罗氏电化学发光免疫分析仪定标物保存方法
罗氏 cobas e 801 电化学发光免疫分析仪使用说明书 - 检测抗 HBs 抗体的试剂盒
Elecsys Anti-HBs IIREFSYSTEM********************** 300cobas e 801EnglishSystem information Short name ACN (application code number) AHBS 2 10138 Immunoassay for the in vitro quantitative determination of human antibodies to the hepatitis B surface antigen (HBsAg) in human serum and plasma.Anti-HBs assays are used within the scope of hepatitis B vaccination to check the necessity and success of vaccination. In addition, anti-HBs assays are used to monitor the course of disease following acute hepatitis B infection. This test is not intended for diagnosis.The e lectro c hemi l uminescence i mmuno a ssay “ECLIA” is intended for use on the cobas e 801 immunoassay analyzer.Note: Please note that the catalogue number appearing on the package insert retains only the first 8 digits of the licensed 11-digit Catalogue Number: 07026854190 for the Elecsys Anti-HBs II assay. The last 3 digits -190 have been replaced by -119 for logistic purposes. SummaryAnti-HBs is a specific (generally IgG) antibody that is directed against the hepatitis B surface antigen (HBsAg).1,2 Anti ‑HBs can be detected several weeks after the disappearance of hepatitis B surface antigen.3,4 Anti ‑HBs can be formed following a hepatitis B infection or after hepatitis Bvaccination.3,4 Antibodies are formed against the HBsAg determinant a, which is common to all subtypes, and against subtype-specific determinants.1,5,6Anti ‑HBs assays are used within the scope of hepatitis B vaccination to check the necessity and success of vaccination.2,4,7 In addition, anti ‑HBs assays are used to monitor the course of disease following acute hepatitis B infection.3The Elecsys Anti ‑HBs II assay uses a mixture of purified antigens fromhuman serum (HBsAg subtype ad), and recombinant HBsAg subtype ay from CHO (Chinese Hamster Ovary) cells. Test principleSandwich principle. Total duration of assay: 18 minutes.▪ 1st incubation: Anti ‑HBs in the sample (24 μL), biotinylated HBsAg(ad/ay), and HBsAg (ad/ay) labeled with a ruthenium complex a) react to form a sandwich complex.▪ 2nd incubation: After addition of streptavidin-coated microparticles, thecomplex becomes bound to the solid phase via interaction of biotin and streptavidin.▪ The reaction mixture is aspirated into the measuring cell where themicroparticles are magnetically captured onto the surface of the electrode. Unbound substances are then removed with ProCell II M. Application of a voltage to the electrode then induces chemiluminescent emission which is measured by a photomultiplier.▪ Results are determined via a calibration curve which is instrument-specifically generated by 2‑point calibration and a master curve provided via the cobas link.a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)32+)Reagents – working solutionsThe cobas e pack (M, R1, R2) is labeled as AHBS 2. M Streptavidin-coated microparticles, 1 bottle, 13.2 mL:Streptavidin-coated microparticles 0.72 mg/mL; preservative. R1 HBsAg~biotin, 1 bottle, 16.7 mL:Biotinylated HBsAg (ad/ay) human/recombinant, > 0.5 mg/L; MES b) buffer 85 mmol/L, pH 6.5; preservative. R2 HBsAg~Ru(bpy)32+, 1 bottle, 15.8 mL:HBsAg (ad/ay) human/recombinant, labeled with ruthenium complex > 0.3 mg/L; MES buffer 85 mmol/L, pH 6.5; preservative.b) MES = 2-morpholino-ethane sulfonic acidAHBS 2 Cal1 Calibrator 1, 1 bottle of 1.3 mL:Anti ‑HBs (human) in human serum; preservative.AHBS 2 Cal2 Calibrator 2, 1 bottle of 1.3 mL:Anti ‑HBs (human) in human serum; preservative.Precautions and warnings For in vitro diagnostic use.Exercise the normal precautions required for handling all laboratory reagents. Disposal of all waste material should be in accordance with local guidelines. Safety data sheet available for professional user on request.This kit contains components classified as follows in accordance with the Regulation (EC) No. 1272/2008:n ‑Octyl ‑N,N ‑dimethyl ‑3‑ammonio ‑1‑propanesulfonateEUH 208 May produce an allergic reaction.Product safety labeling primarily follows EU GHS guidance. All human material should be considered potentially infectious.The calibrators (AHBS 2 Cal1 and AHBS 2 Cal2) have been preparedexclusively from the blood of donors tested individually and shown to be free from HBsAg and antibodies to HCV and HIV. The testing methods applied were FDA ‑approved or cleared in compliance with the European Directive 98/79/EC, Annex II, List A.The HBsAg starting material used was inactivated prior to labeling with biotin or ruthenium by heating to 60 °C for 15 hours. In addition, any virus particles remaining were removed by ultracentrifugation.However, as no inactivation or testing method can rule out the potential risk of infection with absolute certainty, the material should be handled with the same level of care as a patient specimen. In the event of exposure, the directives of the responsible health authorities should be followed.8,9 Avoid foam formation in all reagents and sample types (specimens, calibrators and controls). Reagent handlingThe reagents (M, R1, R2) in the kit are ready-for-use and are supplied in cobas e packs. CalibratorsThe calibrators are supplied ready ‑for ‑use in bottles compatible with the system.Unless the entire volume is necessary for calibration on the analyzer, transfer aliquots of the ready ‑for ‑use calibrators into empty snap ‑cap bottles (CalSet Vials). Attach the supplied labels to these additional bottles. Store the aliquots at 2‑8 °C for later use.Perform only one calibration procedure per aliquot.All information required for correct operation is available via the cobas link. Storage and stability Store at 2‑8 °C. Do not freeze.Store the cobas e pack upright in order to ensure complete availability of the microparticles during automatic mixing prior to use. Stability of the cobas e pack: unopened at 2‑8 °Cup to the stated expiration date on the cobas e 801 analyzer 16 weeksStability of the calibrators: unopened at 2‑8 °C up to the stated expiration date after opening at 2‑8 °C 16 weeks on the cobas e 801 analyzer at 20‑25 °Cuse only onceadhering to the snap ‑cap.Specimen collection and preparationOnly the specimens listed below were tested and found acceptable.Serum collected using standard sampling tubes or tubes containing separating gel.K2‑EDTA and K3‑EDTA plasma.Criterion: Slope 1.00 ± 0.15 + intercept 0 ± 2 IU/L + bias at 10 IU/L: ≤ 30 %. Stable for 3 days at 20‑25 °C, 6 days at 2‑8 °C, 3 months at ‑20 °C(± 5 °C). The samples may be frozen 5 times.For plasma treated with lithium heparin, lithium heparin with gel or sodium heparin, the values found were on average up to 20 % lower than those obtained in serum. For plasma treated with sodium citrate, the values found were on average up to 30 % lower than those obtained with serum.The sample types listed were tested with a selection of sample collection tubes or systems that were commercially available at the time of testing, i.e. not all available tubes of all manufacturers were tested. Sample collection systems from various manufacturers may contain differing materials which could affect the test results in some cases. When processing samples in primary tubes (sample collection systems), follow the instructions of the tube manufacturer.Centrifuge samples containing precipitates and thawed samples before performing the assay.Do not use heat‑inactivated samples.Do not use samples and controls stabilized with azide.Ensure the samples and calibrators are at 20‑25 °C prior to measurement. Due to possible evaporation effects, samples and calibrators on the analyzers should be analyzed/measured within 2 hours.The performance of the Elecsys Anti‑HBs II assay has not been established with cadaveric samples or body fluids other than serum and plasma. Materials providedSee “Reagents –working solutions” section for reagents.▪ 2 x 6 bottle labelsMaterials required (but not provided)▪REF 11876317122, PreciControl Anti‑HBs, 16 x 1.3 mL▪REF 11776576322, CalSet Vials, 2 x 56 empty snap-cap bottles▪REF***********,DiluentUniversal,45.2mLsamplediluent▪▪cobas e 801 analyzerAccessories for the cobas e 801 analyzer:▪REF***********,ProCellIIM,2x2Lsystemsolution▪REF 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L measuring cell cleaning solution ▪REF***********,ReservoirCups,8cupstosupplyProCellIIMand CleanCell M▪REF***********,PreCleanIIM,2x2Lwashsolution▪REF***********,AssayTip/AssayCuptray,6magazinesx6magazine stacks x 105 assay tips and 105 assay cups, 3 wasteliners▪REF***********,LiquidFlowCleaningCup,2adaptorcupstosupply ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean for Liquid Flow CleaningDetection Unit▪REF***********,PreWashLiquidFlowCleaningCup,1adaptorcupto supply ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean for Liquid Flow Cleaning PreWash Unit▪REF 11298500316, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean,5 x 100 mL system cleaning solutionAssayFor optimum performance of the assay follow the directions given in this document for the analyzer concerned. Refer to the appropriate operator’s manual for analyzer‑specific assay instructions.Resuspension of the microparticles takes place automatically prior to use. Place the cooled (stored at 2‑8 °C) cobas e pack on the reagent manager. Avoid foam formation. The system automatically regulates the temperature of the reagents and the opening/closing of the cobas e pack. Calibrators:Place the calibrators in the sample zone.Read in all the information necessary for calibrating the assay.CalibrationTraceability: This method has been standardized against the 1st WHO Reference Standard 1977.The predefined master curve is adapted to the analyzer using AHBS 2 Cal1 and AHBS 2 Cal2.Calibration frequency: Calibration must be performed once per reagent lot using AHBS 2 Cal1, AHBS 2 Cal2 and fresh reagent (i.e. not more than24 hours since the reagent kit was registered on the analyzer).Renewed calibration is recommended as follows:▪after 12 weeks when using the same reagent lot▪after 28 days when using the same cobas e pack on the analyzer▪as required: e.g. quality control findings with PreciControl Anti‑HBs outside the defined limitsQuality controlFor quality control, use PreciControl Anti‑HBs.Controls for the various concentration ranges should be run individually at least once every 24 hours when the test is in use, once per cobas e pack, and following each calibration.The control intervals and limits should be adapted to each laboratory’s individual requirements. Values obtained should fall within the defined limits. Each laboratory should establish corrective measures to be taken if values fall outside the defined limits.If necessary, repeat the measurement of the samples concerned.Follow the applicable government regulations and local guidelines for quality control.CalculationThe analyzer automatically calculates the analyte concentration of each sample in IU/L.Interpretation of the resultsNumeric result Result message Interpretation< 10 IU/L Non-reactive Negative for anti-HBs≥ 10 IU/L Reactive Positive for anti-HBsvary depending on the testing procedure used. Results obtained from a single sample using tests from different manufacturers can therefore differ by up to a factor of 4 (or even a factor of 10 in rare cases). If there is a change in the assay procedure used during the monitoring of vaccination protection, then the anti‑HBs values obtained upon changing over to the new method must be confirmed by parallel measurements by both methods. Vaccination strategies in certain risk groups are based on the measured anti‑HBs concentration. Respective recommendations are given by national or regional guidelines. Limitations - interferenceThe effect of the following endogenous substances and pharmaceutical compounds on assay performance was tested. Interferences were tested up to the listed concentrations and no impact on results was observed. Endogenous substancesCompound Concentration testedBilirubin ≤ 513 μmol/L or ≤ 30 mg/dL Hemoglobin ≤ 0.621 mmol/L or ≤ 1000 mg/dL Intralipid ≤ 1500 mg/dLBiotin ≤ 41 nmol/L or ≤ 10 ng/mL Rheumatoid factors ≤ 1200 IU/mLAlbumin ≤ 7.0 g/dLIgG ≤ 7.0 g/dLIgA ≤ 1.6 g/dLIgM ≤ 1.0 g/dL2 / 42017-09, V 1.0 Can EnglishCriterion: Recovery for samples from Limit of Detection to 10 IU/L:≤ ± 2 IU/L, and samples > 10 IU/L: ≤ ± 20 % of initial value.Samples should not be taken from patients receiving therapy with high biotin doses (i.e. > 5 mg/day) until at least 8 hours following the last biotin administration.Pharmaceutical substancesIn vitro tests were performed on 16 commonly used pharmaceuticals. No interference with the assay was found.In addition, the following special drugs used in hepatitis B therapy were tested. No interference with the assay was found.Special drugsDrug Concentration testedmg/LPeginterferon alfa‑2a ≤ 0.18Peginterferon alfa‑2b ≤ 1.6Lamivudine ≤ 300Adefovir ≤ 10Entecavir ≤ 10Tenofovir ≤ 600Telbivudine ≤ 245Due to high-dose hook effect c), results from anti‑HBs concentrations of> 200000 IU/L may be found below the upper limit of the measuring range of 1000 IU/L. In rare cases, a high-dose hook effect from anti HBs concentrations of < 20000 IU/L cannot be excluded. Therefore in case of any unexpected low result the sample should be diluted 1:100 (refer to chapter “Dilution”) and tested again.In rare cases, interference due to extremely high titers of antibodies to streptavidin and ruthenium can occur. The test contains additives which minimize these effects.c) High-dose hook effect: A sample with a true concentration clearly above the measuring range, but found within the measuring range.Limits and rangesMeasuring range2‑1000 IU/L (defined by the Limit of Detection and the maximum of the master curve). Values below the Limit of Detection are reported as< 2 IU/L.Values above the measuring range are reported as > 1000 IU/L (or up to 100000 IU/L for 100‑fold diluted samples).DilutionSamples with anti‑HBs concentrations above the measuring range can be diluted with Diluent Universal. The recommended dilution is 1:100 (either automatically by the analyzer or manually). The concentration of the diluted sample must be > 10 IU/L.After manual dilution, multiply the result by the dilution factor.After dilution by the analyzer, the software automatically takes the dilution into account when calculating the sample concentration.Manual dilution can also be made with negative human serum.Note: Antibodies to HBsAg are heterogeneous. In some isolated cases, this may lead to non-linear dilution behavior.Specific performance dataRepresentative performance data on the analyzer is given below. Results obtained in individual laboratories may differ.PrecisionPrecision was determined using Elecsys reagents, samples and controls in a protocol (EP05‑A3) of the CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 runs per day in duplicate each for 21 days (n = 84). The following results were obtained:cobas e 801 analyzerRepeatability d)Intermediateprecision e)Sample MeanIU/LSDIU/LCV%SDIU/LCV% Human serum 1 4.33 0.224 5.2 0.272 6.3 Human serum 2 12.0 0.237 2.0 0.277 2.3 Human serum 3 475 6.81 1.4 7.55 1.6 PC f) Anti-HBs 1 < 2.00 - - - -PC Anti-HBs 2 83.8 1.08 1.3 1.28 1.5d) Repeatability = within-run precisione) Intermediate precision = between-run precisionf) PC = PreciControlAnalytical specificityNo cross-reactions with HAV, HCV, HEV, CMV, EBV, HIV, Rubella, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, rheumatoid arthritis, autoimmune response or alcoholic liver disease were observed.Measurements were performed on each of the pathogens listed above using ≥ 8 serum or plasma samples which were positive for antibodies to the above-mentioned pathogens.Relative sensitivityPerformance of the Elecsys Anti‑HBs II assay has been assessed by testing a total of 669 samples at two different study sites. 296 samples from vaccinated persons and 373 samples from patients recovered from a hepatitis B infection have been measured with the Elecsys Anti‑HBs II assay and another commercially available fully automated anti‑HBs assay. Discrepant samples were tested with additional anti‑HBs assays to achieve a consensus.Characterization ofsamplesN ElecsysAnti‑HBs IIreactiveAnti‑HBscomparisontest reactiveSensitivity%Anti-HBs positive:vaccinees 296 296 296 100Anti-HBs positive:recovered from ahepatitis B infection373 373 373 100 Total 669 669 669 100 Relative specificityPerformance of the Elecsys Anti‑HBs II assay has been assessed by testing 2673 samples from blood donors negative for anti‑HBs at two different study sites and 1623 anti‑HBs negative samples from laboratory routine at three different study sites. Discrepant samples were tested with additional anti‑HBs assays to achieve a consensus.Characterization of samples N ElecsysAnti‑HBs IIfalsepositiveSpecificity%Anti-HBs negative: blood donors 2673 6 99.78 Anti-HBs negative: routinesamples1623 9 99.45 References1Seeger C, Zoulim F, Mason WS. Hepadnaviruses. In: Field’s Virology, Knipe DM, Howley RM (eds), 2007 5th edition, Lippincott Williams andWilkins, Philadelphia, USA. Chapter 76, pp2977-3029.2WHO. Hepatitis B vaccines. Wkly Epidemiol Rec 2009;84:405-420.3Liaw YF, Chu CM. Hepatitis B virus infection. Lancet2009;373:582-592.4Caspari G, Gerlich WH. The serologic markers of hepatitis B virus infection – proper selection and standardized interpretation. Clin Lab2007;53:335-343.5Kramvis A, Kew M, François G. Hepatitis B virus genotypes. Vaccine 2005;23:2409-2423.6Michel ML, Tiollais P. Hepatitis B vaccines: protective efficacy and therapeutic potential. Pathol Biol 2010;58:288-295.7Elgouhari HM, Abu-Rajab Tamimi TI, Carey WD. Hepatitis B virus infection: understanding its epidemiology, course, and diagnosis. Cleve Clin J Med 2008;75:881-889.8Occupational Safety and Health Standards: Bloodborne pathogens. (29 CFR Part 1910.1030). Fed. Register.9Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of18 September 2000 on the protection of workers from risks related toexposure to biological agents at workFor further information, please refer to the appropriate operator’s manual for the analyzer concerned, the respective application sheets, the product information and the Method Sheets of all necessary components (if available in your country).A point (period/stop) is always used in this Method Sheet as the decimal separator to mark the border between the integral and the fractional parts of a decimal numeral. Separators for thousands are not used.SymbolsRoche Diagnostics uses the following symbols and signs in addition to those listed in the ISO 15223‑1 standard:CONTENT Contents of kitSYSTEM Analyzers/Instruments on which reagents can be used REAGENT ReagentCALIBRATOR CalibratorVolume after reconstitution or mixingGTIN Global Trade Item NumberCOBAS, COBAS E, ELECSYS and PRECICONTROL are trademarks of Roche. INTRALIPID is a trademark of Fresenius Kabi AB.All other product names and trademarks are the property of their respective owners. Additions, deletions or changes are indicated by a change bar in the margin.© 2016, Roche DiagnosticsRoche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim。
Cobase411全自动电化学发光分析仪日常保养与故障处理
孵 育位 （ 则 将 再 次 引 起 抓 手 报 警 ） 开 机 进 行 复 位 操 作 ， 警 否 ， 报
清除 。
ｃｌ 位 置 ， 记 “ Ｅ 的 边 缘 朝 着 分 析 仪 后 部 ， 空 废 液 桶 ， ｅｌ ” 标 ＵＳ Ｒ” 清 确 认 其 他 ３个 “ ｒｃｌ 和 “ ｌ ｎ ｅ ” 液 量 充 足 ， 瓶 盖 打 开 ， ｐｏｅｌ ” Ｃｅ ｃｌ 瓶 ａ ｌ 且 关闭针保护盖 ， “ 合功能” 的“ 护” 面 打开“ Ｆ 在 综 中 维 界 Ｌ Ｃ液 路 清 洗 ” 口， 择 循 环 次 数 ， “ 始 ” ， 约 １ ｎ后 结 束 ， 窗 选 按 开 键 大 ７ｍｉ 取 出适 配 器 ， 用蒸 馏水 彻底 冲洗 干净 ， “ ｒｃｌ 瓶 放 回瓶 组 １ 将 ｐｏｅ ” ｌ
将 被灌 满 Ｓ ｓ ｌ ｎ的 适 配 器 小 心 插 入 试 剂 仓 内 瓶 组 １ “ ｒ — ｙｃ ａ ｅ 的 ｐ ｏ
２ １ 开 机 后 仪 器 运 行 初 始 化 ， 现 “ ８Ｏ—９和 １一３Ｏ ” ． 出 １一２０ ８Ｏ ２ 报 警 而 停 机 ， 示 抓 手 不 能 到 达 或 停 止 在 Ｙ 复 位 位 置 ， 不 能 回 提 或 到 ｚ方 向上 的初 始位 置 ＿ 。 首 先 考 虑 废 物 盒 的 渗 漏 物 导 致 而 ５ ］ 引 发 抓 手 移 动 的 报 警 ， 检 查 废 物 盒 无 渗 漏 ， 在 废 物 盒 上 的 经 而 孵 育 盘 表 面 和 吸 取 位 有 残 留突 起 的 污 物 ， 抓 手 还 未 到达 孵 育 使 盘 ， 置传 感器 已感 应 到 位 ， 致 误 报 警 。排 除 方 法 ： 闭 分 析 位 导 关 仪 ， 量 往 左 边 移 动 样 本 试 剂 针 臂 ， 沾 有 蒸 馏 水 的纱 布 清 除 尽 用 孵 育 盘 表 面 突起 污 物 ， 用 棉 签擦 拭 ３ 再 ２个 孵 育 位 和 吸 取 位 （ 铝 部 件 不 能用 有 机 试 剂 ） 清 洗 完 毕 用 干 纱 布 擦 干 孵 育 盘 表 面 和 ，
血检四项化学发光法调查
血检四项化学发光法调查目前血检四项（HBsAg、HCV、HIV、TP）的检测方法主要有酶联免疫（ELISA）、核酸扩增（PCR）、胶体金标记、以及化学发光（CLIA）。
现就CLIA在血检项目中的应用情况做一调查分析。
一．化学发光免疫分析法简介。
化学发光免疫分析法(Chemiluminescence imnunoassay，CLIA)是建立在放射免疫分析技术(radioimmunoassay，RIA)理论的基础上，以标记发光剂为示踪物信号建立起来的一种非放射标记免疫分析法。
CLIA是利用化学反应中释放大量自由能，产生激发态中间体，当其回到稳定的基态时发射出光子（hν），用发光信号测量仪对所发出的光量子进行定量测量。
鲁米诺(1umino1)、异鲁米诺(isolumino1)及其衍生物、吖啶酯(acIidinim ester)衍生物、辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase，HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)是目前CLIA中使用最多的四类标记物。
表1 化学发光法类型注：* 严格意义上属于荧光免疫。
二．国内外化学发光法的仪器和试剂情况。
国外化学发光法检测仪器的生产厂家以贝克曼、雅培、罗氏、拜耳这四家的市场占有率较高。
其中罗氏拥有唯一的电化学发光技术，雅培则独占微粒子酶联免疫（EMIA）。
不同厂家的仪器有各自的优势检测项目，主流的仪器型号如下：表2 国外主要化学发光免疫分析仪厂家国内也逐渐有厂家研制化学发光试剂，配合国外引进的仪器（多为半自动）共同销售，也有自发研制的化学发光仪（泰格科信）。
针对血检四项（HBsAg、HCV、HIV、TP），除北京科美生物（科美东雅）外，所有厂家试剂均只有HBsAg试剂。
表3 国内主要厂家仪器和试剂情况国外厂家的试剂大多随仪器配送，并没有在SFDA单独注册。
目前SFDA注册的血检四项化学发光法试剂列表如下。
就检测项目来看，除梅毒外，其余三项均可使用化学发光法；就现有资料，国内外只有北京科美东雅配有梅毒检测试剂。
河南地区电化学发光法CEA、CYFRA21-1、NSE参考值的建立
作者简介:侯艳丽,女,主管技师,主要从事临床检验质量管理研究㊂ ә 通信作者,E -m a i l :q i z p@d a z d .c n ㊂㊃论 著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2024.01.018河南地区电化学发光法C E A ㊁C Y F R A 21-1㊁N S E 参考值的建立侯艳丽,闫春宇,陈 秀,付海雁,齐振普ә郑州迪安医学检验所检验实验室,河南郑州450000摘 要:目的 建立河南地区电化学发光法癌胚抗原(C E A )㊁细胞角蛋白19片段(C Y F R A 21-1)㊁神经元特异性烯醇化酶(N S E )的参考值,为临床诊断提供有价值的参考依据㊂方法 采用罗氏电化学发光分析系统检测并进行性能验证,按照W S /T 402-2012临床实验室检验项目参考区间的制定要求筛选符合标准的参考个体组成参考人群㊂进行C E A 检测男1517例,女923例;进行C Y F R A 21-1检测男1456例,女1049例;进行N S E 检测男1494例,女1295例㊂以40岁为界分别统计ɤ40岁和>40岁的参考值㊂性别间差异比较采用M a n n -W h i t n e y U 检验,差异无统计学意义时,合并统计参考值,差异有统计学意义时,则分别统计参考值㊂以单侧95%百分位数法确定参考值㊂结果 参考值如下㊂C E A :男(ɤ40岁)0.60~5.09μg/L ,男(>40岁)0.60~7.86μg /L ,女(ɤ40岁)0.60~2.95μg /L ,女(>40岁)0.60~9.24μg/L ㊂C Y F R A 21-1:(ɤ40岁)0.30~3.93μg /L ,(>40岁)0.30~5.02μg /L ㊂N S E :男(ɤ40岁)0.15~19.83μg /L ,男(>40岁)0.15~23.06μg /L ,女(ɤ40岁)0.15~19.73μg /L ,女(>40岁)0.15~21.95μg/L ㊂经小样本验证,全部通过㊂除ɤ40岁女性C E A 低于罗氏说明书提供的参考值上限外,其他均高于罗氏说明书提供的参考值上限(P <0.001)㊂结论 国内使用罗氏电化学发光法检测C E A ㊁C Y F R A 21-1㊁N S E 的实验室不宜直接使用罗氏说明书提供的参考值,而应该先验证罗氏参考值是否适用于该实验室服务的人群,必要时建立自己实验室的参考值㊂关键词:电化学发光; 癌胚抗原; 细胞角蛋白19片段; 神经元特异性烯醇化酶; 参考值中图法分类号:R 446.6文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)01-0079-04E s t a b l i s h m e n t o f r e f e r e n c e v a l u e s o f C E A ,C YF R A 21-1a n d N S Eb y el e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e i n H e n a n a r e a H O U Y a n l i ,Y a n C h u n y u ,C H E N X i u ,F U H a i y a n ,Q I Z h e n p u әD e p a r t m e n t o f I n s p e c t i o n L a b o r a t o r y ,Z h e n g z h o u D i a n M e d i c a l L a b o r a t o r y ,Z h e n gz h o u ,H e n a n 450000,C h i n a A b s t r a c t :O b je c t i v e T o e s t a b l i s h t h e r ef e r e n c e v a l u e s o f c a r c i n o e m b r y o n i c a n t ig e n (C E A ),c y t o k e r a t i n 19(C Y F R A 21-1)a n d n e u r o n s p e c i f i c e n o l a s e (N S E )b y el e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e i n H e n a n a r e a t o p r o v i d e v a l u -a b l e r e f e r e n c e b a s i s f o r c l i n i c a l d i a g n o s i s .M e t h o d s T h e R o c h e e l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e a n a l y s i s s ys t e m w a s u s e d t o c o n d u c t t h e d e t e c t i o n a n d p e r f o r m a n c e v a l i d a t i o n ,t h e r e f e r e n c e p o p u l a t i o n m e e t i n g th e s t a n d a r d w a s s e l e c t e d a c c o r d i n g t o t h e f o r m u l a t i o n r e q u i r e m e n t o f c l i n i c a l l a b o r a t o r y te s t i t e m s r ef e r e n c e i n t e r v a l i n W S T 402-2012.T h e C E A d e t e c t i o n w a s p e r f o r m e d i n 1517m a l e s a n d 923f e m a l e s ;t h e C Y F R A 21-1w a s p e r f o r m e di n 1456m a l e s a n d 1049f e m a l e s ;t h e N S E d e t e c t i o n w a s p e r f o r m e d i n 1494m a l e s a n d 1295f e m a l e s .T h e r e f -e r e n c e v a l u e s i n ɤ40y e a r s o l d a n d >40y e a r s o l d c o n d u c t e d t h e s t a t i s t i c s w i t h 40y e a r s o l d a s t h e b o u n d a r y.T h e M a n n -W h i t n e y U t e s t w a s u s e d t o c o m p a r e t h e d i f f e r e n c e s b e t w e e n g e n d e r s .I f t h e r e w e r e n o s t a t i s t i c a l l ys i gn i f i c a n t d i f f e r e n c e s b e t w e e n g e n d e r ,t h e s t a t i s t i c a l r e f e r e n c e v a l u e s w e r e c o m b i n e d ;i f t h e d i f f e r e n c e s w e r e s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t ,t h e r e f e r e n c e v a l u e s w e r e c o u n t e d s e p a r a t e l y .T h e r e f e r e n c e v a l u e w a s d e t e r m i n e d b yt h e u n i l a t e r a l 95%p e r c e n t i l e m e t h o d .R e s u l t s C E A :m a l e (ɤ40y e a r s o l d )0.60-5.09μg/L ,m a l e (>40y e a r s o l d )0.60-7.86μg /L ,f e m a l e (ɤ40y e a r s o l d )0.60-2.95μg /L ,f e m a l e (>40y e a r s o l d )0.60-9.24μg /L .C Y F R A 21-1:(ɤ40y e a r s o l d )0.30-3.93μg /L ,(>40y e a r s o l d )0.30-5.02μg /L .N S E :m a l e (ɤ40y e a r s o l d )0.15-19.83μg /L ,m a l e (>40y e a r s o l d )0.15-23.06μg/L ,f e m a l e (ɤ40y e a r s o l d )0.15-19.73μg /L ,m a l e (>40y e a r s o l d )0.15-21.95μg /L .A f t e r t h e s m a l l s a m p l e v e r i f i c a t i o n ,a l l p a s s e d .E x c e p t t h a t t h e C E A i n f e m a l e ɤ40y e a r s o l d w a s l o w e r t h a n t h e u p p e r l i m i t o f t h e r e f e r e n c e v a l u e p r o v i d e d b yt h e R o c h e m a n u a l ,a l l t h e o t h e r s w e r e h i g h e r t h a n t h e u p p e r l i m i t o f t h e r e f e r e n c e v a l u e p r o v i d e d b y th e R o c h e m a n u a l .C o n c l u s i o n T h e d o m e s t i c l a b o r a t o r i e s t h a t u s i n g th e R o c h e e l e c t r o c h e m i c a l l u m i n e s c e n c e m e t h o d t o d e t e c t C E A ,C Y F R A 21-1a n d N S E s h o u l d n o t d i r e c t l y u s e t h e r e f e r e n c e v a l u e s p r o v i d e d b y Ro c h e 's i n s t r u c t i o n s ,b u t ㊃97㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n ,J a n u a r y 2024,V o l .21,N o .1s h o u l d f i r s t v e r i f y w h e t h e r t h e R o c h e r e f e r e n c e v a l u e s a r e a p p l i c a b l e t o t h e p e o p l e s e r v e d b y t h e l a b o r a t o r y.T h e r e f e r e n c e v a l u e s f o r y o u r o w n l a b o r a t o r y s h o u l d b e e s t a b l i s h e d i f n e c e s s a r y.K e y wo r d s :e l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e ; c a r c i n o e m b r y o n i c a n t i g e n ; c y t o k e r a t i n 19; n e u r o n s p e c i f i c e n o -l a s e ; r e f e r e n c e v a l u e血清肿瘤标志物的检测方法众多,尤以发光法多见㊂基于免疫学原理建立的各检测系统间的结果一般不具可比性,特别是国外的检测系统提供的参考值是否适合国人都需要验证,当验证未通过时则需要建立自己的参考值[1]㊂故不同厂家的说明书几乎都建议各实验室建立自己的参考值[2-4]㊂在工作中,笔者经常发现肿瘤标志物水平轻度升高(超过说明书给出的参考值上限),常引起临床医师及患者质疑㊂为了了解肿瘤标志物水平轻度增高者的比例,本研究前期对健康体检者癌胚抗原(C E A ,2076例)㊁血清细胞角蛋白19片段(C Y F R A 21-1,1896例)㊁神经元特异性烯醇化酶(N S E ,841例)的结果进行统计,超过罗氏参考值上限者分别为C E A 383例(18.45%)㊁C Y -F R A 21-1408例(21.52%)㊁N S E 314例(37.34%)㊂故质疑厂家罗氏参考值不适合本实验室检测人群㊂罗氏电化学发光分析系统检测性能稳定,精密度㊁特异度较高,特别是其定标可溯源至国际标准[5-7],在国内实验室应用较为普遍㊂但厂家提供的参考值是否有效,需要评估,若不适当的参考值出现在检验报告上,会误导临床医生和患者,甚至导致患者到多家医院复查,浪费医疗资源并增加医疗成本㊂为此,在对罗氏C o b a s E 601电化学发光分析系统性能验证的基础上,本研究对肺癌相关血清标志物C E A ㊁C Y -F R A 21-1㊁N S E 进行参考值调查,现报道如下㊂1 资料与方法1.1 一般资料 参考人群:参照文献[1]筛选符合标准的参考个体组成参考人群㊂选择2021年6-8月河南省59家医疗单位(包括豫北10家㊁豫东10家㊁豫南7家㊁豫西9家和郑州地区23家)体检人群,纳入参考值统计的数据每组不少于120例,年龄为8~80岁㊂其中进行C E A 检测男1517例,女923例;进行C Y F R A 21-1检测男1456例,女1049例;进行N S E 检测男1494例,女1295例㊂㊂本研究通过本单位医学伦理委员会审批(Y X L L -Z Z D A -081)㊂1.2 仪器与试剂 仪器:罗氏C o b a s E 601电化学发光分析系统㊂试剂:罗氏配套试剂和校准品㊂质控品:伯乐B I O -R A D 定值质控品㊂1.3 方法1.3.1 检测系统性能验证与质控 按照文献[2-4]方案进行㊂性能验证参数包括:测量精密度(包括重复性和中间精密度)㊁测量正确度㊁线性区间(包括检出限)㊁临床可报告区间㊁参考区间等㊂室内质控采用伯乐正常值和异常值质控品和质控程序,每天质控通过后检测受检者样本㊂验证后的检测系统参加国家卫生健康委员会临床检验中心与河南省临床检验中心室间质量评价成绩合格㊂1.3.2 确定参考值 以40岁分界,分别统计ɤ40岁和>40岁的参考值㊂性别间比较差异无统计学意义时,合并统计参考值,差异有统计学意义时,则分别统计参考值㊂以单侧95%百分位数法确定参考值㊂1.3.3 参考值验证 按照文献[1]小样本验证方案,随机选取男㊁女性ɤ40岁和>40岁每组20例进行验证㊂1.4 统计学处理 采用M i c r o s o f t E x c e l 2003和S P S S 21.0统计软件进行数据处理和分析㊂由专人收集符合标准的参考个体结果,参照文献[1]方法剔除离群值㊂性别间差异比较采用M a n n -W h i t n e y U 检验,自建参考值与罗氏参考值比较采用单样本W i l c -o x o n 检验㊂以P <0.05为差异有统计学意义㊂2 结 果2.1 3个项目的基本统计量 不同性别间C E A ㊁N S E 水平比较,差异有统计学意义(P <0.05),需要分性别统计参考值㊂不同性别间C Y F R A 21-1水平比较,差异无统计学意义(P >0.05),故合并统计参考值㊂见表1㊂2.2 参考值确定 以罗氏说明书确定的检出限作为下限,单侧95%百分位数为上限,确定的参考值㊂与罗氏说明书提供的参考值比较,差异均有统计学意义(P <0.05)㊂见表2㊂表1 不同年龄㊁性别人群C E A ㊁C Y F R A 21-1㊁N S E 水平比较(μg /L )年龄性别C E AnM (m i n ~m a x )单侧95百分位数Z P C Y F R A 21-1nM (m i n ~m a x )单侧95百分位数ZPɤ40岁男6342.17(0.55~8.83)5.09-10.436<0.0012501.84(0.29~3.49)3.02-1.6470.522女3631.19(0.22~7.27)2.953411.62(0.76~3.27)2.34>40岁男8832.75(0.41~14.82)7.86-8.377<0.00112062.14(0.23~12.40)4.76-6.9670.846女5601.97(0.02~12.91)9.247082.18(0.48~12.99)6.41㊃08㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n ,J a n u a r y 2024,V o l .21,N o .1续表1 不同年龄㊁性别人群C E A ㊁C Y F R A 21-1㊁N S E 水平比较(μg /L )年龄性别N S EnM (m i n ~m a x)单侧95百分位数ZPɤ40岁男64813.27(4.01~25.80)19.83-4.131<0.001女51611.89(6.95~21.25)19.73>40岁男84614.02(4.04~28.50)23.06-2.5440.011女77913.09(4.09~28.26)21.95表2 C E A ㊁C Y F R A 21-1㊁N S E 3个项目的参考值(μg /L )项目特征罗氏说明书检出限罗氏说明书参考值本研究确定的参考值与罗氏参考值比较(P )C E A男(ɤ40岁)0.600.60~4.700.60~5.09<0.001男(>40岁)0.600.60~5.200.60~7.86<0.001女(ɤ40岁)0.600.60~4.700.60~2.95<0.001女(>40岁)0.600.60~5.200.60~9.24<0.001C Y F R A 21-1ɤ40岁0.300.30~3.300.30~3.93<0.001>40岁0.300.30~3.300.30~5.02<0.001N S E男(ɤ40岁)0.150.15~16.300.15~19.83<0.001男(>40岁)0.150.15~16.300.15~23.06<0.001女(ɤ40岁)0.150.15~16.300.15~19.73<0.001女(>40岁)0.150.15~16.300.15~21.95<0.0012.3 参考值验证 采用小样本验证方案,本研究建立的参考值全部通过验证㊂3 讨 论随着科学技术的发展,越来越多的检验新方法㊁新技术应用于临床㊂但很多项目的生产厂家特别是国外厂家提供的参考值并不适合中国人群㊂虽然自2012年以来,原国家卫生部陆续建立了部分血液学㊁生物化学㊁免疫学检验等数十个检验项目的参考值[5-9],但与临床检验的发展和新项目的应用相比,仍有较多新的检验项目没有建立国人的参考值㊂目前第三方实验室开展的检验项目达到或超过2000项,检测这些项目的仪器和试剂由国外厂家生产的占很大比例,提供的参考值基本不适合中国人群[2-4]㊂但建立参考区间的研究工作量大㊁成本高,若不建立国人的参考值,会导致这些项目的临床应用价值大打折扣[9]㊂肿瘤标志物虽然应用于临床已有几十年,但由于检验方法和检测系统较多,至今只有部分项目建立了参考值[9],大多数肿瘤标志物仍使用试剂说明书提供的参考值㊂血清肿瘤标志物主要采用发光法检测,分为化学发光法和电化学发光法2种㊂罗氏电化学发光分析系统的精密度和灵敏度高,但其提供的参考值并不针对中国人群㊂其说明书声明 C E A 参考范围来源自352例健康人的调查,各实验室应调查期望值对自身人群的适用性,如有必要应建立各自的参考范围[2] ㊂针对C Y F R A 21-1和N S E ,罗氏说明书也有类似声明,应 根据526例良性肺病患者得到的特异度为95%,每个实验室应考虑参考值对患者人群的适用性,如有必要,应自行确定参考范围 一项多中心研究对N S E 进行了评估,共检测了3个临床中心547份健康人群的样品,结果如下:16.3n g/m L (95%百分位数),15.7~17.0n g/m L (95%C I )㊂每个实验室必须调查各自患者群体的参考范围变异性,必要时根据具体情况制订自己的参考范围㊂国内众多第三方检验机构及多数三级甲等医院普遍使用的罗氏检测系统肺癌标志物的临床检验结果可能存在以下问题:一是提供的参考值研究例数较少;二是其参考人群并非中国人群,故对中国人群不宜直接使用㊂而应该按照文献[10]及说明书声明的 各实验室应调查期望值对其自身人群的适用性,建立各自的参考范围 ㊂在临床实践中,笔者经常发现有的健康体检者的检测结果轻度超出说明书给出的参考值上限,但既没有相应症状也没有其他影像学证据,导致临床医生和患者质疑结果的准确性㊂为此,对肺癌相关的C E A ㊁C Y F R A 21-1㊁N S E 3个项目进行参考值调查,建立适合国人的参考值显得尤为必要㊂血清肺癌肿瘤标志物C E A ㊁C Y F R A 21-1㊁N S E 的检测对肺癌的早期诊断以及肺癌病理类型的鉴别诊断都有一定价值[11-15],在老年肺部恶性肿瘤及在肺癌鉴别诊断中的应用价值也被临床认可[13-14]㊂但各实验室在应用不同检测系统时必须评估厂家说明书提供的参考值的实用性,必要时建立各自实验室的参考㊃18㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n ,J a n u a r y 2024,V o l .21,N o .1值,才能为临床提供有价值的诊断参考依据㊂由于免疫学方法及检测系统众多的原因,不同检测系统的实验室检验结果往往缺乏可比性,在针对肿瘤标志物水平轻度增高的患者,笔者建议不能仅凭一次检验结果贸然决定进行医学干预㊂而应该建议患者多次重复检测(每两次检测之间至少相隔1~2周),根据重复检测结果进行判断㊂如果数次检测结果下降至参考值范围内,则说明是患者的生物学变异或实验误差导致,应判为正常结果㊂如果数次结果仍轻度增高且保持在一个小的范围内波动,则说明该患者的 个体参考值 高于 群体参考值 ,也应判为正常㊂如果检测结果持续呈趋势性升高,则判为不正常,应密切关注临床症状和影像学变化,必要时结合病理学诊断进行医学干预㊂应注意重复检测尽量在检验质量符合要求的同一家实验室的同一个检测系统进行,以避免不同检测系统间的检测结果缺乏可比性㊂参考文献[1]中华人民共和国卫生部.临床实验室检验项目参考区间的制定:W S/T402-2012[S].北京:中华人民共和国卫生部,2012.[2]中国合格评定国家认可委员会.临床化学定量检验程序性能验证指南:C N A S-G L037[S].北京:中国合格评定国家认可委员会,2019.[3]中华人民共和国国家卫生健康委员会.临床检验定量测定室内质量控制:W S/T641-2018[S].北京:中华人民共和国国家卫生健康委员会,2018.[4]中华人民共和国国家卫生健康委员会.临床检验室间质量评价:W S/T644-2018[S].北京:中华人民共和国国家卫生健康委员会,2018.[5]中华人民共和国国家卫生健康委员会.临床常用生化检验项目参考区间:W S/T-404.1-404.9[S].北京:中华人民共和国国家卫生健康委员会,2018.[6]中华人民共和国卫生部.血细胞分析参考区间:W S/T 405-2012[S].北京:中华人民共和国卫生部,2012. [7]中华人民共和国国家卫生健康委员会.临床常用免疫学检验项目参考区间:W S/T645-2018[S].北京:中华人民共和国国家卫生健康委员会,2018.[8]中华人民共和国国家卫生健康委员会.儿童临床常用生化检验项目参考区间:W S/T780-2021[S].北京:中华人民共和国国家卫生健康委员会,2021.[9]中华人民共和国国家卫生健康委员会.临床常用免疫学检验项目参考区间第2部分:血清甲胎蛋白㊁癌胚抗原㊁糖链抗原19-9㊁糖链抗原15-3㊁糖链抗原125:W S_T645. 2-2018[S].北京:中华人民共和国国家卫生健康委员会, 2018.[10]中华人民共和国卫生部.医疗机构临床实验室管理办法(卫医发 2006 73号)[E B/O L].[2023-09-01].h t t p:// w s j k w.g d.g o v.c n/g k m l p t/c o n t e n t/2/2125/m p o s t_ 2125847.h t m l#2569.[11]辛灵艳,宗晓福.P r o G R P㊁C E A㊁S C C和N S E在小细胞肺癌中诊断的联合检测意义[J].河南师范大学学报(医学版),2019,16(4):183-185.[12]田莹莹,张银铃,李新,等.C E A㊁C Y F R A21-1㊁N S E联合检测对于肺癌早期诊断的临床价值[J].癌症进展,2017, 15(10):1206-1208.[13]高翔,陈艳炯.血清肿瘤标记物N S E㊁C E A㊁S C C㊁P r o G R P及C Y F R A21-1对肺癌病理类型的鉴别诊断价值[J].检验医学与临床,2020,17(3):366-368.[14]杨宗桥,胡贡学,樊海琴.联合检测C E A㊁N S E㊁C Y-F R A21-1㊁C A72-4在老年肺部恶性肿瘤中的临床价值[J].中国老年医学杂志,2022,42(7):3434-3436. [15]王茜,夏睿,董惠霞,等.P r o G R P㊁N S E㊁C E A㊁C Y F R A21-1㊁S C C单独及联合检测在肺癌鉴别诊断中的价值[J].临床检验杂志,2020,38(12):930-932.(收稿日期:2023-03-10修回日期:2023-10-15)(上接第78页)[17]左立旻,贺月秋,陈凌梅,等.孟鲁司特钠与氢化可的松琥珀酸钠联合在小儿喘息性支气管炎中的应用分析[J].中国医院药学杂志,2016,36(24):2194-2198. [18]WU X B,WA N G M Y,Z HU H Y,e t a l.O v e r e x p r e s s i o n o f m i c r o R N A-21a n d m i c r o R N A-126i n t h e p a t i e n t s o fb r o nc h i a l a s t h m a[J].I n t J C l i n E x p M e d,2014,7(5): 1307-1312.[19]L U T X,MU N I T Z A,R O T H E N B E R G M E.M i c r o R N A-21i s u p-r e g u l a t e d i n a l l e r g i c a i r w a y i n f l a mm a t i o n a n d r e g u l a t e s I L-12p35e x p r e s s i o n[J].J I mm u n o l,2009,182(8):4994-5002.[20]L U T X,F A B R Y V,L I M E,e t a l.M i c r o R N A-21d e f i-c i e n c y l e ad s t o a n a t te n u a t e d a s t h m a r e s p o n s e i n m i c e[J].J A l l e r g y C l i n I mm u n o l,2011,127(2):A B220-A B220.[21]L E E H Y,L E E H Y,C HO I J Y,e t a l.I n h i b i t i o n o f M i-c r o R N A-21b y a n a n t a g o m i r a m e l i o r a t e s a l l e r g i c i n f l a m-m a t i o n i n a m o u s e m o d e l o f a s t h m a[J].E x p L u n g R e s, 2017,43(3):109-111.[22]厉兰,彭贻界,王刚祚,等.丙卡特罗联合孟鲁司特对小儿支气管哮喘的疗效及对其相关血清指标及预后的影响研究[J].中南医学科学杂志,2019,47(3):285-287.[23]WA N G J Y,D O N G X,Y U Z,e t a l.B o r n e o l i n h i b i t sC D4+T c e l l s p r o l i f e r a t i o n b y d o w n-r e g u l a t i n g m i R-26aa n d m i R-142-3p t o a t t e n u a t e a s t h m a[J].I n t I mm u n o p-h a r m a c o l,2021,90:107223.(收稿日期:2023-03-16修回日期:2023-10-08)㊃28㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n,J a n u a r y2024,V o l.21,N o.1。
罗氏Cobas E411及Cobas E601电化学发光免疫分析仪的故障分析与维修
维修工程ZHONGGUO YIXUEZHUANGBEI159插入16 mm标本试管中用。
3 罗氏Cobas E601报警故障3.1 故障案例一(1)故障现象。
搅拌棒运动异常，报警代码为161和162。
(2)故障分析。
①搅拌棒未在复位期间离开回转的初始位置；②搅拌棒未在复位期间回转的初始位置停止；③搅拌棒未在回转的初始位置停止；④搅拌棒未在回转的混合位置停止；⑤搅拌棒未在初始位置(向上的)的垂直位置停止。
(3)故障处理。
先清理搅拌棒移动路径上的障碍，再运行“机械检查”(10个循环)，在“综合功能”工作的“维护”界面上，观察操作，若故障依旧，需联系厂商维修工程师进行处理。
杜 涛① 魏晓峰① 袁聪玲①*[文章编号] 1672-8270(2017)11-0159-02 [中图分类号] R197.39 [文献标识码] B罗氏Cobas E411及Cobas E601电化学发光免疫分析仪的故障分析与维修DOI: 10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.11.048[关键词] 电化学发光；免疫分析仪；报警故障；故障维修①荆州市第一人民医院核医学科 湖北 荆州 434000*通讯作者：108483796@作者简介杜涛,男,(1978- ),本科学历，主管技师。
荆州市第一人民医院核医学科，从事核医学科实验室检验工作。
中国医学装备2017年11月第14卷第11期 China Medical Equipment 2017 November V ol.14 No.11化学发光免疫分析法(chemiluminescence immu-noassay，CLIA)具有的高特异性灵敏度的特点，在电生化分析、法医鉴定以及食品安全等方面起到至关重要的作用，广泛适用于各学科不同领域的应用需求。
荆州市第一人民医院先后引进罗氏Cobas E411及Cobas E601电化学发光免疫分析仪，由于设备使用频率高，发生故障时会报警提示，医学工程人员按照操作手册及使用经验，以最短时间对故障进行妥善处理。
Cobas e601 SOP
处理系统和测定试剂溶液
不要与Cleancell M、SysClean M、ProbeWash M或Hitergent直接接触。直接接触可造成皮肤发炎或损伤。有关详细说明，请参见试剂盒标签。
无灰尘的、良好通风的环境
无直接日照
地面水平(角度：<1/200º)
地面足够坚硬能够承受仪器的重量
温度：18~32摄氏度
当系统启动时，温度的改变应该小于2度/小时
屋内湿度：45%~85%
电源电压没有明显的波动
在附近没有会产生电磁波的仪器
有接地的三相电源
噪音应该小于65分贝
2，水质要求
无菌(< 10 cfu/ml)，去离子水
在操作仪器的同时，不要接触孵育器、试剂盘。否则，会发生人身伤害，仪器可能会损坏或操作可能停止。
不要维修操作手册中没有说明的其它区域。仅允许经过培训的罗氏技术支持人员维修这些区域。
应用
本仪器设计用于使用水溶液标本和试剂的免疫学实验分析。
请注意其它分析可能不适合本仪器。
长时间的操作
长时间地观看监视器屏幕会导致眼睛或身体的疲劳。每隔一个小时要休息10到15分钟，以放松双眼或身体。每天不要观看监视器屏幕超过6个小时。
试剂盘和孵育器盖
在分析期间使孵育器盖或试剂盘盖打开会导致温度控制异常和数据错误。在开始操作之前，要确保关闭孵育器盖和试剂盘盖，以及顶盖并将其锁定。
装载标本和试剂
要保证装载标本和试剂到仪器上指定的位置。如果标本或试剂溢出，则可能会造成仪器失效。
乙肝病毒核心抗体体外诊断试剂盒说明书-罗氏
批内精密度
批间精密度
样品
均值COIc
SD
特异性参数：
以下所列举为Elecsys分析仪具代表性资料。各实验室所测结果可能有所差异。
精密度：
利用Elecsys试剂,重复检测人类混合血清和质控液（批内n＝21，批间n＝10）,按照修正NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards)公布的实验方法(EP5-A)执行:每天测试6次,进行10天(n=60),在E170上测试一次运转内的精确度,重复21次,得到下列结果:
未开封，可稳定至标明的保质期。
M，R0、R1 ，R2试剂开封后，2-8 度, 8周；
在仪器上(Elecsys2010和cobas e 411)，8周，
在仪器上(MODULAR ANALYTICSE170和cobas e 601)，8周。
Cal 1，Cal 2开封后， 2－8 度, 8周；
在仪器上(Elecsys2010和cobas e 411)，5小时，
若试剂超过保质期，则不能再使用。
避免试剂和标本（标本、校准液和质控液）产生泡沫。
试剂处理
校正液置于与系统相容的瓶內即可立即使用.
Elecsys2010/cobas e 411分析仪：在20－25C定标过程中定标液应放在分析仪上。使用后，应尽快关闭瓶盖，并将其储存在2－8C。因为可能会发生蒸发，每瓶定标液定标次数不宜超过5次。
R2：生物素化的抗HBcAg抗体;Ru(bpy)32+标记的抗HBcAg抗体（黑盖），1瓶，8ml：生物素化的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于800ng/ml；Ru(bpy)32+标记的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于130ng/ml；磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.4，含防腐剂。
罗氏心脏标志物检测仪h
04 操作流程与注意事项
样本采集、处理及保存要求
样本采集
使用无菌技术采集静脉血样本，避免溶血和污染。
样本处理
离心分离血清或血浆，确保无纤维蛋白残留。
样本保存
在2-8℃条件下保存样本，避免反复冻融，确保样 本稳定性。
仪器操作步骤指南
开机前准备
样本检测
结果分析
关机后维护
检查仪器试剂、耗材是 否充足，确保仪器处于
仪器界面友好，操作简便， 易于上手。
试剂即用型设计
减少操作步骤，提高检测 效率。
安全防护措施
具备多重安全防护功能， 确保操作人员和样本安全。
03 临床应用范围与优势
适应症筛查与诊断辅助
早期心脏病筛查
罗氏心脏标志物检测仪h可快速、 准确地检测多种心脏标志物，有 助于早期发现心脏疾病迹象。
急性心肌梗死诊断
标志物。
罗氏心脏标志物检测仪h广泛应 用于医院、临床实验室等场所， 为心血管疾病的诊断和治疗提供
重要依据。
市场需求及发展趋势
随着心血管疾病发病率的不断上升，市场对心脏标志物检测设备的需求逐渐增加。
心脏标志物检测技术的不断发展和完善，推动了相关设备的更新换代和市场拓展。
未来，随着精准医疗和个体化诊疗的不断推进，心脏标志物检测设备将更加普及和 重要。
重复性
优异的批内和批间重复性，确 保结果稳定可靠。
精确度与可靠性保障
1 2
严格的质量控制体系
从试剂制备到检测过程，实施严格的质量控制。
仪器校准与验证
定期进行仪器校准和性能验证，确保检测结果的 准确性。
3
专业培训和技术支持
为操作人员提供专业培训和技术支持，确保操作 规范。
罗氏诊断降钙素原中文说明书
0 200 100测试主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的PCT (procalcitonin)。
Elecsys BRAHMS PCT检测可辅助临床早期诊断相关的细菌感染。
Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。
临床应用降钙素原（PCT）是由116个氨基酸组成的激素原，分子量大约为12.7kD。
PCT由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，经酶切分解为（未成熟）降钙素、羧基端肽和氨基端肽。
健康人血中仅含有少量的PCT1,2。
细菌感染后PCT会明显升高。
动物模型试验显示机体发生脓毒血症时，多组织均能表达PCT３。
脓毒血症患者体内的PCT只含有114个氨基酸，缺少氨基末端的Ala-Pro4。
PCT水平升高见于细菌性脓毒血症，尤其是重症脓毒血症和感染性休克5,6,7,8,9,10。
PCT可作为脓毒血症的预后指标8,11,12,13，也是急性重症胰腺炎及其主要并发症的可靠指标14,15。
对于社区获得性呼吸道感染和空调诱导性肺炎患者，PCT可作为抗生素选择以及疗效判断的指标。
检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟●第一次孵育：30μl样本、生物素化的单克隆PCT抗体以及钌复合物标记a的单克隆PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。
●第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。
●将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。
未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。
给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。
●Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到检测结果。
a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-co mplex (Ru(bpy){23}三联吡啶钌试剂－工作溶液M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。
罗氏cobash检测原理Wu专家讲座
cobas e 411电化学发光全自动免疫分析仪
检测原理
电化学发光免疫检测技术
测试速度
86个测试/小时
试剂通道
18个
定标类型
二维码定标、2点定标
样本位
30个样本位（盘式系统）75个样本位（架式系统）
样本类型
血清、血浆、尿液、其它
自动探测
液面、气泡、凝块
操作界面
汉字操作界面
架式
盘式
罗氏cobash检测原理Wu专家讲座
罗氏cobash检测原理Wu专家讲座
第9页
胶体金免疫层析法
相关概念
抗原抗体反应: 每个抗体结合特定抗原
双抗体夹心法
胶体金标识物
罗氏cobash检测原理Wu专家讲座
第10页
cobas h 232检测原理
以NT-proBNP为例
加样
免疫胶体金抗体
识别NT-proBNP抗体
含有NT-proBNP血样
COBAS and LIFE NEEDS ANSWERS are trademarks of Roche
罗氏cobash检测原理Wu专家讲座
第28页
以NT-proBNP为例
检测
醋酸纤维膜层
双抗体夹心抗原抗体复合物与信号线结合信号线显色
免疫胶体金抗体结合质控线质控线显色
没有结合抗体与信号线结合信号线不显色
罗氏cobash检测原理Wu专家讲座
第13页
cobas h 232检测原理
影响抗原抗体反应原因
外部原因温度: 18°C 至32°C室温下湿度: 10%至85%相对湿度环境: 是否处于水平、无震平面
第27页
Thank you for your attention
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
罗氏电化学发光免疫分析仪测试项目定标物保存方法 甲状腺项目 定标液 及其货号 定标频率 靶值Cal 1/Cal 2 未开包装 稳定时间 （2-8C） 打开后 稳定时间 （2-8 C） 定标物状态 可否冰 冻保存 每瓶容量/ 每次吸样量 冻干， 需溶解 液体，
打开即用
FT3 03051994
1．当需要时，如质控不在范围内
2．每月，使用同一批号试剂
3．每周，使用同一盒试剂
2/40 pmol/l 26-- pg/ml 有效期限 8 周 是 - 1 ml 15 l
FT4 10/45 pmol/l ng/dl 有效期限 12 周 是 - 1 ml
15 l
T3 nmol/l ng/ml 有效期限 8 周 是 - 1 ml
30 l
T4 50/230 nmol/l µg/dl 有效期限 12 周 是 - 1 ml
15 l
TSH 04738551 0/ µIU/ml 有效期限 12 周 是 - ml
50 l T-uptake TBI 有效期限 12周 是 -
1 ml
15 l
TG 4/800 ng/ml 有效期限 3周 是 1 次 (-20C / 3
月)
1 ml
20 l
Anti-TG 06368603 40/3250 IU/ml 有效期限 6 周 是 不可 ml
10 µl Anti-TPO 06472931 35/350 IU/ml 有效期限 8小时 是 1 次 (-20C / 8周) ml
20 µl
Anti-TSHR 1/25 IU/l 有效期限 是 1 次 (-20C / 3 月)
2 ml
50 µl
- 无信息 # 定标物和质控物是测试包装内的一部分
定标必须被进行：每盒新试剂； 每天 (当仪器上使用同一盒试剂)；需要时，如质控不在范围内 心肌标志物
定标液 及其货号 定标频率 靶值Cal 1/Cal 2 未开包装 稳定时间 （2-8 C） 打开后 稳定时间 （2-8 C） 定标物状态 可否冰 冻保存 每瓶容量/ 每次吸样量 冻干， 需溶解 液体，
打开即用
CK-MB (18 min) 1．当需要时，如质控不在范围内
2．每月，使用同一批号试剂
3．每周，使用同一盒试剂
25ng/ml 有效期限 2 周 是 1次 (-20C / 3 月)
1 ml
15 l
CK-MB STAT (9 min) 25ng/ml 有效期限 2 周 是 1次 (-20C / 3
月)
1 ml
15 l
Myoglobin (18 min) 35/1200 ng/ml 有效期限 12周 是 - 1 ml
15 µl
Myoglobin STAT (9min) 35/1200 ng/ml 有效期限 12周 是 - 1 ml
15 µl
Troponin T hs 05092736 (9 min)
10 ng/ml 有效期限 2周 是 1次 (-20C / 3
月)
1 ml
15 l Troponin T hs 05092752 (18 min)
10 ng/ml 有效期限 2周 是 1次 (-20C / 3
月)
1 ml
15 l
ProBNP II 03121658 140/2700pg/ml 320 pmol/l 有效期限 2周 是 1次 (-20C / 3 月) 1 ml 15 µl
Digoxin ml, l 有效期限 12 周 是 - ml
10 µl
Digitoxin 03002667 60 ng/ml, 79 nmol/l 有效期限 12 周 是 - 1 ml
15 µl
性激素项目 定标液 及其货号 定标频率 靶值Cal 1/Cal 2 未开包装 稳定时间 （2-8 C） 打开后 稳定时间 （2-8 C） 定标物状态 可否冰 冻保存 每瓶容量/ 每次吸样量 冻干， 需溶解 液体，
打开即用
HCG+ 03302652 1．当需要时，如质控不在范围内
2．每月，使用同一
2000mIU/ml 有效期限 12 周 是 - 1 ml 10 µl HCG STAT 03303071 10/5000mIU/ml 有效期限 12 周 是 -
1 ml
10 µl
Cortisol 1000 nmol/l 36 µg/dl 有效期限 - 是 1次 (-20C / 3 月) 1 ml 20 µl ACTH 03255760
批号试剂
3．每周，使用同一盒试剂
15/120 pg/ml 有效期限 - 是 1 次 (-20C / 1月)
1 ml
50 l
DHEA-S 03000095 20 µmol/l 5/750 µg/dl 有效期限 - 是 1次 (-20C / 3 月) 1 ml
15 µl
Estradiol II 03064921
73/11000 pmol/l 20/3000 pg/ml 有效期限 - 是 1次
(-20C / 3 月)
1 ml
35 µl
FSH II 03032680 1/55 mIU/ml 有效期限 - 是 1次 (-20C / 3
月)
1 ml
40 µl
LH II 03561097 1/45 mIU/ml 有效期限 是 1次 (-20C / 3
月)
1 ml
20 µl
Progesterone II 169 nmol/l 53 ng/ml 有效期限 12 周 是 - 1 ml
30 µl
Prolactin 03277356
2/2000 µIU/ml 94 ng/ml 有效期限 - 是 1次
(-20C / 3 月)
1 ml
10 µl
SHBG 03052028 0/40 nmol/l 有效期限 - 是 1次 (-20C / 2
月)
1 ml
10 µl
Testosterone II 05202230
< 40 nmol/l < ng/ml 有效期限 - 是 1次 (-20C / 3 月) 1 ml
20 µl
hGH 0/10 ng/ml 0/10000 pg/ml 有效期限 7天 是 1次 (-20C / 28天)
1 ml
40 µl 肿瘤标志物 定标液 及其货号 定标频率 靶值Cal 1/Cal 2 未开包装 稳定时间 （2-8 C） 打开后 稳定时间 （2-8 C） 定标物状态 可否冰 冻保存 每瓶容量/ 每次吸样量 冻干， 需溶解 液体， 打开即用
AFP 04487761
1．当需要时，如质控不在范围内
2．每月，使用同一批号试剂
3．每周，使用同一盒试剂
5/50 IU/ml, 6/60 ng/ml 有效期限 6 周 是 1次 (-20C / 6周) 1 ml 10 l
CEA 5/50 ng/ml 有效期限 12 周 是 -
1 ml
10 l CA 125 II 35/500 U/ml 有效期限 12 周 是 -
1 ml
20 µl CA 15-3 II 03045846 15/100 U/ml 有效期限 12 周 是 -
1 ml
20 µl
CA 19-9 20/250 U/ml 有效期限 4 周 是 1次 (-20C / 2
月)
1 ml
10 µl
CA 72-4 1/70 U/ml 有效期限 6 周 是 -
1 ml
30 µl Cyfra21-1 0/50 ng/ml 有效期限 8周 是 -
1 ml
20 µl NSE 50 ng/ml 有效期限 6 周 是 -
1 ml
20 µl
HE4 5/200 pmol/l 有效期限 7天 是 1 ml 10 µl
total PSA II 04485220 0/60 ng/ml 有效期限 6 周 是 1次 (-20C / 3
月)
1 ml
20 µl