2019-2025年全球及中国无血清培养基行业调研报告

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EU GMP欧盟GMP中文版

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欧盟药品管理规则第 4 卷药品生产质量管理规范1998 版欧洲共同体前言欧洲共同体制药工业在药品的开发,生产和控制过程中保持高标准的质量保证。

上市许可系统保证由有能力的权威机构对药品的安全,质量和有效性是否达到相应的规定进行评估。

生产许可系统保证在欧洲市场上获准销售的药品是由授权的生产商生产,其日常活动由权威机构定期检查。

无论是在欧共体之内销售,还是在欧共体之外销售,所有欧共体的药品生产企业都必须通过生产许可。

有两个药品生产和质量管理指导原则,药品生产和质量管理规范(GMP)和指南来源于两个指导原则, 一个是人用药物指导原则(指导原则91/356/EEC)一个是兽用药物指导原则(指导原则91/412/EEC),这两个指导原则1991年被欧共体采纳。

根据这些原则,制定了详细的药品生产和质量管理规范,用于对申请生产许可的企业进行评估和对药品生产企业进行检查的基础。

GMP的原则和详细的指南适用于需要按照第16条75/319/ EEC和修改的第24条81/851/EEC要求认证的所有的操作。

也与所有其它大规模药品生产过程,诸如医院负责的临床试验用药的制备有关。

所有的成员国和工业企业本身都同意GMP适用于人用药物的生产,也适用于兽用药物的生产。

在两个附录中对兽用药品和兽用免疫药品的GMP指南做了详细的调整。

指南用章来表述,每章用标题来概括章节的原则内容。

第一章质量管理列出了药品生产的质量保证的基本概念。

后续各章的原则列出了质量保证的目标和提供了足够的让生产商在执行这一原则时所必须考虑的基本要素。

这一指南除了在9个章节中表述了GMP的基本要素外, 还包括一系列附录提供了与之有关的活动的特定范围的细节。

有时几个附录同时使用,如关于无菌制剂,辐射性药物,生化药物的附录。

在附录后还列出了这一指南所使用的术语表.指南的第一版在1989 年出版, 包括一个无菌药品生产的附录。

第二版在1992 年1月出版; 欧共体指到原则包括给人用药品和兽用药品的GMP提供原则和指南的欧共体于1991 年6月13 日颁布的91/356指导原则和1991 年7月23 日颁布的91/412指导原则。

CHO细胞无血清培养基的筛选与优化

CHO细胞无血清培养基的筛选与优化

CHO细胞无血清培养基的筛选与优化在生物制药领域,CHO 细胞(Chinese Hamster Ovary Cell,中国仓鼠卵巢细胞)因其能够高效表达重组蛋白而被广泛应用。

然而,传统的含血清培养基存在诸多问题,如血清成分复杂且批次间差异大,易引入外源病毒和支原体污染等。

因此,开发和优化 CHO 细胞无血清培养基成为了提高生物制品质量和安全性的关键环节。

一、CHO 细胞无血清培养基的重要性血清在细胞培养中曾被广泛使用,但其存在的问题不容忽视。

血清中的成分复杂且不稳定,这使得细胞培养过程难以控制和标准化。

不同批次的血清质量差异较大,可能影响细胞的生长、代谢和产物表达。

此外,血清中可能携带的病毒、支原体等污染物会给生物制品带来潜在的安全风险。

相比之下,无血清培养基具有明显的优势。

它的成分明确且稳定,便于质量控制和优化。

无血清培养基可以减少外源污染物的引入,提高生物制品的安全性。

同时,它能够为细胞提供更适宜的生长环境,促进细胞的生长和产物表达,从而提高生产效率和产品质量。

二、筛选 CHO 细胞无血清培养基的方法1、基础培养基的选择首先需要选择合适的基础培养基作为起点。

常见的基础培养基如DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium,杜氏改良伊格尔培养基)、RPMI 1640 等,它们在营养成分和离子浓度等方面有所不同。

需要根据 CHO 细胞的特性和培养需求,初步筛选出几种可能适用的基础培养基。

2、添加剂的筛选在基础培养基的基础上,需要添加各种营养成分、生长因子、激素等添加剂来满足 CHO 细胞的生长和代谢需求。

例如,胰岛素、转铁蛋白、乙醇胺等对于细胞的生长和存活至关重要。

通过单独或组合添加这些添加剂,并检测细胞的生长情况、代谢指标和产物表达水平,来筛选出最优的添加剂组合。

3、化学成分的优化除了添加剂,培养基中的化学成分如氨基酸、维生素、无机盐等的浓度和比例也需要进行优化。

生物制药(动物保健、动物疫苗)行业研究报告

生物制药(动物保健、动物疫苗)行业研究报告

生物制药(动物保健)行业研究报告一、生物制药产业处于快速发展期受益于“十二五”生物产业规划和生物研发加速,我国生物产业将维持高景气发展。

随着化学制药研发遇到瓶颈和生物科技的迅猛发展,生物制药已成为医药产业中发展最快、活力最强和技术含量最高的领域,在全球医药产业中所占比重逐年上升。

我国生物制药发展迅速,每四年便翻一番。

随着“十二五”生物产业规划启动、生物研发加速和医药内需扩大,在全球生物制药和我国医药行业高速发展的行业背景下,我国生物制药行业具有更高的发展速度和市场潜力,将持续高速发展。

二、生物制药细分子行业--动物保健动物保健品(俗称兽药)按类别分为:药用饲料添加剂、生物制品和化学药品。

兽药化学药品主要包括抗感染,抗寄生虫等。

兽用生物制品主要包括疫苗、诊断试剂等,其中兽用疫苗占绝对主导。

除宠物以外,动物的价值主要体现在食用上,单个动物的经济价值有限,且考虑药残等问题,不宜过多用药,这就决定了饲用型动物重“防”不重“治”。

因而长期来看,兽用化学制剂除宠物药和饲料添加剂外,发展空间有限,兽用生物制品更符合动物保健的发展方向。

动物保健品分类图资料来源:券商报告三、全球动物保健行业发展状况根据国际动保联盟(IFAH)的数据显示,全球动物保健品行业(不含中国)2012 年销售额为225 亿美元,2000 年至2014年的年复合增速为6.12%,预计到2016 年市场规模有望达到290 亿美元。

美国、欧盟等发达国家动物保健行业较为成熟,占据全球80%左右的市场份额(面积占据全球的37%,人口约占全球34%,不含中国)。

其中美国动物保健品市场预计到2016年预计达到80.8 亿美元。

全球动物保健品(不含中国)市场规模(百万美元)全球动保产品销售额与增速-按区域资料来源:IFAH按照产品类别来看,兽用化学药品占据主导地位,但生物制品增速明显快于其他两类。

2012年化学药品占动物保健品总额的62%,兽用生物制品2005-2012年复合增速为8.26%,高于整体增速约2%,其中兽用疫苗占比95%以上,处于绝对主导地位。

中和抗体检测应用于新型冠状病毒mRNA_疫苗效力分析

中和抗体检测应用于新型冠状病毒mRNA_疫苗效力分析

国家药监局重点实验室专栏[重点实验室简介]国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室是国家药监局2019年首批认定的重点实验室ꎬ依托单位为中国食品药品检定研究院生物制品检定所ꎮ生物制品检定所主要开展应用基础研究ꎬ方向包括:治疗类生物技术产品㊁预防类菌苗/疫苗及其创新性产品和一些重要的体内外诊断试剂(血液筛查)的质量控制和质量评价研究ꎻ建立符合国际规范的质量检定用标准物质㊁生产与检定用菌种库和细胞库等ꎮ通过提供疫苗及生物技术产品等国家标准物质㊁建立标准的检验技术㊁研究与制定完善的药品质量标准ꎬ生物制品检定所在我国药品质量控制㊁创新性药品研究与产业化发展中起到不可或缺的技术支撑作用ꎮ生物制品质量研究与评价重点实验室具备完善的生物制品检验检测体系ꎬ检测技术范围与检测能力在国内相同领域是唯一的也是最全面的ꎬ共获得的CNAS实验室资质认定的项目222项ꎮ2013年生物制品检定所被评估认定成为WHO生物制品标准化和评价合作中心ꎬ2017年通过WHO生物制品标准化和评价合作中心再认定ꎮ通过广泛的国际药交流(WHO㊁英国NIBSC㊁美国药学会㊁美国FDA和人用药物注册技术要求国际协调会议ICH等)ꎬ重点实验室不仅引进国外先进的药品质量监管理念和技术ꎬ还将我国的一些优势技术运用于国际标准品和国际药品质量标准的建立中ꎬ在相关领域的国际标准制定中发挥重要作用ꎮ实验室主任:徐苗ꎬ女ꎬ医学博士ꎬ研究员ꎬ博士生导师ꎬ中国食品药品检定研究院生物制品检定所所长ꎮ主要从事疫苗等生物制品质量控制与评价的研究和管理工作ꎮ先后主持国家级课题4项ꎬ参与省部级以上课题6项ꎬ以第一或通信作者在«Naturalprotocols»«EmergingMicrobes&Infections»等杂志上发表论文80余篇ꎬ编写专著5部ꎬ获授权专利6项ꎬ其中3项已经完成转化ꎬ先后获得中华预防医学会科学技术一等奖㊁中国防痨协会科学技术奖一等奖㊁中国药学会科学技术奖二等奖㊁北京市科学技术二等奖等多个奖项ꎮ获国家市场监管总局抗击新冠疫情先进个人㊁中国药学会以岭生物青年生物奖等ꎮ㊀基金项目:国家重点研发计划(No.2021YFC2302404)作者简介:吴小红ꎬ女ꎬ硕士ꎬ副研究员ꎬ研究方向:新型冠状病毒mRNA疫苗及狂犬病疫苗质量控制ꎬE-mail:wuxiaohong@nifdc.org.cn通信作者:刘欣玉ꎬ男ꎬ博士ꎬ研究员ꎬ研究方向:疫苗质量控制ꎬTel:010-53851780ꎬE-mail:liuxinyu@nifdc.org.cn中和抗体检测应用于新型冠状病毒mRNA疫苗效力分析吴小红ꎬ赵丹华ꎬ所玥ꎬ彭沁华ꎬ王红玉ꎬ刘欣玉ꎬ李玉华(中国食品药品检定研究院虫媒病毒疫苗室ꎬ国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室ꎬ北京102629)摘要:目的㊀通过对新型冠状病毒(2019novelcoronavirusꎬ2019-nCoV)mRNA疫苗(新冠mRNA疫苗)免疫小鼠后产生的中和抗体进行检测ꎬ探索中和抗体检测法应用于mRNA疫苗体内效力评价的可行性ꎮ方法㊀采用6~8周BALB/c小鼠进行后肢肌肉免疫ꎬ检测不同免疫剂量和不同免疫程序的中和抗体滴度ꎮ并对8家企业生产的新冠mRNA疫苗免疫的小鼠血清进行中和抗体和IgG抗体检测ꎮ结果㊀2㊁5㊁10μg不同剂量mRNA疫苗按照不同免疫程序免疫小鼠后中和抗体检测结果显示ꎬ抗体阳转率均为100%ꎬ中和抗体反应有明显的剂量-效应关系ꎮ2针间隔14d加强免疫组抗体滴度显著高于间隔7d加强免疫组及1针组(F=57.13ꎬP<0.001)ꎮ2μg剂量间隔7d加强免疫和间隔14d加强免疫产生的中和抗体几何平均滴度(geometricmeantiterꎬGMT)分别为218和468ꎬ差异有统计学意义(t=3.40ꎬP=0.003)ꎻ5μg剂量间隔7d加强免疫和间隔14d加强免疫产生的中和抗体GMT分别为499和1436ꎬ差异有统计学意义(t=3.62ꎬP=0.002)ꎻ10μg剂量间隔7d加强免疫和间隔14d加强免疫产生的中和抗体GMT分别为608和1909ꎬ差异有统计学意义(t=3.23ꎬP=0.005)ꎮ国内8家企业生产的新冠mRNA疫苗免疫小鼠后均可产生高滴度的IgG抗体(104.5~107.5)和中和抗体(102.6~104.8)ꎬ效力测定结果均符合企业质量标准ꎮ各企业生产的mRNA疫苗的中和抗体滴度结果差异有统计学意义(F=70.03ꎬP<0.001)ꎮ结论㊀小鼠免疫后中和抗体检测可用于mRNA疫苗的体内效力评价ꎮ关键词:新型冠状病毒ꎻmRNA疫苗ꎻ中和抗体ꎻIgG抗体ꎻ效力中图分类号:R917㊀文献标志码:A㊀文章编号:2095-5375(2023)11-0896-006doi:10.13506/j.cnki.jpr.2023.11.009StudyonthepotencyofmRNACOVID-19vaccineinvivousingneutralizingantibodyassayWUXiaohongꎬZHAODanhuaꎬSUOYueꎬPENGQinhuaꎬWANGHongyuꎬLIUXinyuꎬLIYuhua(NMPAKeyLaboratoryforQualityControlandEvaluationofBiologicalProductsꎬDivisionofArbovirusVaccineꎬNationalInstitutesforFoodandDrugControlꎬBeijing102629ꎬChina)Abstract:Objective㊀ToevaluatethepotencyofmRNACOVID-19vaccineinvivobyneutralizingantibodyassayaf ̄termiceimmunizationꎬandestablishamethodforevaluatingtheefficacyofthevaccine.Methods㊀BALB/cmiceat6~8weekswereimmunizedwithmRNACOVID-19vaccineandtheneutralizingantibodytitersofdifferentimmunedosageanddifferentvaccinationschedulesweredetected.Thevariantvaccinesproducedbydifferentmanufactureswereimmunizedatintervalsof7dor14dꎬandserumsampleswascollectedat7daftertheseconddoseofimmunization.2019novelcoronavir ̄us(2019-nCoV)neutralizingantibodytiterandIgGantibodytiterweredetectedbypseudovirusneutralizationtestanden ̄zymelinkedimmunosorbentassayseparately.Results㊀Theresultsofneutralizingantibodyatdifferentimmunedosageof2ꎬ5ꎬ10μgmRNAvaccineshowedthattheseropositiverateofantibodyinmicewas100%andtheneutralizingantibodyreac ̄tionhadanobviousdose-effectcorrelation.Theneutralizationantibodytiterofthe14-dayintervalgroupwassignificantlyhigherthanthatofthe7-dayintervalgroupandonedosegroup(F=57.13ꎬP<0.001).Thegeometricmeantiters(GMT)ofneutralizingantibodyinducedby2μgdosageintervalof7-dayand14-daywere218and468ꎬrespectivelyꎬwithsignifi ̄cantdifference(t=3.40ꎬP=0.003)ꎻTheGMTofneutralizingantibodyinducedby5μgdosageintervalof7-dayand14-daywere499and1436ꎬrespectivelyꎬwithsignificantdifference(t=3.62ꎬP=0.002)ꎻTheGMTofneutralizingantibodiesinducedby10μgdosageintervalof7-dayand14-daywere608and1909respectivelyꎬwithsignificantdifference(t=3.23ꎬP=0.005).HighlevelsofIgGantibody(104.5~107.5)andneutralizingantibody(102.6~104.8)couldbedetectedafterimmunizingmicewiththeCOVID-19mRNAvaccineꎬpotencyofthevaccineswereallmetwiththerequirementswithgoodlotconsistenceꎬthereweresignificantdifferenceintheantibodytitersamongthevariousvaccineproducedbydifferentman ̄ufacturers(F=70.03ꎬP<0.001).Conclusion㊀TheneutralizingantibodytestofthemiceafterimmunizationcanbeusedtoevaluatethepotencyofCOID-19mRNAvaccineinvivo.Keywords:2019novelcoronavirusꎻmRNAvaccineꎻNeutralizingantibodyꎻIgGantibodyꎻPotency㊀㊀新型冠状病毒感染(coronavirusdisease2019ꎬCOVID-19)的流行对人类健康造成了严重影响ꎮ疫苗接种已被证实对严重疾病㊁降低住院率和死亡率非常有效[1-2]ꎮ其中mRNA疫苗由于具有能够同时诱导体液免疫和细胞免疫㊁研发和生产周期短㊁容易实现量产等优势ꎬ成为国际上主要采用的COVID-19疫苗研发技术ꎮ随着新型冠状病毒(2019-nCoV)变异株的不断出现ꎬ单价变异株疫苗及多价变异株疫苗可作为加强免疫以及异源序贯免疫来应对病毒变异造成的感染威胁[3]ꎮ新冠mRNA疫苗的效力评价目前尚无国际标准ꎬ欧洲及世界卫生组织(WHO)专家多推荐体外活性研究作为该疫苗效力评价的主要方法[4-6]ꎮ鉴于mRNA疫苗为创新技术疫苗ꎬ缺乏系统的疫苗质量研究经验ꎬ我国现阶段采用体内和体外双效力指标进行评价[7]ꎬ体内效力的评价可利用动物免疫后检测中和抗体和/或总抗体的方法来进行[8]ꎮ本研究对新冠mRNA疫苗不同免疫剂量和不同免疫程序诱导的中和抗体反应进行初步研究ꎬ并对新冠变异株mRNA疫苗及二价mRNA疫苗免疫小鼠后的抗体阳性率和抗体水平进行体内效力分析ꎬ从而评价mRNA疫苗的质量ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀实验动物㊀SPF级BALB/c小鼠ꎬ6~8周龄ꎬ体重18~22gꎬ雌雄不限ꎬ由中国食品药品检定研究院动物所提供ꎬ实验动物生产许可证号:SCXK(京)2022-0002ꎬ使用许可证号:SYXK(京)2022-0014ꎬ动物实验伦理批准文号:中检动(福)第2022(B)008号ꎮ1.2㊀主要试剂及仪器㊀10ˑPBS㊁TMB㊁终止液购自索莱宝公司ꎻHRP标记的羊抗小鼠IgG购自美国Jackson公司ꎻBSA购自美国Sigma公司ꎻDMEM㊁胎牛血清㊁胰酶㊁HEPES㊁双抗均购自美国Gibco公司ꎻ荧光素酶检测试剂购自美国普洛麦格Promega公司ꎻPromegaGloMax96微孔板化学发光检测仪(Glomaxnavigator)购自美国普洛麦格Promega公司ꎻ酶标仪(InfiniteM200)购自美国蒂肯公司ꎮ1.3㊀实验用疫苗㊁细胞㊁不同型别假病毒㊀实验用疫苗为国内企业生产的mRNA疫苗ꎬ编号V1~V9ꎮ其中V1为原型株疫苗ꎬV2~V7为二价2019-nCoV变异株mRNA疫苗(OmicronBA.4/5株和Delta株双价㊁OmicronBA.4/5株和Beta株双价㊁OmicronBA.2株和原型株双价以及OmicronXBB.1.5株和BQ.1.7株双价)ꎬV8~V9是2019-nCoV变异株mRNA疫苗(OmicronBA.1)ꎻVero细胞购自ATCCꎬ本室传代保存ꎻ假病毒原型株㊁Delta株㊁Beta株㊁O ̄micronBA.1㊁OmicronBA.2㊁OmicronBA.4/5㊁OmicronXBB.1.5购自北京云菱生物技术公司ꎻ不同株2019-nCoVS蛋白抗原分别购自北京义翘神州生物技术有限公司和北京百普赛斯公司ꎮ1.4㊀免疫剂量及免疫程序1.4.1㊀mRNA疫苗免疫剂量和免疫程序研究㊀将V1mRNA疫苗(原型株)配制成不同浓度后ꎬ按照不同的免疫程序分成A㊁B㊁C3组:A组程序为免疫1针ꎬ14d采血ꎻB组程序为间隔7d加强免疫1针后7d采血ꎻC组程序为间隔14d加强免疫1针后7d采血ꎮ每种免疫程序按照不同的免疫剂量分成3个小组ꎬ分别是每只小鼠注射2㊁5和10μgꎬ共计9组ꎬ每组10只小鼠ꎮ同时10只小鼠注射生理盐水作为阴性对照组ꎮ每只小鼠后肢肌肉注射100μL疫苗ꎬ眼球取血分离血清ꎬ-20ħ保存备用ꎮ用假病毒中和试验法检测抗2019-nCoV中和抗体ꎮ1.4.2㊀实验疫苗免疫和检测㊀mRNA变异株疫苗及二价疫苗均按照企业的免疫剂量和免疫程序进行免疫和采血ꎬ分离血清后于-20ħ保存ꎮ分别进行中和抗体和IgG结合抗体的检测ꎮ1.5㊀假病毒中和试验(PBNA法)㊀按照操作规程进行[9-10]ꎬ在96孔板上3倍系列稀释的血清100μLꎬ分别加入各型假病毒[用DMEM培养基稀释至1.3ˑ104半数组织培养感染剂量(TCID50)/mL]ꎬ每孔加入50μLꎬ同时设立病毒对照和细胞对照ꎮ37ħ5%CO2培养箱中和1hꎬ加入2ˑ105个/mL的Vero细胞悬液ꎬ每孔100μLꎬ37ħ5%CO2培养箱培养20~28h后ꎬ从细胞培养箱中取出96孔板ꎬ用多道移液器从每个上样孔中吸弃150μL上清ꎬ然后加入100μL荧光素酶检测试剂ꎬ室温避光反应2minꎮ反应结束后ꎬ用多道移液器将反应孔中的液体反复吹吸6~8次ꎬ使细胞充分裂解ꎬ从每孔中吸出100μL液体ꎬ加于对应96孔化学发光检测板中ꎬ置于化学发光检测仪中读取发光值ꎮ计算抑制率={1-[样品组的发光强度均值-空白对照CC(CellControlꎬCC)均值]/[阴性组的发光强度VC(VirusControlꎬVC)均值-空白对照值CC均值]}ˑ100%ꎮ根据中和抑制率结果ꎬ按照ReedMuench法计算中和抗体滴度半数效应剂量(50%maximaleffectiveconcentrationꎬEC50)ꎬEC50>30为抗体阳性ꎮ1.6㊀特异性抗2019-nCoVSpike蛋白IgG抗体检测㊀将2019-nCoV各株抗原分别用1ˑPBS稀释至2μg mL-1ꎬ取96孔板每孔加100μLꎬ(5ʃ3)ħ条件下包被过夜16hꎬPBST洗板3次ꎬ拍干后加入封闭液(2%BSA溶液)ꎬ100μL/孔ꎬ37ħ孵箱里封闭2hꎬ加入系列稀释后的待检测血清样本ꎬ37ħ孵箱里孵育后1hꎬPBST洗板3次ꎬ加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗小鼠IgG抗体ꎬ每孔100μLꎬ37ħ孵育后1hꎬPBST洗板3次ꎬ加入底物TMB50μLꎬ室温避光显色3~5minꎬ加入1mol L-1硫酸溶液终止液终止ꎬ150μL/孔ꎬ在酶标仪上检测波长450nm/630nm的OD值ꎬ以阴性小鼠吸光度均值的2.1倍为cutoff值ꎮ血清A值大于cutoff值为抗体阳性ꎬ取阳性A值最大的血清稀释度为血清的IgG抗体滴度ꎮ1.7㊀统计学方法㊀使用GraphPadPrism8.0进行数据分析ꎬ相同免疫剂量不同免疫程序以及相同免疫程序不同免疫剂量间中和抗体滴度以及不同企业mRNA疫苗免疫后中和抗体之间比较采用单因素方差分析评估组间差异ꎬ中和抗体和IgG抗体之间差异采用t检验分析ꎬP<0.05表示差异有统计学意义ꎮ2㊀结果2.1㊀不同免疫剂量和不同免疫程序的抗体反应㊀针对原型株mRNA疫苗不同免疫剂量和免疫程序的中和抗体检测结果显示ꎬ2㊁5㊁10μgmRNA疫苗免疫小鼠后ꎬ1针免疫组和2针免疫组抗体阳性率均为100%ꎮ2㊁5㊁10μg首针免疫后14d或21d中和抗体反应具有明显的剂量-效应关系ꎮ相同免疫剂量㊁不同免疫程序结果显示ꎬ2针免疫组高于1针免疫组ꎬ其中2μg剂量组不同针次之间抗体滴度结果差异有统计学意义(F=20.64ꎬP<0.001)ꎻ5μg剂量组不同针次之间抗体滴度结果差异有统计学意义(F=18.27ꎬP<0.001)ꎻ10μg剂量组不同针次之间抗体滴度结果差异有统计学意义(F=11.37ꎬP<0.001)ꎮ2针免疫组中14d加强免疫组高于7d加强免疫组及1针组(F=57.13ꎬP<0.001)ꎮ其中2μg间隔7d加强免疫和间隔14d加强免疫组产生的中和抗体几何平均滴度(geometricmeantiterꎬGMT)分别为218和468ꎬ14d为7d的2.15倍ꎬ差异有统计学意义(t=3.40ꎬP=0.003)ꎻ5μg间隔7d加强免疫和间隔14d加强免疫产生的中和抗体GMT分别为499和1436ꎬ14d为7d的2.88倍ꎬ差异有统计学意义(t=3.62ꎬP=0.002)ꎻ10μg间隔7d加强免疫和间隔14d加强免疫产生的中和抗体GMT分别为608和1909ꎬ14d为7d的3.14倍ꎬ差异有统计学意义(t=3.23ꎬP=0.005)ꎮ相同免疫程序㊁不同免疫剂量诱导的抗体反应结果显示ꎬ1针免疫组不同剂量间相比(F=7.33ꎬP=0.003)ꎻ2针免疫组ꎬ间隔7d不同剂量间相比(F=6.40ꎬP=0.005)ꎻ2针免疫组ꎬ间隔14d不同剂量间相比(F=7.64ꎬP=0.002)ꎬ差异均有统计学意义ꎬ结果见表1ꎮ表1㊀V1疫苗不同免疫剂量和免疫程序的中和抗体滴度及阳性率剂量/μgGMT(95%CI)A组B组C组F值P值阳性率(%)260(46~73)218(167~629)468(263~674)20.64P<0.001100.05187(102~271)499(311~688)1436(759~2112)18.27P<0.001100.010349(52~646)608(269~948)1909(709~3109)11.37P<0.001100.0F值7.336.407.643.40a3.62b3.23cP值0.0030.0050.0020.003a0.002b0.005c阳性率(%)100.0100.0100.0///㊀注:GMT为几何平均滴度:95%CI:95%可信区间ꎻ/表示无统计ꎻabc2㊁5㊁10μg间隔7d和间隔14d中和抗体滴度分别进行t检验ꎮ2.2㊀8家企业生产的新冠变异株mRNA疫苗体内效力检测结果㊀8家企业生产的疫苗V2~V9按照企业的免疫剂量和免疫程序免疫BALB/c小鼠后ꎬ中和抗体及特异性IgG抗体检测结果见表2ꎮ表2㊀不同企业生产的mRNA疫苗抗体检测结果生产者免疫程序检测批数LgIgG(GMT)中和抗体EC50(GMT)(LgEC50)V37d2针免疫14d采血V47d2针免疫14d采血V514d2针免疫21d采血V614d2针免疫21d采血V714d2针免疫21d采血V814d2针免疫28d采血V914d2针免疫28d采血25.95.61202(3.1)N/A35.65.71268(3.1)N/A15.96.0410(2.6)966(3.0)26.05.7617(2.8)1456(3.2)36.05.7644(2.8)1671(3.2)46.96.6667(2.8)3935(3.6)14.54.81291(3.1)2080(3.3)24.74.91556(3.2)2353(3.4)34.74.81361(3.1)2582(3.4)44.64.91050(3.0)1931(3.3)16.06.11274(3.1)3812(3.6)26.15.81170(3.1)2798(3.4)36.05.81589(3.2)3097(3.5)46.06.01298(3.1)4074(3.6)15.04.87495(3.9)1427(3.2)25.15.06230(3.8)1257(3.1)35.35.29580(4.0)2806(3.4)17.1/24453(4.4)/27.5/27976(4.4)/37.5/26979(4.4)/15.6/65630(4.8)/25.6/40445(4.6)/35.6/25343(4.4)/F值或t值11.47a17.56b70.03cP值P<0.001aP<0.001bP<0.001c㊀注: / 代表该疫苗为单价疫苗ꎻ N/A 代表该组分未检测ꎻ 1㊁2㊁3㊁4 分别代表检测批数ꎮa代表组分1IgG结合抗体和中和抗体滴度t检验结果ꎻb代表组分2IgG结合抗体和中和抗体滴度t检验结果ꎻc代表各企业之间中和抗体滴度方差分析结果ꎮ组分1和组分2代表双价疫苗中的单价组分ꎬ如V7疫苗:组分1为德尔塔株ꎬ组分2为奥密克戎BA.4/5株ꎮ2.3㊀特异性IgG结合抗体和中和抗体结果分析㊀检测结果以对数转换后进行t检验ꎬ组份1IgG和EC50比较t=11.47ꎬP<0.001ꎻ组份2IgG和EC50比较t=17.56ꎬP<0.001ꎬ均显示中和抗体检测结果和IgG结合抗体检测差异有统计学意义ꎮPearson相关系数r分别为0.42和0.22ꎮ虽然两种方法抗体检测结果相关性较差ꎬ但均可以检测到高水平的抗体特异性反应ꎮ两种方法检测各企业3~4批疫苗ꎬIgG抗体结果批间变异系数在1.0%~7.6%ꎬ中和抗体结果批间变异系数在2.0%~7.9%ꎬ提示两种抗体检测方法均可以用于评价疫苗体内效价的批间一致性ꎮ各企业mRNA疫苗的中和抗体结果对数转换后进行组间方差分析ꎬ差异有统计学意义(F=70.03ꎬP<0.001)ꎮ3㊀讨论新冠mRNA疫苗临床前和临床研究中均证实疫苗的有效性与动物或人群保护力之间有一定的量效关系[11-14]ꎮ中和抗体是最重要的保护性抗体ꎬ与2019-nCoV感染者症状严重程度之间也有一定的相关性[15-16]ꎮ因此建立标准的中和抗体检测平台技术对COVID-19疫苗进行评价尤为重要[17]ꎮ本研究采用的假病毒中和方法经国内多家实验室联合验证[9ꎬ18]ꎬ抗体检测结果相对客观ꎬ与IgG结合抗体检测相比更能体现疫苗的免疫原性ꎮ尤其对于多价疫苗ꎬ假病毒中和抗体检测方法可实现对不同变异株抗体分别进行检测ꎬ能较好的反映出针对多价疫苗各毒株组份疫苗诱导的抗体中和活性ꎮ通过对1批mRNA原型株疫苗不同免疫剂量和不同免疫程序的分析ꎬ提示mRNA疫苗免疫小鼠后的中和抗体水平与免疫剂量和免疫程序有密切关系ꎮ本研究发现ꎬ同等剂量下(2㊁5㊁10μg)间隔7d与间隔14d2针免疫的抗体结果差异有统计学意义ꎬ对于mRNA疫苗来说ꎬ间隔7d的第2针加强免疫不是产生高滴度中和抗体的最适宜的程序ꎬ疫苗实际使用过程中第2针加强免疫的时间选择在21d或28d[11-12]ꎮ因此mRNA疫苗体内效力的评价应适当关注免疫程序的设计ꎮ研究结果显示mRNA变异株单价疫苗或二价疫苗中针对不同组分的IgG抗体滴度均在104.5~107.5间ꎬ符合各企业的质量标准(不低于103或104)ꎬ且各企业生产的疫苗IgG抗体结果批间一致性良好ꎬ变异系数在1.0%~7.6%之间ꎮ假病毒法检测中和抗体滴度在102.6~104.8之间ꎬ不同企业生产的疫苗免疫后中和抗体水平差异有统计学意义(F=70.03ꎬP<0.001)ꎬ与国产mRNA疫苗已公布的Ⅰ~Ⅱ期临床研究数据一致ꎬ不同企业新冠mRNA疫苗在人体内产生的中和抗体滴度有差异[12-15]ꎮ各企业不同批次中和抗体检测结果变异系数为2.0%~7.9%ꎮ因此中和抗体检测可用于不同企业mRNA疫苗效力的比较研究以及疫苗批间一致性的评价ꎮ辉瑞公司生产的BNT162b为30μg/剂ꎬ莫德纳公司mRNA-1273为100μg/剂ꎮ两款疫苗对2019-nCoV感染的保护效力分别达到了94.6%和94.1%ꎬ不同的人用剂量和免疫程序可产生相同的临床保护力[19-21]ꎮmRNA-1273Ⅲ期临床研究结果显示接种该疫苗后假病毒法检测中和抗体滴度半数抑制稀释(50%inhibitorydilutionꎬID50)为10㊁100和1000ꎬ测算疫苗保护效力分别为78%㊁91%和96%[22]ꎻ新冠灭活疫苗NVX-CoV2373中和抗体滴度ID50为50㊁100和7230(IU50 mL-1)ꎬ疫苗保护效力分别为75.7%㊁81.7%和96.8%[23]ꎮ本研究结果显示国产新冠mRNA疫苗小鼠免疫后中和抗体均达到较高水平ꎬ无论是1针免疫还是2针免疫EC50除个别企业因单价组分配比含量低ꎬ造成滴度偏低(V4)外ꎬ其余企业中和抗体滴度均在在1000以上甚至更高ꎬ提示国产新冠mRNA疫苗的体内效力结果已达到较高的标准要求ꎮ虽然本研究未利用上述新冠mRNA疫苗进一步开展攻毒保护力研究ꎬ但随着mRNA疫苗大量的临床研究数据以及真实世界的保护力数据公布ꎬ会对疫苗的效力评价标准提供更有效的数据支持ꎮ尽快建立效力评价用疫苗参考品和血清检测用标准物质ꎬ提高国产mRNA疫苗的质量评价水平是下一步研究方向ꎮ参考文献:[1]㊀EARLEKAꎬAMBROSINODMꎬFIORE-GARTLANDAꎬetal.EvidenceforantibodyasaprotectivecorrelateforCO ̄VID-19vaccines[J].Vaccineꎬ2021ꎬ39(32):4423-4428. 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[9]NIEJꎬLIQꎬWUJꎬetal.Establishmentandvalidationofapseudo-virusneutralizationassayforSARS-CoV-2[J].EmergMicrobesInfectꎬ2020ꎬ9(1):680-686.[10]NIEJꎬLIQꎬWUJꎬetal.QuantificationofSARS-CoV-2neutralizingantibodybyapseudo-typedvirus-basedassay[J].NatProtocꎬ2020ꎬ15(11):3699-3715.[11]LIJLꎬLIUQꎬLIUJꎬetal.DevelopmentofBivalentmRNAVaccinesagainstSARS-CoV-2Variants[J].Vac ̄cines(Basel)ꎬ2022ꎬ10(11):1807.[12]YANGRꎬDENGYꎬHUANGBYꎬetal.Acore-shellstructuredCOVID-19mRNAvaccinewithfavorablebio ̄distributionpatternandpromisingimmunity[J].SignalTransductTargetTherꎬ2021ꎬ6(1):213.[13]CHENGLꎬLIXFꎬDAIXHꎬetal.Safetyandimmunoge ̄nicityoftheSARS-CoV-2ARCoVmRNAvaccineinChineseadults:arandomizedꎬdouble-blindꎬplacebo-con ̄trolledꎬphase1trial[J].LancetMicrobeꎬ2022ꎬ3(3):e193-e202.[14]XUKꎬLEIWWꎬKANGBꎬetal.AnovelmRNAvaccineꎬSYS6006ꎬagainstSARS-CoV-2[J].FrontImmunolꎬ2023(13):1051576.[15]GARCIA-BELTRANWFꎬLAMECꎬASTUDILLOMGꎬetal.COVID-19-neutralizingantibodiespredictdiseaseseverityandsurvival[J].Cellꎬ2021ꎬ184(2):476-488. [16]KHOURYDSꎬCROMERDꎬREYNALDIAꎬetal.Neu ̄tralizingantibodylevelsarehighlypredictiveofimmuneprotectionfromsymptomaticSARS-CoV-2infection[J].NatMedꎬ2021ꎬ27(7):1205-1211.[17]WANGYC.StandardizedneutralisingantibodyassaysareneededforevaluatingCOVID-19vaccines[J].EBioMedi ̄cineꎬ2021(73):103677.[18]GUANLDꎬYUYLꎬWUXHꎬetal.ThefirstChinesena ̄tionalstandardsforSARS-CoV-2neutralizingantibody[J].Vaccineꎬ2021ꎬ39(28):3724-3730.[19]POLACKFPꎬTHOMASSJꎬKITCHINNꎬetal.SafetyandEfficacyoftheBNT162b2mRNACovid-19Vaccine[J].NEnglJMedꎬ2020ꎬ383(27):2603-2615.[20]SKOWRONSKIDMꎬDESERRESG.SafetyandefficacyoftheBNT162b2mRNAcovid-19vaccine[J].NEnglJMedꎬ2021ꎬ384(16):1576-1577.[21]BADENLRꎬELSAHLYHMꎬESSINKBꎬetal.EfficacyandsafetyofthemRNA-1273SARS-CoV-2vaccine[J].NEnglJMedꎬ2021ꎬ384(5):403-416.[22]GILBERTPBꎬMONTEFIRRIDCꎬMCDERMOTTABꎬetal.ImmunecorrelatesanalysisofthemRNA-1273CO ̄VID-19vaccineefficacyclinicaltrial[J].Scienceꎬ2022ꎬ375(6576):43-50.[23]FONGYꎬHUANGYꎬBENKESERDꎬetal.Immunecorre ̄latesanalysisofthePREVENT-19COVID-19vaccineefficacyclinicaltrial[J].NatCommunꎬ2023ꎬ14(1):331.(收稿日期:2023-10-13)(上接第883页)[15]WUYBꎬPENGMCꎬZHANGCꎬetal.Quantitativedeter ̄minationofmulti-classbioactiveconstituentsforqualityassessmentoftenAnoectochilusꎬfourGoodyeraandoneLudisiaspeciesinChina[J].ChinHerbMedꎬ2020ꎬ12(4):430-439.[16]DUXMꎬIRINONꎬFURUSHONꎬetal.PharmacologicallyactivecompoundsintheAnoectochilusandGoodyeraspecies[J].JNatMedꎬ2008ꎬ62(2):132-148.[17]DUXMꎬSUNNYꎬCHENYꎬetal.Hepatoprotectiveali ̄phaticglycosidesfromthreeGoodyeraspecies[J].BiolPharmBullꎬ2000ꎬ23(6):731-734.[18]张婉菁ꎬ刘量ꎬ胡荣ꎬ等.斑叶兰抗氧化活性组分研究及其乳膏的制备[J].中医药导报ꎬ2017ꎬ23(1):59-62. 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无血清培养基介绍

无血清培养基介绍

无血清培养基转载请注明来自丁香园发布日期:2012-02-17 12:29 文章来源:丁香园分享到:收藏夹新浪微博腾讯微博开心网豆瓣社区人人网关键词:丁香园生物专题义翘神州细胞培养培养基点击次数:1026无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。

但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。

虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作用,这时需要排除其他生长因子的干扰作用。

而血清中可能含有各种生长因子;又如需要测定某种细胞在培养过程中分泌某种物质(抗体、生长因子)的能力;或者要大规模的培养某种细胞,以获得它们的分泌产物。

因此研制出无血清培养基一直是生物科学工作者努力的目标。

无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。

用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长。

添加组分1.促贴壁物质:许多细胞必须贴壁才能生长,这种情况下无血清培养基中一定要添加促贴壁和扩展因子,一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。

它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。

纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。

2.促生长因子及激素:针对不同细胞添加不同的生长因子。

激素也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些激素是许多细胞必不可少的,如胰岛素。

3.酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中必不可少须含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。

细胞培养基市场分析报告

细胞培养基市场分析报告

细胞培养基市场分析报告1.引言1.1 概述概述细胞培养基市场作为生物科技领域中的重要组成部分,近年来呈现出快速发展的趋势。

细胞培养基是细胞培养的基础,广泛应用于生物医药、科研及临床诊断等领域。

随着人们对健康和生命科学的关注不断增加,细胞培养基市场的需求也在不断扩大。

本报告旨在对当前细胞培养基市场进行全面分析,包括市场现状、发展趋势以及竞争格局,并对未来市场前景进行展望。

同时,本报告还将针对市场现状提出行业发展建议,为相关企业提供参考。

通过本报告的阐述,希望能够为行业内的相关人士提供有益的信息和参考,推动细胞培养基市场的健康发展。

1.2 文章结构文章结构包括引言、正文和结论三部分。

在引言部分,将简要介绍细胞培养基市场的背景和重要性,以及文章的目的和结构安排。

在正文部分,将依次分析细胞培养基市场的现状、发展趋势和竞争格局,为读者提供全面的市场信息和分析。

在结论部分,将对细胞培养基市场前景进行展望,并提出行业发展建议,为读者总结全文的重点内容。

通过以上结构安排,读者可以系统地了解细胞培养基市场的现状和未来发展趋势,为相关行业人士提供决策参考。

文章1.3 目的部分的内容可编写如下:"1.3 目的本报告的目的在于全面分析细胞培养基市场的现状与发展趋势,为相关企业、投资者以及政府部门提供市场情报和决策参考。

通过对市场竞争格局的深入分析,帮助企业制定有效的市场策略和产品定位,推动行业健康发展。

同时,本报告也旨在为行业监管部门提供数据支持,促进行业规范化和可持续性发展。

通过本报告的撰写,我们希望能够为细胞培养基市场的未来发展提供有价值的参考和倡导,为行业发展做出贡献。

"1.4 总结总结部分的内容可以包括对整篇文章的核心观点和研究结果进行总结和归纳。

可以从细胞培养基市场现状、发展趋势、竞争格局以及前景展望等方面进行总结,指出市场存在的机遇和挑战,以及行业发展的建议和展望。

最后,对整个报告的重点观点进行强调,强调本文对细胞培养基市场进行了全面深入的分析和研究,具有一定的参考价值和实践意义。

2024年细胞培养基市场发展现状

2024年细胞培养基市场发展现状

2024年细胞培养基市场发展现状概述细胞培养基是在实验室中用于维持和培养细胞生长的一种特殊培养液。

随着生物技术和医学研究的不断发展,细胞培养基市场持续增长并不断创新。

本文将就细胞培养基市场的发展现状进行探讨,分析市场规模、主要厂商、产品创新等方面的情况。

市场规模细胞培养基市场在过去几年间呈现了持续增长的态势。

根据市场研究数据,细胞培养基市场的年复合增长率预计将超过10%。

这是由于细胞培养基在生物医学研究、药物开发和生产等领域的广泛应用。

细胞培养基市场的主要消费者包括科研机构、制药公司、生物技术公司等。

特别是在药物开发领域,对细胞培养基的需求量不断增加,推动了市场的快速增长。

主要厂商细胞培养基市场存在许多主要厂商,其中一些拥有较高的市场份额。

以下是一些世界知名的细胞培养基厂商:1.Thermo Fisher Scientific Inc.2.Gibco(Life Technologies Corporation)3.Merck KGaA4.Lonza Group Ltd.5.Corning Incorporated这些厂商通过提供优质的细胞培养基产品、不断创新以及与科研机构和制药公司的合作来保持竞争优势。

产品创新细胞培养基市场的发展受到产品创新的推动。

厂商们不断努力研发新型细胞培养基,以满足不同细胞类型和应用的需求。

一些新兴的技术和趋势也影响着细胞培养基市场的发展。

例如,借助生物反应器和生物芯片等高通量技术,可以实现更高效的细胞培养和筛选。

此外,细胞培养基的无动物成分和无血清配方的研发也是目前的热点。

进一步发展细胞培养基市场将继续保持增长势头,并进一步发展。

随着基因编辑、干细胞研究等前沿领域的不断进展,细胞培养基的需求将进一步增加。

此外,不断涌现的新技术和产品创新也将推动市场的发展。

然而,细胞培养基市场也面临着一些挑战。

例如,高成本、质量控制等问题需要得到解决。

因此,厂商们需要继续投入研发,并与科研机构和制药公司密切合作,以满足市场需求。

无血清培养MRC-5和狂犬病毒的研究

无血清培养MRC-5和狂犬病毒的研究

277BIOTECHWORLD 生物技术世界概述mrc-5(人胚肺成纤维)细胞为与人同种属的人二倍体细胞,是目前最为理想的细胞基质,在整个mrc-5细胞生长和增殖过程中血清的加入是必需的,由于血清成分复杂、来源不易控制,易受外源因子污染等,不仅增加了下游的纯化难度,同时也为产品带来安全隐患。

本实验在日水MEM培养基上,添加特定比例的转铁蛋白、L-谷氨酰胺、胰岛素、表皮生长因子、大豆胰蛋白酶抑制剂、非必需氨基酸等,利用正交试验筛选适合mrc-5细胞生长的无血清培养基配方,在此基础上,使用生物反应器中微载体培养mrc-5和狂犬病毒,并对此进行评价。

1 材料与方法1.1 细胞及病毒Mrc-5细胞、Pitman-moore毒种:成都康华生物制品有限公司研发部提供。

1.2 主要试剂及仪器纤粘连蛋白(FN):拜尔迪生物技术有限公司;转铁蛋白(TF):索莱宝生物科技公司;大豆胰蛋白酶抑制剂(TI):sigma公司;表皮生长因子(EGF):PEPROTECH公司;胰岛素(ins):索莱宝生物科技公司;L-谷氨酰胺:sigma公司;非必须氨基酸(NON-ESSENTIAL AMINO ACID):sigma公司;MEM培养基:日本日水株式会社。

1.3 单因素确定确定各个单因数取值范围,包括纤粘连蛋白(FN)、转铁蛋白(TF)、大豆胰蛋白酶抑制剂(TI)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素(ins)、L-谷氨酰胺、非必须氨基酸(NON-ESSENTIAL AMINO ACID),设计6因数3水平的L18(36)正交试验,分别配制无血清培养基(SFM)。

1.4培养基筛选mrc-5细胞按下述血清梯度用玻璃K氏瓶进行传代,每个血清梯度浓度细胞连续传二代,最后适应到自配的无血清培养基(SFM)。

10%S→5%S→3%S→1%S→SFM1.5 细胞密度计算利用EDTA-胰酶消化K氏瓶细胞,采用细胞计数板进行细胞计数。

1.6 狂犬病毒培养于含10%血清的MEM中培养mrc-5细胞,逐步降低血清至5%、3%、1%,直至上述已筛选优化的无血清培养基上。

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2019-2025年全球及中国无血清培养基行业调研报告喵咪产业服务(微信公众号)第一章产业概述1.1 无血清培养基定义无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。

无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。

经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。

采用无血清培养可简化纯化和鉴定各种细胞产物的程序,避免病毒污染造成的危害。

1.2 无血清培养基分类目前,无血清培养基的研究有两个方向:一是培养基中不含有任何动物来源的添加组分;二是培养基中不含有不明确的添加组分。

依此可以将当前应用较多的无血清培养基归纳为以下四种:1.一般意义上的无血清培养基,用各类可代替血清功能的生物材料配制细胞培养基,如牛血清白蛋白(BSA),转铁蛋白,胰岛素等生物大分子物质,以及从血清中提取的去除蛋白质的混合脂类以及水解蛋白等。

其特点是培养基中的蛋白含量较高,添加物质的化学成分不明确,其中含有大量的动物来源蛋白。

2.无动物来源培养基:许多商业公司开发的无动物来源培养基是基于生产重组药物的安全考虑,培养基中的添加组分无动物来源,需要的蛋白来源于重组蛋白或者蛋白水解物,这些组分可以保障细胞生长及增殖的需要。

3.无动物蛋白培养基:培养基完全不用动物来源的蛋白,但仍有部分添加物是来源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。

此类培养基组分相对稳定,但必须添加类固醇激素和脂类前体,并且对培养的细胞是高度特异性的。

4.化学组分限定培养基,此类培养基是目前最安全的,最为理想的培养基,首先可以保证培养基批次间的一致性,其中所添加的少量动物来源的蛋白水解物、蛋白都是成分明确的组分。

其特点是培养基的性质确定,配起培养基来也比较方便。

1.3 无血清培养基应用领域目前在大规模动物细胞的培养中已经普遍适用于无血清培养基。

在疫苗生长、单抗和各种生物活性蛋白等生物制品的应用领域中,优化无血清培养基的成分可使不同的细胞在最有利于细胞生长和表达目的产物的环境中维持高密度培养,降低生产成本。

在人类细胞培养中,应用无血清培养基还能有选择性地控制及避免成纤维细胞的过度生长。

在无血清培养条件下,某些细胞的生长量和抗体的产量甚至较有血清时高出数倍。

除生产生物制品外,无血清培养基也被广泛应用于细胞生物学、药理学、肿瘤学领域:(1)研究细胞的分化条件:无血清培养基其组成可以是完全确知的化学物质,因而可根据研究的需要增减具有重要生物活性物质的种类和数量。

这就为研究细胞分化的条件提供了有效的手段。

(2)用于激素、生长因子和药物等与细胞相互作用的研究。

(3)用于从多种细胞混杂的培养中选择目的细胞:通过对无血清培养中的某些成分的取舍,可抑制原代组织培养物中非目的细胞的过度生长,达到选择目的细胞的目的。

(4)肿瘤病理学和病因学的研究:如用于研究致癌因子对细胞的影响,研究肿瘤细胞对可能触发正常细胞终末分化的外周信号的反应能力,或用于研究正常细胞与肿瘤细胞的生长和移行与基底膜信号的关系等。

(5)无血清培养基在生物制品生产中的得到广泛应用,国内外的很多生产单位都在致力于如何将无血清培养基与发酵罐培养技术更好的结合应用。

另外,无血清培养基还广泛应用于干细胞和免疫细胞的研究和临床治疗中。

且在此领域对无血清培养基的需求量最大而且最迫切。

1.4 无血清培养基产业链结构无血清培养基上游行业主要是基础培养基、添加因子。

无血清培养基下游主要应用于生物制品、细胞生物学、药理学等行业。

1.5 无血清培养基产业概述及主要地区发展现状通常,动物细胞的生长均有赖于血清的存在,在普通培养基中,如不加血清,绝大部分细胞不能增殖。

目前,血清培养基中通常添加的比较好的血清是牛血清。

经研究发现细胞培养中使用牛血清存在污染外源病毒和致病因子的风险:由于不同批次牛血清间的生物活性和因子的不一致,导致产品和实验结果的重现性差:制品中残留的牛血清易引起接种者对血清的过敏反应。

无血清培养基是继天然培养基,合成培养基之后的第三类培养基。

与传统的培养基相比较,无血清培养基是不含动物血清或其他生物提取液,但仍可以维持细胞在体外较长时间生长、繁殖的一种培养基。

无血清培养基由于其组成成分相对清楚,制备过程简单,在现代生物技术学领域得到广泛应用。

无血清培养技术也是阐明细胞生长,增值,分化及基因表达调控的基础研究问题的有力工具。

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联系:电话& 微信:壹叁柒伍零零零壹肆零叁Q Q:9847 53543正文目录第一章产业概述1.1 无血清培养基定义1.2 无血清培养基分类1.3 无血清培养基应用领域1.4 无血清培养基产业链结构1.5 无血清培养基产业概述及主要地区发展现状1.6 无血清培养基产业政策分析1.7 中国无血清培养基行业批文情况1.8 无血清培养基行业新闻动态分析第二章无血清培养基生产成本分析2.1 无血清培养基原材料分析2.2 劳动力成本分析2.3 其他成本分析2.4 生产成本结构分析2.5 无血清培养基生产工艺分析2.6 全球2013-2018年无血清培养基价格、成本及毛利率分析第三章技术资料和制造工厂分析3.1 全球主要生产商产品3.2 全球主要生产商兼并情况3.3 全球主要生产商2018年无血清培养基产品种类3.4 全球主要生产商2018年无血清培养基关键原料来源分析第四章无血清培养基产量细分(按地区、产品类别及应用)4.1 全球主要地区2013-2018年无血清培养基产量细分4.2 全球2013-2018年无血清培养基主要产品类别产量4.3 全球2013-2018年无血清培养基主要应用领域产量4.4 全球主要地区2013-2018年无血清培养基价格分析4.5 美国2013-2018年无血清培养基产能、产量、价格、成本及产值分析4.6 欧洲2013-2018年无血清培养基产能、产量、价格、成本及产值分析4.7 中国2013-2018年无血清培养基产能、产量、价格、成本及产值分析第五章无血清培养基消费量及消费额的地区分析5.1 全球主要地区2013-2018年无血清培养基消费量分析5.2 全球主要地区2013-2018年无血清培养基消费额分析5.3 全球主要地区2013-2018年消费价格分析第六章无血清培养基2013-2018年产供销需市场现状和分析6.1 2013-2018年无血清培养基产能及产量统计6.2 无血清培养基2013-2018年产量及市场份额6.3 无血清培养基2013-2018年销量综述6.4 无血清培养基2013-2018年供应量、销量及缺口量6.5 中国2013-2018年无血清培养基进口量、出口量及消费量6.6 无血清培养基2013-2018年成本、价格、产值、毛利率第七章无血清培养基核心企业研究7.1 北京清大天一科技有限公司7.1.1 企业介绍7.1.2 产品参数7.1.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析7.2 北京弘博康医药科技有限公司7.2.1 企业介绍7.2.2 产品参数7.2.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析7.3 赛业(广州)生物科技有限公司7.3.1 企业介绍7.3.2 产品参数7.3.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析7.4 上海奥浦迈生物科技有限公司7.4.1 企业介绍7.4.2 产品参数7.4.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析7.5 北京天信和生物科技有限公司7.5.1 企业介绍7.5.2 产品参数7.5.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析7.6 甘肃健顺生物科技有限公司7.6.1 企业介绍7.6.2 产品参数7.6.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析7.7 广东普奥思生物科技有限公司7.7.1 企业介绍7.7.2 产品参数7.7.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析7.8 上海多宁生物科技有限公司7.8.1 企业介绍7.8.2 产品参数7.8.3 产能、产量、产值、价格、成本、毛利及毛利率分析第八章无血清培养基价格和毛利率分析8.1 价格、供应及消费分析8.2 毛利率分析8.3 全球各地区出厂价格对比8.5 不同价格水平无血清培养基市场份额分析8.6 不同应用领域无血清培养基毛利率分析第九章无血清培养基营销渠道分析9.1 无血清培养基营销渠道现状分析9.2 无血清培养基营销渠道特点介绍9.3 中国无血清培养基营销渠道发展趋势9.4 各地区无血清培养基进口、出口和贸易第十章无血清培养基行业2019-2025年发展预测10.1 无血清培养基2019-2025年产能及产量预测10.2 无血清培养基2019-2025年产量及市场份额10.3 无血清培养基2019-2025年销量综述10.4 无血清培养基2019-2025年供应量、销量及缺口量10.5 无血清培养基2019-2025年进口量、出口量及消费量10.6 无血清培养基2019-2025年成本、价格、产值、毛利率第十一章无血清培养基供应链分析11.1 无血清培养基原材料主要供应商和联系方式11.2 无血清培养基生产设备供应商及联系方式11.3 无血清培养基主要供应商和联系方式11.4 无血清培养基主要客户联系方式11.5 无血清培养基供应链条关系分析第十二章无血清培养基新项目投资可行性分析12.1 无血清培养基新项目SWOT分析12.2 无血清培养基新项目可行性分析第十三章无血清培养基产业研究总结。

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