缺氧缺血性脑损伤(HIE)小鼠模型详细步骤及说明

缺氧缺血性脑损伤(HIE)小鼠模型详细步骤及说明原型物种人

来源低氧导致的脑损伤

模式动物品系SPF级Balb/c 小鼠，雄性，6~8周

实验分组随机分组：对照组，模型组，阳性药物组和药物组，每组15只实验周期4~6w

建模方法将实验动物置于可视恒压舱内，并持续注入流量为5L/min的低氧气体（8%O2及92%N2），每次90min。每周干预1~3次，干预周期为3周。

应用疾病模型

模型评价

Morris水迷宫实验所有组别，于12周龄时，进行Morris水迷宫试验，试验分为定位航行实验和空间探索实验。

1. 定位航行实验：小鼠连续接受5天的训练，每天4次，每次时间间隔

30min，记录下小鼠从4个入水点和入水并找到平台所需要的时间，即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果进入到最后统计。

2. 空间探索实验：实验的第6天，撤去平台，从距离平台的最远端入水后，将小鼠放入水中，记录下30s内小鼠的游泳轨迹，并观察分析小鼠在目标象限的停留时间，以及它的穿越平台的次数。

行为学结束后，将各组小鼠摘取全脑，冰上剥去小脑，放入4%多聚甲醛中固定，用于病理学检测。

1. 免疫组化染色

观察海马区和皮层去Aβ淀粉样斑块染色情况。光学显微镜下，计数6个视野下每组小鼠同一部位的阳性斑块数量，作统计分析。

2. Thiolain S染色

石蜡白片用Tholain S荧光染料染色，染色检测海马区以及皮层区Aβ淀粉样斑块（绿色荧光）的表达。荧光显微镜下，计数6个视野下每组小鼠同一部位的阳性斑块数量，作统计分析。

应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显著差异。