实验-植物根系活力的测定
植物根系活力的测定方法 ( TTC 法)

实验 5 植物根系活力的测定( TTC 法)植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。
本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、原理氯化三苯基四氮唑( TTC )是标准氧化电位为 80 mV 的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲( TTF ),生成的三苯甲( TTF )比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以 TTC 被广泛用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的 TTC 还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以 TTC 还原量能表示脱氢酶活性,并作为根系活力的指标。
二、实验材料、试剂与仪器设备(一)实验材料水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
(二)试剂1. 乙酸乙酯(分析纯)。
2. 次硫酸钠( Na 2 S 2 O 4 ,分析纯),粉末。
3. 1 % TTC 溶液:准确称取 TTC 1.0 g ,溶于少量水中,定容到 100 mL 。
用时稀释至需要的浓度。
4. 磷酸缓冲液( 1/15 mol/L , pH7.0 )。
5. 1 mol/L 硫酸:用量筒取比重 1.84 的浓硫酸 55 mL ,边搅拌边加入盛有 500 mL 蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至 1000 mL 。
6. 0.4 mol/L 琥珀酸:称取琥珀酸 4.72 g ,溶于水中,定容至 100 mL 即成。
(三)仪器设备小烧杯 3 个,研钵 1 个,移液管: 0.5 mL 1 支、 10 mL 1 支、 5 mL 3 支,刻度试管 6 支,分光光度计,分析天平(感量 0.1 mg ),电子顶载天平(感量 0.1 g ),温箱,试管架,药勺,石英砂适量,滤纸。
三、实验步骤1. 定性测定( 1 )配制反应液把 1 % TTC 溶液、 0.4 mol / L 的琥珀酸和磷酸缓冲液按 1:5:4 比例混合。
根系活力测定方法

植物根系活力的测定(甲烯蓝法)植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。
本实验学习测定根系活力的甲烯蓝法。
【原理】根据沙比宁等的理论,植物对溶质的吸收具有表面吸附的特性,并假定被吸附物质在根系表面形成一层均匀的单分子层;当根系对溶质的吸附达到饱和后,根系的活跃部分能将吸附着的物质进一步转移到细胞中去,并继续产生吸附作用。
在测定根系活力时常用甲烯蓝作为吸附物质,其被吸附量可以根据吸附前后甲烯蓝浓度的改变算出,甲烯蓝浓度可用比色法测定。
已知1mg甲烯蓝形成单分子层时覆盖的面积为1.1m2,据此可算出根系的总吸收面积。
从吸附饱和后再吸附的甲烯蓝的量,可算出根系的活跃吸收表面积,作为根系吸收活力的指标。
【材料、仪器与试剂】1.材料:植物根系。
2.仪器及用具:分光光度计;移液管;烧杯;比色管。
3.试剂:0.01 mg•mL-1甲烯蓝溶液;0.0002 mol•L-1(0.075 mg•mL-1)甲烯蓝溶液。
【方法与步骤】1. 甲烯蓝标准曲线的制作按表2-1用0.01 mg•mL-1甲烯蓝溶液配制系列标准溶液,于660 nm处测定吸光度,以甲烯蓝浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
表2-1 甲烯蓝系列标准溶液的配制2. 将待测的植物根系洗净沥干,浸在装有一定量水的量筒中,用排水法测定根系的体积(或用体积计测定)。
3. 将0.0002 mol•L-1的甲烯蓝溶液(每毫升溶液中应含0.075 mg甲烯蓝,为消除溶液配制和比色误差,其含量需要重新进行比色,查标准曲线确定)分别倒入3个小烧杯中,编号,每个烧杯中溶液体积约10倍于根系的体积。
准确记下每个烧杯中的溶液量。
4. 将洗净的待测根系,用吸水纸小心吸干,然后依次浸入盛有甲烯蓝溶液的烧杯中,每杯中浸1.5 min,注意每次取出时,都要使根上的甲烯蓝溶液流回到原杯中去。
5. 从3个小烧杯中各吸取甲烯蓝溶液1 mL,用去离子水稀释10倍后,于660 nm处测定吸光度,根据标准曲线,查得各杯浸根后甲烯蓝的浓度。
实验四 根系活力的测定

实验四根系活力的测定一、意义根系是植物对水分和矿质营养的主要吸收器官,同时又是植物体中重要物质如氨基酸、激素等物质合成、同化、转化的器官,因此根的生长情况和活动能力直接影响植物个体的生长情况、营养水平和产量水平等具有重要的实际意义。
在科学研究中常把根系的呼吸强度、阳离子代还量(CEC)、对有色物质的吸附量和ATP酶的活性等作为作物根系活力的指标。
二、测定原理TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯基甲月朁(TTF)。
具有活力的组织和细胞在呼吸作用中,脱氢酶催化底物氧化脱氢产生NADH、NADPH 等还原性物质,当TTC渗入组织或细胞时呼吸过程产生的还原物质可将其还原成TTF(红色),组织或细胞被染成红色。
死细胞无呼吸,不发生这样的氧化还原反应。
应用这一原理,可根据组织或细胞染色情况来检测种子、花粉、根系等的活力。
植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到加强;而被丙二酸、碘乙酸所严重抑制。
还原强度(即根系活力强弱)可用TTF的生成量来表示。
TTF在485 nm 处有吸收峰,用乙酸乙酯提取后测定OD485,通过标准曲线计算TTF的生成量,用单位时间内单位根重产生的TTF表示根系的活力。
三、仪器设备1.分光光度计;2.分析天平(感量0.1mg);3.托盘天平(感量0.1 g);4.温箱;5.研钵:1套;6.4 cm漏斗:2 个;7.量筒10 mL:1 个;8.刻度移液管:0.5 mL、2 mL、5 mL;9.10 mL容量瓶(或10 mL具塞刻度试管):8个;10.试管架:1 个;11.石英砂适量;12.高型称量瓶(30×60 mm):2 个。
四、试剂1.乙酸乙酯(分析纯);2.连二亚硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末;3.1 %TTC溶液:准确称取TTC 1.0000 g,溶于少量水中,定容到100 mL,用时稀释至需要浓度;4.0.1 mol ·L -1 pH 7.5磷酸缓冲液;5.1 mol ·L -1 硫酸:用量筒取比重1.84的浓硫酸55 mL,边搅拌边加入盛有500 mL蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000 mL;6.0.4 mol ·L -1琥珀酸:称取琥珀酸4.72 g,溶于水中,定容至100 mL。
实验3 根系活力的测定(TTC法)

实验3 根系活力的测定(TTC法)植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。
本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
一、实验目的熟悉测定根系活力的方法和原理二、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC 被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
三、材料、设备仪器及试剂1、材料:水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
2、仪器设备:分光光度计;分析天平(感量0.1mg);电子顶载天平(感量0.1g);温箱;研钵;三角瓶50ml;. 漏斗;. 量筒100ml;吸量管10ml;. 刻度试管10ml;. 试管架;容量瓶10ml;. 药勺;. 石英砂适量;. 烧杯10ml、1000ml。
3、试剂:乙酸乙酯(分析纯)。
次硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末。
.1%TTC溶液准确称取TTC1.0g,溶于少量水中。
定容到100ml。
用时稀释至各需要的浓度。
磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7)。
. 1mol/L硫酸用量筒取比重1.84的浓硫酸55ml,边搅拌边加入盛有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000ml。
.0.4mol/L琥珀酸称取琥珀酸4.72g,溶于水中,定容至100ml即成。
四、实验步骤1、TTC标准曲线的制作取0.4%TTC溶液0.2ml放入10ml量瓶中,加少许Na2S2O4粉摇匀后立即产生红色的甲月替。
再用乙酸乙酯定容至刻度,摇匀。
然后分别取此液0.25ml、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml 置10ml容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度,即得到含甲月替25μg、50μg、100μg、150μg、200μg的标准比色系列,以空白作参比,在485nm波长下测定吸光度,绘制标准曲线。
根系活力的测定实验报告

根系活力的测定实验报告
《根系活力的测定实验报告》
根系是植物的重要器官之一,它承担着吸收水分和养分的功能,同时也是植物生长的重要支撑。
因此,了解根系活力对于研究植物生长发育具有重要意义。
为了深入了解根系活力的测定方法,我们进行了一项实验。
实验方法:
1. 实验材料:本实验选取了小麦种子作为实验材料。
2. 实验步骤:
a. 将一定数量的小麦种子放入含有适量水的培养皿中,让其在恒温恒湿的条件下进行发芽。
b. 在小麦种子发芽后,选取相同大小的小麦幼苗,将其根系放入适量的生理盐水中浸泡一段时间。
c. 将浸泡后的小麦根系取出,用酒精进行漂白处理,然后将其放入含有适量三氧化二砷的溶液中浸泡。
d. 观察小麦根系的活力情况,并记录下根系的长度、数量和形态等数据。
实验结果:
经过实验测定,我们得到了小麦根系的活力数据。
通过对比实验前后小麦根系的长度、数量和形态等数据,我们可以清晰地了解到小麦根系的生长情况。
在实验中,我们发现浸泡后的小麦根系长度有所增加,数量也有所增加,形态也更加健康。
实验结论:
通过本次实验,我们成功测定了小麦根系的活力情况。
根据实验结果,我们可
以得出结论:浸泡处理可以促进小麦根系的生长,增强其活力。
这为我们进一步研究植物生长发育提供了重要的参考依据。
总结:
根系活力的测定是研究植物生长发育的重要手段之一,通过实验测定,我们可以了解根系的生长情况,为进一步研究提供重要数据支持。
希望本次实验结果能够对相关领域的研究工作提供一定的参考价值。
植物根系活力实验报告

一、实验目的通过本次实验,我们旨在探究植物根系活力的影响因素,并运用TTC法测定根系活力,以了解根系对外界环境的适应能力及对不同环境因素的响应。
二、实验原理植物根系活力是指根系吸收水分和养分的能力,它是植物生长和发育的重要指标。
TTC法(氯化三苯基四氮唑法)是一种常用的测定根系活力的方法。
该法基于根系活力与细胞呼吸作用的关系,通过测定根系在特定条件下对TTC的还原程度来评估其活力。
三、实验材料与方法1. 实验材料- 植物材料:小麦、玉米、大豆等- 实验试剂:TTC溶液、蒸馏水、盐酸、氢氧化钠等- 仪器设备:分光光度计、烘箱、天平等2. 实验方法(1)根系活力测定- 将植物根系洗净、烘干,称重后剪成1-2厘米的小段。
- 将根系放入装有适量TTC溶液的试管中,在25℃下避光培养24小时。
- 用蒸馏水冲洗根系,去除多余的TTC,然后用盐酸和氢氧化钠调节pH值至中性。
- 将根系放入烘箱中,在80℃下烘干至恒重。
- 称量烘干后的根系重量,计算根系活力。
(2)不同环境因素对根系活力的影响- 将植物根系分别置于不同温度、光照、土壤水分等条件下培养,然后按照上述方法测定根系活力。
四、实验结果与分析1. 不同植物根系活力的比较实验结果显示,小麦、玉米、大豆等植物的根系活力存在差异。
其中,小麦的根系活力最高,玉米次之,大豆最低。
2. 不同环境因素对根系活力的影响(1)温度:在一定范围内,随着温度的升高,根系活力逐渐增强。
但当温度过高时,根系活力会下降。
(2)光照:光照强度对根系活力有显著影响。
在一定光照强度范围内,根系活力随光照强度的增加而增强。
但当光照强度过高时,根系活力会下降。
(3)土壤水分:在一定土壤水分范围内,根系活力随土壤水分的增加而增强。
但当土壤水分过多或过少时,根系活力会下降。
五、结论本次实验通过TTC法测定了不同植物根系活力,并分析了温度、光照、土壤水分等环境因素对根系活力的影响。
结果表明,根系活力受多种因素影响,其中温度、光照、土壤水分等因素对根系活力的影响较为显著。
植物根系活力的测定(ttc法)

实验概要植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。
本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。
实验原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲瓒,生成的三苯甲瓒比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
主要试剂1.乙酸乙酯(分析纯)。
2. 次硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末。
3. 1%TTC溶液准确称取TTC1.0g,溶于少量水中,定容到100ml。
用时稀释至各需要的浓度。
4. 磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7)。
5. 1mol/L硫酸用量筒取比重1.84的浓硫酸55ml,边搅拌边加入盛有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000ml。
6. 0.4mol/L琥珀酸称取琥珀酸4.72g,溶于水中,定容至100ml即成。
主要设备1. 分光光度计;2. 分析天平(感量0.1mg);3. 电子顶载天平(感量0.1g);4. 温箱;5. 研钵;6. 三角瓶50ml;7. 漏斗;8. 量筒100ml;9. 吸量管10ml;10. 刻度试管10ml;11. 试管架;12. 容量瓶10ml;13. 药勺;14. 石英砂适量;15. 烧杯10ml、1000ml。
实验材料水培小麦根系。
实验步骤1. 定性测定1)配制反应液把1%TTC 溶液、0.4 mol/L 的琥珀酸和磷酸缓冲液按1:5:4 比例混合。
2)把根仔细洗净,把地上部分从茎基部切除。
将根放入三角瓶中,倒入反应液,以浸没根为度,置37℃左右暗处放1~3h ,以观察着色情况,新根尖端几毫米以及细侧根都明显地变成红色,表明该处有脱氢酶存在。
实验五+根系活力的测定

实验五根系活力的测定一、实验目的• 1、理解植物根系活力的内涵• 2、熟悉测定根系活力的方法及测定原理:•二、实验原理TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
在幼根中,脱氢酶活性的强弱与根系活力成正比。
所以,通过测定脱氢酶的活性,可由脱氢酶活性代表根系活力。
氯化三苯基四氮唑(TTC)溶于水中为无色溶液,还原后生成稳定、红色、不溶于水的三苯基甲腙 (TTF)。
生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化溶于乙酸乙酯,485nm有最高吸收峰三、实验材料及用品实验材料:水培1天葱的根系实验器皿:分光光度计、水浴锅、研钵、漏斗、移液管、比色皿、容量瓶、烧杯、滤纸实验溶液:乙酸乙酯、石英砂、硫代硫酸钠(Na2S2O4)、TTC、磷酸缓冲液、硫酸四、实验步骤1.制作TTC标准曲线将配制好的浓度为0,0.01%,0.02%,0.03%,0.04%的TCC溶液,各取5ml放入比色管中,在哥使馆中加入乙酸乙酯5ml和Na2S2O2粉末少量,摇匀?溶液分层,甲腙位于乙酸乙酯层?取上层乙酸乙酯?485nm比色?标准曲线?记录数据。
2.测定根系活力将根系洗净,搽干表面水分,取0.5g根尖样品(第1份加1mol/L硫酸2ml )?0.5,TTC溶液5ml?磷酸缓冲液5ml?37?下保温1h?第2份试管加入1mol/L硫酸2ml,以杀死根系作为空白对照?取出根,洗净,吸干水分?与4 ml乙酸乙酯和少量石英砂在研钵内磨碎 ?红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到10ml?空白试验作参比测485nm下吸光度?根据标准曲线,求四氮唑还原量。
五、实验现象和结果a、制作标准曲线(显示计算公式及R^2值)浓度(mg/ml) 0 1 2 3 4 OD值 0 0.157 0.418 0.820 1.187表一各浓度吸光度值记录表图一各浓度TTC溶液在485nm下的吸光度曲线图如图一所示,回归方程为y=303.7x – 0.0910, R^2=0.9735把样品吸光度0.021nm代入方程可得x=3.688x10^-4b、计算TTC还原强度和还原量=TTC浓度×提取液总体积(×稀释倍数) 四氮唑还原量(ug)=3.688 x 10^-4 x 25=9.22x 10^-3 ug四氮唑还原量(ug)四氮唑还原强度(ug/g(根鲜重)/h)= ———————————[根重(g)×时间(h)]= 9.22x10^3/(0.5x1)=1.844x10^-2六、分析和讨论1.在实验中,进行标准曲线制作步骤时,加入Na S O粉末摇匀后为出现红色,可能是由于溶液本身浓度有偏差和操作时加入的溶液有偏差。
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实验-植物根系活力的测定
植物根系活力是指植物根系在土壤中生长、吸收水分和养分的能力。
测定植物根系活力的方法有很多种,其中常用的方法是测定根长、根数和根重等指标。
下面介绍一种简单的测定植物根系活力的实验方法。
实验目的:
测定不同植物对不同营养液的根系生长情况,比较不同营养液对根系生长的影响。
实验器材:
1. 玻璃培养皿
2. 密闭袋
3. 印度蓝溶液
4. 双面胶带
5. 不同营养液:蔗糖水、盐水、橙汁、矿泉水等。
实验步骤:
1. 将玻璃培养皿控制在 3~7 cm,用双面胶带将玻璃培养皿固定于橙汁、矿泉水、蔗糖水、盐水等不同营养液中。
2. 取几株同龄、同质、同株的植物。
去掉表皮组织,并将植物的根部放入玻璃培养皿里。
3. 将培养皿置于密闭袋内,保证环境温度、光线和空气湿度的一致性。
4. 每天提取一些根系,用印度蓝溶液染色。
将所有染蓝的根系取出,用银砂纸将植物根系的颜色刮干净,然后用千分尺测量根长或者称重等。
实验注意事项:
1. 保持密闭袋的气密性,注意通风、换氧。
2. 保持营养液的稳定性,避免出现水质的变化。
实验结论:
从实验结果来看,不同营养液对植物根系的生长效果不尽相同。
因此,植物的根系发育和生长需要各种不同的营养元素。
营养液中各种无机盐和有机化合物含量的不同,可能会影响植物根系的生长效果。