细菌的培养与接种技术 PPT课件
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微生物学实验ppt课件
器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等，不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落，了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量，适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线，操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面，培养后计数形成的菌 落数，适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖，通过提供适宜的细胞环境， 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性，利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用：如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性，如营养需 求、代谢产物等，进行进一步的分类 鉴定。
实验三：细菌分离接种技术和培养
实验三 细菌分离、接种技术和培养法
实验三 细菌分离、接种技术和培养法
目的要求：
1、掌握细菌分离培养的基本要领和方法。
2、掌握平板划线、斜面培养基等接种方法。
3、熟悉细菌分离培养的环境和条件。
实验内容：
1、 细菌划线分离培养：连续划线分离培养法 分区划线分离培养法
2、 纯培养获得与移植：试管间的斜面移植； 可疑菌落纯培养移植
Staphylococcus epidermidis on blood agar With on hemolysis
细菌纯培养
细菌斜面 纯培养法
细菌纯培养
液体培养基
半固体培养基穿刺培养
实验报告：
1、细菌分离培养和纯培养的实验过程。 2、本次细菌分离培养的结果。
细菌划线分离培养
Streptococcus pyogenes on blood agar, illustration b-hemolysis.
Streptococcus pneumoniae on blood agar, illustration a-hemolysis.
Staphylococcus aureus on blood agar, illustration b-hemolysis.
3、 液体培养基增菌和培养（示教）
4、 半固体培养基穿刺培养（示教）
说明：
病原菌的人工培养一般采用35～37℃，培养时间多数为18～24 h，但有 时需根据菌种及培养目的作最佳选择，如细菌的药物敏感试验则应选用对数 期的培养物。将标本或培养物划线接种在固体培养基的表面，因划线的分散 作用，使许多原混杂的细菌在固体培养基表面上散开，称为分离培养。一般 经过18～24 h培养后，单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团，称为 菌落（colony）。挑取一个菌落，移种到另一培养基中，生长出来的细菌均 为纯种，称为纯培养（pure culture）。从混杂的微生物群体中获得只含有 某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。微生物在固体培养 基生长形成的单个菌落一般是一个细胞繁殖而成的集合体，因此可通过挑取 单菌落而获得一种纯培养。
实验三 细菌分离、接种技术和培养法
目的要求：
1、掌握细菌分离培养的基本要领和方法。
2、掌握平板划线、斜面培养基等接种方法。
3、熟悉细菌分离培养的环境和条件。
实验内容：
1、 细菌划线分离培养：连续划线分离培养法 分区划线分离培养法
2、 纯培养获得与移植：试管间的斜面移植； 可疑菌落纯培养移植
Staphylococcus epidermidis on blood agar With on hemolysis
细菌纯培养
细菌斜面 纯培养法
细菌纯培养
液体培养基
半固体培养基穿刺培养
实验报告：
1、细菌分离培养和纯培养的实验过程。 2、本次细菌分离培养的结果。
细菌划线分离培养
Streptococcus pyogenes on blood agar, illustration b-hemolysis.
Streptococcus pneumoniae on blood agar, illustration a-hemolysis.
Staphylococcus aureus on blood agar, illustration b-hemolysis.
3、 液体培养基增菌和培养（示教）
4、 半固体培养基穿刺培养（示教）
说明：
病原菌的人工培养一般采用35～37℃，培养时间多数为18～24 h，但有 时需根据菌种及培养目的作最佳选择，如细菌的药物敏感试验则应选用对数 期的培养物。将标本或培养物划线接种在固体培养基的表面，因划线的分散 作用，使许多原混杂的细菌在固体培养基表面上散开，称为分离培养。一般 经过18～24 h培养后，单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团，称为 菌落（colony）。挑取一个菌落，移种到另一培养基中，生长出来的细菌均 为纯种，称为纯培养（pure culture）。从混杂的微生物群体中获得只含有 某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。微生物在固体培养 基生长形成的单个菌落一般是一个细胞繁殖而成的集合体，因此可通过挑取 单菌落而获得一种纯培养。
高中生物选修1微生物的实验室培养ppt(共54张PPT)
稀释涂布平板法
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结 合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想， 第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如， 酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触 任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
3类。
（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后
分装前，要进行的是
。 调整pH
（6）右表中各成分重量确定的原则
是 依微生物的生长需要确定 。 （7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该
增加的成分
琼脂（或凝固。剂）
一、课题目标：
了解有关微生物及培养基的基础知识，进 行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构
青霉
生殖 孢子生殖
直立菌丝 营养菌丝
腐生生活
（二）培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制
而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养
液。
1.培养基的类型
（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、
半固体培养基。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。
（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。
芽孢又小又轻，可以随风飘散。
平板划线的操作方法
C是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；
且体内一般不含有叶绿素.
寄生菌 大部分病原菌
消毒与灭菌的概念及两者的区别
（2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。
有的碳源同时是能源，如葡萄糖；
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。
微生物培养技术_图文_图文
• 二、培养基对微生物的选择作用
【案例】分解纤维素的微生物的分离 （一）、基础知识
1、纤维素与纤维素酶
纤维素是一种多糖 纤维素酶是一种复合酶
纤维素
C1酶、Cx酶 纤维二糖
葡萄糖苷酶
葡萄糖
（二）、筛选
1、方法： 刚果红染色法
原理：刚果红（CR）可以与纤维素形成红 色复合物，当纤维素被纤维素酶分 解后，红色复合物无法形成，出现 以纤维素分解菌为中心的透明圈， 我们可以通过是否产生透明圈来筛 选纤维素分解菌。
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
鉴别培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某 种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同 种类的微生物。
例如：在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来 鉴别大肠杆菌。 如果有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝 结合，使菌落呈蓝紫色，并带有金属光泽。 (课本15页)
（3）按成分分：合成培养基和天然培养基
微生物培养技术_图文_图文.ppt
非细胞生物：病毒
微生物
原核生物：细菌、放线菌、支原体、 立克次氏体
真核生物：真菌（酵母菌、霉菌）
菌落：
• 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁 殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有 一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落 。
• 菌落是鉴定菌种的重要依据。
细菌的营养类型
或 80 ℃下煮15min C、化学药剂消毒法:用酒精进行皮肤消毒;
氯气消毒水源 D、射线消毒法
2、灭菌
（1）定义：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的
微生物，包括芽孢和孢子 。
（2）灭菌的方法：
A、灼烧灭菌
B、干热灭菌：
160-170 ℃下加热1-2h。
最新微生物的培养和应用课件PPT课件
选择培养基和鉴别培养基的比较
从众多微生物 中分离所需的 微生物
加入青霉素分离得 到酵母菌和霉菌
鉴别不同种 类的微生物
伊红—美篮培养基 使大肠杆菌的菌落 呈深紫色，可以鉴 别大肠杆菌
几种选择培养基：
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A.C A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌
2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮源是
A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐
A.C
C 蛋白质
D 无机氮化物
下表关于四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢的类 型，描述正确的是
1000mL牛肉膏蛋白胨固体培养基配方
（2）特殊营养：—生长因子
细菌生长必需，而往往自身不能合成的 化合物，如维生素、某些氨基酸、碱基等
（3）pH、氧气等要求
四：营养基配制的原则
1：目的要明确 配制培养基要根据 培养的微生物、培养
的目的、培养基的用途来确定培养基的化 学成分、物理状态。 2：营养要协调 3：PH要适宜
五、培养基的配制过程
霉菌 5.0～6.0 细菌6.5～7.5 放线菌 7.5～8.5
以上反应了微生物生长受到哪些条件影响？
三、培养基的营养物质 1、水 2、碳源（提供碳元素的物质） 3、氮源（提供氮元素的物质） 4、无机物（无机盐） 5、生长因子（微生物生长不可缺少的微 量有机物。如维生素、含氮碱基）
碳源
▪ 可作为碳源的物质有: ▪ 含碳无机物: 碳酸盐 碳酸氢盐 二氧化碳 ▪ 含碳有机物： 糖类（主要）
细菌的分离、培养和鉴定PPT课件
二）仪器的自动化鉴定：VITEK 系统、M IDI系统、 BIOLOG 系统、SENS ITITRE 系统、 AUTOSCEPTOR系统以及MICROSCAN系统等 （ATB Expression）
三）分子生物学方法:基因测序、指纹图谱技术、基
因探针技术、聚合酶链反应( PCR)、GC 含量测定
等
精品ppt
PCR和核酸杂交单独或结合在仪器已经形成 比较经典的核酸检测技术, 目前这两者已经 得到了较大范围的推广和应用
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微生物学工作必须在一个清洁卫生的环 境中进行，实验室的整洁与否直接影响 实验效果。在卫生状况差而零乱的实验 室中不可能取得好的实验效果；实验室 脏、乱，不但增加了污染的机会，同时 也影响人的安全和情绪，所以，清洁、 明亮的实验环境是顺利开展工作的保障 之一；保持实验室清洁是学生进入实验 应尽的责任。
④ 鉴别培养基：是一类含有某种特定化合物或试剂的培养
基。某种细菌在这种培养基上反应；
从而达到区分不同的微生物精品。ppt （TCBS）
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❖ 病料在接种培养基后，经过一段时间，应检查其 生长状况。首先用肉眼检查有无细菌生长；若有， 则需进一步检查菌落是否纯一。形态特征包括： 大小、形状、突起或扁平、凹陷、边缘（光滑、 波形、锯齿状、卷发状等）、颜色（红色、灰白 色、黄色等）、表面（光滑、粗糙等）、透明度 （不透明、半透明、透明等）和粘度等
细菌的分离、培养与鉴定
王欣欣
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1
一、细菌的分离
1、从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的 方法称为分离。 2、分离的目的在于从被检材料中、或者从 污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。
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2
1)病料采集
《细菌分离培养》课件
在工业领域的应用
食品工业
在食品工业中，细菌分离培养用 于检测食品中的病原菌，保障食
品安全。
生物能源
利用细菌发酵产生生物燃料，如乙 醇、生物柴油等，替代化石燃料。
生物降解
某些细菌能够降解污染物，对环境 保护和治理具有重要意义。
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展与未来发展方向
新技术的开发与应用
基因编辑技术
人工智能与机器学习
《细菌分离培养》 PPT课件
• 细菌分离培养概述 • 细菌分离技术 • 细菌培养技术 • 细菌的鉴定与分类 • 细菌分离培养的应用 • 展望与未来发展方向
目录
01
细菌分离培养概述
细菌分离培养的定义
细菌分离培养是指从混合菌群中分离 出单一菌种的过程，通过选择性培养 基和特定的培养条件，使目的菌种得 以繁殖并从其他微生物中分离出来。
高了分离效率。
03
细菌培养技术
培养基的种类与制备
固体培养基
用于细菌分离和纯化， 制备时需添加琼脂作为
凝固剂。
液体培养基
用于大量繁殖细菌，制 备相对简单。
选择性培养基
加入特定成分抑制某些 细菌生长，突出所需分
离的细菌。
鉴别培养基
根据细菌代谢产物不同 ，通过指示剂变化鉴别
不同细菌。
培养方法
01
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菌种分离
将样品中的微生物接种到选择好的培 养基上，通过培养得到单一菌落。
02
细菌分离技术
划线分离法
总结词
通过在固体培养基上划线，使细菌分散生长的方法。
详细描述
划线分离法是最早的细菌分离技术之一，通过在固体培养基表面划线，使细菌 在划线区域内生长繁殖，形成单个菌落。该方法适用于细菌的纯培养分离。
实验5细菌的接种及分离培养
观察记录菌落形态和特征
01
菌落形态
观察并记录不同细菌在培养基上 形成的菌落形态，如圆形、椭圆 形、不规则形等。
菌落特征
02
03
菌落大小和颜色
记录菌落的色素、透明度、边缘 形状、表面特征（光滑或粗糙） 等。
观察并记录菌落的大小和颜色， 这些特征有助于鉴别不同种类的 细菌。
测定细菌的生长曲线
1 2
生长曲线绘制
观察与记录
定时观察细菌的生长情况，记 录菌落形态、颜色、大小等信 息，以便后续分析。
分离纯化
对于需要分离纯化的细菌，可 采用划线法、稀释涂布法等方 法进行分离纯化，获得单一菌 落。
保存菌种
将分离纯化后的菌种进行保存 ，以便后续实验使用。可以采 用甘油管藏、冷冻干燥等方法
进行保存。
04 实验结果分析
实验结果：通过实验，我们 成功地分离培养出了纯种的 细菌，并观察到了其在不同 培养条件下的生长情况。具
体数据如下表所示
| 培养条件 | 菌落数 | 生长情 况|
实验总结
| --- | --- | --- |
| 温度37℃、湿度适宜 | 120 | 良好 |
| 温度4℃、湿度适宜 | 0 | 无生 长|
结果分析
分析实验结果，比较不同细菌之间的差异，探究其原 因。
结论总结
根据分析结果，得出关于细菌接种及分离培养的结论， 并指出实验中可能存在的误差和不足之处。
05 注意事项与实验总结
注意事项
安全注意事项 实验应在无菌环境下进行，避免外界细菌污染。
使用后的器材和培养基应进行正确的消毒处理，避免交叉污染。
实验目的
本实验旨在学习细菌的接种及分离培养技术，掌握无菌操作技术和显微观察技 术，了解细菌的生长特性和培养条件。
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细菌接种法
• 平板划线接种法：
★目的：使混合的细菌呈单个分散生长， 形成单个菌落，以便获得纯菌。
★方法：
➢分区划线法：适用于含菌量较多的标本
➢连续划线法：适用于含菌量较少的标本
• 液体培养基接种法
• 穿刺接种法 :用于观察细菌动力
• 斜面接种法
• 倾注培养法:用于细菌计数
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➢完全封闭，应有缓冲区。 ➢用前要用紫外灯消毒30min,定期用甲醛熏蒸消毒。 ➢仅限于分装培养基及传染性强的细菌接种。 ➢要保证本室的无菌状态。 ➢保证本室的温度。 ➢无菌实验室可用超净工作台代替。
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• 常用玻璃器材的准备 • 培养基的成分和作用 • 培养基的种类 • 培养基的制备
细菌的分离培养与接种技术
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进行细菌学实验的场所，标本的接种、培养、分 离、鉴定、药敏等工作在此完成。
➢细菌室要防止外界污染，还要避免细菌播散。 ➢配备紫外灯、消毒剂等。注意定期消毒。 ➢对无菌物品和标本应明显分开放于指定位置，同
时要对用过的物品及时进行灭菌处理。
➢保证细菌室的温度。
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• 培养基：是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综
合营养基质。
(1) 营养物质：蛋白胨(氮源)、肉浸液（氮源和碳源）、牛 肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清、生长因 子、无机盐类
(2) 水 (3) 凝固剂：琼脂、明胶 (4) 抑制剂：非生长必需，而是选择、鉴定及判断结果的需要 (5) 指示剂：便于观察细菌
分区划线法
第一区划线
灭菌接种环
第二区划线
灭菌接种环
第三区划线
灭菌接种环
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• 菌落
★定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形 成单一肉眼可见的细菌集团。
★菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透 明度、湿润度、黏度、溶血性
★菌落类型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型 （M）
较少的标本，如葡萄糖肉汤。
• 厌氧培养基：用于培养厌氧菌
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培养基的制备
• 玻璃器皿的消毒灭菌 • 制备的程序
– 调配 – 溶化 – 矫正 – 过滤澄清 – 分装 – 灭菌 – 鉴定 – 保存
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细菌接种的基本程序
灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本 沾取标本 接种 灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境
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精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
是细菌实验室内用于无菌操作的小室，要求更严格。
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培养基的种类（按用途分类）
• 基础培养基：培养营养要求不高的细菌，如普通
平板
• 营养培养基：能满足营养需求较高细菌的生长，
如血平板
• 鉴别培养基：含有某些特定的底物，用于鉴别细
菌，如克氏双糖培养基（KIA）
• 选择培养基：具有选择性抑制作用，用于选择性
的培养目的菌，如SS平板
• 增菌培养基：促进目的菌的生长，适用于含菌量
• 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。
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菌落
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