第四章 药物定量分析与分析方法验证
第四章 药物定量分析与分析方法验证
1、含卤素有机药物
含卤素有机药物是指分子结构中所含卤素直接与芳环
如果测得理论板数低于规定的最小理论板数， 应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色 谱柱填充的优劣等），使理论板数达到要求。
(2)分离度(R)
在定量分析时，要求定量峰与其他峰 或内标峰之间有较好的分离度。除另有规定 外，分离度应大于1.5。
分离度（R）的计算公式见下式：
R 2 t R2 t R1
含量（CX）= f
AX AS / CS
式中，AX为供试品峰面积或峰高；CX为供
试品的浓度 。
丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品 对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成 每lmL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液 和内标溶液（1．6mg/ml苯丙酸诺龙甲醇溶 液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录
例
取盐酸麻黄碱0.1532g，精密称定， 加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 2ml与结晶紫指示液1滴，用HClO4滴 定至绿色，用去0.1022mol/L的高氯 酸滴定液7.50m1，空白试验消耗高氯 酸滴定液0.08ml。已知每1ml高氯酸 滴定液（0.1mol/L）当于20.17mg的 C10H15ON·HCl。试计算盐酸麻黄碱 的百分含量？（99.80％）
1.分离原理
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
吸附色谱
根据填充剂吸附活性 对样品的吸收系数不 同而分离
充填剂：硅胶
分配色谱
根据固定相与流动相的极性不同而分为 正相分配色谱和反相分配色谱 两者的区别如下图所示：
固定相
流动相
正相分配
极性
4章 药物定量分析与分析方法验证
枸橼酸铋钾、葡萄糖酸锌 ——EDTA滴定法测定
2013-07-29
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碱水解后测定法 适合于卤素与脂肪链相连的卤代烷烃，经加热回流使其水解，有机结 合的卤素转变成无机的卤素离子，然后用适当方法进行测定。 例 三氯叔丁醇的含量测定 CCl3－C(CH3)2－OH + 4NaOH 回流 3NaCl Fw=186.47 用银量法(佛尔哈德法)测定氯化钠含量：氯化钠与硝酸银生成氯化银沉 淀，过量的硝酸银用硫氰酸铵液回滴定。
磺溴酞钠的换算因数=
被测组分重 = 32.06 233.3 称量形式重
BaSO4
2013-07-29
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与测S不同 溴 取本品约0.2g，精密称定，照氧瓶燃烧法（附录Ⅶ C）进行
有机破坏,选用1000ml燃烧瓶，以0.4％氢氧化钠溶液10ml、浓过 氧化氢溶液0.5ml与水10ml作为吸收液,俟生成的烟雾完全吸入吸 收液后，用水稀释至100ml，煮沸5分钟，放冷，加稀硝酸使成酸 性，精密加硝酸银滴定液(0.1mol/L)20ml，摇匀，再加硫酸铁铵 指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果 用空白试验校正。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于7.990mg 的溴(Br)。
氨苯砜中检查“有关杂质”采用TLC法：取本品， 精密称定，加水适量制成10mg/mL的溶液，作为 样品测定液。取样品测定液1.00mL加水稀释至 100.0mL，作为杂质对照液。取样品测定液10μl 和杂质对照液5μl点在同一块薄层板上，展开。 样品测定液所显杂质斑点颜色不得比杂质对照液更 深 。 计 算 样 品 中 “ 有 关 杂 质 ” 的 限 量 。 (0.5%) 样品测定液: 10mg/mL 杂质对照液: (10mg/mL1.00mL)/100.0mL=0.1mg/mL
第四章-药物定量分析和分析方法验证
方法分类
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC。
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
2. 系统性试验
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2 分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大于1.5 拖尾因子：T = W0.05h/2d1 应在0.9 ～ 1.05
后银量法
3. 利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量
（1）含锑药物 例如：葡萄糖酸锑的含量测定
Sb5+ + 2KI H+ Sb3+ + 2K+ ++ I2
I2 + 2Na2S2O3
2NaI + Na2S4O6
（2）含铁药物
2Fe3+ + 2KI I2 + 2Na2S2O3
2Fe2+ + 2K+ + I2 2NaI + Na2S4O6
2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入原 料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。
具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价 回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC法时，一般回 收率可达98%～102%；容量法可达99.7%～100.3%
（二）数据要求
回收率% = （测定平均值— 空白值）/加入量×100% 要求制备高、中、低三浓度的样品，各测定3次。应 报告已知加入量的回收率，或测定结果平均值与真实值 之差及其可信限。
3. 百分含量的计算
（1）直接滴定法 D% = V ×F × T/W ×100% F = 实际标定的浓度/规定的浓度
第04章药物定量分析与分析方法验证
A = ECL
吸收系数：摩尔吸收系数ε —— 研究分子结构 1% E 百分吸收系数 1cm —— 含量测定
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3.仪器的校正和检定 波长的校正：汞灯中的几根较强的谱线或用仪器自身 所带的氘灯的特定谱线为参照进行校正 吸收度准确性的检定：重铬酸钾的硫酸溶液，规定波
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测得量(mg) 40.18 36.17 31.36 32.52 39.85
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回收率（%） 统计学处理 100.10 x 99.88% 98.60 100.10 RSD=0.55% 98.91 100.20
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三波长分光光度法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量
回收率试验 取连蒲双清片粉适量（约相当于盐酸小檗碱40mg)
Байду номын сангаас
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3.百分含量的计算
（1）直接滴定法 设至终点时，消耗滴定液体积为V ml 则药物理论质量为V· T C实际 浓度校正因数 F＝ C规定
实测药物质量 V FT 含量%＝ 100 ％＝ 100 ％ 供试品取样量 W
W：供试品取样量
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（2）间接滴定法 1）生成物滴定法 滴定剂 药物 + A → B 滴定 2）剩余滴定法（回滴法） 药物 + A（定、过量） →················ 剩余的 A + B →·······（回滴）· · · · · · V 空白试 验· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · V 0 （V －V）FT
药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
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4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
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(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
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2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
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（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
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氧瓶燃烧
药物定量分析与分析方法验证
例3、枸橼酸铁铵的测定
ChP（2000）
ห้องสมุดไป่ตู้取本品约 0.5g ，精密称定，置具塞锥形瓶中。加
水15ml溶解后，加硫酸lml，加热至溶液由暗棕色变成
淡黄色，放冷至约 15℃，滴加高锰酸钾试液至溶液显 粉红色并持续 5s ，加盐酸 15ml 与碘化钾试液 15ml ，密 塞，静置 3min ，加水 50ml 稀释后，用硫代硫酸钠滴定 液(0.1mol/L)滴定至近终点时，加淀粉指示液2ml，继 每 lml 的硫代硫酸钠滴定液 (0.1mol/L) 相当于 5.585mg
续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。 的Fe。
（二）经水解后测定法
1.碱水解后测定法 是将含卤素的有机药物溶于适当 溶剂（如乙醇）中，加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后， 加热回流使其水解，将有机结合的卤素经水解作用转 变为无机的卤素离子，然后选用间接银量法进行测定。 本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢 固的药物，如卤素和脂肪碳链相连者。
(0.1mol/L)相当于25.29mg的汞撒利。
3、经还原分解后测定法 ①碱性还原后测定 卤素结合于芳环上时，由
于分子中碘的结合较牢固，需在碱性溶液中加还原
剂（如锌粉）回流，使碳-碘键断裂，形成无机碘 化物后测定。 ②酸性还原后测定法 两法均是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加
还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反
C4H7Cl3O·1/2H2O。
反应摩尔比为1∶3
T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数
c——滴定液浓度，mol/L
M——被测物的摩尔质量，g/mol n——1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即 反应摩尔比为1∶n
04第四章药物定量分析与分析方法验证
▪ 2009年，英国科学家文卡特拉曼·拉马克里希南、美国科学家托马斯·施 泰茨和以色列科学家阿达·约纳特因对“核糖体的结构和功能”研究的 贡献而获奖。
H2O2-NaOH液 或NaOH液硫酸肼饱和液
NaOH液硫酸肼饱和液
测定方法
pH4.3 HAc-NaAc Buffer 茜素氟蓝 分光光度法
银量法 汞量法 分光光度法
银量法 分光法
银量法 碘量法 汞量法 分光法
碘苯酯含量测定
取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用NaOH T.S. 2ml与H2O 10ml为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液10 ml，密 塞，振摇放置数分钟，加甲酸约1ml，用水洗涤瓶口，并通入空气流约 3~5min，以除去剩余的溴蒸气，加KI 2g，密塞，摇匀，用Na2S2O3液 (0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的硫代硫酸钠液(0.02mol/L)相当 于1.388mg的C19H29IO2
（四）最低定量限LOQ 3～5倍t1/2，或1/10～1/20倍Cmax
（五）样品稳定性 室温、冻融、长期冰冻
（六）提取回收率（绝对回收率） 一般低于100％，须稳定
（七）质控样品 已知浓度样品均匀放入待测生物样品序列中，以
确保定量测定的准确度
样品 固相净化 及 反相高效液相色谱法 测定血浆中茶碱
测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度。
▪ HPLC法变动因素有：流动相组成与pH，色谱柱， 柱温，流速等。
第四章药物定量分析与方法验证PPT课件
（二）容量分析法的计算问题
1.滴定度（T）：
每1ml规定浓度的滴定液相当于被测物质的质量(mg)
2.滴定度的计算
aA（待测物） + bB（滴定液）
a
b
T/M
1·m
cC + dD
T = m×a/b×M m：滴定液浓度 (mol/L)
M：被测物分子量
WA=T×VB 6
3.百分含量的计算
（1）直接滴定法 设至终点时，消耗滴定液体积为V ml
CX
CX＝—C—AR·R—AX—
要求：进样量准确、操作条件稳定
33
34
（二）GC法 1. 对GC仪器一般要求
载 气：氮气 色谱柱：填充柱或毛细管柱 填充柱：内径2～4mm，长1～10m，内装吸附剂
高分子多孔小球或涂渍固定液的载体 毛细管柱：内径0.2～0.5mm，长10～100m，
片数＝ W
W
15
16
2）吸收系数法：
E C X
AX
1%
1cm
E 注意： 1％ 1cm
应>100
应注意仪器的校正和检定：E
1％ 1cm
作为计算浓
度的因数进行定量的方法，不是任何情况下都
适用的，特别是单色光不纯的情况下，A会随
仪器不同而变化，误差较大。
但若认定一台仪器，固定其工作状态和测 定条件，则C和A间的关系在多数情况下仍符合 Lambert－Beer定律。
2. 系统适用性试验
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2 分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 应大于1.5
重复性：对照液连续进样5次，峰面积RSD≤2.0％
药物分析第四章定量分析与分析方法验证
标准偏差
三、专属性 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等） 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在 采用的方法能准确测定出被物的特性。 下，采用的方法能准确测定出被物的特性。 四、检测限（LOD） 检测限（ ） 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 五、定量限（LOQ） 定量限（ ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量， 指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果具有 一定的准确度和精密度。 一定的准确度和精密度。 六、线性 系指在设计的范围内， 系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接 呈正比关系的程度，相关系数R-->1 ,用软件可得回归方程 用软件可得回归方程. 呈正比关系的程度，相关系数 用软件可得回归方程
VT 含量% = × 100% W
T—滴定度 滴定度;V—消耗滴定液体积 消耗滴定液体积;W—供试品取量 滴定度 消耗滴定液体积 供试品取量 校正因子F: 校正因子 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时,要校正 要校正: 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时 要校正 实际摩尔浓度 F= 规定摩尔浓度 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度,而是 值 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度 而是F值. 而是 实际滴定度:T’=TF 实际滴定度
二、光谱分析法 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射， 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射，利用 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 1、紫外-可见分光光度法（200nm—760nm) 、紫外 可见分光光度法 可见分光光度法（ (1)朗伯 比耳定律 朗伯-比耳定律 朗伯 A=ELC A-吸光度；L-液层厚度；C-溶液浓度；E-吸收系数 吸光度； 液层厚度 液层厚度； 溶液浓度 溶液浓度； 吸收系数 吸光度 （2）百分吸收系数 ）百分吸收系数E 1% 溶液浓度为1%（ 溶液浓度为 （W/V）厚度为 ）厚度为1cm的吸收度 E1cm 的吸收度 A （3）吸收系数法测含量 ） ×D 1% E1cm 含量%= ×100% W × l ×100 A-供试品吸光度；D-供试品稀释倍数； 供试品吸光度； 供试品稀释倍数 供试品稀释倍数； 供试品吸光度 W-供试品取量（标示量）（ ）； 液层厚度（cm） 供试品取量（ ）（g）； 液层厚度（ ） 供试品取量 标示量）（ ）；L-液层厚度
第4章-药物定量分析
验证分析方法的具体内容
鉴 别 准确度 重复性 精密度 中间精密度 专属性 检测限 定量限 线性 范围 耐用性 － ＋ － － － － ＋ ＋* ＋ －** ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ － － － ＋ ＋* ＋ － － ＋ ＋ ＋ － － 杂质检查 定量 ＋ ＋ 限度 － － 含量测定及 溶出度测定 ＋ ＋
系统适用性试验
色谱柱的理论塔板数 分离度 重复性 拖尾因子
色谱柱的理论塔板数
N = 5.54 (tR/W1/2)2 = 16(t/W)2 改变柱长、内径、固定相牌号、固定 相颗粒粒径等
分离度
定量峰与其它峰或内标峰之间的分离度 R应大于1.5
重复性
取各品种项下的对照品溶液，连续进样5 次，其峰面积测量值的RSD不应大于 2.0% 配制相当于80%，100%，120%的对照品 溶液，加入规定量的内标溶液，配成3种 不同浓度的溶液，分别进样3次，计算平 均校正因子，其RSD不应大于2.0%
全血（加抗凝剂） 测定血样中平均分布于细 胞内和细胞外的药浓
• 种类：
硫酸-硝酸法 硫酸-高氯酸法 硫酸-硫酸盐法 硝酸-高锰酸钾法
凯氏定氮法
（二）干法破坏
1.高温炽灼法
---- 将有机物灼烧灰化 • 适用于湿法不易破坏完全的有机药物及 某些不能用硫酸破坏的有机药物 • 不适用于含易挥发金属有机药物的破坏 （砷、汞） • 常加入无水碳酸钠或轻质氧化镁助灰化
二．精密度
1．表示方法 • 标准偏差SD
• 相对标准偏差
relative standard deviation RSD
即变异系数 coefficient of variation CV
2. 重复性
• 在相同操作条件下，由同一个分析人员 测定同一种样品所得结果的精密度。
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第四章药物定量分析与分析方法验证（不讲）[教学目的]一、掌握定量分析方法验证的效能指标。
二、熟悉定量分析样品的前处理方法。
三、了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用。
[本章分配学时数]4学时[教学环节与教学内容][复习引入]2分钟在上一章里，我们介绍了药物杂质检查的相关内容，其中包括11种一般杂质的检查方法以及以药物和杂质在物化性质上的差异为基础的特殊杂质的检查方法，另外我们还重点要求同学们着重掌握一些与药物杂质检查相关的概念。
通过上一章的学习，同学们应该掌握了一般杂质检查的原理、方法和计算，并熟悉了特殊杂质检查的方法和原理。
那么，在下一章里，同学们将会接触到药物分析基础知识的第三大部分，即药物定量分析与分析方法验证。
通过本章的学习，同学们应该掌握定量分析方法验证的效能指标，熟悉定量分析样品的前处理方法，了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用。
[教授新课]一、定量分析样品的前处理方法1．概述（1）含金属或卤素的药物，如葡萄糖酸锑钠，硬脂酸镁，碘苯酯，磺溴肽钠等，在分析前需要经过不同方法处理后，方可进行测定。
（2）处理方法因金属或卤素在分子中结合的牢固程度而异，如：有机卤素药物，所含卤素原子均直接与碳原子相连，但不同药物中卤素所处的位置不同，则与碳原子结合的牢固程度就有差异。
如果卤素和芳环相连接，则结合牢固，与脂肪酸的碳原子相连接，则结合不牢固。
（3）而含金属的有机药物，有两种情况：一是金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物，称为含金属的有机药物，其分子结构中的金属原子结合不够牢固，在水溶液中即可理解出金属离子，若有机结构部分不干扰分析时，可在溶液中直接进行其金属的鉴别或含量测定；二是金属原子直接与碳原子以共价键相连接，结合状态比较牢，称为有机金属药物，在溶液中其金属一般不能解离成离子状态，应该根据共价键的牢固程度，经适当处理，将其金属转变为适于分析的状态（多转变为无机的金属盐或离子），方可进行其金属的鉴别或含量测定。
2．不经有机破坏的分析方法（1）直接测定法凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些C-M（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中可以电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方法进行测定。
例如富马酸亚铁的含量测定，可用硫酸铈标准溶液直接进行滴定。
（2）经水解后测定法1)直接回流后测定法本法是将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加NaOH溶液或AgNO3溶液后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素经水解作用转变为无机的卤素离子，然后选用间接银量法进行测定。
本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物，如卤素和脂肪酸链相连者。
例如：三氯叔丁醇的含量测定（银量法）本品在NaOH溶液中加热回流使分解产生NaCl，与AgNO3生成AgCl沉淀，过量的AgNO3用硫氰酸铵液回滴定。
CCl3C(CH3)2OH+4NaOH(CH3)2CO+3NaCl+HCOONa+2H2ONaCl+AgNO3AgCl+NaNO3AgNO3+NH4SCN+NH4NO32)用硫酸水解后测定法例如：硬脂酸镁含量测定硬脂酸镁，与定量硫酸液共沸、水解生成硬脂酸和MgSO 4，剩余的酸以NaOH 液滴定。
Mg(C 17H 35COO)2+H 2SO4MgSO 4+2C 17H 35COOH H 2SO 4+2NaOHNa 2SO 4+2H 2O（3） 经氧化还原后测定法1）碱性还原后测定法 卤素结合于芳环上时，由于分子中碘的结合较牢固，需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）回流，使碳－碘键断裂，形成无机碘化物后测定。
例如：泛影酸含量测定（银量法） COOHI NHCOCH 3I CH 3COHNI+11NaOH +3Zn COONaNH 2H 2N+3NaI +2CH 3COONa +3Na 2ZnO 2+3H 2ONaI +AgNO 3+NaNO 32）酸性还原后测定法例如：碘番酸含量测定碘番酸在醋酸酸性条件下用锌粉还原，使碳－碘键断裂，形成无机碘化物后用银量法测定。
3）利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量（间接碘量法） a ． 含锑药物利用五价锑有机药物中可游离的Sb 5＋的氧化性，在酸性液中氧化碘化钾，并定量析出碘，可用硫代硫酸钠滴定液滴定（如：葡萄糖酸锑钠的含量测定）。
Sb5＋＋2KI H+Sb3++I2+2K+I2 + 2Na2S2O32NaI + Na2S4O6b．含铁药物将含铁药物加酸溶解后，便游离出Fe3＋，利用Fe3＋在酸性溶液中氧化碘化钾，析出的碘可用硫代硫酸钠滴定液滴定以测定含量。
3．经有机破坏的分析方法条件：含金属有机药物及有机卤素药物结构中的金属原子、卤素与碳原子结合牢固者，用水解或氧化还原后测定方法难以将有机结合的金属原子及卤素转变为无机的金属化合物及卤素化合物。
（1）湿法破坏1）硝酸－高氯酸法本法破坏能力强，反应比较强烈。
故进行破坏时，必须严密注意切勿将容器中的内容物蒸干，以免发生爆炸。
本法适用于血、尿、组织等生物样品的破坏。
经本法破坏后，所得的无机金属离子，一般为高价态。
本法对含氮杂环药物的破坏不够完全，此时宜选用干法烧灼进行破坏。
2）硝酸－硫酸法本法适用于大多数有机物质的破坏，如燃料、中间体或药物等。
经本法破坏分解所得的无机金属离子均为高价态。
因碱土金属可与硫酸形成不溶性的硫酸盐，将会吸附被测定的金属离子，使测定的结果偏低。
所以本法不适用于含碱土金属有机药物的破坏。
此时，可改用硝酸－高氯酸法进行破坏、3）硫酸－硫酸盐法本法所用硫酸盐为硫酸钾或硫酸钠，因硫酸钠为含水化合物，不利于有机破坏，故一般多采用硫酸钾。
加入硫酸盐的目的，是为了提高硫酸的沸点，以使样品破坏完全。
同时，也防止硫酸在加热过程中过早地分解为三氧化硫而损失。
经本法破坏分解所得的金属离子，多为低价态。
本法常用于含砷或锑有机药物的破坏分解。
因在有机物破坏时须经炭化过程，最后得到低价态的三价砷或锑离子。
如用本法破坏低碳化合物时，宜添加适量的淀粉等多碳化合物，以保证在破坏过程中，经炭化，将金属离子都转变为低价态。
4）其它湿法硝酸－硫酸－高氯酸法、硫酸－过氧化氢法、硫酸－高锰酸钾法等，其根据都是增加氧化剂。
注：a.湿法破坏所用的仪器，一般为硅玻璃或硼玻璃制成的凯氏烧瓶；b.所用试剂及蒸馏水均不应含有被测金属离子或干扰测定的其它金属离子等组分；c.由于整个操作过程所用矿酸量数倍于样品，所以必须按相同条件进行空白试验校正；d.操作时应在通风櫉内进行。
（2）干法破坏1)本法是将有机物灼烧灰化以达分解的目的。
将适量样品置于瓷坩埚或镍坩埚、铂坩埚中，常加无水碳酸钠或轻质氧化镁等以助灰化，混合均匀后，先小火加热，使样品完全炭化，然后放入高温炉中灼烧，使其灰化完全，即可。
2)应注意的问题a.加热或灼烧时，应控制温度在420℃以下，以防止某些被测金属化合物的挥发。
b.灰化完全与否，直接影响测定结果的准确性。
c.经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但此时切勿弃去。
3)本法适用于湿法不易破坏完全的有机物（如含氮杂环类有机药物）以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。
不适用于含易挥发性金属（如汞、砷等）有机药物的破坏。
（3）氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法（oxygen flask combustion method）是将有机药物放入充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的欲测物质吸收于适当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别，检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、硒等其它元素的有机药物。
本法是快速分解有机物的简单方法，它不需要复杂设备，就能够使有机化合物中的待测元素定量分解成离子型。
该方法的详细介绍及举例请参阅教材P67~69。
二、定量分析方法特点1．容量分析法（1）容量分析法是将已知浓度的滴定液（中国药典中称滴定液）由滴定管滴加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化学计量反应完全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗的体积，就可以计算出被测药物的含量。
（2）容量分析的关键问题是如何确定等当点。
当滴定液与被测药物完全作用时，反应达到了化学计量点即等当点，在进行容量分析时，都希望在等当点时停止滴定。
在等当点时，常常没有任何外观现象的变化，为此必须借助指示剂的变色来确定滴定终点。
滴定终点与等当点不一定恰好符合，二者之间的误差称为滴定误差。
这是容量分析误差的来源之一，为了减少滴定误差，就需要选择合适的指示剂，使滴定终点尽可能接近等当点。
（3）容量分析通常用于测定高含量或中含量组分，即被测组分的含量在1％以上。
容量分析法比较准确，一般情况下相对误差可达0.2％以下。
（4）容量分析法操作简便、快速、比较准确，所用仪器普通易得，在药品检验工作中具有很大的实用价值。
（5）容量分析法的计算问题1）滴定度指每1ml 某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。
中国药典用毫克（mg ）表示。
2）滴定度（T ）的计算在容量分析中，被测药物（B ）与滴定液（A ）之间都按一定的摩尔比进行反应，反应可表示为：aA + bB cC + dD滴定度（T ）可按下式计算：(/)b T M B mg ml a=⨯⨯ M －滴定液的摩尔浓度b －被测药物的摩尔数a －滴定液的摩尔数B －被测药物的毫摩尔质量（分子量）3）百分含量计算在测定药物含量时，常用直接滴定法和回滴定法，其计算方法如下：a. 直接滴定法此法是用滴定液直接滴定，以求得被测药物的含量。
100%V T W⨯⨯含量％＝T －滴定度值W －供试品取量 V －消耗滴定液的体积在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药典上所给出的滴定度（T ），但只要乘以滴定液浓度校正因数（F ）即可换算成实际的滴定度（T ’），即'T T F =⨯式中 F =实际摩尔浓度规定摩尔浓度于是，被测药物的百分含量可由下式求得：'100%V T W ⨯⨯含量％＝ 100%V T F W⨯⨯=⨯ 在学习过程中应注意记忆滴定液与被测药物在反应中的摩尔比，即反应式中a 与b 的数值。
只有这样，才能正确计算滴定液和百分含量。
b. 回滴定法（剩余滴定法）此法是先加入定量过量的滴定液A ，使其与被测药物反应，待此反应进行完全后，再用另一滴定液B 来回滴反应中剩余的滴定液A 。
I. 不做空白试验时百分含量计算方法0100%B V V T F W⨯⨯⨯（-）含量％＝V A －先加入的定量过量的滴定液A 体积V B －滴定液B 消耗体积F A －滴定液A 浓度校正因数F B －滴定液B 浓度校正因数W －供试品取量 T －滴定度II. 做空白试验的百分含量计算方法0100%B V V T F W⨯⨯⨯（-）含量％＝V 0－空白试验消耗硫酸滴定液体积V B －样品测定试验消耗滴定液体积T －滴定度F －滴定液浓度校正因数W －供试品取样量（g ）2．光谱分析法当物质与辐射能相互作用时，物质内部发生能级跃迁。