜下腔
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正常解剖 脑池
桥池：又称桥前池，位于桥脑腹侧面和枕骨 斜坡之间，其内有几根动脉。此池向上通向 脚间池，向后通入小脑延髓池。
间脑
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正常解剖 间脑
位于中脑和端脑之间，与两侧大脑半球 分界不清
两侧间脑之间窄腔称第三脑室 分为5个部分：背侧丘脑（丘脑）、后
丘脑、上丘脑、下丘脑和底丘脑 体积不到中枢神经系统的2%，但结构功
能复杂 上丘脑--松果体 下丘脑—垂体、视交叉
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正常解剖 松果体
小脑上面观
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小脑下面观
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正常解剖 脑室系统
侧脑室：双侧额角（前角）、体部、三角区（房 部）、枕角（后角）及颞角（下角）
第Ⅲ脑室：位于两侧丘脑和下丘脑之间，为一狭 窄的空腔，经室间孔与侧脑室相通，经导水管与 第Ⅳ脑室相通。室间孔位于前连合上方几毫米处。 第Ⅲ脑室前壁为前连合和终板，底为下丘脑和丘 脑下部组成（矢状面可见视交叉上隐窝和漏斗隐 窝），顶为中间帆，后壁为后连合及松果体隐窝
脑组织采集操作流程
脑组织采集操作流程概述本文档旨在提供脑组织采集的操作流程，确保实验的顺利进行。
准备工作1. 确保实验室环境整洁、无菌。
2. 准备好以下工具和材料：- 手套- 外科刀具- 确保脑组织完整的冰冻- 乙醚或异氟醚的麻醉药物操作步骤1. 麻醉动物：- 将动物置于适当的麻醉设备中。
- 使用乙醚或异氟醚等麻醉药物使动物失去知觉。
2. 杀死动物：- 确保动物已经完全麻醉。
- 使用合适的方式将动物安全地杀死。
3. 切割头皮：- 用外科刀具将动物的头部皮肤切开，暴露出颅骨。
4. 打开颅骨：- 使用外科刀具小心地在颅骨上切开一个小孔。
- 用鹦鹉嘴钳将颅骨完全开放，暴露出脑组织。
5. 采集脑组织：- 使用手套小心地将脑组织取出，并放入冰冻中。
- 确保脑组织完整，并尽量避免污染。
6. 处理采集的脑组织：- 将采集的脑组织储存到合适的中，确保冷冻保存。
- 根据后续实验的需求，可以进行进一步处理，如切片等。
清理工作1. 将使用过的刀具和其他工具进行高温高压灭菌处理。
2. 清理实验室环境，保持整洁和无菌。
注意事项：- 在进行脑组织采集实验前，需要得到合适的伦理审批，并遵守相关的法律法规。
- 操作过程中要保证自身和他人的安全，注意使用麻醉药物时的剂量和注意事项。
- 在进行切割和操作时，要小心谨慎，避免对动物和人员造成伤害。
- 采集和处理脑组织时要保持无菌条件，避免可能的污染。
以上为脑组织采集的操作流程，希望能对您有所帮助。
脑部某些部位缺血引起脑组织损伤的原理
脑部某些部位缺血引起脑组织损伤的原理脑部某些部位缺血引起脑组织损伤的原理，听起来好像很高级的样子，其实咱们老百姓也能听懂。
就是说，当脑部的某个地方没有足够的血液供应时，那个地方的脑细胞就会受到损伤，从而导致各种奇怪的症状。
咱们得知道什么是缺血。
缺血就是指某个地方的血液流量不足，导致那里的细胞无法得到足够的氧气和营养物质。
这就像是一条河流被截断了源头，河水就不会再流过去了。
同样地，如果脑部的某个地方缺血了，那里的脑细胞就会停止工作，甚至死亡。
那么，为什么脑部某些部位缺血会引起脑组织损伤呢？这是因为脑部的各个部分都是相互关联的，它们需要不断地接收和传递信息才能正常运作。
如果某个地方的脑细胞受损了，那么它就无法完成自己的任务，整个大脑的功能都会受到影响。
举个例子吧，你可能听说过“中风”这个词。
中风就是因为脑部某个地方的血管破裂或者被阻塞了，导致那里的脑细胞死亡或者受损。
中风患者会出现各种各样的症状，比如说肢体无力、言语不清等等。
这些症状都是因为中风导致了大脑功能的部分丧失。
除了中风之外，还有很多其他的原因会导致脑部某些部位缺血引起脑组织损伤。
比如说高血压、动脉硬化等等都可能导致脑血管狭窄或者堵塞，从而影响到大脑的正常功能。
那么，我们应该如何预防脑部某些部位缺血引起的脑组织损伤呢？保持健康的生活方式非常重要。
要多吃蔬菜水果、少吃油腻食物；要适量运动、避免长时间久坐不动；还要戒烟限酒、保持良好的心态等等。
这些都有助于降低患上中风等疾病的风险。
定期体检也非常重要。
通过检查血压、血脂等指标，可以及早发现潜在的健康问题并采取相应的措施进行干预。
如果出现了任何不寻常的症状，比如说头痛、眩晕、视力模糊等等，一定要及时就医。
早期诊断和治疗可以有效地避免脑部某些部位缺血引起的脑组织损伤。
脑部某些部位缺血引起脑组织损伤是一个非常严重的问题。
但是只要我们保持健康的生活方式、定期体检、及时就医等等，就可以有效地降低患病的风险。
脑部某些部位缺血引起脑组织损伤的原理
脑部某些部位缺血引起脑组织损伤的原理脑部某些部位缺血引起脑组织损伤的原理，听起来好像很高级的样子，但是其实咱们日常生活中也会遇到这样的情况。
比如说，你突然觉得脑子有点儿晕，有时候还会出现记忆力下降、注意力不集中等问题，这些都是因为脑部某些部位缺血引起的脑组织损伤哦！
那么，为什么脑部某些部位缺血会引起脑组织损伤呢？这是因为脑部是一个非常复杂的器官，由很多个小部分组成，每个部分都需要充足的氧气和营养物质来维持正常的生理功能。
而当血液循环不畅，或者血管受到堵塞时，就会导致脑部某些部位缺氧、缺乏营养，从而引发脑组织损伤。
具体来说，脑部缺血可能会导致脑细胞死亡或者功能受损。
当脑细胞死亡时，它们就不能正常地接收和传递神经信号了，这样就会导致一系列的问题，比如说记忆力下降、注意力不集中等等。
而当脑细胞功能受损时，它们也可能会影响到其他脑细胞的正常工作，从而导致更严重的问题。
那么，我们应该如何预防脑部缺血引起的脑组织损伤呢？保持良好的生活习惯非常重要。
比如说，要保持充足的睡眠、合理的饮食、适量的运动等等。
要注意控制血压、血糖、血脂等生理指标的水平，避免过度劳累和压力过大。
如果你有高血压、糖尿病、心脏病等慢性疾病的话，一定要按时服药、定期复诊，以保持身体健康。
如果你觉得自己可能存在脑部缺血引起的脑组织损伤的问题，一定要及时去医院进行检查和治疗。
早期发现、早期治疗可以有效地减轻病情、避免并发症的发生。
在治疗过程中也要积极配合医生的治疗方案，遵守医嘱，注意调整自己的生活方式和心态。
只有这样才能真正做到预防和治疗脑部缺血引起的脑组织损伤。
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脑组织①动物处死2min内取脑组织，选取视交叉后Imm至乳头体之间的脑组织，首先冠状位向后取2mm的厚度，4%多聚甲醛溶液固定，按照常规脱水、透明、石蜡包埋，切片后进行HE染色②暴露出大鼠脑组织，用眼科剪轻轻剪断脑底各相连神经，取出完整组织，放入4%多聚甲醛中固定48一72小时。
腓肠肌①取腓肠肌，用4℃预冷的生理盐水清洗，去除血污，滤纸吸干水分，锡箔纸包裹做好标签，浸入液氮3Omin后放入一80℃超低温冰箱冷冻。
②左后肢腓肠肌内侧头中下部1/3处快速取约0.5g组织，用冰生理盐水洗去浮血，剔除脂肪及结缔组织，液氮速冻后置于一80℃低温冰箱保存以备提取RNA。
③在左后肢胖肠肌内侧头中下部1/3处快速取下约0.5x0.5xlm3肌组织，入4%中性多聚甲醛固定液中固定，以备光镜组织切片的制备。
在每组12只动物中随机取3只动物左后肢腓肠肌内侧头中下1/3处约0.5x0.5x0.1cm，组织块，立即入3%戊二醛固定液中固定，以备透射电镜切片的制备。
余下的肌肉经液氮冷冻后，置于一80℃低温冰箱保存待测。
④取双下肢排肠肌，深层腓肠肌放入高压灭菌的冻存管中，于液氮中暂存，编号后置于一80℃冰箱中保存备用于mRNA及蛋白测定。
取一小部分组织置于20%中性福尔马林中充分浸泡24小时后，常规石蜡包埋，切5um厚的切片，留测病理及免疫组化指标。
取lm³的组织置于电镜液电留测电镜，其余大部分排肠肌组织置于4℃线粒体提取介质中，以备提取骨骼肌线粒体。
股四头肌①取出下肢股四头肌，生理盐水漂净血渍后滤纸蘸干，迅速放入-70℃液氮中保存②取大鼠左侧股四头肌股直肌深层肌肉约200mg，放入无菌EP管，液氮冻干，-70℃冰箱保存，待测骨骼肌分子生物学指标。
③取右侧部分股四头肌股直肌，先经异戊烷处理，再用液氮冻干，-70℃冰箱保存，待做骨骼肌冰冻切片④完整剥离双侧腓肠肌，冰盐水冲洗，滤纸吸干，电子天平称重。
取少许左侧腓肠肌组织约300mg，按照1：9（W/V）的比例加入4℃生理盐水，然后在冰浴中电动匀浆、超声粉碎(4次，10s／次，间隔10s)，4℃离心（12000 rpm）15min，取上清，-30℃保存待肌肉组织生化指标。
⑤取出股四头肌，于冰生理盐水中洗净血液，装入样品管中，并迅速将之放入一84度超低温冰箱中。
⑥开胸心脏放血，提取股四头肌组织，PBS溶液冲洗。
切取适量股四头肌组织置4%多聚甲醛中固定备作石腊切片。
剩余的股四头肌组织迅速放入-70℃冰箱保存。
⑦大鼠股四头肌置15%中性福尔马林固定24h以上，脱水包埋:器官经改刀后置于15%甲醛中24h以上，70%乙醇30h，80%乙醇24h，95%乙醇5h，100%乙醇1h，苯15min，软蜡30min、硬蜡90min、石蜡包埋⑧取小鼠右腿的股四头肌后，用滤纸吸去残留血液，称重，记录股四头肌重量，用EP管封闭后直接投入液氮，再转移至一80℃超低温冰箱保存.以备用于RT一PCR测MHC四种亚型的基因表达。
⑨迅速取部分股四头肌以10%多聚甲醛固定，待光镜观察、免疫组织化学分析；部分以4%戊二醛固定，待电镜观察。
血管①在无菌条件下取出主动脉弓至肾动脉一段，放入PBS液中。
然后再移入超净台，放入培养皿，剥离血管，沿纵轴切开，摊平，充分暴露内膜，刮取内膜，将内膜组织移入EP管，加入0.smlRNA裂解液(6mol八)，放入冰箱4℃保存②在无菌条件下取出主动脉弓至肾动脉一段，放入10%福尔马林中固定，梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，浸腊、包埋，待切片。
③打开胸腔分离并剪下主动脉，去除周围过多的结缔组织，切取胸主动脉上段10%PBS甲醛固定用于组织学检测；中段，取6mm宽血管条，观察其收缩舒张反应性;下段，液氮贮存，用于测定AGEs、MDA含量，SOD、NOS活性，eNOS、VCAM一1蛋白表达等。
④取主动脉弓-70℃保存，同时部分主动脉弓置入4%多聚甲醛固定液中固定，待光镜、免疫组化检测⑤分离背部大血管，固定于10%甲醛，经石蜡包埋后切片备用，行HE染色⑥快速分离胸主动脉，冰生理盐水洗净后，一部分置入液氮中保存，用作AGEs、原位杂交、荧光定量PCR等检测；剩下部分主动脉置入福尔马林中固定用作免疫组化及病理检测。
⑦找到并分离胸主动脉剪断，可见大鼠心脏仍呈窦性搏动，自主动脉根部游离整个心脏，迅速移入预冷的生理盐水漂洗血液，取出吸干后迅速在分析天平上称重，精确至0.00019。
取胸主动脉长约3一4cm，心肌大小约Icm3迅速放入甲醛留作HE染色用，取胸主动脉长约Icm，lmm3大小左心室置入戊二醛溶液的小瓶中，送电镜检查。
心①切取大鼠心脏，去除结缔组织和心房部位，心室称重，用10%甲醛溶液固定用于组织学检测。
②大鼠心尖部称重后立即加入固定液(4%多聚甲醛/0.IMPBS)中，已固定好的组织经梯度酒精脱水(70%一80%一90%一100%)、二甲苯透明、石蜡包埋，切片厚度5um，裱于用防脱片剂处理过的干净载玻片上，置于60℃恒温箱内烤片12小时，以备用于HE染色；于左心室取1xlx1mm，的心肌组织放入2.5%的戊二醛中固定，4℃保存，送电镜观察。
③取心脏、肾脏、脾脏组织，用PBS冲去残留血液,用10%甲醛固定,石蜡包埋后，切成5μm厚的小块，制成石蜡切片,进行苏木精Hematoxylin&伊红Eosin(HE)染色,在光学显微镜下观察并照相。
④取心肌组织0.2g，加入1ml预冷的裂解液，冰水浴中匀浆，4℃静置1hr，然后4℃离心13000rpm，30min，取上清于-20℃保存。
应用Pierce公司的蛋白定量测定试剂盒测定蛋白浓度。
⑤立即取胰岛、心脏、肾脏组织,用4%的多聚甲醛及2%、5%的戊二醛固定后,组织块再经锇酸缓冲液、醋酸双氧铀固定,丙酮梯度脱水,Epon812环氧树脂包埋,ULTRACUT E/S型超薄切片机切片,醋酸双氧铀-柠檬酸铅染色,Philips EM400T型透射电镜观察。
⑥取左室中段横截面心肌组织，宽度约2mm，10%甲醛溶液固定，余下的心肌组织放入无菌冻存管中，保存于一80℃冰箱⑦将处死的大鼠置于冰上，迅速剪开胸腔，用生理盐水冲洗心内血液，迅速取左J自室心肌，将其切成1mm*1mm*1mm左右的组织块，放入3%的戊二醛固定液(用于电镜检测)。
再分别切取3块3mmx3mm只3mm大小的心肌组织，分别浸入10%甲醛溶液(HE染色用)，BOUIN固定液(Masson3色染色用)，Carnoy氏液固定(PAS染色用)，其余心肌组织去除心耳及多余组织放入I0mlEP管中，一80℃冰箱中保存备用。
肝①将修整好的小块肝脏组织用生理盐水清洗后，立即投入4%甲醛中固定24h②用1%戊巴比妥钠麻醉处死大鼠，迅速摘取肝组织数块，剪成1mm×1mm×1mm大小，置2.5%戊二醛磷酸盐缓冲液中固定2小时，0.1mmol/L磷酸缓冲液漂洗2次各20分钟，1%锇酸后固定2小时，0.1mmol/L磷酸缓冲液漂洗后置梯度序列的乙醇中梯度脱水，纯环氧树脂包埋后，置80℃恒温箱内聚合10小时，修整包埋块，应用德国产Leica Ultracutuct切片机超薄切片，醋酸双氧铀-枸橼酸铅双染色各10分钟，置FEITecnai G212型透射电镜下观察照相。
③称取100mg肝脏组织剪碎，置于含新鲜配制的1ml冰Western细胞裂解液的匀浆器中，冰浴匀浆至组织完全裂解；组织匀浆于预冷的离心机中在4℃下12,000 g离心20分钟，弃沉渣后留取上清，上清液立刻转移入新的Ep 管中保存待用④取肝脏组织的小叶部分，固定于4%的多聚甲醛中，用于病理学检测；其余部分在液氮中速冻后保存于一70℃待用。
⑤称取肝湿重，迅速摘取肝右叶组织0.5g，放入预冷的生理盐水溶液中，在4℃下制成10%肝匀浆，3000r/min，离心10min，取上清液。
另取肝左叶，浸泡于10%中性甲醛缓冲掖中固定，石蜡包埋，常规制片，HE染色，光镜下观察肝组织形态变化。
⑥在肝脏最大叶边缘0.5cm处取小块肝组织冰生理盐水冲洗，滤纸吸干，称取0.5g置于预冷的5ml生理盐水，迅速用内切式匀浆机10000r/min匀浆10秒/次，间隙30秒，连续3次，碎冰块中制成10%的肝匀浆，再用高速冷冻离心机4℃，3000r/min离心10分钟，取上清3ml密封，一20℃冷存待检。
另在肝脏不同部位分别取1xlx0.5cm大小肝组织3块，浸泡于10%甲醛固定液固定，送病理科检查。
⑦肝脏组织，4℃环境中操作，分成3份，分别置入：⒈浸泡于10%中性磷酸缓冲福尔马林溶液，常规制成石蜡切片，HE染色，光镜观察肝脏组织形态学指标。
并用于免疫组化检测NF-κ B p65的表达。
⒉冻存管，保存于液氮罐中，待测肝脏组织MPO、iNOS和NO活性。
⒊去酶处理冻存管，保存于液氮罐中，待用RT-PCR法检测肝脏组织中PPARγmRNA、iNOS mRNA的表达。
⑧取肝脏组织，用PBS冲去残留血液,用10%福尔马林固定,制成石蜡切片,进行Hematoxylin&Eosin(HE)染色,在光镜下观察⑨打开腹腔取出肝脏用生理盐水漂洗后，滤纸洗干，切下部分并称重，投入液氮中。
⑩肝组织匀浆制备：迅速剖取动物肝脏，取部分肝组织用冰生理盐水冲洗，滤纸吸湿后，称取湿重0.3g左右，加入预冷的生理盐水，用电动匀浆器研磨，镜检未见完整细胞，制成10%的肝组织匀浆，4℃4000r/min离心10min，提取上清液，-20℃冷存待检。
脾①无菌摘取大鼠脾脏，置于小皿中，用无菌剪刀将脾脏分为两份，一份装入冻存管中，并进行编号标记，立即置于液氮中进行保存;另一份放入无菌玻璃匀浆器中，并加入1m1RPMl1640培养液(武汉博士德公司)碾碎脾脏，经200目不锈钢筛网过滤入15ml离心管，离心10min(1000r/min)，加入2ml0.83%NH4CI溶液(l单位的Tris溶液与9单位的NH4Cl溶液充分混②取出脾脏，用生理盐水漂洗滤纸吸干水份后称重。
脾脏标本分两份，一份用10%福尔马林溶液固定，用于石蜡切片的制作;另一份放入冻存管，一20℃冰箱存放一小时后置于一80℃冰箱保存，用于冰冻切片的制作。
肾①切取肾脏，称重，取左侧肾脏10%甲醛固定用于组织学检测。
②迅速摘取双侧肾脏，用4℃PBS冲洗残留血液，吸干，称重，而后将一侧肾脏放入一80℃冰箱保存，制备组织匀浆。
另一侧肾脏放入4%多聚甲醛中固定，以备常规石蜡包埋、切片③HE染色：冰冷的生理盐水灌注肾脏，取双侧肾脏，右肾称重，切取肾皮质后一部分浸入福尔马林中备用。
部分浸入2.5%戊二醛固定(固定液每隔3小时更换一次，共三次)④肾脏电镜标本制备：取肾脏皮质部分，切取1.5mm×l.5 mm小块，以2.5%戊二醛固定2h，以磷酸缓冲液冲洗30min，1%饿酸固定lh，逐级酒精脱水，环氧树脂包埋，超薄切片，常规醋酸双氧铀与构椽酸铅双重染色。