多糖的制备工艺标准研究

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多糖提取——精选推荐

多糖提取——精选推荐

传统的海带多糖的提取方法包括:热水提取法、酶提取法、碱提取法,度是而这些提取方法都存在一定的缺陷。

热水提取的方法采用的温70^-80'}C耗能多,提取时间长.工业生产需要使用的酶量大,不经济。

酶提取的方法提取的时间长,碱提取法是现在工业提取海带多糖的主要方法,但是碱提取方法会造成多糖生物活性的降低。

因此寻找合适的提取方法来降低能耗,提高海带多糖的提取率以及活性变得越来越重要。

为达到这一目的,我们现采用超声波方法来提取海带多糖,随后对其理化性质和生物学活性进行检侧,并与传统方法进行比较,以期得到海带多糖提取的最佳方法。

配制1%的碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500mL水称取制备好的200g海带粉,置于不锈钢桶中,加入配好的碳酸钠溶液2. 8L,在50℃水浴5h,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000r/min离心15min,保留上清液。

按体积比平均分成两份,一份上清液经减压浓缩(40 ℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。

离心后获得海带粗多糖 E.另一份上清液中加入氛化钙( 2g/1OOmL),静置,5000r/min离心去除揭藻酸钙。

上清液经减压浓缩(40 ℃)后,加入三倍体积95%乙醉,沉淀过夜.离心后获得海带硫酸多糖F.将以上所得沉淀E, F各重新溶于水,离心除去不溶物。

上清液再加三倍体积95%乙醇,静置沉淀.生成沉淀经无水乙醇、乙醚洗涤,重新溶于蒸馏水,置于一20℃冰箱冷冻过夜,冷冻干燥得到海带杂多糖E,以及海带硫酸多糖粗品F1可溶性大豆多糖是一种从大豆中提取的多糖类化合物,主要由膳食纤维组成,而膳食纤维对治疗高血压、高血脂、心血管疾病和肥胖病等具有积极作用[1-3]。

可溶性大豆多糖还具有分散稳定性、乳化性,所以常用于酸性饮料中[4-5]。

其属于酸性多糖,结构类似于果胶,多数类型由半乳糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸,也包括鼠李糖、海藻糖、木糖、葡萄糖等。

交联大豆多糖的制备及性能研究

交联大豆多糖的制备及性能研究

利 用 六偏磷 酸 钠 与 大豆 多糖 进行 酯 化反 应 , 制 备 交联 大 豆 多糖 , 并 对 交联 大 豆 多糖 的 结 构功 能
进 行 测定 。结果 表 明 : 不 同多糖 分 子的羟 基 通过 与六 偏磷 酸钠 形成 酯化键 而 交联起 来 , 交联 大豆 多糖 的相 对
分子质 量 由 5 6 6 0 0 0左右增 大 至 1 5 4 0 0 0 0左 右 , 黏度由5 5 m P a・ S 增大至 7 0 m P a・ S 。通 过考 察 大豆 多糖 对
2 0 1 3年 l 2月 第2 8卷第 1 2期
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
中国粮油学报
J o u r n a l o f t h e C h i n e s e C e r e a l s a n d Oi l s As s o c i a t i o n
Vo 1 . 2 8, No .1 2 De e . 2 01 3
大豆 分 离蛋 白乳 液 的分散稳 定作 用 , 发 现在 酸 性 p H条件 下 , 交联 大豆 多糖 对 大豆 分 离蛋 白的乳 化稳 定性 较 交
联 之前 有 所提 高 , 乳 液在 4℃放 置 3 0 d后 , 乳 液粒径 可保持 0 . 3 5 m左 右。
关 键词 水 溶性 大豆 多糖 交联 乳 化稳 定性
交 联 大 豆 多 糖 的制备 及 性 能研究
王 思远 刘学铭 杨 晓泉 齐军茹 陈智毅 杨春英 杨荣玲 林耀盛
( 广东 省农 业科 学 院蚕业 与农 产 品加 工研 究所 , 广州 ( 华 南理 工大 学轻 工与食 品学 院 , 广州
摘 要
5 1 0 6 1 0 )
5 1 0 6 4 0 )

还阳参多糖提取工艺的研究

还阳参多糖提取工艺的研究

纵坐标 , 绘制标准曲线 。回归方程 如下式 : A=4 .1C一0 24 8 .
06 ,=0 98 , 明 多 糖 在 0 02 1 09 r .99 表 .058—0 029 gm 范 围 .15 m / l
内具有 良好线性 关系。 2 3 3 样品溶液的制备 ..
度 , 匀 , 得。 摇 即 2 34 样 品 的 多糖 含 量 测 定 .. 分 别 精 密 吸 取 23 3项 下 的 ..
炎、 肺结核等疾病 。主要分布在 山西 、 内蒙古一带 , 在我省j 匕
部地 区资源尤为丰 富。为 了充分利用我省药材资源 , 本课题
组从 19 98年开始对还 阳参这一地方药材进行 资源调查并 对
液, 混匀 , 迅速加入 50 l .m 的浓硫酸 , 匀 , 摇 静置 l O分钟 ,o 4 ℃ 水 浴保 温 1 5分钟后 , 出迅速冷却至 室温 , 40m处测定 取 于 9n
空干燥 , 得多糖粗 品 , 称重计算得率 , 结果见表 2 。
2 3 总糖 含 量 的 测 定 .
231 对照品溶液 的制备 ..
精 密 称 取 在 15 干 燥 至 恒 重 0℃
的葡 萄糖对照 品 2m , 20 l 瓶 中, 5 g置 5m 量 加水溶解 并稀 释 至
维普资讯

要 目的 : 优化还 阳参多糖的提取工艺 。方法 : 采用正交试验 方法, 以粗 多糖得率和总糖含量为评价
指标 , 对还 阳参中多糖提取 工艺进行 筛选。结果 : 综合考虑 , 最佳提取 工艺为 l0 0 ℃煎煮 3次 , 次 10小时。结论 : 每 . 优选得到 的工艺经济、 简单 、 定、 稳 可行 。 主题词 还 阳参 多糖, 生产和制备 工艺学 , 药 制

一种银耳多糖及其制备方法和应用

一种银耳多糖及其制备方法和应用

一种银耳多糖及其制备方法和应用一种银耳多糖及其制备方法和应用简介银耳多糖是一种天然的多糖类化合物,具有多种生物活性与保健功效。

本文将针对一种银耳多糖的制备方法和应用进行详细介绍。

制备方法1.采集新鲜银耳并进行清洗。

2.银耳进行研磨处理,使其成为粉末状。

3.将银耳粉末与适量的水进行混合,形成稀浆状。

4.对稀浆进行高温酶解处理,使银耳中的多糖得以释放与提取。

5.经过离心和过滤等步骤,得到银耳多糖的提取液。

6.对提取液进行浓缩、干燥等处理,最终得到粉末状的银耳多糖。

应用医药领域•免疫调节:银耳多糖具有增强机体免疫功能的作用,可以调节免疫系统的功能,提高机体抵抗疾病的能力。

•抗肿瘤:研究发现,银耳多糖可以抑制肿瘤细胞的生长与扩散,具有一定的抗肿瘤活性。

•降血脂:银耳多糖可降低血液中的胆固醇含量,起到降血脂的作用,对于预防心血管疾病具有一定的益处。

食品工业•增稠剂:银耳多糖具有较好的增稠性能,可以作为食品工业中的天然增稠剂,用于制备各种果酱、果冻、糕点等食品,提高食品的质感和口感。

•保湿剂:银耳多糖具有良好的保湿性能,可以作为食品中的保湿剂,增加食品的保鲜期,延长食品的货架寿命。

化妆品•保湿修复:银耳多糖对于皮肤有一定的保湿与修复作用,可以作为化妆品中的保湿修复成分,有效改善干燥、粗糙的皮肤状况。

•抗氧化:研究表明,银耳多糖具有抗氧化性能,可以抑制自由基的产生,减缓皮肤的衰老过程。

养生保健•护肝:银耳多糖对肝脏具有保护作用,可以帮助修复受损的肝细胞,促进肝功能的恢复与代谢废物的排出。

•降糖:研究发现,银耳多糖可以降低血液中的糖分含量,调节血糖水平,对于糖尿病的预防与辅助治疗具有一定的效果。

总结银耳多糖是一种具有广泛应用价值的天然多糖,它在医药、食品、化妆品以及养生保健等领域都发挥着重要作用。

通过简单的制备方法,人们可以充分利用银耳多糖的生物活性与保健功效,为人们的健康和品质生活做出贡献。

医药领域•抗炎作用:银耳多糖具有一定的抗炎作用,可以减轻炎症反应,缓解炎症引起的疼痛和不适。

小分子芦荟多糖的制备及工艺研究

小分子芦荟多糖的制备及工艺研究

小分子芦荟多糖的制备及工艺研究
梁振益;孙达远;林栖凤
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2012(23)5
【摘要】目的研究小分子芦荟多糖的制备及工艺。

方法采用乙酸、H2O2在维生素C的诱导作用下氧化降解芦荟多糖,考察了时间、温度、乙酸用量、H2O2用量及维生素C用量对降解效果的影响,并采用正交设计法优选降解工艺。

结果降解每克芦荟多糖的最佳工艺条件为:30%的H2O212 ml,乙酸26 ml,Vc5g,温度为80℃,降解时间5.5 h;各因素对降解效果影响的主次顺序为:乙酸用量>双氧水用量>温度>时间>Vc用量。

结论最佳工艺条件下降解的芦荟多糖的分子量约为5 600,通过与芦荟原多糖比较其红外谱图,降解前后分子结构并没有发生太大变化,说明糖苷元没有发生断裂。

【总页数】2页(P1213-1214)
【关键词】芦荟多糖;小分子;制备;降解
【作者】梁振益;孙达远;林栖凤
【作者单位】海南大学材料与化工学院;海南省耐盐作物生物技术重点实验室,海南大学生物技术研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R283
【相关文献】
1.芦荟中芦荟多糖提取及脱色工艺的研究 [J], 郑婷婷;李多伟;张嘉
2.芦荟多糖的制备工艺及稳定性研究 [J], 何洁;唐建红;刘川玉;黄瑶;冯熙
3.4种工艺制备芦荟凝胶中芦荟多糖的含量比较 [J], 唐建红;刘川玉;何洁
4.芦荟多糖乳膏的制备及其性能研究 [J], 杨伟丽;刘青;
5.芦荟多糖的制备工艺及稳定性探究 [J], 郭洪勋
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植物多糖提取、分离纯化及鉴定方法的研究进展

植物多糖提取、分离纯化及鉴定方法的研究进展

然而,本研究仍存在一定的不足之处,例如实验范围较窄,未能全面考虑各 种因素对多糖提取、分离纯化及分析鉴定的影响。未来可以进一步拓展研究范围, 探讨更加高效、环保的多糖提取方法和纯化技术,同时深入研究多糖的结构与功 能关系,为多糖的应用提供更多理论依据和技术支持。
一、植物多糖概述
植物多糖是由植物细胞壁和细胞间层组成的复杂碳水化合物,具有调节植物 生理功能、增强免疫力等多种生物活性。近年来,随着生物技术的不断发展,植 物多糖在医药、保健、农业等领域的应用价值逐渐被挖掘出来,引起了广泛。
在分析鉴定方面,采用光谱分析法可以获得多糖的结构信息,而电化学分析 法则可以快速、准确地测定多糖的含量。
结论
本次演示对多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法进行了详细的研究,得出 了各种方法的相关优缺点。实验结果表明,乙醇提取法是一种高效、环保的多糖 提取方法;沉淀法和吸附法相结合可以获得高纯度的多糖;光谱分析法可以提供 多糖的结构信息,而电化学分析法则可以快速、准确地测定多糖的含量。
在分离纯化方面,除了传统的沉淀法、色谱法和膜分离等方法外,一些新的 分离技术如分子印迹技术、电泳技术等也被应用于多糖的分离纯化。此外,一些 新型材料如聚合物材料、无机材料等也被用于制备分离纯化多糖的新型膜和填料, 取得了很好的效果。
在鉴定方面,除了传统的化学法和光谱法外,一些新的鉴定技术如质谱技术、 基因工程技术等也被应用于多糖的鉴定。此外,一些新的生物活性方法也被用于 测定多糖的生物活性,如细胞试验、动物试验等。
四、研究进展概述
随着植物多糖在各个领域的应用价值逐渐被挖掘出来,植物多糖提取分离纯 化的研究也取得了长足的进展。从早期的水提取法、酸碱提取法等传统方法,到 后来的离子交换法、色谱法等较为先进的方法,植物多糖的提取分离纯化技术不 断发展。同时,各种新技术的应用也使得植物多糖的得率、纯度和结构分析更加 准确可靠。

米糠多糖的提取研究

米糠多糖的提取研究米糠多糖(Rice Brain polysaccharide,RBP)存在于稻谷的颖果皮层里,主要是指分子量不等的一类非淀粉多糖。

采用不同的提取工艺会得到不同的米糠多糖组分。

米糠多糖具有广泛的生理活性,在抗肿瘤,增强免疫力,降血糖,降脂方面有显著效果。

多糖提取的方法有微波浸提法,热水蒸煮法,超声浸提法等。

实验中比较了不同去除杂质方法对所得米糠多糖含量的比较,同时也对3种多糖提取方法在米糠多糖的提取中所得的多糖含量进行了比较。

选取较优的微波提取法,并对其提取工艺参数进行了进一步优化。

1.米糠多糖的提取1.1实验材料米糠:无锡秦良商贸有限公司耐高温α-淀粉酶:无锡酶制剂厂,20000IU/g试剂:无水乙醇、石油醚、三氯乙酸、盐酸均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司。

1.2仪器722型可见光分光光度计;LD4-2A型台式离心机;Panasonic微波炉;真空冷冻干燥机。

1.3实验方法1.3.1 米糠样品的前处理将米糠用石油醚按1:3比例脱脂1小时,重复3次,自然干燥。

1.3.2 用改进的硫酸-苯酚法测米糠多糖含量1.3.2.1 显色剂的制备将50 mL浓硫酸缓缓加入10 mL水中,冷却至室温,加入0.6 g苯酚晶体搅拌使其溶解配成显色液。

1.3.2.2硫酸-苯酚法测米糠多糖含量取1.00 mL稀释一定倍数的糖液于试管中加入5.00 mL显色液振荡混匀;取1.00 mL蒸馏水于试管中加入5.00 mL显色液振荡混匀,得到参比溶液。

将标准溶液和参比溶液置于沸水浴中保温30~35 min,取出后放在冷水浴中冷却至室温,于490 nm波长处测定其吸光值。

传统的硫酸-苯酚测糖法的操作过程是:取1.00 mL样品加1.00 mL水,加1.00 mL 6 %苯酚摇匀后再加入5 mL浓硫酸,振荡显色,静置30 min后,于490 nm处检测其吸光度。

加入硫酸时系统显色温度相差较大,而造成相应的偶然偏差。

兰州百合多糖面膜的制备工艺及性能评价

兰州百合多糖面膜的制备工艺及性能评价第一篇范文兰州百合多糖面膜的制备工艺及性能评价兰州百合,产自我国甘肃省兰州市,是一种著名的食用和药用植物。

百合多糖,作为百合中的有效成分,具有良好的保湿、抗氧化和抗衰老作用。

本文将探讨兰州百合多糖面膜的制备工艺及性能评价。

一、兰州百合多糖面膜的制备工艺1. 原料处理:首先,选取新鲜、无病虫害的兰州百合,清洗干净后,去皮、去心,然后切成小块。

2. 粉碎:将处理好的百合块进行粉碎,过筛,得到百合粉末。

3. 提取:将百合粉末加入适量的蒸馏水,加热煮沸,保持一定温度,持续提取一定时间,以获取百合多糖提取液。

4. 脱色:将提取液通过活性炭脱色,以去除提取液中的色素。

5. 浓缩:将脱色后的提取液进行浓缩,得到浓度较高的百合多糖浓缩液。

6. 面膜基质制备:选择合适的面膜基质,如透明质酸、甘油等,与百合多糖浓缩液混合均匀。

7. 成型:将混合好的面膜基质均匀涂抹在模具中,冷却凝固,得到兰州百合多糖面膜。

二、兰州百合多糖面膜的性能评价1. 保湿性能:采用皮肤保湿试验方法,对兰州百合多糖面膜的保湿性能进行评价。

实验结果显示,兰州百合多糖面膜具有良好的保湿效果。

2. 抗氧化性能:通过体外抗氧化试验,如DPPH自由基清除试验、超氧阴离子清除试验等,评价兰州百合多糖面膜的抗氧化性能。

实验结果表明,兰州百合多糖面膜具有显著的抗氧化作用。

3. 抗衰老性能:采用皮肤衰老模型动物,如小鼠,评价兰州百合多糖面膜的抗衰老性能。

实验结果显示,兰州百合多糖面膜能够显著延缓皮肤衰老进程。

4. 安全性评价:通过皮肤刺激性试验、过敏性试验等,对兰州百合多糖面膜的安全性进行评价。

实验结果表明,兰州百合多糖面膜无刺激性、无过敏性,具有良好的安全性。

第二篇范文“兰州百合多糖面膜”:天然成分的护肤秘方兰州,这座位于黄河岸边的城市,不仅以其独特的地理位置和丰富的历史文化闻名,还盛产一种珍贵的植物——兰州百合。

这种百合不仅可以食用,还具有出色的药用价值,尤其是它含有的丰富多糖,对人体肌肤有着意想不到的益处。

枸杞多糖测定实验报告

一、实验目的1. 掌握枸杞多糖提取的基本原理和方法;2. 学习使用苯酚-硫酸法测定枸杞多糖含量的操作步骤;3. 分析实验数据,评估枸杞多糖的含量。

二、实验原理枸杞多糖是一种生物活性物质,具有多种生物功能,如抗衰老、抗氧化、抗肿瘤等。

本实验采用苯酚-硫酸法测定枸杞多糖含量,其原理是:在酸性条件下,多糖与苯酚反应生成蓝色化合物,该化合物的吸光度与多糖含量成正比。

三、实验材料1. 材料与试剂:枸杞子、苯酚、硫酸、葡萄糖标准品、蒸馏水等。

2. 仪器:电子天平、电热恒温水浴锅、分光光度计、离心机、研钵等。

四、实验方法1. 枸杞多糖提取(1)将枸杞子洗净,晾干,研磨成粉末;(2)称取一定量的枸杞子粉末,加入适量蒸馏水,煮沸提取;(3)提取液过滤,取滤液备用。

2. 标准曲线制备(1)精密称取一定量的葡萄糖标准品,配制成不同浓度的溶液;(2)按照苯酚-硫酸法测定吸光度,以葡萄糖浓度(mg/mL)为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

3. 枸杞多糖含量测定(1)取一定量的枸杞多糖提取液,按照苯酚-硫酸法测定吸光度;(2)根据标准曲线,计算枸杞多糖的含量。

五、实验结果1. 标准曲线制备根据实验数据,绘制标准曲线,得出回归方程为:y = 0.0018x + 0.0016,相关系数R² = 0.9988。

2. 枸杞多糖含量测定取一定量的枸杞多糖提取液,测定吸光度为0.521,根据标准曲线计算枸杞多糖含量为1.24mg/mL。

六、实验讨论1. 本实验采用苯酚-硫酸法测定枸杞多糖含量,操作简便,结果准确可靠。

2. 在实验过程中,要注意控制提取条件,以确保提取液的纯度和含量。

3. 标准曲线的绘制是本实验的关键环节,应严格控制实验条件,保证标准曲线的准确性和可靠性。

4. 本实验结果初步表明,枸杞中含有较高的多糖含量,具有一定的生物活性。

七、实验结论本实验成功提取了枸杞多糖,并采用苯酚-硫酸法测定了枸杞多糖含量。

实验结果表明,枸杞中含有较高的多糖含量,具有潜在的开发价值。

发酵液中普鲁兰多糖提取工艺条件的研究的开题报告

发酵液中普鲁兰多糖提取工艺条件的研究的开题报告一、研究背景和意义普鲁兰多糖是一种天然的高分子有机化合物,具有广泛的应用价值。

在食品、医药、化妆品、农业等领域中,普鲁兰多糖都有着重要的作用。

目前,普鲁兰多糖主要从植物、菌类、动物等天然来源中提取而得,然而这些方法存在着成本高、污染大、提取成本高等问题。

因此,从微生物中提取普鲁兰多糖是一种环保、低成本、高效率的方法。

而发酵液中普鲁兰多糖具有丰富的来源和高含量,因此研究发酵液中普鲁兰多糖提取工艺条件,对于开发高效、低成本、环保的普鲁兰多糖提取方法具有重要意义。

二、研究内容和目标本文的研究内容是基于发酵液中普鲁兰多糖提取的特性和适宜条件,探究提取发酵液中普鲁兰多糖的最佳工艺条件,以及对普鲁兰多糖的性质和质量进行检测和分析。

本文的研究目标是建立一种简单、高效、低成本、环保的发酵液中普鲁兰多糖提取方法,并通过对提取方法的研究,深入了解普鲁兰多糖的成分、结构和性质,为其在各个领域的应用提供理论和实践支持。

三、研究方法和步骤1. 收集发酵液中普鲁兰多糖的相关文献和数据资料,及已有的提取方法和工艺条件的研究成果。

2. 实验室制备具有一定含量和性质的发酵液,并对其中的普鲁兰多糖成分进行分析、检测。

3. 通过正交试验等方法,研究发酵液中普鲁兰多糖的提取工艺条件,如提取时间、温度、pH 值、提取剂浓度等等。

4. 对所提取的普鲁兰多糖样品进行红外光谱和糖链结构分析,以及理化性质、生化性质等方面的检测和分析。

5. 对所得结果进行整理、分析和比较,最终确定最佳提取工艺条件和提取率,评价该方法的优劣和适用性,并探讨其在应用中的前景和发展。

四、研究意义和贡献1. 建立了一种简单、高效、低成本、环保的发酵液中普鲁兰多糖提取方法,为普鲁兰多糖在各个领域的应用提供了理论和实践支持。

2. 对普鲁兰多糖的结构、质量和性质进行了深入研究和分析,丰富了普鲁兰多糖的相关知识和数据资料。

3. 对提取工艺条件和提取率进行了比较和评价,为普鲁兰多糖提取方法的改进和优化提供了参考。

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/. 多糖的生物活性及制备工艺研究 摘要: 多糖是一种自然界中含量丰富的生物大分子,其具有复杂的结构及多方面的生物活性功能。本文综述了多糖的一些主要生物活性,如抗炎、抗病毒、抗肿瘤、降血糖、抗补体等药理作用,以及多糖的提取、分离纯化等制备工艺的研究。其大致流程包括活性成分的确定、对原料药物的预处理、最佳提取分离工艺的选择、对粗品的提纯及纯化、精制多糖成品、多糖组分分析等。虽然近几十年来多糖研究取得了很大进步,由于其结构的复杂性增加了研究的难度,因此多糖的分离纯化方法发展依然缓慢,很多技术环节仍有待发展。 关键词:多糖;生物活性;制备工艺;提取;分离纯化

多糖是一类由酮糖或者醛糖通过糖苷键连接而成的,为一种天然高分子多聚物,其在自然界含量丰富。多糖及其复合物是来自于高等植、 动物细胞膜和微生物细胞壁中的自然界含量丰富的天然大分子物质之一,与人类生活紧密相关,对维持生命活动起着至关重要的作用"和蛋白质、核酸、脂类构成了最基本的4类生命物质[1]。本文就国内外多糖的提取工艺方面作一综述,为进一步研究其生物活性奠定基础。 1 多糖的生物活性

1.1抗肿瘤作用 具有抗肿瘤活性的多糖大多是无毒性且具有诸如诱导细胞分化、刺激造血、抗转移[2]、抗新生血管生成[3]和诱导NO产生[4]等生物活性。它们大多不直接作用于肿瘤细胞,而是通过激活机体的免疫系统起作用,即促进淋巴细胞、巨噬细胞和自然杀伤细胞的成熟、分化和繁殖[5],同时活化网上内皮系统和补体,促进各种细胞因子的生成[6],最终抑制肿瘤细胞的生长或导致肿瘤细胞的凋亡。 1.2 抗病毒作用

20世纪70年代以后发现有些多糖具有抗疱疹病毒及流感病毒作用,特别是80年代发现多糖具抗艾滋病病毒(HIV)作用。 1.3 降血糖作用 多糖是有10个以上单糖缩合去水,以糖苷键形式结合形成的多聚糖。它与单糖、寡糖的性质不同,不但不会使血糖升高,而且能降低血糖。有望成为一类新的降血糖药物。 1.4 抗补体作用 /. 补体系统是人体的重要免疫防御系统之一,但过度激活会引起诸如类风湿关节炎、重症非典型肺炎(SARS)等许多疾病。至今尚无理想治疗药物,因此临床上急需高效低毒的补体抑制剂药物。

2 多糖的制备工艺流程 2.1 多糖的预处理 2.1.1 净制 取新鲜的样品,用刷子将其表面的泥沙刷去。 2.1.2 清洗 将样品经少许石油醚脱表面油脂,用去离子水洗涤至中性。 2.1.3 干燥 用真空冷冻干燥的方法干燥,或者干燥箱中干燥,干燥应以恒重为准。 2.1.4 粉碎 粉碎应过40目筛子,费穗成适当的粉末后备用。 2.1.5 样品脱脂 取干燥的粉未样品,用乙酸乙酯、丙酮进行索氏提取各6h以除去脂肪。 2.1.6 酶处理 准确称取一定量的脱脂粉,按α-淀粉酶与茯苓脱脂粉质量比为1︰10的比例加入α-淀粉酶,按一定的料液比置于三角锥形瓶中,放置于一定温度的恒温水浴锅中酶解30 min。 2.1.7 灭酶 置于90 ℃水浴20 min。 2.2 多糖的提取 多糖既可存在细胞壁外, 又可存在细胞壁内中,因此,从动、植物中提取多糖,首先就要对细胞进行破碎处理,使多糖从细胞中容易释放出来。因破碎后的细胞,其中含有脂类物质,容易连同多糖被提取出来,故需预处理。 一般采用醇和醚类物质浸泡或回流提取来除去脂质,此时一些脂溶性色素也容易被除去, 脱脂后的样品再用于多糖的提取, 以水、盐溶液、稀酸及稀碱在不同条件下提取。提取液浓缩后经透析、沉淀、干燥得到粗多糖。近年来,微波、超声和酶法辅助提取技术也开始应用于多糖的提取[7-8]。 /. 存在于细胞壁中的多糖,按照溶解度的不同又分为水溶性多糖和碱溶性多糖[9]。通常采用水提醇沉法、碱提醇沉法提取。 水溶性多糖的提取主要与提取次数、时间、固液比及温度等因素有关。随着提取次数增多,多糖的浸出率明显增高,但提取次数不易过多,一般为两次。虽然提取时间延长可提高多糖的浸出率,但浸提时间过长,将造成提取工艺延长。同时,还有可能增加杂质的溶出,通常选3h。碱溶性多糖的提取一般在4℃下进行,其影响因素除以上几点外,还与碱浓度有关,常采用0.5mol/L。在乙醇沉淀步骤中,浸提液浓缩比及乙醇加量是影响多糖沉淀率的主要因素。 2.2.1 水提醇沉法 称取一定量样品粉末→热水浸提→抽滤→滤液减压浓缩(浸提液∶浓缩液=10∶1) →95%乙醇沉淀(含醇量达80%)→于冰箱中静置过夜→离心→沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→真空干燥得药物多糖粗品[10]。 该法采用水作为溶剂,具有价廉、无毒、操作安全等优点,其缺点是浸提时间长且提取率较低。 2.2.2 稀碱浸提法[11] 取样品粉末15g溶于3℃的015molPL NaOH 3000mL液中,搅拌至粉末溶解,此时溶液呈粘稠状态。5℃以下冷藏,过夜,抽渣弃去,滤液以10%的醋酸液中和至酸性,再加入等量95%乙醇,于3℃放置过夜,滤取沉淀,流水透析两天,再依次用蒸馏水、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤后,减压抽干,置干燥箱中60℃以下干燥,即得样品多糖粗品,呈淡黄色细颗状结晶。该法提取率较水提醇沉法高,但浸提程序较繁琐,浸提条件较剧烈,极易破坏多糖的立体结构,使其生物活性受到限制。 2.2.3 酶解+热水浸提法[ 12 ]

将一定量的样品粉末加水浸泡30min(复合酶加水在40℃活化10min)→加入复合酶在48℃(PHS)浸提90min→中和后加水再升温至80℃继续浸提90min→乙醉醇沉,无水乙醉、丙酮、乙醚分别洗涤→获多糖粗品。酶解法可以在较低的温度下提高多糖的提取率,与传统的热水浸提法相比,浸提时间缩短,得率提高,是水溶性多糖的好方法。 2.2.4 发酵醇沉法[13]

发酵醇沉法提取多糖包括胞外多糖的提取及胞内多糖的提取,,前者将菌丝提取摇瓶培养10d,分离发酵上清液,在上清液中加入3倍量的95%乙醇,过夜,过滤得沉淀。沉淀相继用乙醇、丙酮、乙醚洗涤,得胞外多糖。后者包括胞内水溶性多糖及碱溶性多糖的提取,水溶性多糖的提取:取有机溶剂处理(脱脂)后的菌丝体粉末采用水提醇沉法进行提取;碱溶性多糖的提取:将上述提取水溶性多糖后的菌丝体滤渣用5 倍量0. 5 mol/L 的氢氧化钠溶液浸提,步骤同稀碱浸/. 提法。液体发酵具有易于操作、节约资源、产率高、周期短、可大规模投入工业生产等优点,已逐渐成为获取多糖的主要方法[14]。但研究表明[15],发酵菌丝体中总多糖的提取率较天然菌丝低,这可能因为发酵菌丝体多糖的提取工艺不完善,有待进一步优化,也可能由于发酵菌丝体中总多糖占总糖的比例低于天然菌丝。 2.2.5 微波、超声波辅助提取法 微波提取法利用加热导致细胞内的极性物质温度迅速上升,液态水汽化产生的压力将细胞膜和细胞壁冲破,形成微小的孔洞,进而出现裂纹,从而使胞外溶剂容易进入细胞内,溶解并释放出胞内产物[16]。称取10g的样品粉末,溶解于500mL的溶液中,提取30min,在42%的微波占空比下回流提取后滤过,残渣依法再提取两次,合并滤液,低温浓缩至50mL。该法具有受热均匀、快速、高效、安全、节能等优点,近年来,普遍应用于多糖的提取。超声波提取技术也是近年来发展起来的一种提取生物活性物质的方法,具有方便、快速、提取物活性高的特点。赵声兰等[17]采用超声波法提取多糖,但提取率不高,最高达到1.6%。 随着医药、化学以及生物学的不断发展,多糖的提取取得了很大进展,酶+热水浸提法显著提高了多糖的提取率,同时缩短了提取时间。然而,水溶性多糖的提取率仍较低,一般不超过6%,因此,有必要进一步改进多糖的提取工艺,提高提取率。同时,应深入研究液体发酵生产多糖的方法,从而节约资源,适应大规模工业化生产的要求。然而对于微波、超声波辅助提取法由于该法具有受热均匀、快速、高效、提取物活性高等特点正处于快速发展阶段,越来越被人们所重视。 3 多糖提取液中杂质的去除

3.1 Sevag法除蛋白 粗多糖溶液加入Sevag试剂(氯仿:异戊醇=3:1混合摇匀)后,置恒温振荡器中震荡过夜,使蛋白质充分沉淀,离心(3 000 r/min)分离,去除蛋白质。脱游离蛋白后,上葡聚糖凝胶柱分离纯化。选用Sephadex G-15葡聚糖凝胶,将已充分膨胀的葡聚糖凝胶湿法装柱,用氯化钠水溶液进行平衡。样品上柱后,用蒸馏水洗脱,分部收集。洗脱液经不同浓度乙醇沉淀,离心,干燥沉淀即得较为纯化的树舌多糖Ga-1、Ga-2、Ga-3 3个级分和茯苓多糖Pc-1,Pc-2,Pc-3 3个级分。 3.2 沉淀洗涤

沉淀中加入一定比例无水乙醇,离心、去上清;加入一定比例丙酮,离心、去上清;加入一定比例乙醚,离心、去上清。 /. 4 多糖的纯化[18,19-23] 多糖的纯化是指将复杂的混合多糖分离纯化变成一个个单一的多糖。 4.1 分步沉淀法 它是根据不同的多糖在低级醇或酮(通常是乙醇或丙酮)中具有不同溶解度而进行分离。分子量大的多糖较分子量小的多糖在乙醇(或丙酮)中的溶解度小,所以逐步加大乙醇(或丙酮)的浓度可将不同分子量的多糖分别沉淀出来。 4.2 盐析法 它是根据分子量不同的多糖在一定浓度的盐溶液中具有不同溶解度的性质分离各种多糖。在多糖中加入中性盐(如NaCl、KCl、(NH4)2SO4等)至一定浓度,则在该盐浓度时溶解度最小的多糖便沉淀析出,然后上清液继续加盐至更高浓度,则另一多糖又沉淀析出。盐析法在蛋白质纯化上用得很多。 4.3 属络合法 根据不同多糖能与各种铜、钡、钙和铅离子形成络合物而沉淀的性质进行多糖的纯化。常用的络合剂有氯化铜、氢氧化钡和醋酸铅等。得到的络合物沉淀经水充分洗涤后,用酸分解,得到游离的多糖。在多糖的纯化中最常用的是铜盐络合法及氢氧化钡络合法。 4.4 有机盐沉淀法 2000年美国专利(US75920000111)报道从植物与微生物中提取粘多糖或蛋白多糖的方法,其在多糖溶液中加入有机酸单宁使其与多糖形成有机盐复合物而沉淀。离心,沉淀用有机溶剂或其他物质使多糖复合物中的单宁除去。 4.5 季胺盐沉淀法 根据长链季胺盐能与酸性多糖或长链高分子量多糖形成络合物,在低离子强度的水溶液中不溶解的特性,使其沉淀析出,然后增加溶液的离子强度到一定范围,络合物则逐渐离解,最终溶解。 4.6 柱层析方法 柱层析方法是目前多糖中应用最多的方法,原因是效果好,操作简单。主要分为纤维素柱层析和阴离子交换柱层析。 5 干燥

将醇沉物置于60 ℃恒温干燥箱中进行干燥,干燥后的产物即为多糖。 6 组分分析 称取少许的多糖(0.1克)于2.0 ml离心管中,加入1 M的硫酸1 ml,沸水浴水解2 h,然后加氢氧化钡中和至中性,过滤除去硫酸钡沉淀,得多糖水解澄清液,以此进行点样;薄层层析法一般只展开1次,为达到较好分离效果,实验

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