新乡医学院医化学实验课教案首页

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新乡医学院医用化学实验课教案首页

授课教师姓名及职称:

一、实验名称糖和蛋白质的性质

二、授课对象普本授课形式实验教学

三、教学目标1、掌握主要糖类和蛋白质的鉴别方法

2、熟悉常见糖和蛋白质的性质

四、教学内容1、单糖、双糖和多糖的性质

2、蛋白质的结构

3、反应及现象

五、教学安排与

课时分配1、讲解演示 40 min

2、学生操作、教师指导 80 min

六、授课重点糖和蛋白质的性质、鉴定

七、注意事项1、酒精灯加热试管时切勿对准自己或他人

八、授课方法教师示范讲述,学生操作

九、使用教材《医用化学实验技术导论》闫福林成都科技大学出版社1998

十、教研室

审查意见

主任签字

新乡医学院化学教研室年月日

实验 糖和蛋白质的性质

一、实验目的

熟悉糖和蛋白质的组成及性质 掌握糖和蛋白质的鉴别方法

二、实验原理

对于有机化合物来说,有确定其结构,除了元素分析,波谱技术,或测定其物理常数(如熔点、沸点、折光率等)外,利用化学方法进行官能团分析也是很重要的方法。特别是官能团定性实验,操作简便,速度快,马上可以知道结果。官能团的定性检验是利用有机化合物中各官能团所具有的不同特征,与某些试剂发生反应,根据反应现象(如颜色变化、沉淀、放出气体等),与其他化合物进行区别。因此,对定性试验要求反应迅速、结果明显,而且对某一官能团有专一性。

1.糖的性质

糖是一类含有多个羟基的醛、酮,具有羟基和羰基的官能团性质。通常分为单糖、双糖和多糖。单糖及含有半缩醛羟基的双糖在水溶液中能发生互变异构现象,开链结构与环状结构具有一定的平衡。因此,具有还原性,也称为还原糖,能与Fehling 试剂,Benedict 试剂 和Tollen 试剂等弱氧化剂作用。

还原糖Tollen 试剂+银镜

还原糖+还原糖

+Fehling 试剂Benedict 试剂Cu 2O 砖红色沉淀Cu 2O 砖红色沉淀+

还原性糖与Benedict 试剂作用,产生砖红色氧化亚铜,临床上常用此反应作血糖和尿糖的定性和定量检查。

还原糖与过量的苯肼成脎,可生成难溶于水的黄色糖脎结晶,不同的糖脎均有一定的熔点和晶形,可鉴别某些糖。如葡萄糖与过量的苯肼作用,在热水中很容易生成糖脎。

CHO OH H H HO OH H OH H

2OH

HC C H HO OH H OH

H

2OH

NNHC 6H 5NNHC 6H 5C 6H 5NHNH 2

糖类化合物在浓盐酸或浓硫酸的作用下,能与酚类化合物发生颜色反应,如与α-萘酚的乙醇溶液作用产生紫色,这个反应称为Molish 反应。

另外,糖还可以与间苯二酚的盐酸溶液作用呈现红色,此反应称为Seliwanoff 反应,由于此试剂与酮糖反应出现红色较醛糖快得多,常用此反应来鉴别酮糖和醛糖。

淀粉与碘呈蓝色,是淀粉的特性反应。 2.蛋白质的性质

蛋白质是由氨基酸缩合而成的大分子化合物,因分子有游离的氨基和羧基,也能发生两性电离。蛋白质还具有胶体性质和生物活性。与一些化学物质作用可以变性发生沉淀。常利用重金属离子与蛋白质作用生成不溶性盐来缓解重金属中毒。

蛋白质除了具有α—氨基酸与茚三酮反应外,由于分子中含有多个

N

C

H

O 基团,可以发生

双缩脲反应,即与稀的碱性硫酸铜溶液作用,呈现紫色。对于分子中含有苯环结构的蛋白质,还可以发生蛋白黄色反应,即与浓硝酸作用呈现黄色。

三、实验

1.糖的性质

(1)仪器与药品

试管 烧杯 酒精灯 水浴锅 点滴板 显微镜 浓硫酸、硫酸(3 mol·L -1)浓盐酸、NaOH (100 g·L -1)碘溶液 Benedict 试剂 盐酸苯肼-醋酸钠溶液Molish 试剂Seliwanoff 试剂 红色石蕊试纸 葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉溶液 糖与Benedict 试剂反应

(2)实验内容

①糖与Benedict 试剂反应

取6支大试管,各加入1 ml Benedict 试剂 再分别加入2滴葡萄糖、果糖、麦芽糖,蔗糖、淀粉溶液和蒸馏水(对照管),在沸水中加热2~3分钟,移出试管,观察并记录结果 ②糖脎的生成

取2支大试管,分别加入1 ml 葡萄糖、果糖溶液,再加入1ml 新配置的盐酸苯肼-醋酸钠溶液,摇匀后置沸水中30分钟。取出试管,自行冷却(为什么?)此时有黄色结晶生成。取少许结晶在显微镜下观察其晶形。 ③糖的颜色反应

Molish 试验 取5支大试管,分别加入1ml 葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉溶液和蒸馏水(对照管)。各加入2滴新配制的Molish 试剂,摇匀。将每只试管倾斜,沿管壁徐徐注入1ml 浓硫酸,使酸进入管底。观察两层液体交界处的颜色。

Seliwanoff 试验 取4支大试管,各加入1 ml Seliwanoff 试剂,然后再分别加入5滴l 葡萄糖、果糖、蔗糖溶液和蒸馏水,摇匀,在沸水中加热2分钟。比较各管红色出现的次序。 ④蔗糖的水解

取2支大试管,各加入1ml 蔗糖溶液,并往其中一支试管内加入2滴H 2SO 4(3 mol·L -1),将两支试管均置沸水中加热10分钟。冷却后加入NaOH (100 g·L -1)至溶液呈碱性(红色石蕊试纸变蓝),再各加入10滴Benedict 试剂,置沸水中再加热3分钟,取出后观察结果。 ⑤淀粉的性质

与碘液作用 取1支大试管,加1滴淀粉溶液,用蒸馏水稀释10倍,加1滴碘液,显何色?再

在酒精灯上加热,待颜色退去后,冷却,显何色?

水解反应取1支大试管,加入2ml淀粉溶液,再加3滴浓硫酸,置沸水中加热。每隔2分钟,用吸管取1滴反应液于白瓷板上,加1滴碘液,观察颜色变化。当反应液不与碘显色时,取出冷却,用NaOH(100 g·L-1)中和至石蕊试纸变蓝。加入10滴Benedict试剂,摇匀,置沸水中加热3分钟,观察结果。

(3)思考题

①葡萄糖和果糖是否可以用生成糖脎的反应鉴别?为什么?

②蔗糖和淀粉与Benedict试剂均无作用。此实验对了解二者的结构有何提示?

2. 蛋白质的性质

(1)仪器与药品

试管烧杯离心管离心机点滴板

NaOH(50 g·L-1)CuSO4(30 g·L-1)HgCl2(30 g·L-1)AgNO3(30 g·L-1)醋酸铅(30 g·L-1)Molish 试剂盐酸(mol·L-1)浓硝酸饱和硫酸铵溶液硫酸铵粉末三氯乙酸(100 g·L-1)苯酚(10 g·L-1)茚三酮溶液无水乙醇苦味酸(50 g·L-1)蛋白质溶液(100 g·L-1)

(2)实验内容

①蛋白质的颜色反应

与茚三酮反应在试管中加入蛋白质溶液,然后加3滴茚三酮溶液,在沸水浴中加热10-15min,观察现象?

Molish反应取两支试管,在一试管中加3滴苯酚;在另一支试管中加3滴蛋白质溶液,然后在两支试管中各加3滴Molish试剂(此时在蛋白质溶液中有白色沉淀生成),将两支试管放在沸水浴中加热,观察颜色变化。

黄蛋白反应取两支试管,在一试管中加5滴苯酚;在另一支试管中加5滴蛋白质溶液,然后分别加入2滴浓硝酸,观察在蛋白质溶液中是否有白色沉淀生成?将两支试管放在沸水浴中加热,此时两支试管各有什么现象。

醋酸铅反应在试管中加入10滴醋酸铅,滴加2滴氢氧化钠,摇匀后再加4滴蛋白质溶液,振荡,将试管放在沸水浴中加热2~3分钟,观察颜色变化。

二缩脲反应在试管中加入5滴蛋白质溶液和5滴氢氧化钠,摇匀后,加入2滴硫酸铜,振荡,观察颜色变化。

②蛋白质的沉淀

中性盐沉淀蛋白质在离心管中分别加入2ml蛋白质溶液和饱和硫酸铵溶液,混匀后,静置10分钟,球蛋白将析出,将其离心,离心后的上层清液用滴管移至另一离心管中,慢慢加硫酸铵粉末,每加一次,均用玻璃棒充分搅拌,直到粉末不再溶解为止。静置10分钟,则可见清蛋白沉淀析出,离心并吸去上层清液。

向上述两离心管沉淀中分别加入蒸馏水2 ml,用玻璃棒搅拌,观察沉淀能否溶解?

乙醇沉淀蛋白质在试管中加入5滴蛋白质溶液,沿试管壁加入10滴无水乙醇,摇匀,静置数分钟,观察溶液能否出现浑浊?

③蛋白质的变性

酸沉淀蛋白质在试管中加入5滴蛋白质溶液,然后加入1滴盐酸使其酸化,再滴加2滴三氯乙酸,观察沉淀的生成。

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