食品营养学实验
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实验一:槐米中黄酮的测定
一、原理与目的
(一)原理:
维生素P是一组与保持血管壁正常渗透压有关的黄酮类物质,能与铝离子生成有色络和物,其吸光度与浓度成正比。
近年来,一些研究表明,银杏叶中含有黄酮类物质,对冠心病、心绞痛、高血压、支气管哮喘等有显著的疗效,同时也是一类具有广泛开发前景的天然抗氧化剂。
(二)目的
实验是利用索式提取从槐米中提取生物活性成分并对其含量进行测定。
二、材料、仪器与试剂
材料:槐米
仪器:分光光度计,索式提取器,天平
试剂:Vp,甲醇,5%亚硝酸钠,10%硝酸铝,4%氢氧化钠
三、操作步骤
(一)槐米中黄酮的提取
取0.5克槐米包好放入索式提取器中,加入90ml乙醇,在90℃水浴下回流,然后定容至100ml ,备用。
(二)黄酮含量的测定
1、标准曲线的制作:准确称取120℃下减压干燥至恒重的维生素P于100ml 容量瓶中,加少许甲醇在通风橱中微微加热使其溶解,冷却后用甲醇定容,混匀,吸取10ml于100ml容量瓶中,加蒸馏水定容,混匀,此液最终浓度为0.2mg/ml 维生素P,取上述标准液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0于6个25ml刻度试管中,各加入5%亚硝酸钠1ml,放置6min,再加入10%硝酸铝1ml,混匀,放置6min,然后加入4%氢氧化钠10ml,用蒸馏水定容,静置15min,以第一管作空白在500nm处测吸光度值,以维生素P浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标做标准曲线。
2、测定:取黄酮提取液2.0ml于25ml刻度试管中,按标准曲线的操作步骤测定吸光度值,通过标准曲线计算维生素P的含量
X×V×100
黄酮(mg/100g)=
V1×W(g)
式中:X——从标准曲线计算出的黄酮浓度(mg/ml)
V——定容体积
V1——稀释倍数
100——mg/g换算为mg/100g
W ——样品重(g)
实验二海带中碘含量的测定
一、实验目的与要求:掌握碘的生理功能和化学性质,并学习用重铬酸钾氧化法测定碘的含量。
二、实验所需仪器设备:
分光光度计、组织捣碎机、常量天平
三、实验主要内容:
( 1 )样品的处理
( 2 )碘的标准曲线的制备
( 3 )样品中碘含量的测定
四、实验步骤:
1、样品的处理:称取捣成匀浆状的样品 4g 移入坩埚内,加10N KOH5ml 移入高温炉中600℃灰化,待冷却后取出,用热水数次过滤于50ml容量瓶中定容。
2、碘标准曲线制备:准确吸取每毫升相当于0.1mg/m1 的碘的标准液0.0、2.0、4. 0、6.0 、8.0ml 分别移入125ml分液漏斗中,加水至40ml,再加入2ml 浓硫酸, 0.2N重铬酸钾溶液15ml,摇匀后放置30min。加入10ml氯仿振摇lmin,通过棉花过滤于比色皿中,于510nm波长下测定吸光度绘制标准曲线。
3、样品中碘含量的测定:吸取5ml样品溶液移入125ml分液漏斗中,加水至40ml , 然后按标准曲线步骤操作。
4、计算:
碘(mg/kg ) = C/ W×1000
式中: C ——从标准曲线查出碘的标准量(mg )
w ——测定时所取样品液相当于样品量(g )
五、实验报告要求:
实验报告内容包括实验名称、实验目的、实验原理、仪器与试剂、实验步骤、实验记录、实验结果与分析及实验讨论与思考。