微生物学整理--肠杆菌科

格兰阴性杆菌肠杆菌科：共同特点大肠埃希菌沙门菌属志贺菌属克雷伯菌属沙雷菌属变形杆菌属耶尔森菌属形态结构1）格兰阴性杆菌；2）中等大小；3）无芽孢，多数有周边毛，少数有荚膜1)格兰阴性短杆菌2)有周鞭毛、菌毛，某些菌株有微荚膜1）格兰阴性杆菌2）有菌毛，周鞭毛，无荚膜1）格兰阴性杆菌2）无鞭毛，无荚膜，多数有菌毛1）格兰阴性2）卵圆或球杆状，常成双排列3）有明显荚膜，无芽孢，无鞭毛，有菌毛1）格兰阴性小杆菌2）粘质沙雷菌是细菌中最小者，可用于检查除菌滤器的除菌效果（最大炭疽）3）周鞭毛，除臭味沙雷菌外均无荚膜，无芽孢格兰阴性杆菌，呈多形性，周鞭毛格兰阴性球杆状，偶有两级染色，无荚膜，22~25度有周边毛，35度无鞭毛（鼠疫耶尔森无鞭毛）培养特征1）需氧或兼性厌氧；2）营养要求不高；3）选择性培养基：麦康凯（Mac.C），S.S,伊红-美兰（EMB）1）兼性厌氧2）营养要求不高3）在普通琼脂和血琼脂平板生长良好，菌落呈圆形、湿润、灰白色、、、4）在肠道培养基上能发酵乳糖产酸1）兼性需氧2）营养要求不高；3）在SS、Mac等选择鉴别培养基上形成中等大小无色半透明的S型菌落1）兼性厌氧2）营养要求不高，能在普通培养基上生长，中等大小，半透明的光滑型菌落3）在肠道杆菌选择培养基上形成不分解乳糖的菌落(宋内氏菌除外，它迟缓分解乳糖）1）在血琼脂上菌落呈圆形、凸起、灰白、不溶血。

光亮的大而粘液菌落，相邻菌落易于融合，呈粘液状，用接种环可拉起长丝（拉丝实验）2）在MAC上多数形成发酵乳糖产酸的红色菌落室温下可产生脂溶性或水溶性色素，菌落呈粉红色，红色1，点种在营养/血琼脂培养基上可迅速生长弥漫成同心圆形波纹状薄膜，布满培养基表面，称迁徙生长。

可悲胆盐，式碳酸，苯酚等抑制。

2）在肠道选择鉴别培养基上形成无色透明，乳糖不发酵的菌落，产硫化氢的菌落在SS上菌落中心呈黑色1）最适温度20~28,4度能生长+2）在肠道培养基（如MAC）呈无色，半透明，较小的不发酵乳糖型菌落生化反应+ 1）活泼，能分解多种糖；葡萄糖，O/F F2）氧化酶（-）1）氧化酶阴性，硝酸盐还原阳性2)活泼，能分解多种糖产气；分1）分解葡萄糖产酸，多数产气2）不分解乳糖3）H2S(+) 赖/鸟1）分解葡萄糖，产酸不产气2）不分解乳糖，宋内氏志贺菌能1）葡萄糖酸盐阳性，本病氨酸脱羧酶阴性2）分解葡萄糖1）葡萄糖酸盐阳性，苯丙氨酸脱羧酶阴性2）分解葡萄糖1）苯丙氨酸脱羧酶阳性，葡萄糖酸盐阴性2）H2S阳，乳糖1）生化反应特征不稳定，分解葡萄糖产酸不产气触酶实验（+）3）都能够还原硝酸盐为亚硝酸盐4）致病菌多不分解乳糖，非致病菌多分解乳糖解乳糖3)H2S（-）尿素酶（-）4)IMViC:++——5)MIU：++—6)KIA：AA+—氨酸脱羧（+）4）吲哚（—）尿素酶（—）5）枸橼酸盐利用：多数（+）（伤寒阴性）IMViC:-+-+迟缓发酵乳糖3）H2S（-）吲哚（-/+）来氨酸脱羧（-）4）尿素酶（-）枸橼酸盐利用（-）5）4种志贺菌生化鉴别见下表产气，乳糖（+/-）脲酶（+）VP（+）3）吲哚（-）鸟氨酸脱羧（-）4）KIA:AA+-5）MIViC：--++产气，不分解乳糖（但因本身产色素，也成红色），DNA酶阳性（与其他菌鉴别）3）鸟氨酸与赖氨酸脱羧酶，明胶酶，酯酶阳性4）H2S阴性，MIViC：--++5）阳，能迅速分解尿素2）H2S阴，乳糖阴3）脲酶多阳性，鸟氨酸脱羧酶阳4）VP试验22~25度阳性，35~37度阴性抗原结构1）O抗原;菌体抗原2）H抗原;鞭毛抗原3）表面抗原1）O抗原：细胞壁LPS，耐热，血清学分型基础2）H抗原:不耐热蛋白抗原3）K抗原：表面抗原，不是每种菌株都有K抗原，分LAB三类，致病性大肠埃希菌的K抗原主要为B类1)O抗原:每个沙门菌的血清型含一种或多种O抗原，凡含有相同抗原组分的归位一个组。

引起人类疾病的沙门菌多在A~F组2)H抗原：分第Ⅰ相第Ⅱ相2种。

第Ⅰ相特异性高，又称特异相。

第Ⅱ相特异性低，又称非特异相。

同时含有ⅠⅡ相H抗原的称双相菌，仅有一种者为单相菌。

根据H抗原不同，将沙门菌分成不同的菌型1)O抗原:根据O抗原不同，可分为四群（ABCD群）40多个血清型（亚型）2)群特异性O抗原，常在几种近似的菌种间出现，特异性较低，福氏菌中由于所含群抗原不同，可将某些菌型分为多种亚型3)型特异性O抗原，特异性较高，用于区别菌型4)K抗原:无血清学分型意义，可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应O抗原为分群的主要依据，用于外斐试验，以辅助诊断立克次体3)表面抗原：主要有Vi抗原M抗原和5抗原。

Vi抗原即毒力抗原，不稳定，它可阻止O抗原与相应抗体结合抵抗力弱，不耐热（60度，30分钟）、干燥，一般消毒剂易于杀灭日渐耐药致病性1）肠道外感染2）肠道感染：急慢性肠道炎症、食物中毒、旅行者腹泻和肠热证等1）侵袭力：K抗原--抗吞噬、抵抗抗体和补体。

菌毛--粘附、定植2）毒素：内毒素，外毒素，志贺毒素3）见下表一、致病物质1）侵袭力，能穿过肠上皮屏障2）菌毛，帮助细菌粘附肠粘膜上皮细胞3）Vi抗原，可以阻断相应抗体和补体的作用，保护被吞噬细胞吞噬的细菌不被破坏，反而增殖，为胞内寄生菌（产单核李斯特菌，结核杆菌都是胞内寄生）4）内毒素，课激活补体系统，引起肠道炎症5）肠毒素二、所致疾病1）肠热症（伤寒副伤寒总称）2）食物中的1）侵袭力，主要有K抗原，菌毛组成2）内毒素，出现里急后重3）外毒素，志贺毒素，细胞毒素，肠毒素，神经毒素医院感染常见细菌，引起典型的原发性肺炎，也可引起肺外感染易引起超光谱β-内酰胺酶（ESBL）以泌尿系统多见，并与泌尿道结石有关。

还可引起食物中毒广泛存在自然界，能在冷藏温度下生长的少数肠道致病菌，人兽共患病原菌，进出口食品的常规检测项目3）败血症4）无症状带菌者微生物学检测标本采集：肠道外感染：血液，体液。

尿液，呼吸道及伤口分泌物等肠道内感染：疾病早期采集新鲜粪便，肛拭子标本采集:伤寒、副伤寒：第一周采血，第二三周采粪尿，全程可采骨髓血清学检查（肥达氏反应）第二周起课采血清败血症，采血肠炎，粪便，呕吐物，可疑实物标本采集：粪便食物其他常用鉴别实验MIU实验：动力—吲哚—尿素酶IMViC实验：吲哚—甲基红—VP—枸橼酸盐利用氨基酸脱羧实验双糖铁KIA一、科间鉴定，常见格兰阴性杆菌的鉴别+肠杆菌科弧菌科非发酵菌巴斯德菌科O/F实验 F F O/— F氧化酶—+ +/—+鞭毛类型周/无单鞭毛单/周/丛/无无形态杆状弧状、杆状杆状球杆状二、属间鉴定，常见肠杆菌科细菌的初步生化分群+菌属苯丙氨酸葡盐菌属苯丙氨酸葡盐埃希菌属——克雷伯菌属—+志贺菌属——沙雷菌属—+沙门菌属——肠杆菌属—+爱德华菌属——哈夫尼亚菌属—+枸橼酸杆菌属——耶尔森菌属——变形杆菌属+ —普罗菲登思菌属+ —摩根菌属+ —大肠埃希菌肠道感染的疾病及机制致病因素所致疾病ETEC 肠产毒大肠埃希菌肠毒素婴幼儿、旅行者腹泻EPEC 肠致病。

粘附、大量繁殖、破坏刷状缘婴幼儿腹泻（消化不良）和微绒毛EIEC 肠侵袭、、侵袭力、志贺样毒素较大儿童和成人腹泻（又称痢疾样大肠埃希菌）EHEC 肠出血、、志贺毒素出血性肠炎、HUS婴幼儿急/慢性腹泻EAEC 肠凝集。

集聚性粘附菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞形成砖状排列，使微绒毛变短肠道外感染大肠埃希菌的鉴定：主要依据1）格兰阴性杆菌，周鞭毛，动力（+）2）在肠道选择培养基上形成乳糖分解的菌落3）氧化酶（-）硝酸盐还原（+）O/F葡萄糖：F型4）KIA底层斜面都产酸，产气。

H2S（-）5）IMViC;++——肠道感染大肠埃希菌的鉴定一．ETEC：检测肠毒素（ST、LT）或其基因1）肠毒素的检测：双向琼脂扩散实验测定LS，乳鼠灌胃试验测定ST，家兔结扎回肠短试验测定LT和ST 2）基因检测：ST/LT基因3）血清学试验：肠毒素阳性株可用ETEC有关的多价O血清及单价血清作玻片凝集试验，以确定其O抗原二、EIEC1）与志贺菌相似的特点+生化反应：:动力（—）、不/迟分解乳糖，赖氨酸脱羧酶（-）致病特点：大量繁殖和侵袭力，临床表现类似菌痢抗原：与志贺菌有交叉抗原2）鉴定：血清学：EIEC O/H分型其他3）鉴别（与志贺菌）醋酸钠、葡萄糖铵利用实验、粘质酸盐产酸实验（+）三、EHEC筛选：不/迟分解山梨醇鉴定：以O157/H7血清作玻片凝集或试管凝集埃希菌、志贺菌、沙门菌的主要鉴别菌属鞭毛乳糖H2S 吲哚枸橼酸赖氨酸鸟氨酸埃希周鞭毛+ - + - + +志贺无- - + - - -/+沙门周鞭毛- + - + + +/-4种志贺菌的生化鉴别菌名血清型甘露醇鸟氨酸脱羧酶棉籽糖迟缓分解乳糖痢疾志贺菌 A - - - - 福氏志贺菌 B + - + - 鲍氏志贺菌 C + - - - 宋内志贺菌 D + + + +葡萄糖酸盐、苯丙氨酸阴性组的生化鉴别菌属动力H2S 枸橼酸盐吲哚尿素酶赖氨酸乳糖埃希+ - - + - +/- +/- 志贺- - - -/+ - - -/+ 沙门+ +/- +/- - - + -爱德华+ + - + - - +/- 枸橼酸+ +/- + -/+ +/- - +/- 耶尔森+ - - -/+ +/- +/- -/+葡萄糖酸盐阴性，苯丙氨酸阳性组细菌的生化鉴别菌属H2S 鸟氨酸枸橼酸盐尿素酶变形杆+ +/- + ++摩根- + - ++普罗费登斯- - + +/-葡萄糖酸盐阳性，苯丙氨酸阴性组细菌的生化鉴别菌名动力山梨醇棉籽糖枸橼酸盐DNA酶克雷伯- + + + -肠杆+ +/- + + -沙雷+ + +/- + +哈福尼亚+ - - - -。