细胞治疗用无血清培养基国内外现状
CHO细胞无血清培养基技术手册
(1)无血清培养基，为一般意义上无血清培养基，用各类可替代血清功能的生物材料配制细胞培养基，如牛血清白蛋白(BSA)、转铁蛋白、胰岛素等生物大分子物质，以及从血清中提取的去除蛋白质的混合脂类以及水解蛋白等。其特点是培养基中的蛋白含量较高,添加物质的化学成分不明确，其中含有大量的动物来源蛋白。
5 CHO细胞无血清无动物组分培养基（SAF-CHO-G-004）
其实个性化培养基并不新鲜，在国外生物制药企业普遍采用个性化培养基，世界著名的生物制药公司（如Amgen、Genetech）往往和培养基企业合作，通过细胞培养基的客户定制方式，研制最适合自身细胞特点的个性化细胞培养基应用于生产实践，用于提高细胞产率和生产效率。另有数据显示，国际上的细胞培养基生产企业，个性化、定制培养基占其培养基业务的90%以上，目录培养基不足10%。
ATCC提供的CHO/dhfr-细胞照片
2 CHO细胞表达系统的优势与特点
由于哺乳动物细胞结构、功能和基因表达调控的复杂性，外源基因在哺乳动物细胞中的表达与在原核生物中的表达存在较大差异，因而外源基因在哺乳动物细胞中高效表达所需的元件也不同于在原核生物细胞中的表达所需的元件。外源基因在哺乳动物细胞中的表达包括基因的转录、mRNA翻译及翻译后蛋白质的加工等过程，如蛋白质的糖基化、磷酸化、寡聚体的形成以及蛋白质分子内或分子间二硫键的形成等比较复杂，要表达具有生物学功能的蛋白质如膜蛋白、抗体和具有特异性催化功能的酶需要在哺乳动物细胞中进行。
其它
无水葡萄糖、HEPES、丙酮酸钠、亚油酸、硫辛酸、胰岛素、亚硒酸钠、植物蛋白等
淋巴细胞无血清培养基（无酚红）产品说明书
产品说明书淋巴细胞无血清培养基（无酚红）产品型号：HIPP-T009描述DrivingM®HIPP-T009淋巴细胞无血清培养基是上海倍谙基生物科技有限公司针对血液细胞的生长和分化的特点自主设计开发的个性化无血清基础培养基。
该培养基包含碳水化合物、氨基酸、维生素、金属离子、药用级别人血白蛋白等营养组分，不含酚红和抗生素。
本产品未加入细胞生长和扩增所需的细胞因子。
适用于下列人血液细胞的体外无血清培养： 外周血单个核细胞（PBMCs）T细胞NK细胞CAR-TCIKCAR-NK造血干细胞（CD34+）多种细胞系（NK-92、NK-92MI、K562和Jurkat）配方DrivingM®HIPP-T009淋巴细胞无血清培养基配方知识产权为上海倍谙基生物科技有限公司所有，如需获悉额外信息，请与公司技术支持部门联系。
声明请参照DrivingM®HIPP-T009淋巴细胞无血清培养基产品信息及使用说明使用本产品。
本产品在GMP条件下生产。
保存及有效期密封保存于2-8℃的避光环境中，避免冷冻。
上海倍谙基生物科技有限公司未开封保存于上述条件下，培养基的有效期为12个月。
开封后建议1个月内使用。
产品失效本产品为淡黄色的透明液体，密封保质期为12个月。
本品包装为经过0.22μm滤膜除菌后的无菌产品，若出现以下情况可认为本产品失效，请及时与上海倍谙基生物科技有限公司的技术支持部门/售后服务部门联系。
液体内出现肉眼可见的颗粒物或絮状物。
液体浑浊。
包装破损。
液体渗出。
使用说明使用该培养基培养描述部分所述细胞时，细胞培养过程中均无需添加血清、血浆或血清替代物，可根据细胞类型灵活选择恰当的细胞因子添加策略和培养工艺。
上海倍谙基生物科技有限公司。
CHO细胞无血清培养基的筛选与优化
CHO细胞无血清培养基的筛选与优化CHO细胞（Chinese Hamster Ovary cell）是一种常用于生物制药工业中的哺乳动物细胞系，用于产生重组蛋白质和抗体。
通过无血清培养基的筛选和优化，可以提高CHO细胞的生长和表达效率，降低生产成本。
1.细胞生长和细胞密度：无血清培养基应该能够支持CHO细胞的生长和扩增，达到较高的细胞密度。
2.细胞存活率和稳定性：无血清培养基应该能够提供足够的养分和适宜的环境条件，使CHO细胞能够保持良好的生存状态和稳定的遗传特性。
3.蛋白质表达水平：无血清培养基应该能够提高CHO细胞的蛋白质表达效率，使其能够产生高水平的重组蛋白质或抗体。
下面是一种无血清培养基的筛选和优化策略：1. 筛选适宜的基础培养基：根据CHO细胞的特性和需求，选择适合细胞生长和表达的基础培养基，如DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）或CDM（Chromium Depleted Medium）等。
这些基础培养基都是经过优化和完善的，可以满足CHO细胞的基本需求。
2. 添加适宜的生长因子和细胞因子：在基础培养基中添加不同的生长因子和细胞因子，如FGF（Fibroblast Growth Factor）、EGF （Epidermal Growth Factor）等，可以促进CHO细胞的生长和扩增。
根据实验室的需求，可以逐个添加或同时添加这些因子，优化细胞生长和表达的效果。
3.优化细胞培养条件：CHO细胞的培养条件包括温度、CO2浓度、培养皿类型等。
根据CHO细胞的特性和需求，优化这些培养条件，使其适应无血清培养基的环境。
一般来说，CHO细胞的培养温度为37℃，CO2浓度为5%，培养皿选择TC增添剂的培养皿。
4.评估培养基的细胞生长和表达效果：通过细胞计数仪、流式细胞仪等实验手段，评估不同改良培养基对CHO细胞的生长和表达的影响。
比较不同培养基中CHO细胞的生长速率、细胞密度和蛋白质表达水平，选择表现较好的培养基进行优化。
无血清培养基及应用
无血清培养基及应用
无血清培养基及应用
无血清培养基专门用来在无血清条件下培养特殊类型的细胞或进
行特殊应用。
无血清培养基的使用展现了一种重要的培养方法：允许细胞培养
在一套限定条件下进行，尽可能避免受到干扰参数的影响。
使用无血清培养的优点：
? 增加确定性。
? 性能更加一致。
? 容易进行纯化和后期处理。
? 对细胞功能进行精确评估。
? 增强生长和/或产量。
? 生理反应性的更好对照。
? 加强细胞内介质的检测。
某些应用可能需要添加生长因子和/或细胞因子。
术语表:
无血清培养基—无血清培养基无需添加血清，但可能含有离散
的蛋白或大块蛋白片段。
无蛋白培养基—无蛋白培养基不含有蛋白质，但可能含有植物或酵母的水解产物。
很多无蛋白培养基都不含动物来源成分。
符合化学定义的培养基—符合化学定义的培养基不含蛋白质、
水解产物或其它未知成分。
这些培养基不含动物来源成分，并
且所有成分都有已知的化学结构。
不含动物来源物的产品—不含动物来源物的产品不含有直接取
自高等真核生物(如哺乳动物(包括人)、鱼、鸟、昆虫等)的动物
组织、细胞或体液的材料。
“动物来源”一词不适用于低等真
核生物，如高等植物、真菌、原生动物和藻类，也不适于原核
生物，如细菌或蓝绿藻。
无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立
无血清培养基培养 Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立摘要：文章主要是分析了Vero 细胞无血清培养基的组成，在此基础上讲解了Vero细胞无血清细胞培养基的发展，望可以为有关人员提供到一定的参考和帮助。
关键字：Vero细胞；无血清培养基；研究进展1、前言当前现代细胞工程的不断发展，无血清培养基培养Vero细胞作为其中的基质生产疫苗已被广泛的应用，市场上的商品化Vero细胞无血清培养基主要是使用到无血清培养基以及无血清无动物源成分的培养基，其可以有效维持到细胞在体外的生长以及增值，但其中还是存在了一定的污染可能，这会在一定程度上使得疫苗存在一定风险。
2、组成2.1、基础培养基葡萄糖是血液生长、增殖和产物表达过程中的重要能量来源。
通过对血清培养Vero细胞中枢代谢的研究，发现葡萄糖主要参与葡萄糖代谢，而谷氨酰胺是三羧酸循环中最重要的碳源。
用天门冬酰胺和丙酮酸钠代替谷氨酰胺作为碳源，才可以有效的减少到了次级代谢的产物（如乳酸和氨）对细胞的伤害，且谷氨酰胺易被降解，在新形成的培养基中加入等量的谷氨酰胺。
2.2、主要添加因子在Vero无细胞培养的早期研究中，主要是加入到了一些牛（人）血清白蛋白和转铁蛋白，然后有效的促进到了细胞的生长。
然而，血清白蛋白不仅能调节渗透压，能够有效的保护到了细胞免受受到机械的损伤，而且能与维生素、脂类激素、金属离子和生长因子结合，使这些物质在血清培养中的活性转移到血清培养中，具有结合毒素和还原蛋白酶的作用。
通过新的研究发现Vero细胞无血清培养物现在用于用植物蛋白质水解酸盐可以替换成了血清白蛋白。
该蛋白质是复杂的，其中主要是包括了氨基酸，寡肽，橄榄果多酚和纤维。
目前，最常用的植物水解产物是大豆植物水解产物，小麦植物水解产物和水稻水解产物。
这些植物蛋白质使疫苗更加安全。
转铁素是无细胞培养物中最重要的额外组分，这可能导致细胞生长抑制。
在没有动物来源成分的Vero细胞培养基研究中，认为铁柠檬酸铁和维生素C的混合物可以取代转铁蛋白。
CHO细胞无血清无动物组分细胞培养基
CHO细胞无血清无动物组分细胞培养基
SAF-CHO-G-004（代码SAF108）
北京清大天一生物技术有限公司
CHO细胞是被广泛应用于重组蛋白、抗体等表达的哺乳动物细胞系。
CHO 细胞的无血清培养有利于产品的下游纯化、减少血清的外源病毒污染等潜在风险。
CHO细胞既可以贴壁培养，也可悬浮培养，经过适当地驯化就能实现无血清悬浮培养。
CHO细胞无血清无动物组分细胞培养基经专门设计，可广泛应用于CHO细胞的无血清悬浮培养及抗体、重组蛋白的生产过程。
CHO细胞无血清无动物组分细胞培养基SAF-CHO-G-004（代码SAF108）能支持多种CHO细胞的生长、维持。
图1表示了经驯化的CHO细胞的生长曲线：经过3－4天的培养，细胞密度从刚接种的1.5×105cells/ml，提高到细胞2.1×106cells/ml，细胞活率超过95％，细胞扩增了十几倍。
图2是培养了2天后CHO细胞的显微照片，细胞形态饱满、健康。
图1、CHO细胞生长曲线
图2、接种后2天的CHO细胞（200X）
CHO细胞无血清无动物组分培养基
SAF-CHO-G-004（代码SAF108）的配制方法
1.将一袋粉末培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗
下，并入容器，加注射用水（水温20℃-30℃）到950ml，搅拌溶解。
2.加入1.9的碳酸氢钠。
3.搅拌溶解，补加注射用水至1000ml。
4.如果必要，用1mol / L 氢氧化钠溶液或1mol / L盐酸溶液调pH至所需值。
5.用0.2μm滤膜正压过滤除菌。
6.溶液应在2℃-8℃下避光保存。
CHO细胞无血清无蛋白化学培养基产品简介
CHO细胞无血清无蛋白化学培养基产品简介
一、产品简介
CHO 细胞无血清无蛋白化学培养基是剑桥生物自主开发的细胞培养产品系列之一，它是专门针对CHO 细胞系打造，具无血清、无蛋白、无动物源性成分和化学组成明确的特点，适用于各种细胞培养方式包括培养瓶、细胞培养转瓶、生物发酵罐等，可广泛用于实验室研究和工业化的规模生产。
二、产品使用方法
液体产品：培养基开瓶后即可使用
粉包产品：按照每种产品标签上所标识的配制方法操作使用
三、产品使用效果
图1 培养24小时后细胞。
无血清培养基的介绍
无血清培养基的介绍无血清培养基是通过化学合成或以类似动物胎牛血清的化学物质替代的方式，在不使用动物血清的情况下提供细胞培养所需的营养和生长因子。
无血清培养基能够模拟传统的细胞培养条件，提供细胞所需的能量、氨基酸、维生素、脂类和激素等物质，从而维持细胞的正常生长和分裂。
1. 基础培养基：无血清培养基通常使用无菌的DMEM（Dullbecco's Modified Eagle's Medium）或RPMI（Roswell Park MemorialInstitute）等基础培养基作为起始材料。
这些培养基中含有大量的氨基酸、碳水化合物和盐类，能够提供细胞所需的能量和基础物质。
2.营养物质：无血清培养基会添加各种营养物质，如氨基酸、葡萄糖、核苷、维生素等。
这些物质能够提供细胞所需的营养物质，促进细胞的正常生长和代谢。
3.细胞生长因子：无血清培养基中还会添加各种细胞生长因子，如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子等。
这些生长因子能够刺激细胞生长和分裂，促进细胞的增殖和繁殖。
4.补充物质：无血清培养基中还会添加一些补充物质，如胰岛素、转铁蛋白、胆固醇等。
这些物质能够提供细胞所需的特殊物质，满足细胞的特殊需求。
与传统的含血清培养基相比，无血清培养基有以下几个优点：1.可重复性好：无血清培养基是通过化学合成方式制备的，成分和性质都是可控的。
不同批次之间没有差异，能够提供较好的重复性。
2.纯度高：无血清培养基中不含有血清，避免了血清可能存在的污染问题。
同时，无血清培养基还可以通过滤膜等方式过滤除去可能存在的细菌、病毒和真菌等微生物，提高了培养液的纯度。
3.免疫原性低：血清中存在的蛋白质和其他组分可能会引起宿主的免疫反应，导致细胞的受损甚至死亡。
而无血清培养基中不含有血清，因此免疫原性低，能够更好地保护细胞的生长和代谢。
4.成本低：虽然无血清培养基的制备和加工成本较高，但血清的价格较高，使用无血清培养基可以在一定程度上节省成本。