Angient 1220 HPLC操作规程
Agilent1200型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent_1200型高效液相色谱仪标准操作规程1 目的建立Agilent 1200高效液相色谱仪的操作规程，保证其正确使用。
2 范围Agilent 1200高效液相色谱仪的操作与维护。
3 职责操作人员和责任人员对本规程的实施负责。
4 内容4.1 组成G1322A脱气机、G1311A四元泵、G1329A自动进样器、G1330B自动进样器恒温器、G1315B可变波长检测器（DAD）、GB16A 柱温箱和一套Agilent 1200 CHEMSTATIONS 软件（软件光盘与说明书原件由工程部保存），打印机。
4.2 在线清洗若实验的流动相中含有的缓冲盐和离子对等试剂干后会留下固体印迹的物质时，必须要进行在线清洗过程。
首先配制好10%异丙醇溶液，经0.45μm有机膜抽滤后，装入已用滤过的10%异丙醇溶液洗过三遍的洁净玻璃瓶内，调整流量为2～3滴/分钟，10%异丙醇溶液必须每周更新。
4.3 开机接通电源，打开计算机，等计算机启动成功后，含四元泵的Agilent 1200高效液相色谱仪系统：从上到下，依次打开脱气机、泵、进样器、进样器恒温器、柱温箱和多波长检测器。
约30秒钟后，各部件自检完毕，进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
双击桌面上的Instrument 1 Online，计算机进入工作站的Method and Run Control操作界面。
画面如下所示。
4.4 色谱条件的设定4.4.1 方法的编辑●在method and run control 状态下，单击“method”选择“edit entire method”，请先在复选框中选择method中需要编辑的项目。
●进入method information 在method comments 中输入方法的名称及相关描述，参数设置完毕后单击OK。
●进入泵参数设置画面，设置泵流速（ml/min），流动相组成，冲洗梯度，停针时间等，参数设置完毕后单击OK。
Agilent1200高效液相色谱仪操作规程
Agilent1200高效液相色谱仪操作规程一、Agilent1200化学工作站开机顺序(LAN卡联接)1、将待测样品按要求前处理,准备HPLC 所需流动相,检查线路是否连接完好,废液瓶是否够用等2、打开计算机,进入Bootp;3、打开主机各模块电源(不分先后),等待Bootp接收,等待各模块就绪后, 再双击工作站图标,进入化学工作站;4、调出一个分析方法,检查各参数的设置;5、旋开泵上的排气阀,将工作站中的泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%;6、在工作站中打开泵,排出管线中的气体数分钟;7、依此切换到B、C、D溶剂分别排气;8、将工作站中的泵流量设到1ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%, B=20%;9、关闭排气阀,检查柱前压力;10、待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况;二、数据采集方法编辑1 由运行控制进入样品信息,设定操作者姓名,样品数据文件名等。
2自动进样器参数设定:1)选择合适的进样方式, “Standard Injection”----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。
“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置,“UnRegistered”--此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。
“Use injectorprogram”---可以点击“Edit ”键进行进样程序编辑。
2)单击确定进入下一画面。
3 泵参数设定:(四元泵)1)在流量(Flow)处输入流量,如 1.5ml/min,在溶剂B处输入70.0,(A=100-B-C-D) ,也可插入一行时间列表(Timetable) ,编辑梯度。
在最大压力极限处(Pressure LimitsMax)输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
2)单击确定进入下一画面。
4 柱温箱参数设定:1)在柱温下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击更多键,选中与左侧一致,使柱温箱的温度左右一致。
HPLC仪器操作规程.
HPLC仪器操作规程一.每个月该做的事情.我们是按照月份的变化来保存我们的每天检测结果的,如4月份的检测结果,就想建立个文件夹来专门保存,到了5月份,就想建立个文件夹来专门保存5月的检测结果.那我们就要建立个文件夹来专门对应.点开图标D-2000 Elite Administration.lnk,出现下图,点击图标后,出现下图在应用程序明里面填上你想建立的文件夹名,如:图里现在建立的文件夹名即为200907,再在驱动器里指定你想存储的位置,如,图里指定位置为D 盘下.建立好后,选点创建.然后关闭就可以了.二. 我们每天该做的事情.首先我们打开电脑,然后开仪器(开启的顺序是organizer>L2130>L2200>L2300>L2400,然后选点图标D-2000 Elite.lnk 出现下图点图标,出现连机状态,直接点 ,等画面出现为下图,表明连机成功.确认即可. 点图标,将泵开启.然后点图标,下图所示:点,再点,出现提示框这时,将排液阀打开(即在L2130上的一个白色的凸起旋钮,逆时针旋转90度,然后选择是, 泵开始排液,A B C D 四个管路一个个选点过去,每个管路排液2-5分钟.目前我们4个管路的液体分别为,A 是甲醇,B 是水,C 是乙腈,D 是流动相(未加入乙腈. 排液结束后,点关闭净化,将排液阀顺时针方向旋转关紧. 点,出现下图在里面,我们把流速设定为1ML/MIN,C为10%,D为90%.完成后,点.关闭窗口.再点图标,出现这个图标的意思是,我要选择我今天做的样品的结果存储在哪个文件夹下面,比如,现在是3月份, 我选择2009.03这个文件夹做为我的存储地方.双击即可.再点,出现下图目前里面有两个样品表,但每天的样品量是不同的,这就需要我们根据每天新的样品情况来编辑样品表.随便打开一个样品表,比如20090329-2,出现下图上面就是一个我们比较标准的一个进样表,前面3行,即无论是什么情况,都应该是有的,不允许改变.下面,就根据我们样品实际情况一一加入.注意:我们最后有个冲洗柱子的方法,不是每个进样表都需要有的,柱冲洗的方法需要被用到的时候是,我们每天这批样品检测结束后,没有样品需要被检测了,实验结束时候,才需要把这个柱冲洗的方法加入.设定结束后,我们将,起个我们当天的名字保存,如我们今天是2009年3月30日,我们就可以起20090330,如果我们当天不止一批样品,我们可以起成20090330-1,等下批可以起成20090330-2,等等.关闭窗口.将我们实验须检测的样品,一一放入我们编辑的对应位置.点,出现图,我们就可以选择一个我们刚刚编辑好的样品表打开了,比如,200090329-2是我们刚刚编辑好的,我就选择打开出现下图等白色基线走成一条直线,我们就可以进样了,这个时间基本需要45分钟-1小时左右,有时候可能半小时就行,线走直了后,我们还需要确认一个很重要的工作是,看看仪器的压力,就在上图显示,我们要确认我们的压力在6.5-8MPa 之间,如果超过或者少于都是不对的,要停下来检查,看看是不是流动相用完了,瓶子放错了,管路堵了等等.或电话联系工程师咨询.如果一切没问题,点,就可以开始检测了. 如果我们的检测需要过夜,那我们在点后,检测面会出现,点开,出现图选取使用静止,确认就可以.这样这个样品表被执行完后,可以自我关机.需要注意的是,这个自我关机,仅是关闭了泵,关闭了灯,关了柱温箱的加热,仪器的电源是并没有被关闭的.。
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作1. 目的：明确安捷伦高效液相色谱仪的规范操作，确保数据的准确性。
2. 范围：适用于安捷伦高效液相色谱仪。
3. 职责：检验人员对此负责。
4.操作规程：4.1 系统组成本系统由1个溶剂二元输送泵（分主/A泵和副/B泵）、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。
4.2 准备4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常4.1 将待测样品按要求前处理，准备HPLC 所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。
4.3开机：4.3.1 打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。
4.3.2 打开1200 LC 各模块电源。
4.3.3 待各模块自检完成后，双击[Instrument 1 Online]图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4.3.4 从[视图]菜单中选择[方法和运行控制]画面, 点击[视图]菜单中的[显示顶部工具栏]，[ 显示状态工具栏]，[系统视图],[样品视图]，使其命令前有[√]标志，来调用所需的界面。
4.3.5 把流动相放入溶剂瓶中。
4.3.6 打开冲洗阀。
4.3.7 点击[泵]图标，点击[设置泵…]选项，进入泵编辑画面。
4.3.8 设流速：5ml/min，点击[确定]。
4.3.9 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[启动]，点击[确定] ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
4.3.10 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[关闭]，点击[确定]关泵，关闭冲洗阀。
1220液相色谱操作规程模板
液相色谱操作规程一、仪器的开机1、打开电脑；2、打开仪器电源开关；3、等待数秒后，打开电脑桌面上软件“1220（联机）”；二、方法的建立1、文件—新建—方法；2、分别在柱温箱、梯度泵、VWD（检测器）设置该方法的仪器参数；1）柱温箱：温度；2）梯度泵：流量、溶剂比例或梯度洗脱方法、压力限制、停止时间、后运行时间（梯度洗脱时才需设置）；3）检测器：波长、峰宽（＞0.1min 2s响应时间 5Hz）；3、触发器：触发器类型选“外部”；4、文件—保存—保存所有；三、进样前准备1、文件—打开—方法，选定冲洗方法，控制—下载方法；2、控制—仪器状态；3、上柱前排气1）将已经过滤脱气完成的水和甲醇分别接入A（水）和B（甲醇）流动相；2）右键点击梯度泵窗口，选择瓶填充，输入A（水）和B（甲醇）瓶的实际体积，并设置0.1L设定值之下时停止分析，点击确定；3）旋松仪器机身上带“AAA”的黑色旋钮约90°角；4）右键点击梯度泵窗口，选择方法，将流量改为5ml/min，B（甲醇）百分比改为100%，对B流路进行排气；5）排气过程约3-5min，要求肉眼可见该管路和过滤头处无明显气泡，如有则需延长排气时间；6）右键点击梯度泵窗口，选择方法，将流量改为5ml/min，B（甲醇）百分比改为0%，对A流路进行排气，排气要求见5）；7）A流路排气完成后，右键点击梯度泵窗口，选择方法，将流量改为5ml/min，B（甲醇）百分比改为50%，对A、B流路同时进行排气，排气要求见5）；8）确认排气完成后，右键点击梯度泵窗口，选择方法，将流量改为0ml/min，旋紧仪器机身上带“AAA”的黑色旋钮；4、色谱柱的冲洗1）以50%水和50%甲醇对色谱柱进行冲洗；2）冲洗流量0.02-0.04ml/min，如短时间冲洗可使用1ml/min的流量；3）冲洗色谱柱前，右键点击梯度泵窗口，设定瓶填充中溶剂量的数值；4）右键点击梯度泵窗口，选择方法，设置好冲洗流量和流动相百分比，点击确定，冲洗色谱柱开始；5）一般在进样前对色谱柱进行整夜冲洗，如时间紧迫则使用高流量进行冲洗（至少3h）；5、基线1）更换实验方法中所需的流动相A和B，更改瓶填充流动相实际体积，进行排气，排气方法见3；2）文件—打开—方法，选定样品检测方法，控制—下载方法；3）控制—仪器状态，右键点击梯度泵、柱温箱、VWD（检测器）窗口选择方法，检查色谱条件是否设置正确，条件参数包括流量、流动相百分比或梯度洗脱方法、压力限制、停止时间、后运行时间（梯度洗脱时才需设置）、柱温、检测器波长；4）右键点击梯度泵、柱温箱、VWD（检测器）窗口选择开启；5）查看—在线信号，更改—添加方法中波长的吸光度信号，其他的删除；6）可预测范围设定合适的Y轴正负坐标来观察基线，应用—确定；7）右键点击VWD（检测器）窗口，选择平衡；8）观察在线型号图，等待基线平衡，平衡时间约30min以上；四、进样1、确认梯度泵、柱温箱、VWD（检测器）已就绪；2、确认基线已经平衡；3、按实验要求配置要样品，并进行过滤操作；4、进样前设置1）控制—单次运行；2）样品ID处写样品名称并添加“增加编号”；3）数据文件和结果名称添加样品ID和增加编号；4）选择结果路径；5）开始；5、手动进样器的使用1）等待软件工作站最下方显示等待触发时，可开始进样；2）使用样品润洗进样针3-5次，并排空气泡，针内液体需大于50微升；3）将针扎入进样器，将黑色手柄旋至“LOAD”（进样）状态，缓缓推动进样针，使样品完全进入定量环后，将手柄打回“INJECT”状态，进样开始；五、标准曲线的建立1、打开电脑桌面上软件“1220（脱机）”；2、文件—打开—方法，选定检测方法；3、文件—打开—数据，选定浓度最小的标准样图谱数据；4、积分事件，设定合适的宽度、阀值和最小峰面积，剔除不需要的峰；5、在图谱窗口点击右键—图形编程—定义峰，鼠标点击选择开始和结束时间，替换表中现有峰—确定；6、点击峰/组，更改名称、ISTD号（外标法为0，内标法为内标峰编号）、单位%、分析通道、定量方法（面积）、拟合类型（线性）、是否过零点、校正标记（权重平均值）、级别1-6（由低到高写入标准样的浓度）；7、分析—分析，分析—分析/单一级别校正，勾选校正，校正级别1，清除全部校正，开始，保存所有；8、文件—打开—数据，依次选定浓度略高的标准样图谱数据；9、分析—分析，分析—分析/单一级别校正，勾选校正，校正级别依次增加，开始，保存所有；10、添加完所有标准样图谱数据后，点击检查校正，查看校正曲线；六、数据处理1、打开电脑桌面上软件“1220（脱机）”；2、文件—打开—方法，选定检测方法；3、文件—打开—数据，选定需要处理图谱数据；4、积分事件，设定合适的宽度、阀值和最小峰面积，剔除不需要的峰；5、分析—分析；6、点击报告，查看结果；七、仪器的关机1、关机前进行约1h的色谱柱冲洗工作；1）冲洗使用A（水）、B（甲醇）；2）冲洗过程使B（甲醇）百分比逐渐升高至100%，冲洗30min以上，最终使色谱柱浸在100% B（甲醇）中；3）将流量改为0ml/min，将A和B过滤头浸入B（甲醇）瓶中；2、关闭柱温箱、梯度泵、VWD（检测器）；3、关闭软件工作站；4、关闭仪器机身电源；5、关闭电脑。
安捷伦液相操作规程
安捷伦液相操作规程安捷伦液相操作规程液相操作是化学实验室中常见的一种实验操作，适用于溶液的制备、分离和纯化等实验需求。
为了确保操作的安全性和实验结果的准确性，制定液相操作规程十分重要。
以下是针对安捷伦液相操作的规程，以保证实验操作的标准化和规范化。
1. 实验前准备：1.1. 准备所需试剂和试验仪器，确保实验所需材料的完整性和干净度。
1.2. 检查实验室仪器及设备的运行状态，确保其正常工作。
1.3. 根据实验需求，准备所需的溶剂和溶液，确保其质量和浓度的准确度。
2. 个人防护：2.1. 戴上实验室必备的个人防护装备，如实验手套、实验眼镜等。
2.2. 当液相操作涉及有毒或腐蚀性试剂时，应穿戴全身防护服，并配备呼吸器具。
3. 操作条件：3.1. 确保实验操作区域的整洁和干净，防止交叉污染。
3.2. 控制实验室的温度、湿度和通风等环境条件，以满足实验操作的要求。
4. 操作步骤：4.1. 按照实验步骤依次进行液相操作。
4.2. 操作前进行必要的实验器材和试剂的标定和校准，确保实验参数的准确性。
4.3. 使用专用的操作工具和仪器，避免手工直接接触试剂。
4.4. 操作过程中遵循安捷伦仪器的使用说明书，合理设置操作参数，确保实验结果的准确性。
4.5. 在液相操作过程中，注意保持实验器材和试剂的干净和无污染，防止交叉污染的发生。
5. 废物处理：5.1. 涉及有毒或腐蚀性试剂的实验废物应妥善处理，按照相关规定进行分类和处置。
5.2. 已使用的实验器材和试剂应及时清洗和归还到指定位置。
6. 实验记录：6.1. 在液相操作过程中，准确记录实验操作的必要参数和结果。
6.2. 对于实验中的异常情况或问题，及时记录并进行分析。
6.3. 实验结束后整理实验记录，确保其完整性和准确性。
7. 维护与校准：7.1. 定期对实验所需仪器和设备进行维护和校准，保证其正常运行。
7.2. 对实验操作过程中的操作工具和试剂进行定期检查和替换，确保其正常使用。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪（HPLC）是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、生命科学、环境监测等领域。
为了保证色谱仪的正常运行和准确分析结果，需要遵守以下操作规程：1. 准备工作a. 首先，确保色谱仪及其附件的电源已接通，并确认仪器处于正常工作状态。
b. 检查溶剂桶内的溶剂是否充足并无杂质，并确认管路连接正常。
c. 检查流动相液位是否正常，并调整泵的流速和梯度程序参数。
2. 样品制备和准备a. 样品应充分溶解并过滤净化，以避免样品中的杂质对色谱分离产生干扰。
b. 选择合适的进样方式（自动或手动），并根据进样方式调整进样器的参数。
3. 进样器操作a. 将样品注射器插入进样口，并注意不要损坏色谱柱。
b. 设置进样体积和进样速度等参数，并进行一次空白进样以清洗进样器。
4. 色谱柱准备a. 定期检查色谱柱是否损坏，并根据需要更换。
b. 根据实验需要选择合适的色谱柱，并注意记录色谱柱的批号和使用次数。
5. 柱温控制a. 根据分析需要选择合适的柱温，并使用温度控制系统保持恒定。
b. 注意避免温度突变和波动，以保证分析结果的准确性和重复性。
6. 检测器操作a. 根据需要选择合适的检测器，如紫外-可见光检测器（UV-Vis）、荧光检测器、电导检测器等。
b. 设置检测器的参数，如波长、增益和灵敏度，并进行基线校准。
7. 数据采集与处理a. 启动数据采集系统，并设置采集参数，如采样率、数据类型和运行时间等。
b. 对采集到的数据进行处理和分析，如峰识别、定量分析和峰面积计算。
8. 清洗和维护a. 实验结束后，关闭色谱柱和进样器的阀门，并用溶剂清洗色谱柱和进样器，以防止堵塞和降低杂质残留。
b. 清洗完成后，注意关闭色谱仪的电源，并按照要求对色谱柱和进样器进行维护和保养。
总结：高效液相色谱仪的操作规程包括准备工作、样品制备、进样器操作、色谱柱准备、柱温控制、检测器操作、数据采集与处理以及清洗与维护等。
遵守这些规程可以确保色谱仪的正常运行和准确分析结果，提高实验效率。
Agilent1220 高效液相操作规程
Agilent1220 高效液相操作步骤开机步骤1 检查查看电源是否正常；查看废液是否正常；放置流动相。
2 开机打开仪器电器，无先后顺序。
3 开阀打开泵的清洗阀，逆时针为打开。
切记！4 工作站打开电脑，进后操作系统；双击仪器控制面板图标；右键LC图标，点击打开。
5 控制点击[仪器][仪器状态]；进入仪器控制页面。
6 填充瓶右键泵选择填充瓶，按实际流动项的体积输入确定。
7 清洗柱塞杆右键泵的图标选择[控制]，在清洗柱塞杆处选择定期，一般设置为5min，0.2min。
8 清洗右键泵的图标选择打开，等待泵开启；再右键泵的图标选择[方法]，设置数量为5ml/min；A相100%冲洗5min，B相100%冲洗5min，使用哪一项就冲洗哪一项。
9 结束清洗每一项清洗好后将流量和溶剂配比改为清洗前的设置；顺时针关闭清洗阀。
10 清洗色谱柱如果需要冲洗色谱柱，在仪器状态下先关闭灯，用10%的甲醇冲洗30min，再用90%的甲醇冲洗30min，最后更改为方法的溶剂配比后关闭所有模板即可。
分析样品1 打开方法选择文件下的[打开][方法]；弹出文件浏览界面，从上部指定路经，下部双击选择，找到所需方法后双击打开，如果方法打开，窗口最上部显示方法名。
2 下载方法选择[控制][下载方法]；再选择[控制][仪器状态]，依次右键泵，柱温箱和检测器选择[打开]。
3 查看基线如果信号窗口不在，可选择[视图][在线信号]，调出窗口，可先点调整，再点上或下箭头放大缩小范围，一般设为0-500mAu，看基线是否走平。
4 单针进样待基线平稳后选择控制，单次运行，在弹出的窗口内输入样品ID，指定一个数据路经，主要输入样口名称，一般可增加个编号+样品名，编号排在前一次做样的后一位；在[样品瓶]后输入进样位置，点击开始。
5 序列进样点击[文件][新建][序列]；再点击[序列][编辑]在弹出的窗口中一列列选择并输入位置、方法名称、输入样口名称，编辑好列数后点击[文件]，保存序列，并起个数子序列名；可点击[序列][属性]，指定数据文件存入路经；最后点击[控制][运行序列]。
Agilent 1200高效液相色谱仪操作规程(四元泵)
Agilent 1200(四元泵)高效液相色谱仪的标准操作规程（美国安捷伦公司）一、准备工作1．更换纯净水，冲洗色谱柱的纯净水需每天更换，以免长菌。
各溶剂瓶需明确标明瓶内所装液体。
2．打开液相色谱仪柱温箱，按照色谱柱上标示的方向，连接试验所需色谱柱，连接色谱柱时切勿装反。
3．依次打开色谱仪各模块电源，待各模块自检完成后，双击“HPLC联机”图标，化学工作站自动与1200 LC通讯，进入工作站。
4．将要使用的各通道上的滤头放入已经0.45um滤膜过滤、脱气（约10分钟）的水相或流动相中，点击“Methood and Run Control”界面中的“启动”图标，操作界面被激活，由灰色变为绿色；同时调出检测样品所需的方法。
5．打开Purge阀，点击泵图标，在Setup pump选项中设置流速和比例来排气泡。
若使用A、B两通道，则应分别以5ml/min的流速、100%的比例各排液5min。
（脱气机的内腔体积一般为12ml，故排液时间要长，以便能保证各通道管路中充满检测样品所需的水相和有机相）purge结束后，将泵的流速调为0，旋紧purge阀（切勿在5ml/min流速时旋紧purge阀）。
将流速设为1ml/min，以10%的甲醇水（或乙腈水），冲洗色谱柱30min。
6．点击泵的图标，改变所需通道（已purge完）的比例，已达到检测样品所需的流动相条件，平衡色谱柱。
同时按各溶剂瓶中液体的真实体积，设定溶剂瓶体积。
二、数据采集1．点击左上角样品瓶图标，选择样品信息，更改文件保存路径、样品名称、样品位置等信息按要求填写，确认无误后点击确定。
2．点击自动进样器图标，选择设置进样器，设定进样体积。
选择进样方式，一般选择洗针进样方式，洗针瓶位置一般设为样品托盘的第91位，洗针液体一般为50%的甲醇水溶液。
3．点击检测器图标，更改自己所需的检测波长，参比波长（如无需参比波长请关闭），打开紫外灯。
如为DAD检测器时，光谱信息储存请选择全部，以便为图谱处理时提供所需依据。
Agilent LC1220操作指导书
Agilent1220HPLC操作规程1. 系统组成：本系统由溶剂输送泵（二元梯度泵）、手动进样器、VWD紫外可见检测器、柱温箱、内置EZChrom色谱数据工作站的电脑等组成，另外还包括打印机等辅助设备。
2. 准备2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱2.3 配制样品（也可在平衡系统时临用配制），2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
3. 开机：接通HPLC电源，按下电源开关。
等待HPLC1220泵及检测器自检完毕。
打开打印机（根据需要）、柱温箱（根据需要）、电脑显示器、主机电源；3.1 启动EZChrom工作站：在桌面双击“LC1220(联机)”图标，进入EZChrom 的控制界面。
3.2 更换流动相并排气泡1)将溶剂瓶中管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中2)逆时针转动泵的排液阀60～90°，打开排液阀3)点击“文件”“打开”“方法”,选择相应通路排气泡程序，如“A排气泡”或“B排气泡”。
点击“控制”“下载方法”，在“控制”“仪器状态”界面，点击梯度泵绿色“开启设备”按钮打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。
（注意：在排气泡之前一定要先打开排气阀）4)点击“控制”“仪器状态”，点击梯度泵红色“关闭设备“按钮，关闭泵。
将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5)如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6)如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流量为5ml/min，开启泵，冲洗3min后再停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。
（注意：在排气泡之前一定要先打开排气阀）3.3打开泵：点击“控制”“仪器状态”，点击该界面左侧的溶剂瓶图标，输入“实际体积、总体积、溶剂操作”等相关数据，确认即可。
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Angient 1220 HPLC操作规程
1、开机
打开工作站电脑与仪器（仪器每个组块下方的方形按钮）
2、打开软件
双击桌面图标，对话框跳出后，双击图标，进入系统。
3、仪器设置
从菜单“控制”中，点击“仪器状态”对话框，左侧“单元泵”设置流速，右侧“VWD”设置波长。
（或直接打开预先设置的方法运行仪器）
4、冲旁路
逆时针打开脱气阀，设置过程中逐渐增加流速(最大可至3ml/min)进行脱气，待管路中的气泡排尽后，务必降低流速至1.0ml/min后，方可关闭脱气阀。
5、方法设置
①新建和保存方法：从菜单“文件”中，打开“方法”—>“新建”。
在“仪器设置”对话框下，设置单元泵流量，VWD波长，时间等指标，另存为方法名称。
②打开方法：从菜单“文件”中，打开“方法”—>“打开”，。
6、平衡
脱气之后，用流动相平衡色谱柱，约20min。
7、进样
单击进样图标，设置相应名称，打开手动进样旋钮，进样针排尽空气，进样，关上进样旋钮。
8、数据处理
双击桌面图标，右击，离线打开。
单击菜单“文件”，选择保存路径“Data”中的文件—>“打开”。
数据分析：点击（积分关闭）
或点击分析—>选择积分事件—>设置宽度、阈值，积分关闭—>点击积分。
9、关机
顺序：泵流速调为0—>关闭VWD—>软件关闭—>关仪器—>关工作站电脑。