生物药剂学 实验设计

不同促渗剂对新乌头碱透皮吸收率的影响

一、实验目的

研究不同促渗剂对乌头碱的透皮吸收率的影响情况.

二、实验依据

经皮给药是一种较为新颖的给药途径,其渗透能力除了和药物本身性质有关外,还与其它外界条件有一定关系,例如皮肤生理状态,促渗剂的选择,以及基质的pH等都可能影响经皮吸收药物的吸收率,本实验则主要为探究促渗剂对药物的影响.

三、仪器设备和实验材料

1.1 仪器

高效液相色谱仪,检测器,透皮扩散仪,超声波仪.

1.2 动物与试剂

实验动物：SD大鼠，7～8周龄，体重为180～200g，雌雄不限

试剂：那如一3巴布剂（主要有效成分为新乌头碱)，成分为草乌、诃子、荜茇. 新乌头碱标准品

流动相：甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷为色谱纯；二乙胺、无水乙醇为分析纯；

促渗剂： 3％氮酮、3％氮酮+3％丙二醇、3％氮酮+ 3％薄荷脑、3％氮酮+ 3％油酸．

基质：CMC-Na、PVA、PVPK30、甘油

四、实验步骤（详细的操作方法）

1.1 动物离体皮肤的制备及保存

大鼠鼠皮的制备：将大鼠用10％氨基甲酸乙酯腹腔注射麻醉，背位固定于鼠台，用牙刷将含10％硫化钠的脱毛剂均匀地涂于大鼠的腹部毛上，约3～5min，鼠毛的颜色变黄后，用清水冲洗掉鼠毛，纱布擦干皮肤。2日后处死，用剪刀将脱去毛的鼠皮取下，清理残余的皮下组织和脂肪，浸在生理盐水中，冰箱中1℃～2℃保存。

1.2 透皮扩散实验方法

1) 药物供试品溶液制备：首先要制备基质, 称取CMC-Na、PVA、PVPK30、甘油适量，加水溶胀过夜，50 ℃水浴搅拌20 min 至基质完全溶解，同温超声脱气泡得空白基质。然后制备那如－3巴布剂提取物浸膏,分别向4个容量瓶加入制备好的提取物浸膏10ml,再向4个容量瓶加入等量完全溶解的基质,最后分别向4个容量瓶的溶液加入上述4种不同的促渗剂或混合促渗剂.

2）透皮扩散实验方法:透皮扩散试验仪的立式玻璃扩散池容积为7．0ml，扩散面积为2．92cm2。向扩散池中加入生理盐水+PEG400水溶液(1:1)适量,水浴温度为(37±1) 度，磁力搅拌速度为300r /min ，将大鼠皮固定扩散池的给药室和接受池之间，渗透面积A为2.92cm2。取供试品制剂(载药量60μg)涂于离体皮肤的角质层表面。于规定时间点吸取5ml 接受液，同时补加相同体积的生理盐水。

3)含量测定:

①高效液相色谱条件色谱柱：Hypersil ODS C18柱(4．6mm×150mm，5μm)；流动

相：甲醇一水一氯仿一二乙胺(70：30：1：0．2)；流速：1．0ml／min;柱温：25℃；

检测波长：240nm.

②标准品溶液的配制：精密称量新乌头碱5．18mg，置于lOml容量瓶中，用二氯甲

烷溶解至刻度,作为母液,取适量配制成20μg/ml的标准品溶液．

③取在透皮扩散实验中得到的自接受液中得到的系列溶液0.5ml，以及标准品溶液

0.5ml，顺次进样,得到一系列色谱图．通过计算峰面积即可得到透皮扩散实验系列

溶液的浓度．

五、实验结果预测

加入不同促渗剂的同种药物，理论上其累计渗透量以及单位渗透量均应该有着较明显的差别．因为每组实验每组取样时间间隔一样，所以可以不考虑时间影响．

六、本实验的创新点

本实验用的是一般的透皮实验吸收方法，但本药物在促渗剂方面的研究还不是很完善，所以拟通过本实验，希望探究出更适合于本药的促渗剂，适用于不同人群的用药要求的促渗剂．

七、参考文献

1.祁艳,陈军,李磊,蔡宝昌．不同促渗剂对马钱子碱贴剂体外透皮吸收的影响．中国药，2011年第22卷第3期．

2. 刘志敏，牛欣，李海燕．蒙药那如一3巴布剂中新乌头碱的透皮速率测定．中华中医药杂志，2005年第2O卷第6期