免疫学检测新技术在临床检验中的应用与进展
检验科免疫组化常见检测与分析方法
检验科免疫组化常见检测与分析方法免疫组化技术是一种利用免疫学原理，通过检测和定位特定蛋白质在组织或细胞中的表达水平和位置的方法。
在医学检验科中，免疫组化技术被广泛应用于疾病的诊断、治疗及预后评估。
本文将介绍一些常见的免疫组化检测与分析方法。
一、免疫组化染色法免疫组化染色法是免疫组化技术中最常用的方法之一。
它通过采用免疫荧光、酶标记、金标记或放射性标记等技术，将特定抗原与特异性抗体结合，并通过染色或荧光的方式来显示其位置和表达水平。
免疫组化染色法广泛应用于各种疾病的诊断，如肿瘤标记物的检测、感染性疾病的诊断等。
二、免疫组织化学法免疫组织化学法是一种在组织切片上进行免疫组化染色的方法。
它通过对切片进行蛋白质抗原的恢复处理和抗体的特异性结合，来检测和显示抗原在组织中的位置和表达水平。
免疫组织化学法主要应用于病理学领域，帮助医生确定疾病的类型和分级。
三、免疫荧光法免疫荧光法是利用特异性抗体与抗原结合后，在显微镜下观察抗原在组织或细胞中的分布情况和表达水平的技术。
免疫荧光法具有高灵敏度和高特异性的优点，被广泛应用于自身免疫性疾病、感染性疾病等的诊断。
四、免疫电镜法免疫电镜法是一种在电镜下观察和检测抗体与抗原结合的方法。
它通过在样品上标记抗体或抗原，然后利用电镜来观察并获得高分辨率的图像。
免疫电镜法主要用于对超微结构进行研究和观察，是研究细胞和组织的重要手段。
五、免疫组化信号放大技术免疫组化信号放大技术是一种能够放大免疫染色信号并提高染色效果的方法。
常见的免疫组化信号放大技术包括多聚酶法、银增强法、酶蛋白复合物法等。
这些技术在免疫组化检测中可以提高检测的灵敏度和准确性。
免疫组化技术因其高度敏感、高特异性和定量分析的优势，成为了疾病诊断与治疗中不可或缺的重要方法。
随着技术的发展和创新，免疫组化技术将在临床医学中发挥越来越重要的作用。
综上所述，本文介绍了免疫组化检测与分析的常见方法，包括免疫组化染色法、免疫组织化学法、免疫荧光法、免疫电镜法以及免疫组化信号放大技术。
免疫学及免疫学检验标记技术
免疫学及免疫学检验标记技术引言免疫学是研究机体对抗外源性物质或自身异常细胞的防御机制的学科，它对于认识免疫系统的结构和功能，以及预防和治疗感染、免疫性疾病等方面具有重要意义。
而免疫学检验是一种通过检测人体内的免疫反应来确定是否存在某种疾病的方法。
为了更准确地进行免疫学检验，研究人员开发了一系列免疫学检验标记技术，用于标记和检测疾病相关抗原和抗体。
主体免疫学基础知识免疫学是一门研究机体对抗病原微生物、肿瘤细胞等外来物质及异常细胞的防御机制的学科。
人体免疫系统主要由免疫器官、免疫细胞和免疫分子组成。
免疫细胞包括T细胞、B细胞、巨噬细胞等，而免疫分子则包括抗体、细胞因子等。
免疫反应可分为自然免疫和适应性免疫两种类型。
自然免疫是人体先天性的免疫防御机制，能快速对抗病原微生物的入侵。
适应性免疫是通过识别抗原并生成特异性抗体或细胞免疫反应来应对感染和疾病的。
免疫学检验标记技术概述免疫学检验标记技术是一种通过标记特定抗原或抗体用于检测的方法。
常用的标记技术包括酶联免疫吸附检测（ELISA）、放射免疫分析（RIA）、荧光免疫分析（FIA）等。
这些技术能够高度特异性地检测抗原和抗体，广泛应用于临床诊断、药物开发等领域。
酶联免疫吸附检测（ELISA）酶联免疫吸附检测（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学检验标记技术。
它通过将抗原或抗体与酶标记物结合，在固相载体上形成免疫复合物，通过酶的测定手段来检测样品中的特定抗原或抗体。
ELISA技术具有高灵敏度、高特异性、高重复性和简单性等优点，广泛应用于临床检验和科研领域。
放射免疫分析（RIA）放射免疫分析（Radioimmunoassay）是一种利用放射性同位素标记特定抗原或抗体进行检测的技术。
它通过测定放射性同位素的放射性衰变来定量分析样品中的抗原或抗体。
RIA技术具有高灵敏度和高特异性的优点，但由于涉及放射性物质的使用，其操作相对复杂且具有一定的安全风险。
《免疫学及免疫学检验技术》课程思政的探讨与实践
2、理论与实践并重：免疫学及免疫学检验技术不仅需要掌握理论知识，还需 要具备实践技能。实验结果的解读需要学生具备分析问题的能力，同时还需要 学生具备一定的实验室操作技能。
3、发展迅速：免疫学领域的研究成果日新月异，新技术、新方法不断涌现。 免疫学检验技术也在不断发展和完善，对学生提出了更高的要求。
5、职业道德素养：通过案例分析和实践操作的强调学生对职业道德的认识更 加深刻他们在未来的工作中能够更好地履行职责和服务意识从而更好地为患者 服务社会责任感和使命感得到增强.
参考内容
一、引言
病原生物学与免疫学是医学领域中非常重要的学科，它们的研究和应用对于预 防和治疗疾病具有至关重要的作用。近年来，随着医学科技的快速发展，病原 生物学与免疫学在医学教育中的地位也日益凸显。然而，单一的学科教育已经 不能满足现代医学教育的需求，因此，将病原生物学与免疫学进行融合课程思 政教育是医学教育发展的必然趋势。本次演示旨在探讨病原生物学与免疫学融 合课程思政的实践方法及其应用效果。
引导ห้องสมุดไป่ตู้生学习科学家的探索精神和奉献精神；可以通过开展临床实践活动，让 学生亲身感受医生的职业责任和使命，增强他们的职业认同感和荣誉感。
2、强化学生的科学素养
医学微生物学与免疫学是生命科学的重要组成部分，它们的研究领域涉及到生 命科学的各个方面。因此，通过融合课程的思政教育，可以强化学生的科学素 养和综合能力。例如，可以通过引导学生了解微生物的分类、命名、生态分布 等知识，培养学生的逻辑思维和科学思维能力；可以通过讲解免疫系统的组成 和功能，
同时，随着科学技术的发展，医学微生物学与免疫学在临床诊疗、疾病预防和 控制方面发挥着越来越重要的作用，因此对学生的实践能力和综合素质提出了 更高的要求。
免疫学检验的方法和特点
免疫学检验的方法和特点免疫学检验是一种通过检测和分析机体免疫系统相关指标来评估机体免疫功能的方法。
它可以用于疾病的诊断、预防和治疗过程中，对于研究免疫系统的功能和疾病的免疫机制也具有重要意义。
免疫学检验的方法主要包括体外诊断试验、免疫组化技术和流式细胞术等。
下面将逐一介绍这些方法的特点和应用。
1. 体外诊断试验：体外诊断试验是最常用的免疫学检验方法之一，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫分析（RIA）、免疫印迹（Western Blot）等。
这些试验通过检测血清中的抗体或抗原来评估机体的免疫状态。
其特点是操作简单、结果准确可靠、样本来源广泛，可以用于检测多种疾病，如感染病、自身免疫病等。
体外诊断试验的优势在于可以进行大规模筛查，对于人群健康状况的监测和疾病的早期诊断具有重要意义。
2. 免疫组化技术：免疫组化技术是利用抗体与组织或细胞中特定分子的结合反应来检测和定位这些分子的方法。
常用的免疫组化技术包括免疫组织化学（IHC）和免疫荧光染色（IF）等。
这些技术可以用于检测和定位肿瘤标志物、炎症细胞因子、免疫细胞表面标志物等，对于疾病的诊断和治疗有重要的指导意义。
免疫组化技术的优势在于可以直接观察到分子的表达和分布情况，具有较高的灵敏度和特异性。
3. 流式细胞术：流式细胞术是一种通过检测和分析细胞表面标志物来鉴定和分类细胞的方法。
通过标记细胞表面的抗原或抗体，结合流式细胞仪的高速流式分析技术，可以对单个细胞进行高通量的检测和分析。
流式细胞术可以用于检测和鉴定免疫细胞亚群、肿瘤细胞、干细胞等，对于疾病的诊断和治疗选择有重要的指导作用。
流式细胞术的优势在于可以同时检测多个指标，对于复杂的样本分析有较高的效率和准确性。
免疫学检验的特点包括以下几个方面：1. 高度特异性：免疫学检验方法可以通过特异的抗体-抗原反应来检测和定量分析特定的分子或细胞，具有较高的特异性。
这使得免疫学检验方法在疾病的诊断和治疗中具有重要的优势，可以准确地鉴定和区分不同的疾病类型。
放射免疫法与酶免疫法在临床检验上的应用
放射免疫法与酶免疫法在临床检验上的应用摘要】放射免疫法RIA在生物检验上最常使用I-125做为标定物质，标定乙型肝炎表面抗体，比较放射免疫法与酶免疫法EIA的灵敏度与专一性及各中优缺点。
酶免疫法与放射免疫法是临床常使用的免疫化学法。
但前者不需使用到放射性物质，所以广泛被使用，酶免疫法中的异相酶免疫法ELISA的测定有很多种，有测定抗原的双抗体夹心法，有测定抗体的间接法。
酶免疫分析法EIA优点试剂稳定，且沒有放射性物质的放射危险，缺点是酶免疫使用的介质有毒或会致癌，故放射免疫分析法RIA优点是检体中不具放射性，沒有內在背景干扰，具极高灵敏度（1pg／ml），缺点是试剂不稳定，另有辐射污染，废弃物的善后。
【关键词】放射免疫法酶免疫法【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）30-0011-02乙型肝炎是肝炎病毒引起的疾病，其感染途径为不当的注射或输血所至。
乙型肝炎是一种免疫性疾病，当病毒进入人体后，将引发自身免疫反应，造成肝脏的损伤。
凡病毒产物(抗原)或宿主对抗病毒的产物(抗体)。
即所谓免疫标记，常成为免疫疾病的工具。
乙型肝炎有六种免疫标记：表面抗原、核心抗原、e-抗原以及相对的抗体，其中最早出现在血液的为表面抗原。
表面抗原虽非病毒本体，但它的存在为病毒繁殖的确证。
运用放射免疫分析法(RIA)及酶免疫分析法(EIA)，检测乙型肝炎表面抗体。
1、材料与方法放射免疫分析法(RIA)中的材料有乙型肝炎表面抗体试珠I—125标示乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎表面抗原阳性对照组PC、乙型肝炎表面阴性对照组(不含乙型肝炎标记)NC。
酶免疫分析法(EIA)的材料有乙型肝炎表面抗体试盘、乙型肝炎表面抗体过气化酶偶合物、乙型肝炎表面抗原阳性对照组、乙型肝炎表面阴性对照组(不含乙型肝炎标记)、呈色剂。
放射免疫分析法(RIA)是将每一试孔中各加入一试珠，分别加200ulNC至3个试孔，200ulPC至2个试孔，室温培育15分钟，合试珠的试孔中各加入100ul的I-125Anti-HBs溶液，40°C培育1小时，清洗试珠，将试珠倒入试管，用r-count测读每一试管1分错，读出CPM值，判定结果。
临床检验中免疫荧光技术的应用
状腺 原氨酸（ Ｆ Ｔ Ｉ ） ， 游离 甲状腺素（ 丌 ） 和促 甲状腺激素（ Ｔ Ｓ Ｈ） 测定 ， 行精密度 、 灵敏度 、 准确 度 、 抗 干扰实验和准 确度 实验 ，
并 通 过 利 用 统 计 学 来 比较 这 ２种 方 法 的 结 果 。
１ － ３ 统计学处理 ：采用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ３ ． ０统计学软件 ，计数 资料用 表示 ， 做ｔ 检验及方差分析 ， 以Ｐ ＜ ０ ． ０ ５为差异有统计学 意
２ ． ３ 灵 敏度对 比 ： 利用 ２种方法分别 对空 白零标准做批 内的 ２ ０次测定 ， 通 过 比较 ２种方法 的检测低 限 ， 结果显示 时间分
其 中分别加 入 ５ ０ Ｕ ／ Ｌ的 人绒 毛膜促性腺激素 （ Ｈ Ｃ Ｇ） ， ２ ５ ０ ０ ０ ｕ ， Ｌ的卵泡刺激素 （ Ｆ Ｓ Ｈ）和 ｌ ０ ０ ０ Ｕ ／ Ｌ的黄体生成素 （ Ｌ Ｈ） ，
例 甲状腺功能减退症患者 ，作为 甲状 腺功能减退症组 ，年龄
ｌ ９ ～ ６ ９岁 ， 平 均（ ４ ８ ＋ ＿ １ ５ ） 岁。 另外选取 １ ０ ０名健康者 ， 作为健康
对 照组 ， 身 体无 其他 方 面疾 病 ， 年龄 １ ８ ５ ５岁 ， 平均（ ３ ９ ＋ ＿ ６ ）
岁。
【 ４ ］ 刘慧琴 ， 徐 爱明． 不合格血标本 １ ７ ５ ２ 份 的原因分析与对策． 解
临床免疫学检验学科的发展与现状研究综述
临床免疫学检验学科的发展与现状研究综述作者：陆静兰来源：《维吾尔医药》2013年第04期摘要：临床免疫学检验在长时间发展过程中逐渐成为一门具有显著应用性质的学科，该学科涉及内容及范围都非常广泛，与免疫类型疾病病发机制、诊断治疗、预防，免疫学基础检测知识、实际应用、操作技巧等都存在密切联系。
目前我国临床免疫学检验已经被纳为医学检验专业学生必修课程之一，同时也在临床检验诊断专业课程中占据重要位置。
本文主要阐述临床免疫学检验学科的发生发展及应用现状，希望能够给予相关工作者一些借鉴。
关键词：临床免疫学；检验学科；发展与现状；研究我国第一本包涵临床免疫学检验知识的教科书与20世纪80年代末问世，在经过漫长的20年时间才逐渐获得该领域专家及研究者的一致认同[1]。
免疫学检验在我国临床医学领域中占据着非常重要的地位，该学科的发展能够对生命与医学等其他学科产生影响。
伴随着我国经济水平的持续提升，临床免疫学检验学科寻觅到了广阔的发展空间，涉及内容逐渐延伸至生物学、分子生物学等各个领域，与此同时，其他学科在操作过程中使用到临床免疫学检验的频率也呈现逐年增长趋势，由此也奠定了临床免疫学检验学科在现代医学中的独特地位[2-3]。
1. 临床免疫学检验学科的发现及发展临床免疫学检验学科发现及组建时间已经有一百多年时间，形成于一系列抗细菌感染实验研究中，最初在19世纪80年代期间有一些学者针对传染病患者及免疫动物进行研究，发现两者血清里都存在具有特异性质的结合病原体，另外还存在促进这些结合病原体形成的物质，学者将这些结核病物质统一定义抗体，具备推动形成抗体的物质则定义为抗原[4]。
1896年A.Sicad与G.Widal收集获取伤寒患者血清，并通过实验使其与伤寒杆菌相互反应，最终经由两者产生特异性凝集现象来诊断患者伤寒情况，自此开辟了免疫学和医学检验相互结合应用的先例。
19世纪末期，德国化学家Ehrlich发表体液免疫理论学说，俄国动物学家Metchnikoff发表细胞免疫理论学说，两方各有拥护者导致免疫机制长期处于争论中。
临床医学检验新技术
临床医学检验新技术荧光定量PCR所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
技术原理：将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性，低温复性，适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度，求得CT值，同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照，即可得出待测标本目的基因的拷贝数。
临床应用：各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价；地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测；肿瘤标志物及瘤基因检测实现肿瘤病诊断；遗传基因检测实现遗传病诊断。
检测种类涉及多种病原体，从细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体、螺旋体到寄生虫。
酶联免疫分析技术酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)技术自20 世纪70年代初问世以来，发展非常迅速，目前被广泛应用于免疫学、医学、生物学等许多领域。
ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
技术原理：酶联免疫吸附试验是一种固相免疫测定技术，其先将抗体或抗原包被到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。
测定时，将待检样本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应，后加入酶标抗体与免疫复合物结合，用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离的未结合成分，最后加入酶反应底物，根据底物被酶催化产生的颜色及其吸光度(A)值的大小进行定性或定量分析的方法。
根据检测目的和操作步骤不同，有双抗体夹心法、间接法、竞争法三种类型的常用方法。
8 第八章 临床常用免疫学检测_诊断学(十三五_第9版)
诊断学（第9版）
一、免疫球蛋白
（五）M蛋白
M蛋白或称单克隆免疫球蛋白，一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移 率的免疫球蛋白分子及其分子片段。 1.参考值 阴性 2.临床意义 检测到M蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增值并，见于： ➢ 多发性骨髓瘤 ➢ 巨球蛋白血症 ➢ 重链病 ➢ 轻链病 ➢ 半分子病 ➢ 恶性淋巴瘤 ➢ 良性M蛋白血症
诊断学（第9版）
二、补 体 系 统
（六）补体结合试验（CFT）
补体结合试验（CFT)是用免疫溶血机制做指示系统，来检测另一反应系统抗原或抗体的 试验。早在1906年Wasermann就将其应用于梅毒的诊断，即著名的华氏反应。这一传统的 试验经不断改进，除了用于传染病诊断和流行病学调查以外，在一些自身抗体、肿瘤相关抗 原以及HLA的检测和分析中也有应用。
诊断学（第9版）
二、补 体 系 统
（一）总补体溶血活性（C50）检测
总补体溶血活性（CH50)检测的是补体经典途径的溶血活性，主要反映经典途径补体的 综合水平。补体最主要的活性是溶细胞作用，溶血程度与补体量呈正相关，一般以50%溶血 作为检测终点（CH50)。 1.参考值 50-100kU/L（试管法） 2.临床意义 主要反映补体经典途径（C1-C9)的综合水平 ➢ CH50增高 见于急性炎症、组织损伤和某些恶性肿瘤。 ➢ CH50减低 见于各种免疫复合物性疾病、自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病
毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良和遗传性补体成分缺乏症等。
电化学发光免疫分析及其在临床检验中的应用分析
电化学发光免疫分析及其在临床检验中的应用分析苏东梅【摘要】目的：探讨电化学发光免疫分析及在临床检验中的应用效果。
方法指定一名具有专业知识及丰富经验的临床实验室检验人员分别利用ECLIA、ELISA等方法完成100例乙肝患者血样中乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）检验。
记录两种方法检测抗-HBc阳性率，给予统计学分析后得出结论。
结果ECLIA法检测100例乙肝患者血样中抗-HBc阳性率高达98.00％，显著高于ELISA法检测阳性率81.00％，对比结果具有统计学意义（P＜0.05）。
结论电化学发光免疫分析方法可显著提高临床检验结果准确性，为临床医生提供真实可靠的诊断依据，使患者及时确诊病情并获得正确治疗，保障其临床疗效及预后。
%Objective To explore the electrochemiluminescence immunoassay and the application effect in clinical examination. Methods A clinical laboratory staff with professional knowledge and rich experience was specified, using ECLIA, ELISA respectively(anti-HBc)test completed 100 cases of hepatitis B blood samples of patients with hepatitis B virus core antibody. The positive rate of anti–HBc of the two methods was detected and record, gives statistical analysis conclusion. Results The positive rate of anti-HBc ECLIA was up to 98%in 100 cases of hepatitis B patients, it was significantly higher than those of detected by ELISA(81%), comparison of the results was statistical significance(P<0.05). Conclusion Electrochemiluminescence immunoassay method can significantly improve the accuracy of clinical test results, provide the reliable basis for the diagnosis for clinicians, enable patients totimely diagnose the disease and get the correct treatment, ensure the therapeutic effect and prognosis.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2014(000)023【总页数】3页(P102-103,156)【关键词】电化学发光免疫分析;临床检验;应用效果【作者】苏东梅【作者单位】广东省茂名市中医院检验科，广东茂名525000【正文语种】中文【中图分类】R446.6电化学发光免疫分析（electro-chemiluminescence immunoassay，ECLIA）是近年来于临床推广使用的新型标记免疫测定技术，特点为检测速度快、易于控制、灵敏度较高等[1-3]。
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免疫学检测新技术在临床检验中的应用与进展 免疫学检验是依据免疫学原理,尤其是抗原与抗体反应原理,利用各种敏感的标记、示踪技术,超微量地、特异地分析检测各种生理的和病理的免疫学指标,包括体液的(抗体、细胞因子等)和细胞的(各种效应细胞),进行疾病的诊断、疗效的评估和预后判断的一组医学检验项目[1]。因此，免疫学检验是构筑基础免疫学与临床免疫学之间的桥梁,是临床医生借以研究疾病的技术手段。但是由于免疫反应的特殊性及复杂性使许多试验技术操作繁杂、耗时，难以适应临床诊断、治疗的需要。近年来随着生物和生命科学的迅猛发展，操作的自动化以及新技术新材料的应用，为免疫学快速检验技术的发展带来了新的契机，极大地促进了免疫技术的发展与更新。现就免疫学检验中的快速检测技术应用与进展作一简要综述。
1 传统的免疫学快速检验技术 传统的免疫学检验即血清学试验,主要是通过观察沉淀物的形成、扩散、凝集及溶血现象的发生以及测定来分析待测样品中抗原或抗体的有无及含量，如沉淀反应、凝集反应、溶血反应、中和反应及补体结合反应等。这些检测方法均为手工操作，大都操作步骤烦琐，需时较长。而其中的快速检验技术有代表性的当属传统的梅毒快速诊断试验。
1.1 快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) RPR是20世纪80年代问世的非特异性梅毒血清学试验。RPR法检测血清中非特异性抗体即反应素。所用抗原为标准的牛心肌脂抗原,抗原中加有活性炭颗粒，检测时直接将试剂与血浆(或血清)在卡片上混匀，摇动8分钟观察结果。该方法操作简便、迅速、结果容易判定。RPR滴度变化是观察治疗效果、复发、或再感染的重要指标[2]。但其特异性较差，孕妇、疟疾、乙肝、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等疾病时可出现生物学假阳性反应，因此阳性结果常需要做确证试验后最后诊断。
1.2 甲胺苯红不加热血清反应素实验(TRUSR) 其原理与RPR相同,以甲胺苯红染料颗粒代替活性炭颗粒作为指示物，实验结果清晰易读,简便快速,稳定性好。但易受高脂血症、抗心磷脂抗体阳性血清的干扰,也可出现假阳性。
2 免疫胶体金技术 胶体金是一种常用的标记技术。其基本原理是氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金标记，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。用还原法制备成各种不同粒径、不同颜色的胶体金颗粒，对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌Ａ蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共价结合，因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。目前免疫胶体金技术应用较广的主要是两种技术：免疫层析试验及斑点免疫渗滤试验。
2.1 快速免疫层析试验(ICA) ICA是近几年来国外兴起的一种快速诊断技术，其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。免疫层析技术问世已有十多年时间，可检测项目已达数十项[2]。如：心肌标志物、早孕诊断条等。
2.2 快速斑点免疫渗滤试验(DIFA) DIFA的基本原理与ICA相类似。仍是间接法或夹心法。间接法测抗体：固定于膜上的特异性抗原＋标本中的相应抗体＋金标记的抗体或SPA显色。夹心法测抗原：固定于膜上的多克隆抗体＋标本中待测抗原＋金标记的特异性单克隆抗体显色。该技术目前已被广泛应用于结核分枝杆菌等细菌的抗原或抗体检测，病毒抗体的筛查等。 胶体金标记技术是继放射免疫分析(RIA)、荧光免疫分析(FIA)、酶免疫分析(EIA)三大标记技术之后，又一较为成熟且已得到广泛应用的免疫标记技术。其主要特点是灵敏度较高，操作简单，由于省略了温育过程, 因而检测更加快速。不需特殊设备、且可单份测定，特别受到基层的欢迎。但是只能定性,不能定量,带现象可使结果偏低，甚至出现假阴性；严重溶血、黄疸、脂血标本对结果判断有干扰。随着金标技术的不断推广和应用，各种形式的检测条、卡将广泛使用，应特别注意试剂的质量控制[3-4]。
3 化学发光免疫分析技术(CLTA) CLTA是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合, 藉以检测抗原或抗体的分析技术。1978年Schrpeder在RIA和EIA基本理论的基础上，以化学发光信号示踪，建立了化学发光免疫分析技术。发展至今已经成为一种成熟的、先进的超微量活性物质检测技术[5]。主要的优点是:灵敏度高、特异性强、标记物稳定、线性范围宽，检测速度快,无放射性污染等。以全自动微粒子酶放大化学发光免疫分析系统为例。该系统以碱性磷酸酶标记抗原或抗体,用AMPPD作为化学发光剂,这种化学发光剂发光稳定、持续时间长,因此比闪烁发光容易控制。采用磁性微粒子包被技术,由于磁粒子体积小,最大限度扩大了包被面积,可以吸附更多的抗原或抗体,同时磁粒子的核心是铁,在磁场中下沉快，很容易进行洗涤和分离，大大提高了检测速度。化学发光免疫分析技术在目前的临床应用已非常成熟,有取代放射免疫分析技术而成为诊断市场上的主流产品的趋势。但仍存在国外的化学发光免疫分析检测系统价格昂贵,难以得到普及，国内的化学发光免疫分析检测系统虽然价格较国外产品便宜很多,但灵敏度和检测的可靠性得不到保证之不足[6-7]。
电化学发光免疫分析(ECLIA)是90年代发展起来的一种新型发光方法，是电化学发光和免疫测定相结合的产物。一经问世就以发光标记物不需要催化剂、自然本底低、受外界因素干扰少、重现性好、快速、稳定等优点，成为目前最有发展前途的一种免疫分析方法[8]。与化学发光不同的是它在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,包括了电化学和化学发光2个过程。由于电化学发光标记物不同,一般化学发光不稳定，为间断的、闪烁性发光，而电化学发光为电促发光,可产生高效、稳定的连续发光,每秒几十万次的循环电化学发光大大提高了分析的灵敏度[9-10]。而且检测采用均相免疫测定技术,不需将游离相与结合相分开,从而将检测步骤大大简化,如罗氏MODULAR E170全自动电化学发光免疫分析仪,每小时可进行170个测试，明显提高了检测速度[11-12]。不足的是试剂价格高，国内中小医院及基层单位难以开展。
化学/电化学发光免疫分析，由于其原理新颖,干扰因素少,灵敏度高，准确性好，检测速度快，在内分泌、激素、血浆特种蛋白、肿瘤标志物、传染性标志物、维生素、体内药物浓度等的快速检测中起着重要作用[13]。
4 生物传感器技术 生物传感器是指能感应规定的被测量，并按一定的规律将其转换成可用信号输出的器件或装置[14]。它一般由两部分组成，其一是由具有对生物或化学分子识别能力敏感材料的识别元件(或感受器)组成；其二是信号转换器(换能器)，主要是由电化学或光学检测元件组成。生物传感器技术被列为21世纪五大临床检验技术之一,是现代生物学、化学、医学、材料学和电子学等多学科交叉结合的产物。生物传感器具有选择性好、灵敏度高、分析速度快、成本低、能在复杂环境中进行在线连续监测的特点[15-16]，由于自身的优越性，近几十年得到迅速发展并在医学领域得到了广泛的研究与应用。如Tang等[17]将HBsAb固定在铂电极的纳米金颗粒上，制成多层膜修饰的免疫传感器,利用电位滴定法和电流法进行HBsAg检测,其最低检测限量分别为0.015μg/ml和0.005μg/ml。张波等[18]研制的压电石英晶体免疫传感器检测前列腺特异抗原(PSA)，与化学发光法具有良好的相关性，癌胚抗原、人绒毛膜促性腺激素等对PSA的检测基本无干扰，传感器可再生后重复使用5次。开辟了一种检测PSA的新途径。
5 生物芯片技术 生物芯片又称微阵列(microarray)，是20世纪末在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，包括基因芯片、蛋白芯片及芯片实验室三个领域[19]。它主要是指通过微加工技术和微电子技术在固相载体芯片表面构建的微型生物化学分析系统，以实现对核酸、蛋白质、细胞、组织以及其他生物组分的准确、快速、大信息量的检测。由于生物芯片能够在短时间内分析大量的生物分子，快速准确地获取样品中的生物信息，效率是传统检测手段的成百上千倍，因此有人认为它将是继大规模集成电路之后的又一次具有深远意义的科学技术革命。由于生物芯片技术在疾病筛查和早期诊断上具有优势，已经成为检验医学发展的热点之一。目前，通过基因芯片进行细菌检测和细菌耐药性分析；通过蛋白芯片在肿瘤、自身抗体、结核等疾病的筛查和检测方面的检验产品日臻成熟[20]。
综上所述，21世纪将是人类历史上科学技术突飞猛进的时代，免疫学检验作为检验医学中发展最快、最活跃的学科也将进入一个快速发展的新时期。 参 考 文 献
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