优选第二章血液一般检验红细胞检验
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红细胞计数检验PPT课件
价贵；环境 健康人群普查； 要求较高 大批量标本筛检
.
11
质量保证（显微镜法）
显微镜法红细胞计数误差来源有三个
技术误差 仪器误差 分布误差
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12
技术误差
31 2 3 4
采血部位不当 稀释倍数不当
充液不当 血液凝固
.
13
参考值
RBC存在年龄 与性别的差异
成年男性：（4.09～5.74）×1012/L 成年女性：（3.68～5.13）×1012/L 新生儿：（5.2～6.4）×1012/L 婴儿： （4.0～4.3）×1012/L 儿童： （4.0～4.5）×1012/L
显微镜计数法 血液分析仪法
.
6
检测原理
显微镜计数法（重点）
RBC未排除 白细胞数量影响
用等渗液稀释血液后，滴入 血细胞计数板，计数一定范 围内的红细胞，经换算得每 升血液中的红细胞数。
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7
操作
10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血
加入2ml等渗液中，混匀
混悬液充入改良牛鲍计数板
高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个 中方格内的红细胞总数A。
女性 87～112 g/L
.
40
临床意义（同红细胞计数）
判断贫血程度优于红细胞计数 临床应用注意事项
.
34
方法学评价
SDS-Hb测定法（ HiCN替代方法）
优点：操作简单 ，试剂无毒，结果准确， 重复性好 。
缺点：SDS质量差异大；消光系数未定， 不能直接计算Hb浓度；不能测定SHb ；
SDS破坏白细胞。
.
35
方法学评价
AHD575测定法
优点：试剂简易无毒、呈色稳定、准 确性与精密性较高。
临床检验医学知识专题讲座
血液标本采集和血涂片制备
血液标本采集和抗凝剂选择 全血：临床血液学检验：血细胞计数、分类 血浆：临床生化检验（内分泌激素测定等）；血
栓与止血旳检验 血清：除纤维蛋白原等凝血 因子外，其他成份与血浆 基本相同，多数静 脉 采 血 法 (venipuncture for blood collection)
第二章 血液一般检验
第一节 红细胞检验
红细胞（red blood cell ；erythrocyte） 起 源 于 骨 髓 造 血 干 细 胞 （ colony forming unit-spleen，CFU-S）
红细胞旳主要生理功能：经过胞内旳血红 蛋白来实现旳。
一、红细胞计数(red blood cell count， RBC)
（2）红细胞增多
1）原发性红细胞增多：见于真性红细胞增 多症、良性家族性红细胞增多症等。
2）继发性红细胞增多：常见于能够引起低 氧血症旳疾病：心血管病、肺疾病、异 常血红蛋白病。
肾上腺皮质功能亢进（库欣病），可能与 皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有 关
药物肾上腺素、糖皮质激素、雄激素等。
(3）相对性红细胞增多
Na2C10H14O8N2+Ca2+→ aC10H12O8N2+2Na++2H+ 特点：对血细胞形态、血小板计数影响很小（但
影响血小板汇集）。
根 据 国 际 血 液 学 原 则 化 委 员 会 (International Committee for Standardization of hematology , ICSH ) 1993年文件提议，血细 胞 计 数 用 EDTA-K2 作 抗 凝 剂 （ EDTA-K2-2H2O 1.5～2.2mg/ml血液）。
《血液一般检验》课件
形成
血小板计数的 异常可能与多 种疾病有关， 如白血病、再 生障碍性贫血
等
采血：使用采血针或采血器进行采血 离心：将血液离心，分离出红细胞、白细胞、血小板等成分 染色：使用染色剂对血液成分进行染色，以便观察 观察：使用显微镜观察染色后的血液成分，进行血细胞计数和形态学观察
原理：利用自动化仪器进行血 液检测
红细胞计数：反映贫血程 度，判断血液携氧能力
白细胞计数：反映免疫系 统功能，判断感染程度
血小板计数：反映凝血功 能，判断出血风险
血红蛋白：反映贫血程度， 判断血液携氧能力
血型：判断输血安全性， 判断遗传性疾病风险
血沉：反映炎症程度，判 断疾病活动性
避免空腹采血，以免影响检验结果 避免剧烈运动后采血，以免影响检验结果 避免饮酒后采血，以免影响检验结果 避免服用某些药物后采血，以免影响检验结果
血红蛋白测定：评估贫血程度
血液生化检验：包括血糖、血脂、肝功能等 血液免疫学检验：包括抗体、补体等
血型鉴定：ABO血型和Rh血型
血液寄生虫学检验：包括疟疾、丝虫病等
采集血液样本：通过静脉穿刺或指尖采血等方式获取血液样本
血液样本处理：将血液样本进行离心处理，分离出血清和血细胞
血液样本检测：使用血液分析仪对血清和血细胞进行检测，获取各项指标数据
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汇报人：PPT
01
02
03
04
05
06
定义：血液一般检验是 对血液中的各种成分进 行检测，包括红细胞、 白细胞、血小板等
目的：了解血液状况， 诊断疾病，评估治疗效 果，监测疾病进展，指 导临床治疗
全血细胞计数：包括红细胞、白细胞、血小 板等
血小板计数的 异常可能与多 种疾病有关， 如白血病、再 生障碍性贫血
等
采血：使用采血针或采血器进行采血 离心：将血液离心，分离出红细胞、白细胞、血小板等成分 染色：使用染色剂对血液成分进行染色，以便观察 观察：使用显微镜观察染色后的血液成分，进行血细胞计数和形态学观察
原理：利用自动化仪器进行血 液检测
红细胞计数：反映贫血程 度，判断血液携氧能力
白细胞计数：反映免疫系 统功能，判断感染程度
血小板计数：反映凝血功 能，判断出血风险
血红蛋白：反映贫血程度， 判断血液携氧能力
血型：判断输血安全性， 判断遗传性疾病风险
血沉：反映炎症程度，判 断疾病活动性
避免空腹采血，以免影响检验结果 避免剧烈运动后采血，以免影响检验结果 避免饮酒后采血，以免影响检验结果 避免服用某些药物后采血，以免影响检验结果
血红蛋白测定：评估贫血程度
血液生化检验：包括血糖、血脂、肝功能等 血液免疫学检验：包括抗体、补体等
血型鉴定：ABO血型和Rh血型
血液寄生虫学检验：包括疟疾、丝虫病等
采集血液样本：通过静脉穿刺或指尖采血等方式获取血液样本
血液样本处理：将血液样本进行离心处理，分离出血清和血细胞
血液样本检测：使用血液分析仪对血清和血细胞进行检测，获取各项指标数据
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汇报人：PPT
01
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03
04
05
06
定义：血液一般检验是 对血液中的各种成分进 行检测，包括红细胞、 白细胞、血小板等
目的：了解血液状况， 诊断疾病，评估治疗效 果，监测疾病进展，指 导临床治疗
全血细胞计数：包括红细胞、白细胞、血小 板等
血液一般检验方法讲义
• ❖ 影响离体血液红细胞沉降的理化因素较为复杂, 主要与红细胞数量、表面积、厚度、直径、血红蛋 白量和血浆中各种蛋白比例等有关。一般情况下， 细胞因素变化较小，而疾病时血浆因素变化较大。 血沉加速最重要的因素是红细胞相互重叠即“缗钱” 状或积聚成堆，这与血浆的粘稠度和蛋白的种类和 质量密切相关。红细胞形成缗钱状或积聚成团后， 总表面积减少，承受的血浆阻力也减少，下降的速 度要比单个分散的红细胞快得多。 ❖
• 理现象。多见于溶贫、急、慢性白血病及红白血病、骨纤、 脾
❖ 常见于溶血性贫血、巨幼细胞贫血、铅中毒 及白血病。
❖ 提示严重贫血、溶血性贫血、巨幼细胞贫血 ，铅中毒及白血病。
•四、血细胞比容测定
• Hematocrit,Hct,Ht,HCT或 packed cell volume,PCV
•
• 概念：以前称红细胞压积，是指 在一定条件下经离心沉淀压紧的
再生障碍性贫血
❖ 由于化学、物理、生物或不明原因引起的一 种以骨髓造血功能衰竭为特征的贫血。
❖ 临床上分为急性或慢性再障。
再障的实验室检查
❖ 1 血象：全血细胞减少 ❖ 2 骨髓象：多部位骨髓穿刺涂片显示红、粒
、巨核三系细胞增生减低或极度低下，有核 细胞明显减少，巨核细胞减少，无明显病态 造血，骨髓小粒中非造血细胞增多。 ❖ 3 骨髓活检：造血组织/脂肪组织的容积比降 低，造血细胞减少，非造血细胞增多，可见 间质水肿、出血甚至液性脂肪坏死。
• 第二节 白细胞检查
• 中性粒细胞（neutrophil,N)
•
粒细胞
嗜酸性粒细胞(eosinophil,E)
•
(granulocyte)
嗜碱性粒细胞(basophil,B)
•一 白细胞计数
• 理现象。多见于溶贫、急、慢性白血病及红白血病、骨纤、 脾
❖ 常见于溶血性贫血、巨幼细胞贫血、铅中毒 及白血病。
❖ 提示严重贫血、溶血性贫血、巨幼细胞贫血 ，铅中毒及白血病。
•四、血细胞比容测定
• Hematocrit,Hct,Ht,HCT或 packed cell volume,PCV
•
• 概念：以前称红细胞压积，是指 在一定条件下经离心沉淀压紧的
再生障碍性贫血
❖ 由于化学、物理、生物或不明原因引起的一 种以骨髓造血功能衰竭为特征的贫血。
❖ 临床上分为急性或慢性再障。
再障的实验室检查
❖ 1 血象：全血细胞减少 ❖ 2 骨髓象：多部位骨髓穿刺涂片显示红、粒
、巨核三系细胞增生减低或极度低下，有核 细胞明显减少，巨核细胞减少，无明显病态 造血，骨髓小粒中非造血细胞增多。 ❖ 3 骨髓活检：造血组织/脂肪组织的容积比降 低，造血细胞减少，非造血细胞增多，可见 间质水肿、出血甚至液性脂肪坏死。
• 第二节 白细胞检查
• 中性粒细胞（neutrophil,N)
•
粒细胞
嗜酸性粒细胞(eosinophil,E)
•
(granulocyte)
嗜碱性粒细胞(basophil,B)
•一 白细胞计数
临床基础检验学技术(掌握内容)
临床基础检验学技术第一章血液标本采集和处理1、血液标本类型及其应用范围1)全血：用于计数、分类、形态观察。
2)血浆：用于血栓止血检测。
3)血清：用于生物化学、免疫学检测等。
2、临床主要采血方式及其应用范围1)毛细血管采血法：用于微量检测。
采集部位多选择手指或足跟（婴幼儿），WHO已经不推荐用耳垂。
2)静脉采血法：静脉血能准确反映全身循环血液的真实情况。
采集部位：肘静脉。
标本用于血沉、免疫、生化等检测项目。
3)动脉采血法：采血部位多选桡动脉（最方便）、股动脉、肱动脉，标本用于血气分析等。
3、常用抗凝剂的特点和用途4、真空采血管的种类第二章血液一般检查1.红细胞检验1)红细胞计数（RBC）测定单位体积血液中红细胞的数量。
方法包括传统的显微镜技术法和自动血液分析仪法。
红细胞的稀释液有Hayem液，枸橼酸钠液，1％甲醛–生理盐水，要求能等渗，防粘连，防腐。
改良牛鲍计数板是显微镜下计数有形成分的常用工具，计数板的结构、计数方法和质量控制是学习的重点内容，其技术结果的误差来源包括技术误差和固有误差。
2)血红蛋白（Hb/HGB）WHO和ICSH推荐参考方法是HiCN测定法（含有剧毒的氰化钾）。
单位容积循环血液中红细胞、血红蛋白、血细胞比容低于参考值下限称为贫血2.白细胞检验1)白细胞计数方法同红细胞计数，白细胞稀释液含有溶血成分，但不同破坏有何红细胞，在病理情况下有何红细胞增多时，白细胞技术结果中应予以扣除。
2)白细胞分类计数方法有血涂片镜检，自动血液分析仪法及血细胞形态分析仪法。
镜下各类血白胞正常、异常形态特点及学习分类计数的临床意义是学习重点。
3.血小板检查1)血小板计数是止血、凝血检查的常用筛检验之一。
检测方法有显微镜计数法，血液分析仪法和流式细胞仪法（ICSH推荐）。
质控关键：避免血小板被激活、破坏，避免杂物污染。
2)血小板形态检查镜下观察染色血涂片中的血小板形态、聚集性和分布情况，对判断分析血小板相关疾病具有重要意义。
血液常规
血红蛋白 120～160g/L 110～150 g/L 170～200 g/L
正常人 RBC（万/mm3）: Hb（g/dL）≈100:3
RBC 100万/mm3≈Hb3g
以上系指在生理情况下，无失血，无血容量过多， 平原地区。
㈠红细胞及血红蛋白的增多
RBC
Hb
成年男性 成年女性
＞6.0×10合成缺陷
IDA、铁粒幼细胞贫血
珠蛋白合成缺陷
海洋性贫血
红细胞破坏过多（溶贫）
红细胞内在缺陷（遗传性缺陷）
红细胞膜缺陷
遗传性球形细胞增多症等
PNH（获得性膜缺陷）
红细胞内酶缺陷
G-6PD缺乏所致溶贫等
珠蛋白合成缺陷
海洋性贫血等
红细胞外来因素（获得性因素）
免疫性破坏
AIHA
非免疫性破坏
第二章 临床血液学检验
第一节 血液一般检验
血常规
红细胞计数（RBC） 血红蛋白测定（Hb） 白细胞计数（WBC） 白细胞分类计数（DC） 血小板计数（BPC） 外周血涂片 红细胞平均值的计算 网织红细胞计数 红细胞沉降率测定
一.红细胞 和血红蛋 白的检验
红细胞的 生成起源
红细胞生成的影响因素
1. 根据MCV、RDW对贫血进行形态学分类
MCV RDW 贫血类型
常见疾病
增高 正常 大细胞均一性贫血 AA（部分）
增高 大细胞非均一性贫血 巨幼贫、MDS
正常 正常 正常细胞均一性贫血 急性失血性贫血
增高 减低 正常
正常细胞非均一性贫血 AA、PNH、
G-6PD缺乏症
小细胞均一性贫血
珠蛋白生成障碍性贫血
贫血分类
形态学分类 骨髓细胞学分类 病因和发病机制分类
血液一般检查
【临床意义】 见血红蛋白测定。
二
、
血红蛋白（hemoglobin，Hb）是红细胞的主）与亚铁血红素（heme）组成。每个 血红蛋白分子有4条珠蛋白肽链，每条折叠的珠蛋白肽
红
链包裹一个亚铁血红素。血红蛋白按不带氧计算，分 子量为64458。
蛋
珠蛋白具有种属特异性。每个珠蛋白分子含有2条a链 和2条非a链。正常成人的Hb A包括含α2β2珠蛋白肽链
2.十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白 （SLS-Hb）测定法 除SHb外，血液中各 种Hb均可与低浓度十二烷基月桂酰硫酸 钠（SLS）作用，生成SLS-Hb棕红色化 合物。SLS-Hb最大吸收波峰538nm，波 谷500nm。由于摩尔消光系数尚未最后 确认因此不能用吸光度“A”值直接计算 血红蛋白浓度。只有借助于经HiCN法定
红细胞数/L＝5个中方格内红细胞数 ×5×10×201×106
【测定方法及评价】同白细胞计数。 【参考值】 成年男性 （4.0~5.5）×1012/L 成年女性 （3.5~5.0）×1012/L 新生儿 （6.0~7.0）×1012/L 【质量控制】 1.计数误差 同白细胞计数。 2.白细胞的影响 经红细胞稀释液处理后，白细胞与红
氰化高铁血红蛋白转化液有多种配方， 1983年全国临床检验方法学学术会议推 荐采用文齐氏（Van KampenZijlstra）液， 其主要由K3Fe（CN）6、KCN、 KH2PO4及非离子表面活性剂等组成。此 液特点是pH7.2+0.2，Hb转化快，5min即
可完成，且加入非离子表面活性剂后能 较好地防止混浊。
2.红细胞和血红蛋白减少 红细胞和血红蛋白低 于参考值的下限，为红细胞和血红蛋白减少， 通常称贫血。
（1）生理性减少 ①6个月~2岁的婴幼儿由于生 长发育迅速所致造血原料相对不足及血容量的 增加所致。②妊娠中、晚期，为适应胎盘循环 的需要，容量明显增加而使血液稀释。③老年 人造血功能逐渐减退。以上几种情况所致的贫 血统称为生理性贫血。
二
、
血红蛋白（hemoglobin，Hb）是红细胞的主）与亚铁血红素（heme）组成。每个 血红蛋白分子有4条珠蛋白肽链，每条折叠的珠蛋白肽
红
链包裹一个亚铁血红素。血红蛋白按不带氧计算，分 子量为64458。
蛋
珠蛋白具有种属特异性。每个珠蛋白分子含有2条a链 和2条非a链。正常成人的Hb A包括含α2β2珠蛋白肽链
2.十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白 （SLS-Hb）测定法 除SHb外，血液中各 种Hb均可与低浓度十二烷基月桂酰硫酸 钠（SLS）作用，生成SLS-Hb棕红色化 合物。SLS-Hb最大吸收波峰538nm，波 谷500nm。由于摩尔消光系数尚未最后 确认因此不能用吸光度“A”值直接计算 血红蛋白浓度。只有借助于经HiCN法定
红细胞数/L＝5个中方格内红细胞数 ×5×10×201×106
【测定方法及评价】同白细胞计数。 【参考值】 成年男性 （4.0~5.5）×1012/L 成年女性 （3.5~5.0）×1012/L 新生儿 （6.0~7.0）×1012/L 【质量控制】 1.计数误差 同白细胞计数。 2.白细胞的影响 经红细胞稀释液处理后，白细胞与红
氰化高铁血红蛋白转化液有多种配方， 1983年全国临床检验方法学学术会议推 荐采用文齐氏（Van KampenZijlstra）液， 其主要由K3Fe（CN）6、KCN、 KH2PO4及非离子表面活性剂等组成。此 液特点是pH7.2+0.2，Hb转化快，5min即
可完成，且加入非离子表面活性剂后能 较好地防止混浊。
2.红细胞和血红蛋白减少 红细胞和血红蛋白低 于参考值的下限，为红细胞和血红蛋白减少， 通常称贫血。
（1）生理性减少 ①6个月~2岁的婴幼儿由于生 长发育迅速所致造血原料相对不足及血容量的 增加所致。②妊娠中、晚期，为适应胎盘循环 的需要，容量明显增加而使血液稀释。③老年 人造血功能逐渐减退。以上几种情况所致的贫 血统称为生理性贫血。
临检基础第4讲(比容、指数、网织红)
的红细胞，体积略大于成熟红细胞
• 胞质：尚存有嗜碱性物质—RNA • 染色：煌焦油蓝，新亚甲蓝活体染色后， RNA凝聚成
颗粒，又联缀成线，而构成网织状
• 瑞-吉染色：嗜多色红细胞
网织红细胞
（一）概述
• 骨髓中Ret：比外周血多约3倍，且较幼稚 • 网状结构愈多，表示该细胞越幼稚 • 大小：直径为8~9.5μm
4.参考值（单位：L/L）
男：0.40～0.50 女：0.37～0.48 新生儿：0.47~0.67
5. 临床意义
• 增高：
大面积烧伤、各种脱水病人、真性红细胞增多症、继发 性红细胞增多症
• 减低：
贫血时，红细胞数量减少，血细胞比容常随之减低。不 同性质的贫血，红细胞大小不同，两者的减低程度不一 定平行
• 如：RBC=4.0×1012/L；HCT=0.36，则：
MCV
=
0.36 4.0 ×1012
× 1015
=
9（0 fl）
2．平均红细胞血红蛋白含量
（mean corpuscular hemoglobin，MCH）
• 红细胞群体中单个红细胞血红蛋白含量的
平均值。单位：pg（1pg=10-12g）
• Reticulocyte production should increase in response to any loss of
red blood cells. It should increase within 2-3 days of a major acute hemorrhage, for instance, and reach its peak in 6-10 days.
少，也称低色素（低血红蛋白）性贫血，常由缺铁引起，多见于人工喂养不 合理的婴儿。
• 胞质：尚存有嗜碱性物质—RNA • 染色：煌焦油蓝，新亚甲蓝活体染色后， RNA凝聚成
颗粒，又联缀成线，而构成网织状
• 瑞-吉染色：嗜多色红细胞
网织红细胞
（一）概述
• 骨髓中Ret：比外周血多约3倍，且较幼稚 • 网状结构愈多，表示该细胞越幼稚 • 大小：直径为8~9.5μm
4.参考值（单位：L/L）
男：0.40～0.50 女：0.37～0.48 新生儿：0.47~0.67
5. 临床意义
• 增高：
大面积烧伤、各种脱水病人、真性红细胞增多症、继发 性红细胞增多症
• 减低：
贫血时，红细胞数量减少，血细胞比容常随之减低。不 同性质的贫血，红细胞大小不同，两者的减低程度不一 定平行
• 如：RBC=4.0×1012/L；HCT=0.36，则：
MCV
=
0.36 4.0 ×1012
× 1015
=
9（0 fl）
2．平均红细胞血红蛋白含量
（mean corpuscular hemoglobin，MCH）
• 红细胞群体中单个红细胞血红蛋白含量的
平均值。单位：pg（1pg=10-12g）
• Reticulocyte production should increase in response to any loss of
red blood cells. It should increase within 2-3 days of a major acute hemorrhage, for instance, and reach its peak in 6-10 days.
少，也称低色素（低血红蛋白）性贫血，常由缺铁引起，多见于人工喂养不 合理的婴儿。