电化学发光免疫分析方法及其应用
电化学发光免疫分析法-精品文档
Electro-Chemiluminescence Immunoassay (ECLI )
免疫分析法 发光和化学发光 化学发光免疫分析法 电化学发光 电化学发光免疫分析法
免疫分析
基于抗原和抗体的特异性反应进行检测的 一种手段； 免疫标记技术是将一些既易测定又具有高 度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体 分子上，通过这些标记物的增强放大效应 来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含 量。
化学发光是指在某些特殊的化学反应中， 反应的中间体或产物由于吸收了反应释 放的化学能而处于电子激发态，当其回 到基态时伴随产生的光辐射现象。
化学发光 反应包括 两个关键 步骤，即 化学激发 和发光。
化学发光反应能级图
化学发光分析
根据化学发光反应在某一时刻的发光强 度或反应的发光总量来确定反应中相应 组分含量的分析方法，称为化学发光分 析。
免疫分析法 发光和化学发光 化学发光免疫分析法 电化学发光 电化学发光免疫分析法
电致化学发光（ECL)
电致化学发光 (ECL) 是通过在电极上施 加一定波形的电压或电流信号进行电解 反应的产物之间或与体系中共存组分反 应产生化学发光的现象。
电致化学发光（ECL)
ECL与CL的差异在于ECL是电启动发光 反应，而CL是通过化合物混合启动发光 反应。因此ECL反应易精确控制，具有 灵活性。
电化学发光原理图
T P A T P A R u ( b p y ) R u ( b p y )
基态
3 + 3
● +
●
激发态
* R u ( b p y ) 3
2 + 3
不稳定
光 子 ( 6 2 0 n m )
化学发光免疫分析技术原理简介
化学发光免疫分析技术原理简介20 世纪60 年代即有人利用化学发光法测定水样中细菌含量和菌尿症患者尿液检查。
1977 年Halman 等将化学发光系统与抗原抗体反应系统相结合，创建了化学发光免疫分析法，保留了化学发光的高度灵敏性，又克服了它特异性不足的缺陷。
近年来对技术与仪器的不断改进，使此技术已成为一种特异，灵敏，准确的自动化的免疫学检测方法。
1996 年推出的电化学发光免疫技术，在反应原理上又具有一些新的特点。
这两种技术目前已在国内一些大型医院实验室用于常规免疫学检验。
一、化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法( chemiluminescence immunoassay , CLlA) 是把免疫反应与发光反应结合起来的一种定量分析技术，既具有发光检测的高度灵敏性，又具有免疫分析法的高度特异性。
在CLIA中，主要有两个部分，即免疫反应系统和化学发光系统。
免疫反应系统与放射免疫测定中的抗原抗体反应系统相同化学发光系统则是利用某些化合物如鲁米诺( luminol) 、异鲁米诺(isolu-minol) 、金刚烷( AMPPD) 及吖啶酯( AE) 等经氧化剂氧化或催化剂催化后成为激发态产物，当其回到基态时就会将剩余能量转变为光子，随后利用发光信号测量仪器测量光量子的产额。
将发光物质直接标记于抗原(称为化学发光免疫分析)或抗体上(称为免疫化学发光分析) ，经氧化剂或催化剂的激发后，即可快速稳定的发光，其产生的光量子的强度与所测抗原的浓度可成比例。
亦可将氧化剂(如碱性磷酸酶等)或催化剂标记于抗原或抗体上，当抗原抗体反应结束后分离多余的标记物，再与发光底物反应，其产生的光量子的强度也与待测抗原的浓度成比例。
发光免疫分析的灵敏度高于包括RIA 在内的传统检测方法，检测范围宽，测试时间短，仅需30 - 60min 即可。
试剂货架寿命长，稳定性好，具有大规模自动化测试的功能。
这项技术发展很快，已有许多厂商生产各具特色的测定仪器与配套试剂。
化学发光免疫分析技术
化学发光免疫分析技术
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化学发光免疫分析技术
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是当前世界公认先进标识免疫测定技术，化学发光免
疫分析技术含有高度准确性和特异性，成为检验方法中最 为主要技术之一。化学发光免疫分析技术作为疾病诊疗主 要伎俩已被广泛用于机体免疫功效、传染性疾病、内分泌 功效、肿瘤标志物、性激素、甲状腺功效等方面体外诊疗 分析技术
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• 分析方法简便快速
• 结果稳定、误差小
• 样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免去了各种可能原因（光源稳定性、光 散射、光波选择器等）给分析带来影响，使分析结果灵敏稳定可靠。
• 安全性好及使用期长
• 免去了使用放射性物质。到当前为止，还未发觉其危害性；试剂稳定，保留期可达一 年。
T3降低： ⑴仅于较重甲状腺功效减退病人，T3和T4均下降，轻型甲减T3 不一定下降； ⑵重症全身性疾病状态或慢性病变可造成T3下降，多见 于慢性肾功效不全、慢性心功效不全、糖尿病、心梗等疾病患者。
化学发光免疫分析技术
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游离甲状腺素（FT4）游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）
• FT3和FT4分别为T3和T4在血清中未与蛋白结合部分，其不 受血清中TBG影响，直接反应甲状腺功效状态，其敏感性 和特异性均高于T3和T4
化学发光免疫分析技术
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㈠ 辣根过氧化物酶标识化学发光免疫分析
该分析系统采取辣根过氧化物酶（HRP）标 识抗体(或抗原)，在与反应体系中待测标本 和固相载体发生免疫反应后，形成固相包被 抗体-待测抗原-酶（HRP）标识抗体复合物， 这时加入鲁米诺发光剂、H2O2和化学发光增 强剂使产生化学发光。
罗氏电化学发光免疫分析(精)
罗氏电化学发光免疫剖析技术是罗氏企业开发的,但全自动机械制造却由日本的日立企业肩负,所以仪器上还有Hitachi的标记。
这个仪器让大家惊讶的一大原由就在于向来在实验室研究的电致化学发光竟然已经真实地家产化了,此中我们向来没法解决的诸多问题(特别是重现性均已获得解答,看来罗氏确实花了许多心血开发这款仪器。
罗氏电化学发光免疫剖析技术的性能特色——创新的技术,独出心裁一、最初进的检测原理电化学发光免疫测定,是当前最初进的标记免疫测定技术,是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定此后的新一代标记免疫测定技术,拥有敏感、快速和稳固的特色,在固相标记免疫测定中技术上居当先地位。
电化学发光(ECL是一种在电极表面由电化学引起的特异性化学发光反响,实质上是电化学和化学发光两个过程的完满联合。
电化学发光与一般化学发光的主要差别在于前者是电启动发光反响,循环及多次发光,后者是经过化合物混淆启动发光反响,是单次瞬时发光。
所以ECL反响易精准控制,重复性极好。
电化学发光免疫测定是电化学发光(ECL和免疫测定相联合的产物,直接以[Ru(bpy3]2+标记抗体,反响时标记物直接发光。
且[Ru(bpy3]2+在电极表面的反响过程能够循环往复进行,产生很多光子,使光信号得以加强。
二、专利的包被技术链霉亲和素(streptoavidin,SA和生物素(biotin,B是拥有很强的非共价互相作用的一对化合物,特异性强且联合密切。
一分子SA可与四分子B相联合,增大了抗体联合量,达到放大成效。
在ECL的试剂中,SA经过特别的蛋白联合物平均坚固地包被在磁性微粒上,形成通用的能与B联合的固相载体,另一试剂为活化的B衍生物化合的抗原或抗体。
两种试剂混淆时,抗原或抗体即包被在磁性微粒上。
三、独到的载体ECL中采纳的固相载体是带有磁性的直径约2.8m的聚苯乙烯微粒。
其特色是反响面踊跃大,比板式扩大20-30倍,使反响在近乎液相中进行,反响速度大大加速,利用氧化铁的磁性,使用电磁场分别联合态和游离态,方便快速,实现了精准的全自动化。
电化学发光免疫分析
电化学发光免疫分析是一种在电极表面由电化学引发的异性化学发光反应，是电化学和化学
发光两个过程的完美结合。
电化学发光免疫测定是电化学发光和免疫测定相结合的产物，是
目前非常先进的标记免疫测定技术。
电化学发光技术主要技术：
1. 三联吡啶钌标记技术；
（1）循环使用，不会被消耗，电极表面的氧化还原反应循环进行，测定信号无限循环放大，检测灵敏度大大提高
（2）其盐是很稳定的水溶性化合物，试剂的稳定性好，效期长
（3）N 羟基琥珀酰胺（ NHS ）酯能与蛋白质赖氨酸的ε-氨基或核酸上的氨基形成稳定的酰
胺键，应用广泛，宽广的检测菜单
（4）惰性元素，非放射性元素，稳定
（5） [Ru(bpy)32+]和TPA ，无电压的情况非常稳定，确保反应结果的准确性
2. 链霉亲和素—生物素技术；
（1）特异性强且结合紧密，灵敏度高
（2）一分子SA可与四分子B相结合，增大了抗体结合量，灵敏度高
3. 磁性微粒子技术；
（1）反应面积大，结合量增大
（2）反应在近乎液相中进行，信号均匀精确
（3）分离方便迅速，无背景干扰
4. 电启动的化学发光反应。
（1）实现了结合相和游离相的完全自动化分离
（2）彻底清洗，反应易于控制
电化学发光技术特点：试剂稳定、测量范围宽，灵敏度高、特异性优异、检测菜单丰富、准
确性好，精密度高、操作便捷；。
电化学发光免疫传感器的研究及应用现状
电化学发光免疫传感器的研究及应用现状摘要：电化学发光免疫技术是将高灵敏度的电化学发光和高特异性的免疫反应相结合的一种交叉学科研究的成果。
电化学发光主要应用在免疫系统、生物酶等方面的研究，而电化学发光免疫传感器在临床领域中有较明显的成果。
因此，本文将从电化学发光免疫传感器的研究和应用现状两个方面，对电化学发光免疫传感器进行进一步的研究，尤其在医学方面能够有更多突破，实现在更多领域中的应用。
关键词：电化学发光；免疫传感器；研究；应用现状；一、电化学发光免疫传感器的概念（一）电化学发光的概念电化学发光即电致化学发光，是一种通过在电极上施加一定电压，用来引发物质在电极表面进行电化学反应，反应产生的能量激发发光物质由基态迁移到激发态，处于激发态的物质不稳定会返回基态，在这一过程中会伴随光信号产生，产生光信号后通过光/电转换器，将光信号转换成电信号，来实现对目标物的检测。
ECL分析法不仅具有仪器简单，灵敏度高，还具有试剂用量少、时空可控性强等优点，现阶段，电化学发光技术已广泛应用于免疫分析、生物分子和其他生物分子检测中。
（二）免疫传感器的概念免疫传感器是一种将高特异性的免疫反应和高超的物理转换器结合起来的一种分析类器件。
由于免疫反应具有强的特异性，加之物理转换器的高的灵敏度，使得免疫传感器也成为一种有效检测样品的方法，受到人们的热切关注。
目前，免疫传感器也已经广泛地应用于临床医学检测等领域。
（三）电化学发光免疫传感器的概念电化学发光免疫传感器是一种将电化学发光与免疫传感器结合起来的一种具有很高免疫特性的一种装置。
利用电化学发光的高灵敏度的传感技术，再结合特异性免疫反应，最终可以达到一种对临床中微量物质进行定量的检测。
二、电化学发光免疫传感器的研究及应用电化学发光免疫传感器是将抗体或者抗原通过一定方式负载在电极上作为识别探针，当抗体与抗原发生特异性反应后，其产生的复合物与电化学发光信号之间建立一定关系，然后通过光电转换器，将光信号转换成电信号，从而对目标物进行检测。
谈一谈化学发光免疫分析技术在临床检验中的作用
谈一谈化学发光免疫分析技术在临床检验中的作用发表时间：2020-09-08T14:21:18.157Z 来源：《中国医学人文》2020年16期作者：色郎康珠[导读] 化学发光免疫分析（CLLA）属于一个新型的标记免疫分析的技术化学发光免疫分析（CLLA）属于一个新型的标记免疫分析的技术，主要是将具有灵敏度特别高的化学发光测定技术和高特异性的免疫反应相结合而创建的检测。
微量抗原或抗体，其具有非常灵敏的特点，还包括其检测内容比较细致、操作容易等等一些优良特点，所以被广泛的使用在临床的检验当中。
而且化学发光免疫分析能够帮助患者对于其所患的疾病以及身体病理特征进行更加及时更加有效的判断，这为临床的诊断提供了科学的参考依据。
基于此，本文结合实际生活中的相关治疗，对于化学发光免疫分析的相关技术以及具体的应用进行以下相关的分析和探讨，希望对大家能够有所帮助。
化学发光免疫技术的科学原理化学发光免疫技术的主要原理是通过化学发光剂，直接对患者的抗体或者是抗原进行基本的标记。
待抗原体、磁性颗粒性出现任何的反应之后，能够经过磁场的作用将游离和结合状态之下的化学发光剂进行快速的分离，进而能够将化学发光剂添加到已经结合的状态当中去，并且进行更加快速的反应。
同时，在这样的状态下进行监测，可以将发光度变小，测量的方式一定要通过定性或者定量的方式进行检测。
化学发光剂免疫技术的基本类型1、酶催化化学发光的免疫分析酶催化化学发光免疫技术主要是在抗体或者抗原在检测的标本中发生反应的时候，医生通过发光的酶来当做基本的标记物。
2、直接标记发光物质的免疫分析直接标记的发光剂免疫技术主要是通过更加直接的方式直接通过吖啶酯对抗体进行标记，等到抗体出现符合复合反应的现象以后，从中加入NaOH以及带有双氧水的氧化剂之后会出现碱性的化学性质，同时还会呈现出发光的特殊现象。
3、电化学发光的免疫分析电化学发光的免疫分析类型主要是分析了化学反应的光以及电化学，依托于三丙胺，并且将三丙胺当做电子的供体，通过使用三联吡啶钌对抗体或者抗原进行基本的标记，通过电场的基本作用发生电子转移的现象，同时还会出现发光的特殊反应。
电化学发光免疫分析及其在临床检验中的应用分析
电化学发光免疫分析及其在临床检验中的应用分析苏东梅【摘要】目的：探讨电化学发光免疫分析及在临床检验中的应用效果。
方法指定一名具有专业知识及丰富经验的临床实验室检验人员分别利用ECLIA、ELISA等方法完成100例乙肝患者血样中乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）检验。
记录两种方法检测抗-HBc阳性率，给予统计学分析后得出结论。
结果ECLIA法检测100例乙肝患者血样中抗-HBc阳性率高达98.00％，显著高于ELISA法检测阳性率81.00％，对比结果具有统计学意义（P＜0.05）。
结论电化学发光免疫分析方法可显著提高临床检验结果准确性，为临床医生提供真实可靠的诊断依据，使患者及时确诊病情并获得正确治疗，保障其临床疗效及预后。
%Objective To explore the electrochemiluminescence immunoassay and the application effect in clinical examination. Methods A clinical laboratory staff with professional knowledge and rich experience was specified, using ECLIA, ELISA respectively(anti-HBc)test completed 100 cases of hepatitis B blood samples of patients with hepatitis B virus core antibody. The positive rate of anti–HBc of the two methods was detected and record, gives statistical analysis conclusion. Results The positive rate of anti-HBc ECLIA was up to 98%in 100 cases of hepatitis B patients, it was significantly higher than those of detected by ELISA(81%), comparison of the results was statistical significance(P<0.05). Conclusion Electrochemiluminescence immunoassay method can significantly improve the accuracy of clinical test results, provide the reliable basis for the diagnosis for clinicians, enable patients totimely diagnose the disease and get the correct treatment, ensure the therapeutic effect and prognosis.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2014(000)023【总页数】3页(P102-103,156)【关键词】电化学发光免疫分析;临床检验;应用效果【作者】苏东梅【作者单位】广东省茂名市中医院检验科，广东茂名525000【正文语种】中文【中图分类】R446.6电化学发光免疫分析（electro-chemiluminescence immunoassay，ECLIA）是近年来于临床推广使用的新型标记免疫测定技术，特点为检测速度快、易于控制、灵敏度较高等[1-3]。
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２ Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ的类型 根据电化学发光剂在免疫反应步骤中的作用部 位不同， Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ可分为底物电化学发光免疫反应和标 记物电化学发光免疫反应两种。前者的抗原抗体免 疫反应操作步骤与酶免疫测定基本相同， 仅在最后一 步将酶反应底物改为电化学发光剂来检测电化学发 光信号。常用的辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶的发 ， ２ 二氧杂 光底物分别为鲁米诺及其衍生物系列和 １ 环乙烷 磷 酸 酶 及 其 衍 生 物 系 列
［ １ ］ １ ９ ２ ９ 年电致化学发光现象由 Ｈ ａ ｒ ｖ ｅ ｙ 发现。２ ０
免疫反应系统和电化学发光系统。免疫反应系统主 要是抗原抗体结合形成免疫复合物， 而电化学发光 系统是利用电化学发光物质经氧化剂氧化形成激发 态中间体， 这种中间体不稳定， 在其返回基态时， 会 发射出光子， 其产率可以用发光信号检测仪接收测 ［ ４ ］ 检测 量 。以钌标记物电化学发光免疫分析为例， 中以标记有链霉亲和素直径几微米的磁珠作为固相 载体， 与生物素标记抗原或抗体结合后可以捕获检 测样本中的抗体或抗原， 再与反应体系中钌分子标 记的抗抗体或抗体结合， 形成的免疫复合体在外磁 场的作用下， 借助磁珠的磁力吸附完成固液相分离， 截留特异性抗原 抗体复合体， 洗涤除去多余或游离 的抗体或抗原。当反应体系中加入电子供体三丙胺 后， 在电场作用下， 钌分子和三丙胺在电极表面分别 被氧化成三价钌和带阳离子的自由基三丙胺。后者 很不稳定， 迅速失去一个质子形成强还原剂自由基 三丙胺， 将三价钌分子还原成激发态的二价钌， 其自 身则被氧化成二丙胺和丙醛。接着激发态的钌分子 ２ ０ｎ ｍ的 衰减成基态钌分子， 同时放出一个波长为 ６ ［ ３ ， ５ ］ 光子 。这一过程在电极表面以每毫秒几十万次 的速度循环进行， 产生的光子经光电倍增管检测光 强度， 从而测出待检抗体或抗原的含量。
［ ３ ］ Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ ） ， 它是一种在电极表面由电化学引发的特
异性化学发光反应， 比通过化合物简单混合启动的化 学发光反应更易精确控制。本文就近年来该方法的 研究进展及其在医学领域的应用作一综述。 １ Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ的基本原理 Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ是利用电化学发光剂标记的抗原或抗体 与待测物经过一系列的免疫反应和洗涤等理化步 骤， 最后用光学仪器测量免疫反应前后电化学发光 信号强度的改变， 从而对抗原或抗体物质进行定量 分析的一种方法。该方法主要包含了两个部分， 即
１ ２ ］ 断的 敏 感 性。 黄 琛 等［ 分别用蛋白质芯片法和
。这一类型
的Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ既避免了放射性核素的半衰期短及放射性 危害， 又克服了酶标记的不稳定性。它集电化学发 光、 生物素 亲和素、 磁微粒技术和免疫分析于一体， 是继放射免疫分析、 荧光免疫分析、 酶免疫分析和化 学发光免疫分析后的新一代免疫标记技术。同其他 免疫反应一样， 标记物电化学免疫分析反应也有直接 法、 双抗体夹心法和竞争法等 ３ 种主要方式。 ３ Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ的应用 ３ ． １ 细菌、 病毒及其毒素测定 与传 统 的 基 础 培 养 法 相 比， 用Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ检 测 肉 类、 家禽甚至饮用水中的细菌克服了速度慢、 检出率 低、 结果不准确的缺点。Ｙ ｕ 等
Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． ３ ７ ６ ０ ／ ｃ ｍ ａ ． ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ ４ １ ２ ２ ． ２ ０ １ １ ． ０ ２ ． ０ ０ ５ 基金项目： 国家科技支撑计划（ ２ ０ ０ ８ Ｂ Ａ Ｉ ５ ６ Ｂ ０ ３ ） 作者单位： ２ ０ ０ ０ ２ ５上海， 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制 所， 卫生部寄生虫与病原生物学重点实验室， 世界卫生组织疟疾、 血 吸虫病和丝虫病合作中心
Ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｌ ｕ ｍｉ ｎ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ａ ｓ ｓ ａ ｙａ ｎ ｄｉ ｔ ｓ ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｇ Ｕ ＯＪ ｉ ａ ｎ ，Ｃ Ｈ Ｅ ＮＪ ｉ ａ ｘ ｕ ． Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙｏ ｆ Ｐ ａ ｒ ａ ｓ ｉ ｔ ｅ ａ ｎ ｄＶ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ Ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，Ｍ ｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙｏ ｆ Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ ，Ｗ Ｈ ＯＣ ｏ ｌ ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｉ ｎ ｇＣ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ Ｍ ａ ｌ ａ ｒ ｉ ａ ，Ｓ ｃ ｈ ｉ ｓ ｔ ｏ ｓ ｏ ｍ ｉ ａ ｓ ｉ ｓ ａ ｎ ｄ ，Ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｐ ａ ｒ ａ ｓ ｉ ｔ ｉ ｃ Ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｃ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ Ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ａ ｎ ｄＰ ｒ ｅ ｖ ｅ ｎ ｔ ｉ ｏ ｎ ，Ｓ ｈ ａ ｎ ｇ ｈ ａ ｉ Ｆ ｉ ｌ ａ ｒ ｉ ａ ｓ ｉ ｓ ２ ０ ０ ０ ２ ５ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ Ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ：Ｃ Ｈ Ｅ ＮＪ ｉ ａ ｘ ｕ ，Ｅ ｍ ａ ｉ ｌ ：ｃ ｈ ｅ ｎ ｊ ｉ ａ ｘ ｕ １ ９ ６ ２ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ Ｓ ｕ ｐ ｐ ｏ ｒ ｔ ｅ ｄｂ ｙＮ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｋ ｅ ｙＴ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙＲ＆ＤＰ ｒ ｏ ｇ ｒ ａ ｍ （ ２ ０ ０ ８ Ｂ Ａ Ｉ ５ ６ Ｂ ０ ３ ） Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】 Ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｌ ｕ ｍ ｉ ｎ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅｉ ｍ ｍ ｕ ｎ ｏ ａ ｓ ｓ ａ ｙ（ Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ ）ｉ ｓ ａｎ ｅ ｗｈ ｉ ｇ ｈ ｌ ｙｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎｔ ｅ ｃ ｈ 【 ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙｉ ｎｗ ｈ ｉ ｃ ｈｎ ｏｒ ａ ｄ ｉ ｏ ｉ ｓ ｏ ｔ ｏ ｐ ｅ ｓ ａ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ．Ｉ ｔ ｈ ａ ｓ ｅ ｘ ｔ ｒ ｅ ｍ ｅ ｌ ｙ ｌ ｏ ｗｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎｌ ｉ ｍ ｉ ｔ ａ ｎ ｄｗ ｉ ｄ ｅ ｄ ｙ ｎ ａ ｍ ｉ ｃ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ａ ｎ ｄａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ．Ｔ ｈ ｉ ｓ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅｈ ａ ｓ ｂ ｅ ｅ ｎｗ ｉ ｄ ｅ ｌ ｙ ｕ ｓ ｅ ｄｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｈ ｏ ｒ ｍ ｏ ｎ ｅ ｓ ，ｔ ｕ ｍ ｏ ｒ ｍ ａ ｒ ｋ ｅ ｒ ｓ ａ ｎ ｄｃ ｙ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ｅ ｓ ，ａ ｎ ｄｗ ｉ ｌ ｌ ｂ ｅ ａ ，ｆ ｏ ｏ ｄａ ｎ ｄｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ，ｅ ｔ ｃ ． ．Ｉ ｎｔ ｈ ｉ ｓｐ ａ ｐ ｅ ｒ ， ｎ ｏ ｖ ｅ ｌ ｍ ｏ ｄ ｅ ｒ ｎｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｔ ｉ ｃｔ ｏ ｏ ｌ ｉ ｎｔ ｈ ｅｆ ｉ ｅ ｌ ｄ ｓ ｏ ｆ ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ｔ ｈ ｅｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈｐ ｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａｗ ａ ｓ ｒ ｅ ｖ ｉ ｅ ｗ ｅ ｄ ． 【 Ｋ ｅ ｙｗ ｏ ｒ ｄ ｓ 】 Ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｌ ｕ ｍ ｉ ｎ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅｉ ｍ ｍ ｕ ｎ ｏ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ；Ｂ ｉ ｏ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ；Ｔ ｒ ａ ｃ ｅｔ ｅ ｓ ｔ
［ ６ ］
ｇ 数量级。同时检测炭疽杆菌芽孢， 检出值为 于ｐ １ ０ ０个芽孢。在测定可溶性或颗粒抗原时， Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ 的灵敏度极高。 ３ ． ２ 肿瘤标志物测定 肿瘤标志物的检测对肿瘤早期诊断及判断预后、 转归、 评价疗效都具有重要意义。 应用 Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ对疑似 肿瘤患者进行肿瘤标志物检测， 既简便、 快速， 有利于 早期诊断， 又可免除介入检查的痛苦和高昂费用。 戴
世纪 ６ ０ 年代， 伴随电子技术的迅猛发展， 光电传感器 与化学发光技术也得到了推动和发展， 对电化学发光
２ ］ 现象的详细研究开始出现［ 。至 ２ ０世纪 ９ ０年代初，
电化学发光和免疫测定相结合形成了电化学发光免 疫分 析 方 法 （ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｌ ｕ ｍ ｉ ｎ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅｉ ｍ ｍ ｕ ｎ ｏ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ，
［ ８ ］
Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ法检测６ ９ 例肿瘤患者和６ ５ 例正常对照组血清 中的糖类抗原１ ９ ９ （ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ， Ｃ Ａ １ ９ ９ ） 、 糖类抗原 ２ ４ ２ （ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ， Ｃ Ａ ２ ４ ２ ） 、 甲胎蛋白（ ａ ｌ ｐ ｈ ａ ｆ ｅ ｔ ｏ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ， Ａ Ｆ Ｐ ） 等１ ２ 项肿瘤标志物指标， 发现蛋白质芯片 Ｃ Ｌ Ｉ Ａ法简单、 方便， 而Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ法能更精确地检 法较 Ｅ
２ ＋ ３ ［ ７ ］
３ 项肿瘤标志物糖类抗原１ ５ ３ （ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ， Ｃ Ａ １ ５ ３ ） 、 糖类抗原１ ２ ５ （ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ， Ｃ Ａ １ ２ ５ ） 、 癌胚抗原 ｃ ａ ｒ ｃ ｉ ｎ ｏ ｅ ｍ ｂ ｒ ｙ ｏ ｎ ｉ ｃａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ， Ｃ Ｅ Ａ ） 的含量进行检测， 结 （ 果显示３ 项指标联合检测的灵敏度和特异度分别为 ９ ０ ． ７ ６ ％ 和９ ６ ． ８ ３ ％， 优 于 单 项 检 测 时 的７ ７ ． ９ ４ ％和 ８ ９ ． ５ ７ ％、 ９ ５ ． ６ ３ ％和４ １ ． １ ７ ％、 ３ ８ ． ２ ３ ％和９ ３ ． ９ １ ％， 提示 用Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ联合检测能提高乳腺癌早期诊断和鉴别诊
１ １ ］ 庆福等［ 采用 Ｅ Ｃ Ｌ Ｉ Ａ对７ ８ 例乳腺癌患者血清中的