核抗原蛋白序列汇总
尖锐湿疣组织中增殖细胞核抗原和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3的表达及相关性分析
【 ｂｔ ｃ Ｏ ｊ ｔ ｅ ｏ ｎｅ ｉ ｔ ｔ ｘｒ ａｔ ｒ 】 ｂｅ ｉ Ｔ ｖｓｇ ｅ ｈ ｅｐ ｓｏ ｎ ｅ ｏｅ ｔｎｏ ｐ ｌｅ ｔ ｇ ｌｎｃ ａ ａｔｅ Ｐ Ｎ ｃｖ ｉ ｔａ ｅ ｅ ｉ ｈ ｒ ｒ ｌｉ ｆ ｏｆ ａｎ ｃ ｌ ｅ ｉ
【 摘要 】 目的 探讨增 殖细胞核抗 原（ Ｃ Ａ 和半胱氨 酸天冬氨酸特异性蛋 白酶一 Ｃｓａ 一）在 尖锐 湿疣（ Ａ） ＰＮ ） ３（ ａ ｓ ３ ｐｅ Ｃ
组织角质 形成细胞 中的表达与相关性。方法 采 用免疫组化 ｓ Ｐ法分别检 测 ３ ６例初发性 Ｃ Ａ患者（ Ａ组 ） １ Ｃ 和 ０例正 常 Ｃ Ａ组 标本 角质 形成 细胞 Ｐ Ｎ Ｃ Ａ及 Ｃ ｓａｅ表达 ａｐｓ一
ｏ ｓ Ｂ ｏ ｓ ｐ ｃｍｅ ｓｗｅ ｅ ｏ ｔｉ ｅ ｒ ｍ ３ ａｉｎ ｓｗｉ ｒｍａｙ Ｃ ｎ ｒｐ ｃ ｓｏ ０ ｎ ｒ ｌ ｌ ｓｉ ｏ ｔ １ ｈ ｒｔ ｉ ｄ ｉｐ ｙ ｓ ｅ ｉ ｎ ｒ ｂ ａ ｎ ｄ ｆｏ ６ ｐ ｔ ｔ ｔ ｐ ｅ ｈ ｉ ｒ Ａ ａ ｄ ｐ ｅ ｕ ｅ ｆ１ ｏ ｍｏ ｅ ｎ ｃ ｎｒ ．Ｔ ｅ ｐ ｏｅｎ ｍａ ｏ ｅ ｐ ｅ ｓ ｎ ｆＰ ＮＡ ａ ｄ Ｃ ｓ ａ ｅ ３ ｗ ｒ ｘ ｍｉ ｅ ｔ ｔ ｐ ａ ｉｉ — ｅ ｏ ｉａ ｅ ｂ ｏｉ ｍｍｕ ｏ ｉｔｃ ｅ ｃ ｔ ｉｉ ｇ ｔｃ ｎ ｑ ｅ ｘ ｒ ｓ ｉ ｓｏ Ｃ ｎ ａ ｐ ｓ 一 ｅ ｅ ｅ ａ ｎ ｄ ｗｉ ａｓｒ ｔ ｖｄ ｎ ｐ ｒｘ ｄ ｓ — ｉｔ ｉ ｏ ｈ ｅ ｎ ｎ ｈ ｓｏ ｈ ｍｉａ ｓａｎ ｎ ｈ ｉ ｕ ． ｌ ｅ Ｏｎ ｔ ｅ ｂ ｓｓ ｏ ｔｉ ｉｇ ｉｔ ｇ ａｉｎ，ｔ ｅ ｃ ｒｅ ａｉｎ ｂ ｔ ｅ ｈ ｉ ｘ ｒ ｓｉ ｎ ｓｅ ａｕ ｔ ｄ ｈ ａ ｉ ｆ ｓａｎ ｎ ｎ ｅ ｒｔ ｏ ｈ ｏｒ ｌｔ ｅｗｅ ｎ ｔ ｅｒｅ ｐ ｅ ｓｏ ｓｗａ ｖ ｌ ａｅ ．Ｒｅ ｕ ｔ Ａ ｉｈ ｒｉ ｔｎ ｉ ｆｓａ— ｏ ｓｌ ｓ ｈ ｇ ｅ ｅ ｓ ｙ ｏ ｔ ｉ ｎ ｔ ｎ ｎ ａ ｂ ｅ ｖ ｄ ｆ ｒＰ ＮＡ ａ ｄ Ｃ ｓ ａ ｅ ３ ｉ ｒ ｒ Ａ ｈ ｎ ｉ ｒ ｐ ｃ ｓ ｕ ｈ ｒ ａ ｏ ｓａｉｔ ａ ｉｎ ｆ ａ ｔｃ ｒｅａ ｉｎ ｉ ｇ ｗ ｓ ｏ ｓ ｒ ｅ ｏ Ｃ ｎ ａ ｐ ｓ 一 ｎ ｐ ｉ ｙ Ｃ ｔ ａ ｎ ｐ ｅ ｕ ｅ ，ｂ ｔＴ ｅ ｅ ｗ ｓ ｎ ｔ ｔ ｉ ｌｓ ｉ ｃ ｎ ｏ ｒ ｌｔ ｍａ ｓｃ ｇ ｉ ｏ ｂ ｔ ｅ ｎ ｔ ｅｒｅ ｐ ｅ ｓｏ ｅ ｅｓ ｅ ｗ ｅ ｈ ｉ ｘ ｒ ｓｉ ｎ ｌｖ ｌ．Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ Ｔ ｅ ｉ ｃ ｅ ｓ ｎ ｔ ｅ ｅ ｐ ｅ ｓ ｎ ｏ Ｃ ｎ ａ ｐ ｓ 一 ｙ ｐ ａ ｎ ｉ ｏ ｔｎ ｏｅ ｎ ｌ ｓｏ ｈ ｎ ｒ ａ ｅ ｉ ｈ ｘ ｒ ｓ ｉ Ｐ ＮＡ ａ ｄ Ｃ ｓ ａ ｅ ３ ｍａ ｌ ｙ ａ ｍｐ ｒ ｔ ｌ ｏ ｆ ａ ｒ ｉ ｈ ａｈ ｇ ｎ ｓｓｏ Ａ， ｕ ０ ｃ ｒｅａ ｉｎ ｗａ ｏ ｎ ｈ ｎ ｅ ｐ ｅ ｓ ｎ ｌｖ ｌｗ ｒ ｏ ａｅ ． ｎ ｔ ｅ ｐ ｔ ｏ ｅ ｅ ｉ ｆＣ ｂ ｔｎ ｏ ｌｔ ｓｆ ｕ ｄ ｗ ｅ ｘ ｒ ｓ ｉ ｅ ｅ ｅ ｅ ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｏ ｏ
医学细胞生物学课件 细胞核-2014
含量少，种类多
在不同组织细胞中的种类和数量均不相同 与特异的DNA序列结合
※功能*：协助DNA折叠，启动和推进DNA的复制， 调控基因转录
二、常染色质与异染色质
按间期核中染色质螺 旋化程度、功能状态 的不同，可分为：
常染色质 异染色质
核小体（nucleosome）是染色体组装的 一级结构，为直径约10nm的圆盘状颗粒。
伸展的染色质纤维
※核小体的组成*：
146bp：盘绕组蛋白八聚 体1.75圈，称核心DNA
DNA：约200bp左右
60bp：连接相邻的核小体， 称连接DNA（长度变异大）
组蛋白八聚体：一个 Ｈ1组蛋白：一个
核小体串珠的形成使DNA分子长度压缩了约7倍
一、核膜的化学组成
主要为蛋白质（65%～75%）和 脂类，可能还有少 量DNA和RNA 所含的酶类和脂类都与ER相似，但含量有差异
* 二、核膜的结构
电镜下，核膜是由内核膜、外核膜、核周间隙、 核孔复合体和核纤层等结构组成。
（一）外核膜(outer membrane)
与糙面内质网膜相连续 外表面有核糖体附着 外表面附着有细胞骨架成分，起着固定细胞核 并维持细胞核形态的作用。
-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-
病毒SV40的T-抗原在宿主细胞中的分布
具有正常NLS的T-抗原 聚集于细胞核内
NLS发生突变的T-抗原 分布于胞质中
亲核蛋白入核转运的条件
亲核蛋白 核输入受体
①核定位序列（NLS）
②NLS受体（核输入蛋白）
细胞核与染色质(共69张PPT)
细胞核与细胞质之间的界膜
3. 核孔复合体解散， 30 nm的螺线管折叠成环，沿染色体纵轴，由中央向四周伸出，构成复制环，每18个复制环呈放射状平面排列，结合在核基质上形成微带，
约106个微带沿纵轴构成染色单体。 核质环：位于核孔边缘的核质面一侧，又称内环；
H1组蛋白：在构成核小体时H1起连接作用, 形成染色体 高级结构，
（二）非组蛋白(nonhistone)：
序列特异性（相对的）DNA结合蛋白，占染色体蛋白的6070% 。
特性： 1. 具有多样性和异质性：包括参与核酸代谢和修饰的酶类、核质 蛋白、染色体骨架蛋白、基因表达调控蛋白等； 2. 识别DNA具有特异性，识别与结合靠氢键和离子键，位于DNA双
薄层网状结构的核纤层
第二节、染色质 (chromatin)
1879年，W. Flemming（德） 提出 Chromatin——染色质 ——描述细胞核中被碱性染料着色的物质， 1888年，Waldeyer （德）提出 Chromosome——染色体。
染色质:
指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组 成的线性复合结构, 是间期细胞遗传物质存在的形式。
传统观点认为染色质是组蛋白包裹在DNA外面形成的纤维状结 构。
1974，Kornberg根据染色质的酶切和电镜观察，发现核小体
是染色质组装的基本结构单位，提出染色质结构的“串珠”模型 。
核小体是染色质的基本构成单位。
（一）核小体的发现
一级结构：铺核小展体染(nu色cleo质som的e) 电镜观察，经盐溶液处理后解聚的染色质呈现10 nm串 珠状结构； 用非特异性微球菌核酸酶消化染色质，部分酶解片段分析结果: 200 bp片段为单位；
细胞生物学名词解释
名词解释题细胞：是生命体活动的基本单位。
原位杂交：确定特殊的核苷酸序列在上染色体或细胞中的位置的方法称为原位杂交脂质体：根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层的趋势而制备的人工膜。
单层脂分子铺展在水面上时，其极性端插入水相而非极性尾部面向空气界面，搅动后形成乳浊液，即形成极性端向外而非极性尾部在内部的脂分子团或形成双层脂分子的球形脂质体。
主动运输：有载体介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度由浓度低的一侧向高浓度的一侧进行跨膜转运的方式。
此种转运的方式需要消耗能量。
转移序列：存在与新生肽连中使肽连终止转移的一段信号序列，可导致蛋白质锚定在膜的脂双层中。
因终止转移信号作用而形成单次跨膜的蛋白质，那么该蛋白质在结构上只有一个终止转移信号序列，没有内部转移信号，但在N端有一个信号序列作为起始转移信号。
P34cdc2/cdc28：是有芽殖或裂殖酵母cdc2/cdc28基因表达一种分子量为34X103细胞周期依赖的蛋白激酶。
细胞全能性：细胞经分裂和分化后仍具有产生完整有机体的潜能或特性内膜系统（endomembrane system）:指在结构、功能及发生上密切相关的，由膜围绕的细胞器或细胞结构，主要包括内质网、高尔基体、溶酶体、过氧化物酶体、核膜、胞内体和分泌泡等。
Caspase家族： Caspase活性位点是半胱氨酸(Cysteine)，裂解靶蛋白位点是天冬氨酸残基后的肽键，因此称为Cysteine aspartic acic specific protease，即Caspase细胞分化：在个体发育中，有一种相同的细胞类型经细胞分裂后逐渐在形态、结构、和功能上形成稳定性差异，产生不同的细胞类群的过程称细胞分化。
或：由于基因选择性的表达各自特有的专一蛋白质而导致细胞形态、结构与功能的差异。
分泌型胞吐途径：真核细胞都从高尔基体反面管网区分泌的囊泡向质膜流动并与之融合的稳定过程。
细胞骨架：是由蛋白纤维交织而成的立体网架结构，它充满整个细胞质的空间，与外侧的细胞膜和内侧的核膜存在一定的结构联系，以保持细胞特有的形状，并与细胞运动有关。
抗核抗体(免疫荧光法)
•
•
核点型
分少核点型（1-5）和多核点型（5-20），前者靶抗 原是p80盘曲蛋白，后者靶抗原是Sp100和PML。 少核点型多见于进行性系统性硬化症、干燥综合征， 也可见于SLE和PBC等。 多核点型常与AMA并存，多见于PBC，特别是对于 AMA阴性的PBC患者更有临床意义。
• 抗SSA（Ro）抗体和抗 SSB（La）抗体：此两种 抗体是ANA中的细颗粒型。
均质型
• 与抗组蛋白，AnuA anti-dsDNA相关 • 均质型可能是SLE或药物 性狼疮等； • 抗dsDNA抗体：该抗体可 能是ANA中的均质型或是 ANA阴性。最近研究发现， 也可能是颗粒型或核仁型。
• 抗Scl-70、抗RNA聚合酶、抗 PM-Scl • 该抗体是ANA中的核仁型，其 靶抗原是拓扑异构酶Ⅰ。该抗 体是硬皮病弥漫型较为特异的 抗体，并常预示着预后不良。 此外该抗体也可出现与多发性 肌炎、IgA肾病等患者。 • 抗原纤维蛋白抗体、抗PM-SCL 抗体和抗RNA多聚酶抗体：此 三者抗体均多为ANA中的核仁 型。抗原纤维蛋白抗体的靶抗 原是U3nRNP，抗PM-SCL抗体 的靶抗原是核仁中的颗粒成分， 抗RNA多聚酶抗体是RNA多聚 酶Ⅰ和Ⅲ。此三种抗体在硬皮 病中亦较为常见，亦可见于多 发性肌炎等疾病。
• •
核膜型
• • 抗ds-DNA,抗gp210、抗核孔复合 物 又称抗核周因子抗体，靶抗原是核 孔复合物（包括gp210和核孔蛋白 p62）和板层素B受体。该抗体在 PBC中亦具有较高的阳性率，此外 抗板层素B受体抗体也可见于自身 免疫性肝炎、抗磷脂综合征及SLE 等。抗gp210抗体和核孔蛋白p62 抗体对于判断PBC预后具有重要意 义，前者阳性常提示PBC有向肝衰 竭发展的危险性。
原癌基因蛋白和增殖细胞核抗原在皮肤混合瘤中的表达及意义
航 空 航 天 医 药
２１年２ ０ ０ 月
１９ ６
原 癌 基 因 蛋 白和 增 殖 细 胞 核 抗 原 在 皮 肤 混 合 瘤 中 的 表 达 及 意 义
杨 长俊 ， 莉 莉 吴
（ 河南省信 阳市 中心医院病理科 ， 河南 信 阳 ４４ ０ ） ６ ００
摘要 目的 ： 讨原癌基 因蛋 白质和增殖 细胞 核抗原在 皮肤 混合瘤 中的表达特 点及意义 。方 法： 用免疫 探 采 组化 Ｅ ｖ ｉｎ二步法检 测 １ 皮肤 混合瘤标本 中的 ｂｌ ｎｉｏ ｓ Ｏ例 ｃ 一２和 Ｐ Ｎ 的表 达情况 。结 果：０例 患者标本 中均见 ＣＡ １ ｂｌ ｃ一２和 Ｐ Ｎ 阳性 染 色。肿 瘤 巢 内， 于 囊腔 和 导 管样 结 构 内侧 的 肿 瘤 细 胞 示 Ｐ Ｎ 阳性 ， 上 皮 样 细 胞 示 ＣＡ 衬 ＣＡ 而 ｂｌ ｃ 一２阳性 。结论 ： 皮肤混合瘤 中ｂ ｌ ２ Ｐ Ｎ ｃ 一 、 Ｃ Ａ的异 常表达似与此肿瘤的发生有关 。 关 键 词 原 癌 基 因蛋 白质 ； 殖 细胞 核 抗 原 ； 增 皮肤 混合 瘤 中图分类号 ：Ｒ ３ ． ６ ７ ２ １ ｏ 文献标识码 ：Ｂ 文章编号 ：１０ ９ ３ （０ ０ ０ ０ ６ ０ ０ ５ ３４ ２ １ ）２— １９— １
皮肤混合瘤是一种少 见 的良性 皮肤汗腺 肿瘤 ， 关于此 方面 的研究相对较少 ， 其发 生机制 尚不清楚 。本 实验用免 疫组化 Ｅ ｖ ｉｎ ｎ ｉｏ 二步法检 测 了 １ ｓ Ｏ例皮 肤混合 瘤瘤组 织 中 原癌基因蛋白（ ｃ 一 ） 增殖细胞 核抗原 （ Ｃ Ａ） ｂｌ ２ 和 Ｐ Ｎ 的表达 特征 ， 以探讨二者在皮肤混合瘤发生中的作用 。
～
７５ ．
４ 杨炯 ， 吴小 军， 续红 ， ．肺癌组 织 中 ｂｌ 丁 等 ｃ 一２的表 达 与细胞凋 亡和 增殖 的 关 系［ ］ Ｊ ．实用癌 症 杂志 ，００ ２０ ，
PTEN蛋白及增殖细胞核抗原在原发性小肠腺癌中的表达及临床意义
１ ６ （ ５ ／ ３ ２ ￣ 、 ５ （ ２ ／ ４ ０ ￣ 。２ 组 比较 差 异 均 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ
发生 、 发 展 及 临床 预 后 性 指 标 的 关 系 ， 为 判 断 预 后 提 供 参 考
指标 。
１ 材 料 和 方 法
＜ｏ ． ０ ５ ） 。低 分 化 组 （ ６ ７ ） 与 中分 化 组 （ ８ ６ ） 及 高 分 化 组
达（ ８ ０ ） 低 于 淋 巴结 无 转 移 组 （ ９ ２ ） ， 但 差 异 无 统 计 学 意 义（ Ｐ ＞０ ． ０ ５ ） 。表 明 Ｐ Ｔ Ｅ Ｎ 基 因 的缺 失 导 致 Ｐ ＴＥ Ｎ蛋白 降低 ， 致 使 小 肠 腺 癌 细 胞 的生 长 、 分 裂不受控制 ， 脱 离 了 正 常生 长调 控 状 态 ， 癌 细 胞 呈 无 节 制 的 生 长 。小 肠 腺 癌 分 化 程 度 越低 ， Ｐ ＴＥ Ｎ 蛋 白表 达 越 低 ， 肿 瘤 的 恶 性 度 越 高 。Ｐ Ｃ — ＮＡ表 达 阳性 率 为 ６ ６ （ ２ １ ／ ３ ２ ） ， 癌 旁 组 织 及 正 常 小 肠 组 织 分别为 ６ ％（ ２ ／ ３ ２ ） 、 ３ （ １ ／ ４ ０ ） ， ２组 比较 差 异 均 有 统 计 学 意
ChIP常见问题汇总
ChIP常见问题汇总1． ChIP是什么？答：染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP）是研究体蛋白质与DNA相互作用的一种技术。
它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体蛋白因子与基因组DNA结合的状况。
2． ChIP有哪些应用？答：近年来由于该技术不断的发展和完善，其应用围已经从研究目的蛋白与已知靶序列间的相互作用，发展到研究目的蛋白与整个基因组的未知序列的相互作用；从研究一个目的蛋白与DNA的相互作用，发展到研究两个蛋白与DNA共同结合的相互作用；从研究启动子区域的组蛋白的修饰，发展到研究结合在DNA序列上的蛋白复合物。
3． ChIP技术的原理？答：生理状态下把细胞的DNA与蛋白质交联在一起，通过超声或酶处理将染色质切为小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应，将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。
染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定，染色质断裂，染色质免疫沉淀，交联反应的逆转，DNA 的纯化，以及DNA的鉴定。
因为ChIP实验涉及的步骤多，结果的重复性较低，所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照，而且对结果的分析也需要有一定的经验。
4．做ChIP试验，必须做甲醛固定么？答：不一定，视样品及试验方案而定。
做甲醛固定的为X-ChIP，而不需要固定的为N-ChIP。
甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质，蛋白质-DNA，蛋白质-RNA交联，形成生物复合体，防止细胞组分的重新分布。
甲醛的交联反应是完全可逆的，便于在后续步骤中对DNA和蛋白质进行分析。
甲醛的交联反应可被加入的甘氨酸终止。
5．为什么必须将DNA切碎至少于1000bp大小（大约3个核小体~400-500bp）?答：为确保ChIP实验有良好精度。
若您的平均片段长度大于1000bp，您将会分离获得包含您目标序列的DNA，但所要研究的蛋白会离您目标序列有700个核苷酸的距离。
6．为什么使用鲑鱼精子DNA来封闭琼脂糖珠子？为什么我的样品中鲑鱼精子DNA不会发生PCR反应？答：鲑鱼精子用于降低降低染色质DNA与琼脂糖珠子的非特异性结合。
抗核抗体谱(ANA意义)(活动za)
().抗抗体:以患者名字命名抗原是族小分子细胞核核糖核蛋白（），具有抗原性的蛋白的分子量是、、。
抗体和是同一分子复合物中的不同抗原位点，故抗抗体很少单独出现，它常于抗体相伴，约％抗抗体与抗抗体中的有交叉反应。
抗抗体阳性均伴有抗抗体，而抗抗体可以单独存在。
①.在中阳性率为。
虽然敏感性较低，但特异性较高。
在全部抗阳性的病例中，为。
因此，抗抗体为的标记抗体。
②.另外，有人还发现病人由活动期转为缓解期后，狼疮细胞可转阴，、抗抗体效价可降低，但抗体依然存在。
因此，对早期、不典型的或经治疗缓解后的回顾性诊断有一定意义().抗抗体（）：临床上应用较多为抗体，由和种不同的蛋白质组成。
具有抗原性的分子量有、和。
因为以抗核内的核糖核蛋白得名，所作用的抗原是小分子细胞核核糖核蛋白（），所以又称抗抗体。
①.混合性结缔组织病()：几乎均为阳性，且滴度很高，对确立的诊断很有帮助。
高滴度的抗，尤其在没有其他自身抗体存在的情况下，一般认为是混合性结缔组织病（）的诊断标志。
的抗阳性率>。
此种抗体阳性的患者，常有双手肿胀、雷诺现象、肌炎和指（趾）端硬化。
②.系统性红斑狼疮（）：抗抗体在中的阳性率为左右，仅产生抗抗体的病人，常常抗抗体阴性，肾脏受累较少，一般来说皮质激素类药物有很好的治疗效果，预后梦想，定期监测抗对疗效观察及预后判断有实际意义。
抗抗体如和抗抗体、抗抗体同时存在，则发生狼疮肾炎的可能性较大。
③.其他结缔组织病：抗抗体在其他结缔组织病阳性率较低且滴度低。
（）抗抗体：又称为抗抗体或抗干燥综合征抗原抗体／是小分子细胞浆核糖核蛋白（），由一个分子(, , , , )和两种不同的蛋白形成的复合物。
抗原是含有－的蛋白质，它更多的存在于胞浆中，其分子量有及.①.抗抗体主要见于原发性干燥综合征，阳性率高达％～％。
此外，抗抗体常与亚急性皮肤性红斑狼疮、抗核抗体阴性狼疮、新生儿狼疮等相关（抗体可通过胎盘进入胎儿引起新生儿儿狼疮综合症）。
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