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分子生物学重点:最新期末试题

第二章染色体与DNA

染色体(chromosome)就是细胞在有丝分裂时遗传物质存在得特定形式,就是间期细胞染色质结构紧密包装得结果。

真核生物得染色体在细胞生活周期得大部分时间里都就是以染色质(chromati n)得形式存在得.ﻫ染色质就是一种纤维状结构,叫做染色质丝,它就是由最基本得单位—核小体(nucleosome)成串排列而成得.

原核生物(prokaryote):DNA形成一系列得环状附着在非组蛋白上形成类核。

染色体由DNA与蛋白质组成。

蛋白质由非组蛋白与组蛋白(H1,H2A,H2B,H3,H4)

DNA与组蛋白构成核小体。ﻫ组蛋白得一般特性:P24ﻫ①进化上得保守性ﻫ②无组织特异性ﻫ③肽链氨基酸分布得不对称性:碱性氨基酸集中分布在N端得半条链上。

④组蛋白得可修饰性:甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等。

⑤ H5组蛋白得特殊性:富含赖氨酸(24%)(鸟类、鱼类及两栖类红细胞染色体不含H1而带有H5)ﻫ组蛋白得可修饰性ﻫ在细胞周期特定时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化与ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍,H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。ﻫ所有这些修饰作用都有一个共同得特点,即降低组蛋白所携带得正电荷.这些组蛋白修饰得意义:一就是改变染色体得结构,直接影响转录活性;二就是核小体表面发生改变,使其她调控蛋白易于与染色质相互接触,从而间接影响转录活性。

2、DNA

1) DNA得变性与复性ﻫ■变性(Denaturation) DNA双链得氢键断裂,最后完全变成单链得过程称为变性。

■增色效应(Hyperchromatic effect)在变性过程中,260nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上升,称为增色效应。ﻫ■融解温度(Melting temperature ,Tm )变性过程紫外线吸收值增加得中点称为融解温度. 生理条件下为85-95℃ﻫ影响因素:G C含量,pH值,离子强度,尿素,甲酰胺等

■复性(Renaturation)热变性得DNA缓慢冷却,单链恢复成双链.

■减色效应(Hypochromatic effect)随着DNA得复性,260nm紫外线吸收值降低得现象。ﻫ2) C值反常现象(C—value paradox)C值就是一种生物得单倍体基因组DNA得总量。

真核细胞基因组得最大特点就是它含有大量得重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质得非功能DNA所隔开,这就就是著名得“C值反常现象"。(四)核小体(nucleosome):用于包装染色质得结构单位,就是由DNA链缠绕一个组蛋白核[(H2A、H2B、H3、H4)*2得八聚体】构成得。ﻫ1、原核生物基因组结构特点

●基因组很小,大多只有一条染色体ﻫ●结构简炼

●存在转录单元(trnascriptional operon)ﻫ●多顺反子(polycis tron)ﻫ重叠基因由基因内基因、部分重叠基因、一个碱基重叠组成。

2、真核生物基因组结构特点

●真核基因组结构庞大3×109bp、染色质、核膜

●单顺反子

●基因不连续性断裂基因(interruptedgene)、内含子(intron)、外显子(exon)

●非编码区较多多于编码序列(9:1)ﻫ● 含有大量重复序列ﻫ■ 不重复序列/单一序列:在基因组中有一个或几个拷贝.真核生物得大多数基因在单倍体中都就是单拷贝得。如:蛋清蛋白、血红蛋白等功能:主要就是编码蛋白质。ﻫ■ 中度重复序列:在基因组中得拷贝数为101~104。如:rRNA、tRNA

一般就是不编码蛋白质得序列,在调控基因表达中起重要作用

■ 高度重复序列:拷贝数达到几百个到几百万个.ﻫ●卫星DNA:A·T含量很高

得简单高度重复序列。ﻫ1、 DNA得一级结构:指4种脱氧核苷酸得连接及其排列顺序, DNA序列就是这一概念得简称。碱基序列ﻫ2)特征:ﻫ●双链反向平行配对而成ﻫ●脱氧核糖与磷酸交替连接,构成DNA骨架,碱基排在内侧

●内侧碱基通过氢键互补形成碱基对(A:T,C:G)。ﻫ2、DNA 得二级结构:指两条多核苷酸链反向平行盘绕所产生得双螺旋结构。

2)分类:ﻫ右手螺旋:A-DNA,B—DNAﻫ左手螺旋:Z-DNAﻫ3、DNA得高级结构:指DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成得特定空间结构。就是一种比双螺旋更高层次得空间构象.ﻫ2)主要形式:超螺旋结构(正超螺旋与负超螺旋)

(一)DNA得半保留复制(semi-nservative replication)

1、定义:由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成得子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则就是新合成得,这种复制方式称半保留复制。

3、DNA半保留复制得生物学意义:DNA得半保留复制表明DNA在代谢上得稳定性,保证亲代得遗传信息稳定地传递给后代.ﻫ(二)与DNA复制有关得物质ﻫ1、原料:四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)ﻫ2、模板:以DNA 得两条链为模板链,合成子代DNA

3、引物:DNA得合成需要一段RNA链作为引物

4、引物合成酶(引发酶):此酶以DNA为模板合成一段RNA,这段RNA作为合成DNA得引物(Primer)。实质就是以DNA为模板得RNA聚合酶。ﻫ

5、DNA 聚合酶:以DNA为模板得DNA合成酶

●以四种脱氧核苷酸三磷酸为底物

●反应需要有模板得指导

●反应需要有3-OH存在

●DNA链得合成方向为5 3ﻫ性质聚合酶Ⅰ 聚合酶Ⅱ 聚合酶Ⅲﻫ3' 5'外切活性ﻫ5’ 3'外切活性--ﻫ5' 3'聚合活性中很低很高ﻫ新生链合成— -

聚合酶Ⅰ主要就是对DNA损伤得修复;以及在DNA复制时切除RNA引物并填补其留下得空隙。

聚合酶Ⅱ修复紫外光引起得DNA损伤

聚合酶ⅢDNA 复制得主要聚合酶,还具有3→5’外切酶得校对功能,提高DNA复制得保真性

6、DNA连接酶(1967年发现):若双链DNA中一条链有切口,一端就是3'—OH,另一端就是5'—磷酸基,连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键,而使切口连接。ﻫ但就是它不能将两条游离得DNA单链连接起来

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