大鼠二胺氧化酶DAO试剂盒使用方法
二胺氧化酶检测原理
二胺氧化酶检测原理组胺是一种重要的生物活性物质，在机体内具有多种生理功能。
然而，过多的组胺引起的异常反应会影响人体的健康，如过敏反应、哮喘、胃肠道疾病等。
组胺主要由组织胺、食物摄入和菌群产生三个途径供应给机体。
组胺的代谢主要通过两条途径进行：一是经过组胺-N-甲基转移酶（HMT）的催化作用，形成N-甲基组胺，再经过二胺氧化酶（DAO）的氧化作用，生成N-甲酸组胺；二是通过脯氨酸脱羧酶（PAD）的催化作用，脱去L-苯丙氨酸的羧基产生组胺。
色谱法是测定二胺氧化酶活性的常用方法之一、该方法利用色谱柱将活性的二胺氧化酶与待测物质（如组胺）进行反应，然后通过检测柱前和柱后的物质的浓度变化来计算酶活性。
这种方法的优点是灵敏度高，但操作复杂，需要专业的仪器设备。
酶联免疫吸附法（ELISA）是一种常用的检测酶浓度的方法。
该方法利用特异性的抗体与待测酶结合，并通过化学荧光或酶促反应来测定反应活性。
酶联免疫吸附法具有灵敏度高、操作简便、结果准确等优点，被广泛应用于二胺氧化酶检测。
免疫荧光法是一种在组织或细胞水平上检测酶的方法。
该方法利用特异性的抗体与待测酶结合，并标记荧光染料，通过荧光显微镜观察染色物的分布和强度来评估酶的存在和浓度。
二胺氧化酶检测在临床诊断中具有重要意义。
二胺氧化酶的缺乏或活性降低与组胺的过量积聚有关，可引起组胺中毒症状，如面部潮红、喉头水肿、头痛、低血压等。
因此，通过检测二胺氧化酶的活性或浓度可以评估二胺代谢的功能，从而判断患者是否存在二胺代谢异常的情况。
总之，二胺氧化酶检测通过测定血液或尿液中二胺氧化酶的活性或浓度，评估二胺代谢的功能。
常用的检测方法有色谱法、酶联免疫吸附法和免疫荧光法等。
该检测方法在临床诊断中具有重要意义，并可用于评估患者是否存在二胺代谢异常。
氧化酶试剂试纸使用介绍
氧化酶试剂，氧化酶试纸产品使用参见华越洋随带产品包装随带纸质说明书氧化酶试剂，氧化酶试纸产品介绍:英文名称： Oxidase reagent产品用途：用于O157:H7菌氧化酶试验，以及其他病理类菌属检测鉴别。
氧化酶试剂，氧化酶试纸使用方法：取一条滤纸，沾取试验菌的菌落少许。
然后加一滴1%的四甲基对苯二胺试剂，仅使滤纸湿润，不可过湿，在10s内出现红色者为阳性，10—60s 呈现红色者为延迟反应，60s以上出现红色者，按阴性处理，铁可催化试剂，不能使用，可用白金丝或玻璃棒取菌。
保存：2-8℃避光保存氧化酶试剂，氧化酶试纸氧化酶（oxidase）过氧化物酶体中的主要酶类，氧化酶约占过氧化物酶体酶总量的一半，包括：尿酸氧化酶、D-氨基酸氧化酶、L-氨基酸氧化酶和L-α-羟基酸氧化酶等。
各种氧化酶作用于不同的底物，其共同特征是氧化底物的同时，将氧还原成过氧化氢：RH2 + O2 →R + H2O2实验试剂：1%盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配制，干冰箱内避光保存。
1%α-萘酚－乙醇溶液。
试验方法：取白色洁净滤纸沾取菌落。
加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴，阳性者呈现粉红色，并逐渐加深；再加α-萘酚溶液一滴，阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色。
阴性于两分钟内不变色。
以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同。
氧化酶试验(oxidasetest)氧化酶又名细胞色素氧化酶、细胞色素氧化酶C或呼吸酶。
试验用于检测细菌/是否有该酶存在。
原理是氧化酶在有分子氧或细胞色素C存在时，可氧化四甲基对苯撑二胺出现紫色反应。
假单胞菌属、气单胞菌属等阳性，肠杆菌科阴性，可区别。
血浆凝固酶：由金黄色葡萄球菌致病性菌株产生。
能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固。
在感染部位由于凝固酶的产生，使体液中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，沉积于细菌表面，可阻碍吞噬细胞对细菌的吞噬和杀灭作用。
凝固酶试验(coagulase test)原理：致病性葡萄球菌→凝固酶→血浆中纤维蛋白原(液态) 纤维蛋白(固态) →血浆凝固方法：①玻片法：检测结合凝固酶②试管法：检测游离凝固酶应用：作为鉴别葡萄球菌致病性的重要指标。
血清二胺氧化酶含量与大鼠急性脊髓损伤后肠道运动功能的关系
血清二胺氧化酶含量与大鼠急性脊髓损伤后肠道运动功能的关系杨森;杨拯;鄢靖欣;徐洲;徐文坚;田海燕;代小琳;杨平【摘要】目的测定急性脊髓损伤大鼠血清中二胺氧化酶(DAO)的含量,同时观察肠道运动功能的变化和肠黏膜屏障损伤的程度.方法 45只Sprague-Dawley大鼠随机分为打击组(A组)、假手术组(B组)和对照组(C组),每组15只.采取改良Allen打击法(10 g×25 mm)损伤大鼠T10脊髓节段.术后1 d、3 d、7 d分别对各组大鼠进行后肢功能BBB评分,测定大鼠回肠肌电慢波及平滑肌收缩,并做回肠HE染色,ELISA试剂盒测定血清DAO含量.结果脊髓损伤后1 d、3 d和7 d,A组BBB评分显著低于C组(P<0.001),B组与C组无显著性差异(P>0.05).脊髓损伤后1 d、3 d,A组慢波频率和振幅低于C组(P<0.05),收缩频率和振幅低于C组(P<0.05),B组与C组无显著性差异(P>0.05);脊髓损伤后7 d,三组肌电慢波频率和振幅、收缩的频率和振幅均无显著性差异(P>0.05).A组回肠黏膜水肿、倒伏,炎性细胞浸润,黏膜下间隙增大.A组肠黏膜损伤Chiu评分高于B组和C组(P<0.05).脊髓损伤后1 d、3 d,A组大鼠血清DAO含量高于C组(P<0.05),B组与C组无显著性差异(P>0.05);脊髓损伤后7 d,三组间血清DAO含量均无显著性差异(P>0.05).结论血清DAO含量可以反映大鼠急性脊髓损伤后肠道的运动功能和黏膜损伤程度.%Objective To measure the level of diamine oxidase (DAO), and observe the intestinal motor and mucosal barrier injury after acute spinal cord injury (SCI) in rats. Methods A total of 45 Sprague-Dawley rats were randomly divided into SCI group (group A, n=15), sham group (group B,n=15) and control group (group C, n=15). SCI model was established with Allen's strike mode (10 g × 25 mm) by striking T10 spinal segment in rats.One day, three days and seven days after SCI, hind limb motor function was assessed with Basso-Beat-tie-Bresnahan (BBB) Scale in each group, the myoelectric slow wave and ileum smooth muscle contractility were measured in rats, ileum tis-sues were tested with HE staining, and the DAO content of serum was tested with ELISA kit. Results One day, three days and seven days af-ter SCI, the BBB score was significantly lower in group A than in groups B and C (P<0.001). One day, three days after SCI, the frequency and amplitude of both slow wave and contractility were lower in group A than in groups B and C (P<0.05);seven days after SCI, there was no significant difference among three groups (P>0.05). Group A showed ileal mucosal edema, lodging, inflammatory cell infiltration, and submucosal gap increase. The Chiu's score of intestinal mucosal injury was higher in group A than in groups B and C (P<0.05), as well as the serum DAO content one day and three days after SCI (P<0.05), and no significant difference was found in the serum DAO content among three groups seven days after SCI (P>0.05). Conclusion Serum DAO content may respond to the intestinal motor function and mu-cosal injury after acute SCI in rats.【期刊名称】《中国康复理论与实践》【年(卷),期】2017(023)006【总页数】7页(P634-640)【关键词】脊髓损伤;二胺氧化酶;肠道运动功能;黏膜损伤;大鼠【作者】杨森;杨拯;鄢靖欣;徐洲;徐文坚;田海燕;代小琳;杨平【作者单位】成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500【正文语种】中文【中图分类】R651.2[本文著录格式]杨森，杨拯，鄢靖欣，等.血清二胺氧化酶含量与大鼠急性脊髓损伤后肠道运动功能的关系[J].中国康复理论与实践,2017,23(6):634-640.CITED AS:Yang S,Yang Z,Yan JX,et al.Relationship between serum diamine oxidase content and intestinal motility after acute spinal cordinjury[J].Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian,2017,23(6):634-640.临床上，脊髓损伤(spinal cord injury)后患者常出现胃肠功能障碍、大小便失禁、运动和感觉功能障碍、性功能障碍[1-3]。
☆人二胺氧化酶（DAO）酶联免疫分析
人二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：E0656h预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中二胺氧化酶(DAO)含量。
概述二胺氧化酶（DAO）是一种催化二胺（组胺、腐胺和尸胺）氧化的酶，存在于哺乳类动物的黏膜或绒毛上层，其中大部分存在于小肠黏膜绒毛，极少部分存在于子宫内膜绒毛中。
它可将腐胺氧化成氨基丁醛，并进一步环化成砒咯啉，是具有高度活性的细胞内酶，其活性与绒毛高度和黏膜细胞内的核酸和蛋白质合成密切相关，是反映小肠黏膜结构与功能的理想指标。
DAO在分裂细胞中高度表达，并已观察到与一些人类肿瘤有关。
CHASSANDE报道人DAO氨基酸序列由751氨基酸残基组成，分别由其基因序列的五个外显子编码，第一外显子很短，不编码序列，其余四个外显子分别编码氨基酸序列1-523，524-618，619-663和664-751。
通过与已知序列比较，揭示其活性位点由第二外显子编码，而其氨基吡咪结合位点在蛋白质的C-末端。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中DAO水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入DAO抗原、生物素化的抗人DAO抗体、HRP 标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的DAO呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为10 U/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释10 U/ml，5 U/ml ，2.5 U/ml，1.25 U/ml，0.625 U/ml，0.312 U/ml，0.156 U/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 U/ml，临用前15分钟内配制。
二胺氧化酶的临床应用
二胺氧化酶的临床应用汤菲;徐海涛;贾克然【期刊名称】《临床误诊误治》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】4页(P112-115)【关键词】二胺氧化酶;生物学特性;文献综述【作者】汤菲;徐海涛;贾克然【作者单位】050082 石家庄，解放军白求恩国际和平医院检验实验科;050082 石家庄，解放军白求恩国际和平医院干部病房;050082 石家庄，解放军白求恩国际和平医院检验实验科【正文语种】中文【中图分类】R345.44二胺氧化酶(diamine oxidase，DAO)是一种能催化组胺、腐胺和尸胺氧化的酶，能调控组胺和腐胺在组织中的循环水平，可将腐胺氧化成氨基丁醛，并进一步环化成吡咯啉。
近年来，随着对DAO 研究的不断深入，DAO 在活性测定技术、免疫组织化学和分子生物学等领域的应用有了一定进步。
DAO 是具有高度活性的细胞内酶，与小肠黏膜内的核酸和蛋白质合成密切相关，是反映肠道黏膜结构和功能情况的理想指标。
DAO 在分裂细胞中高度表达，和人体内一些肿瘤的发生、发展密切相关。
有研究还提示其具有营养神经的作用，认为其分子上具有不依赖酶活性的神经营养配基［1］。
因此，DAO 在肿瘤诊断、胃肠道疾病的诊断和治疗及神经系统疾病的预防上具有潜在的应用价值。
1 DAO 的结构及分布DAO 是一种分子量为84000 的蛋白质，属于含铜胺氧化酶［2］。
人DAO 基因序列显示，有2.4 kb遗传信息的RNA 从两个相近起源的启动子转录，经排序和修改后形成初始的cDNA 序列。
DAO 基因由5 个外显子组成，所编码的DAO 分子由751 个氨基酸残基组成，其中第一个外显子很短，不编码氨基酸序列，其余4 个外显子分别编码氨基酸序列1-523，524-618，619-663 和664-751［3］。
DAO 分子活性位置的重要元件是酪氨酸，酪氨酸可经转化变成部分醌。
人DAO 序列中含有活性位点的酪氨酸键区域是由第二个外显子编码的，而其氨基吡咪结合位点在蛋白质的C-末端。
SD大鼠二胺氧化酶活力测定方法的研究
SD大鼠二胺氧化酶活力测定方法的研究周冬;朱枝祥;陈丁丁【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2009(003)009【摘要】目的建立SD大鼠二胺氧化酶活力测定方法.方法采用分光光度法,酶反应体系包括底物戊二胺,催化酶二胺氧化酶和辣根过氧化物酶,邻联二茴香胺和磷酸盐缓冲盐溶液,反应体系pH为7.2,反应温度为37℃,检测波长460nm.结果二胺氧化酶在2.5～40 mg/ml浓度范围内均呈良好的线性关系,r = 0.9983(n=5).血清二胺氧化酶平均回收率为97.74%,RSD为1.51%;小肠二胺氧化酶的平均回收率为97.49%,RSD为1.01%.稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.9982.结论本方法简便、灵敏、稳定、可靠,作为特征酶可应用于肠缺血再灌注MODS 疾病模型的研究.【总页数】3页(P9-11)【作者】周冬;朱枝祥;陈丁丁【作者单位】210009,南京,中国药科大学药理研究室;210009,南京,中国药科大学药理研究室;210009,南京,中国药科大学药理研究室【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.花生营养油对中老年SD大鼠大脑皮层单胺氧化酶活性及肝脏细胞的影响研究[J], 赵康宇; 曹健; 田华; 张立伟; 郑竟成; 罗质; 何东平2.PHGPx底物合成及其活力测定方法的研究──Ⅰ．PHGPx活力测定方法的建立[J], 哈鹏程;夏弈明3.酚氧化酶活力测定方法中关于测定时间的研究 [J], 王建国;陆宏达4.益肝降脂方对酒精性脂肪肝SD大鼠D-乳酸和二胺氧化酶的预防效应分析 [J], 赵远红;尹纪红;李正;杨佩颖;李全征;杨彩霞;侯珊珊;张小瑞;贾英杰5.血液胆碱酯酶活力测定方法的进一步研究Ⅰ．红细胞／全血胆碱酯酶活力比例及红细胞计数校正酶活力值的研究 [J], 孙东红;赵丽红;周宏东;薛寿征因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠超氧化物歧化酶SODELISA试剂盒使用说明书
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中SOD含量。
实验原理小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒使用说明书超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内一种重要的超氧阴离子自由基清除剂，分为 Cu,Zn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD 3类，在生物界分布较广，其主要作用是能专一地清除生物氧化中产生的超氧阴离子自由基(O2-.)，有助于减少和阻止脂质的过氧化反应、延缓机体衰老。
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中SOD水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入SOD抗原、生物素化的抗大鼠SOD抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的SOD呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成1. 酶联板：一块（96孔）2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，其浓度为500U/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成500 U/ml，250 U/mL ，125 U/mL，62 U/mL，31 U/mL，15.2 U/mL，7.6 U/mL其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 U/mL，临用前15分钟内配制。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
大鼠丙二醛MDA试剂盒使用建议
大鼠丙二醛（MDA）试剂盒使用建议检测范围：48T0.25nmol/L - 8nmol/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中丙二醛（MDA）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中大鼠丙二醛（MDA）水平。
用纯化的大鼠丙二醛（MDA）抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入丙二醛（MDA），再与HRP标记的丙二醛（MDA）抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的丙二醛（MDA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠丙二醛（MDA）浓度。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
二胺氧化酶（DAO）活性检测试剂盒说明书
二胺氧化酶（DAO ）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1285规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体70 mL×1瓶4℃保存试剂一液体0.25 mL×1支4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体2 mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：液体置于试剂瓶内玻璃瓶中。
临用前加入4mL 蒸馏水溶解，4℃可保存1个月。
产品说明：DAO (EC1.4.3.6)广泛存在于动物（肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等）、植物和微生物中。
催化多胺氧化为醛，其活性与核酸和蛋白合成密切相关，能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
DAO 催化尸胺产生醛和过氧化氢，外源添加过量的辣根过氧化物酶，催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质，在500nm 处有特征吸收峰，通过测定该波长吸光度增加速率，计算DAO 活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、蒸馏水、无水乙醇、水浴锅。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.组织：按照组织质量（g ）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g ，4℃离心20min ，取上清，置冰上待测。
2.细菌、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL ）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w ，超声3秒，间隔7秒，总时间3min ）；然后10000g ，4℃，离心10min ，取上清置于冰上待测。
二胺氧化酶 乳酸 细菌内毒素联检试剂盒(酶法)产品技术要求zhongshengjinyu
二胺氧化酶/乳酸/细菌内毒素联检试剂盒（酶法）适用范围：该试剂盒与本公司的JY-DLT肠道屏障功能生化指标分析系统配套使用，用于体外定量检测人全血或血清中的D-乳酸浓度，二胺氧化酶和细菌内毒素的活性。
1.1 产品型号：JY —Po—Color DLT SetJY：“金域”汉语拼音首字母Po：英文“Peroxidase”（过氧化物酶指示反应）缩写Color：“颜色”的英文“Color”DLT Set：产品英文名称缩写，"D"为“Diamine oxidase”（二胺氧化酶）缩写，“L”为“D Lactic acid”(D-乳酸)缩写，“T”为“Bacterial Endotoxin”（细菌内毒素）缩写。
1.2 产品规格1.2.1 包装规格：10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒、100人份/盒。
1.2.2主要组成成分产品主要组成成分见表1。
表1：产品主要组成成分注：反应装置主要由基板和试剂条组成。
基板上设有三个反应孔，分别为二胺氧化酶（DAO）反应孔、D乳酸（DLC）反应孔、细菌内毒素（BT）反应孔。
2.1 外观2.1.1反应装置为塑料制品，结构应完整、表面光洁、无缺失、无折损、无脱落；2.1.2标签标示应清晰；2.1.3单包装不得有泄露、内装物外溢等现象。
2.2 空白限二胺氧化酶的空白限不高于4U/L；D-乳酸的空白限不高于1mg/L；细菌内毒素的空白限不高于8U/L。
2.3线性范围试剂盒对二胺氧化酶活性、D-乳酸浓度与细菌内毒素活性检测范围内的样品进行测试，线性相关系数r及绝对、相对偏差符合以下标准：表2线性范围及偏差要求2.4 准确度2.4.1 对试剂盒的二胺氧化酶、D-乳酸、细菌内毒素项进行回收试验的测定，回收率应该在95%~105%范围内。
2.4.2 用正确度质控品对试剂盒进行测试，︱相对偏差︱≤10%。
2.5重复性变异系数CV≤10%。
2.6批间差︱相对极差︱≤10%。
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大鼠二胺氧化酶(DAO)试剂盒使用方法
检测范围：96T
25 IU/L -800 IU/L
使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中二胺氧化酶(DAO)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠二胺氧化酶(DAO)水平。
用纯化的大鼠二胺氧化酶(DAO)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大鼠二胺氧化酶(DAO)，再与HRP标记的二胺氧化酶(DAO)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠二胺氧化酶(DAO)浓度。
试剂盒组成
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好
控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。