CD59-linker-CD2融合基因真核表达系统的构建
含有CD基因的腺病毒载体的构建
含有CD基因的腺病毒载体的构建
高军;朱伟;崔龙;龙建秋;谷爱梅;李茂
【期刊名称】《海军医学杂志》
【年(卷),期】1999(0)2
【摘要】目的 :构建携带CD基因和LacZ报告基因的腺病毒载体。
方法 :先将真核表达载体质粒 pCI中的转录框架构建入腺病毒载体中 ,后再将CD和LacZ基因分别装配到框架的多克隆位点内。
结果 :经过酶切鉴定成功地构建了分别携带CD基因和LacZ报告基因的腺病毒载体 ,对肿瘤的前药转换基因治疗有重要意义。
【总页数】4页(P132-135)
【关键词】基因治疗;腺病毒载体;CD基因;载体构建
【作者】高军;朱伟;崔龙;龙建秋;谷爱梅;李茂
【作者单位】海军医学研究所;第二军医大学附属长海医院普外科
【正文语种】中文
【中图分类】R73-36
【相关文献】
1.负载PCA3启动子及CD-TK自杀基因腺病毒载体的构建及包装 [J], 刘雷;黄星华;李坚伟;周建华;陈统权
2.构建含有小鼠CD40-IgG2aFc-IRS-GFP融合基因腺病毒并体外检测 [J], 李传光;方益锋;谭映霞;沈志坚;张启瑜
3.hTERT启动子调控的SEA-CD80基因共表达重组腺病毒载体的构建及在不同肿
瘤细胞中的表达鉴定 [J], 司少艳;刘俊丽;王晓菲;谭小青;宋淑军
4.含有小鼠CD40、IgG2aFc基因片段腺病毒的构建及检测 [J], 李传光;谭映霞;沈志坚;张启瑜
5.奶山羊催乳素受体基因CDS区的克隆和序列分析与腺病毒干扰载体的构建 [J], 赵旺生;罗军;邱思源;王紫骞
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人CD9蛋白cDNA的克隆与真核表达载体的构建
人CD9蛋白cDNA的克隆与真核表达载体的构建宋凯【摘要】@@%CD9蛋白广泛分布于血小板、前B细胞、单核细胞等造血细胞中,另外CD9还普遍在不同组织的干细胞表面表达,在卵母细胞中也有CD9表达,CD9被证明是精卵质膜相互作用中一种重要的蛋白.本试验通过RT-PCR技术对人CD9蛋白的cDNA进行了扩增、克隆、序列测定和分析,并成功构建了该蛋白的真核表达载体,为对CD9的进一步研究创造条件.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2012(040)011【总页数】4页(P29-32)【关键词】CD9;基因克隆;真核表达载体;DNA序列【作者】宋凯【作者单位】徐州生物工程职业技术学院,江苏徐州221006【正文语种】中文CD9/P24 是一种存在于包括卵母细胞等多种细胞的浆膜中的糖蛋白，相对分子质量为24 ku。
CD9 分子中有4个疏水区，往返4次穿过细胞膜，与其他多种同源性膜蛋白共同组成4 次跨膜蛋白(tetraspanin) 超家族。
CD9 是一种广泛分布于血小板、前B 细胞、单核细胞等造血细胞及一些非造血组织细胞中的非系性分化抗原。
另外CD9还普遍在不同组织的干细胞表面表达，如在小鼠的ES细胞、造血干细胞[1-2]、神经干细胞中表达。
CD9一般还表达在小鼠[3-5]及人[6-8]生精干细胞表面。
因此可以推测CD9在一般的干细胞和可自我更新的组织中均有表达。
在卵母细胞中也有CD9表达[9]。
CD9位于人第十二号染色体12p13.3区[10]。
Li等报道精子膜上不存在CD9[9]。
以往发现在小鼠未成熟的卵母细胞膜上有强的CD9表达，在完全成熟的卵母细胞膜上CD9表达最强。
卵母细胞成熟期CD9显著增多提示CD9与卵细胞受精能力有关。
在未成熟的和成熟的滤泡周围鞘膜细胞中也可检测到CD9，但不能在周围卵巢组织中检出。
在小鼠卵母细胞膜和卵丘细胞膜上可见CD9免疫染色，但不出现在卵透明带上。
Li等研究发现CD9在猪卵巢细胞包括卵母细胞、颗粒层细胞和鞘膜细胞中广泛表达。
sCD80-Linker-sCD40L融合基因重组腺病毒载体的构建及其在NIH3T3细胞的表达
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SJIR-2基因真核表达载体的构建及在真核细胞内表达的研究
SJIR-2基因真核表达载体的构建及在真核细胞内表达的研究王正印; 尹元; 陆群【期刊名称】《《热带病与寄生虫学》》【年(卷),期】2019(017)003【总页数】4页(P140-142,130)【关键词】SJIR-2基因; 真核表达载体; 疫苗【作者】王正印; 尹元; 陆群【作者单位】200082上海市上海中医药大学附属上海市中西医结合医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R318血吸虫病是严重危害发展中国家人民健康的重要寄生虫病。
全球有78个国家和地区流行血吸虫病，感染人口接近3亿，其中适龄儿童约占46%［1］，为了实现消除血吸虫病的目标，研发血吸虫病疫苗成为主要的发展方向之一［2］。
在血吸虫基因工程疫苗（包括核酸疫苗）研究中，迄今已筛选出多个亚单位候选抗原，可对血吸虫病的防治起到一定的作用［3～5］。
为了研究更有保护力的血吸虫疫苗，本文从血吸虫胰岛素受体基因（Schistosoma ja-ponicum insulin receptor-2，SJIR-2）方面着手，通过构建SJIR-2基因的真核表达载体作为重组疫苗，以脂质体介导的方法将重组SJIR-2基因导入293T细胞，再以Western blot的方法验证其在真核细胞内的表达，这将为进一步探索SJIR-2基因的重组疫苗在血吸虫病防治中的作用提供帮助。
材料和方法一、材料1.日本血吸虫、真核表达载体和pEGFP 293T细胞均来自于安徽医科大学。
2.主要试剂及仪器Lipo2000和Trizol试剂购自美国invitrogen公司，rTaq mix购自日本TaKaRa公司，逆转录试剂盒购自美国Fermentas公司，T4连接酶、XmaI和PstI内切酶购自北京NEB公司，DNA胶回收试剂盒购自德国QIAGEN公司，质粒提取试剂盒购自美国Axygen公司，HRP标记山羊抗鼠IgG购自北京全式金公司，鼠抗pEGFP购自英国Abcam公司。
二、方法1.RT-PCR将日本血吸虫研碎，用Trizol提取日本血吸虫的总RNA，逆转录成cDNA，以cDNA为模板，SJIR-2基因扩增引物SJIR-2-F：GCTGCAGTATGCTAAATATATTGGCTCAACATG；SJIR-2-R：CCCCGGGATAAGCTAAATCTCCATTTGTAATTGTT进行PCR反应，反应条件是：94℃预变性5 min，接着94℃变性1 min，58℃退火1 min，72℃延伸1 min，最后72℃延伸10 min，4℃停止，共35个循环。
CD59基因的突变并真核表达载体的构建
CD59基因的突变并真核表达载体的构建朱新红高美华任书荣王秋波王静林存智【摘要】目的构建两种活性位点相关性CD59突变基因，并重组入真核表达载体。
方式选取物种间高度保守W40位点及相邻位置为突变位点，重叠延伸PCR(Overlap extension PCR)法构建两种CD59基因点突变，一种是编码W40的密码子TGG缺失突变，另一种是C39W40K41→W39W40W41的相应基因突变，各设计两条常规引物和两条反向互补突变引物,以已构建CD59 cDNA为模板,三重PCR 定点诱变扩增突变基因, 重组入克隆载体PMD18T Vector, EcoRⅠ单酶切取得目的基因，重组入真核表达载体pIRES。
结果通过PCR定点诱变成功取得两种目的CD59突变基因,序列测定及酶切鉴定结果均证明成功构建了pIRES m1CD5九、pIRES m2CD59重组真核表达载体系统,突变CD59基因长度约500 bp。
结论重叠延伸 PCR法诱变经济靠得住，重组质粒的构建为进一步研究CD59的抗补体活性奠定了基础。
【关键词】抗原 CD59 点突变真核表达［ABSTRACT］ Objective To construct two CD59 active site relative mutagenesis and clone mutants into eukaryotic expression system. Methods The highly conserved W40 and its vicinity were selected for mutant, and site directed mutagenesis with deleting residue W40 site and changing C39W40K41→W39W40W41 were performed by Overlap extention PCR.Two normal primers and two mutagenesis reverse complemented primers were designed. cDNAs as templates,tri PCR were used to amplify the mutant genes. Mutant CD59 DNAs were subcloned into the cloning vector PMD18T Vector, then cloned into the eukaryotic expression vector pIRES after digested by EcoRⅠ. Results Mutants were successfully constructed and confirmed by sequence analysis. Recombinant plasmids of pIRES m1CD59 and pIRES m2 CD59 were successfully constructed according to sequence and enzyme digestion analysis. The mutant gene was about 500 bp. Conclusion Overlap extension PCR is economical and in reliable, and the recombinants will be applied for futher study on CD59 anticomplement activity.［KEY WORDS］ Antigens, CD59; Point mutation; Overlap extension PCR; Eukaryotic expression补体是由一系列不耐热因子组成，普遍参与机体防御反映及免疫调剂，也可介导免疫病理损伤性反映。
DC-SIGN真核表达载体的构建及其稳定转染BHK21细胞系的建立
DC-SIGN真核表达载体的构建及其稳定转染BHK21细胞系的建立王宇;阎瑾琦;张亮;王越;于继云【摘要】目的构建DC-SIGN分子真核表达载体,获得可稳定表达DC-SIGN分子的BHK21细胞系.方法以pUNO-hDC-SIGN1Aa质粒为模板,通过PCR方法扩增人DC-SIGN基因,经过Not Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切之后,将其克隆入真核表达载体pIRES-neo,构建真核表达载体pIRES-neo-DC-SIGN,以Not Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切以及测序验证重组质粒的正确性.将重组质粒以Lipo-fectamine~(KM) 2000转染到BHK21细胞,通过G418及有限稀释法进行阳性克隆的筛选,建立稳定表达DC-SIGN分子的BHK21细胞系,利用流式细胞仪、Western blotting及免疫荧光法检测DC-SIGN分子的表达.结果双酶切鉴定证明DC-SIGN基因已经成功克隆入真核表达载体pIRES-neo中,测序结果表明EC-SIGN基因与原序列一致.pIRES-neo-DC-SIGN转染BHK21细胞后,获得了急定表达DC-SIGN分子的细胞系.流式细胞仪检测结果显示,阳性克隆中DC-SIGN分子的表达率为85.42%.免疫荧光结果显示,DC-SIGN分子主要表达于细胞膜表面.Western blotting能检测到DC-SIGN 蛋白表达的特异条带.结论成功构建了稳定、高效表达DC-SIGN分子的BHK21细胞系,为后续DC靶向性疫苗研究奠定了基础.【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2010(035)003【总页数】3页(P304-306)【关键词】基因,DC-SIGN;BHK21细胞系;树突细胞【作者】王宇;阎瑾琦;张亮;王越;于继云【作者单位】100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所;100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所;100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所;100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所;100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所【正文语种】中文【中图分类】R349.8DC-SIGN(DC specific intercellular-adhesion-molecule-3 grabbing nonintegrin)主要表达于不成熟的树突细胞(dendritic cells,DCs)表面[1],参与DCs 摄取抗原,多种病毒都能以DC-SIGN为受体侵入细胞[2]。
CD真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
CD真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达张巨峰;韦芳;李惠明;黄陈;于慧;裘玮;黄倩【期刊名称】《现代生物医学进展》【年(卷),期】2006(006)010【摘要】目的:构建含自杀基因胞嘧啶脱氨酶(CD)的真核表达载体pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-CD,并进行哺乳动物细胞HEK293转染研究.方法:以本实验室保存的含CD基因全长的质粒为模版,用PCR方法扩增CD基因阅读框序列,并定向克隆到带有HAtag的pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z载体上,使目的基因与HAtag在同一阅读框.重组体质粒经EcoRI和BamHI双酶切鉴定,并对插入的CD基因片段进行测序,将鉴定好的阳性重组质粒pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-CD 用脂质体介导转染HEK293,提取细胞蛋白,western blot检测CD基因的表达情况.结果:阳性重组质粒pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z CD经EcoRI和BamHI双酶切后,获得约为5.5kb片段和1.3kb插入片段,序列分析表明插入的片段与GenBank 发布的序列一致,western blot检测到CD基因的表达.结论:成功构建了含自杀基因CD的真核表达质粒.【总页数】3页(P11-13)【作者】张巨峰;韦芳;李惠明;黄陈;于慧;裘玮;黄倩【作者单位】上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海,200080;上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海,200080;上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海,200080;上海交通大学附属第一人民医院普外科,上海,200080;上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海,200080;上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海,200080;上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海,200080【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.pcDNA3.1/eIF5A真核表达载体的构建及其在真核细胞CCRF-CEM中的表达[J], 朱金武;钱之玉;关勇彪2.SK2和 JPH2双基因重组真核表达载体的构建及在 HEK293细胞中的表达 [J], 罗天霞;樊红琨;芮丹丹;孙佳翕;马小芳;章茜3.人STAT4基因真核表达载体构建和在HEK293细胞中表达 [J], 李轩岸;黄玉梅;姚芳玲;范洁琳;雷光华;黎明4.牛乳状瘤病毒13型pEGFP-E5-N1真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达 [J], 庞峰;史巧芸;朱华培;徐开莲;赵天靖;李亚颖;彭冬梅;李国华;周海龙5.pEGFP-C1-MCH真核表达载体的构建及其在HEK293细胞系中的表达 [J], 徐婧;侯赋园;王德彬;李竣;胡鑫;杨光忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
cdx2真核表达质粒的构建
cdx2真核表达质粒的构建牛海静;陈鑫;王邦茂【摘要】目的:构建含有cdx2全长基因的真核表达质粒并在人胃上皮细胞系中表达.方法:从人结肠上皮组织中提取总RNA,RT-PCR获得全长人cdx2基因的cDNA,测序证实序列正确后亚克隆入pcDNA3.1来构建重组真核表达载体pcDNA3.1/cdx2.使用脂质体将该重组质粒转染入人胃上皮细胞GES-1中,RT-PCR 证明该细胞中出现人cdx2基因的表达.结果:酶切鉴定和测序显示靶基因cdx2克隆到pcDNA3.1质粒中,RT-PCR证实转染的人胃上皮细胞中有人cdx2基因的表达.结论:成功构建含有人cdx2基因的真核表达质粒.并在人胃上皮细胞中表达.【期刊名称】《内蒙古医学杂志》【年(卷),期】2010(042)011【总页数】3页(P1292-1294)【关键词】cdx2;真核表达;胃癌【作者】牛海静;陈鑫;王邦茂【作者单位】内蒙古医学院附属医院消化科,内蒙古,呼和浩特,010050;天津医科大学总医院,天津,300052;天津医科大学总医院,天津,300052【正文语种】中文【中图分类】R734.2指导胃肠上皮细胞发育生长的转录因子在胃癌及其癌前病变的发生发展中起着重要的作用。
尾同源盒基因cdx2在人正常上皮细胞中只表达于肠上皮及胰腺导管及腺泡上皮中,但在食管和胃上皮中不表达[1],除消化系统外的其它各系统正常上皮内未检测到cdx2,被认为是肠特异性转录因子。
肠型胃癌及其癌前病变-肠化生中有cdx2及其诱导的相关细胞标志物表达的不同程度升高[2]。
本研究构建cdx2的真核表达质粒,并在体外人胃上皮细胞中表达,为下一步研究肠型胃癌及其癌前病变的发病机制打下基础。
1 材料和方法1.1 研究对象HEK293细胞系(人胚肾细胞系)由天津医科大学生命中心汤华教授馈赠。
人胚胎胃上皮细胞GES-1购于北京肿瘤研究所。
感受态大肠杆菌Top10购自全式金生物技术公司。
CD59-CD2融合蛋白真核表达载体的构建及对T细胞信号转导的作用研究的开题报告
CD59-CD2融合蛋白真核表达载体的构建及对T细胞信号转导的作用研究的开题报告一、研究开题背景及意义T细胞是免疫反应中的重要组成部分，通过T细胞受体（TCR）与抗原肽复合物结合，激活T细胞。
然而，受体识别抗原肽的过程并不直接，还需要在细胞间质中的配体诱导的多种信号的协同参与。
在T细胞信号转导中，协同参与多种信号是一个复杂的过程，需要细胞膜上的多种配体参与。
CD59-CD2融合蛋白就是其中一种配体，它可以与CD2表达的细胞结合并调节T细胞信号转导。
因此，对CD59-CD2融合蛋白的研究具有很重要的意义。
本研究旨在构建CD59-CD2融合蛋白真核表达载体，并探究其在T细胞信号转导中的作用机制。
二、研究目的和研究方法1. 研究目的：（1）构建CD59-CD2融合蛋白真核表达载体，验证其表达；（2）研究CD59-CD2融合蛋白与CD2在T细胞中的相互作用；（3）探究CD59-CD2融合蛋白对T细胞信号转导的影响。
2. 研究方法：（1）基于pcDNA3.1(+)载体的多克隆位点，构建CD59-CD2融合蛋白真核表达载体；（2）通过免疫印迹、Co-IP等方法，验证CD59-CD2融合蛋白与CD2的相互作用；（3）利用Western blot和实时荧光定量PCR方法，研究CD59-CD2融合蛋白对T细胞信号转导的影响。
三、研究预期结果本研究预计可以成功构建CD59-CD2融合蛋白真核表达载体，并验证其表达。
通过验证CD59-CD2融合蛋白与CD2的相互作用和研究CD59-CD2融合蛋白对T细胞信号转导的影响，可以揭示CD59-CD2融合蛋白在T细胞信号转导中的作用机制，并对T细胞自身免疫疾病等相关疾病的治疗提供新思路。
中国人CD59cDNA克隆、序列分析及其表达
中国人CD59cDNA克隆、序列分析及其表达
黄健;苟德明;郑从义;夏总平;李文鑫
【期刊名称】《武汉大学学报：自然科学版》
【年(卷),期】1998(44)6
【摘要】用ＲＴ－ＰＣＲ方法从中国人胚胎总ｍＲＮＡ中扩增出４２０ｂｐ人补体终末阶段同源限制因子（ＣＤ５９）的ｃＤＮＡ，序列分析结果表明，所获得的ＣＤ５９ｃＤＮＡ与文献报道中的基因序列完全一致，含ＣＤ５９全长编码区．构建了真核表达质粒，在３Ｔ３细胞中得到了表达．
【总页数】4页(P773-776)
【关键词】同源限制因子;序列分析;器官移植;cDNA;补体
【作者】黄健;苟德明;郑从义;夏总平;李文鑫
【作者单位】武汉大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】R617;R392.11
【相关文献】
1.中国人肥胖基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达 [J], 周炜;缪为民;周丙荣
2.小地老虎β-微管蛋白基因cDNA序列的克隆、序列分析和表达检测 [J], 闫硕;张璟;张青文;王琼;熊晓菲;刘小侠
3.中国人HLA-G1的cDNA克隆、序列分析、表达和蛋白质空间结构预测 [J], 周
建军;曲宏;吴才宏;韩卫东;李志伟;丰美福
4.中国人丙型肝炎病毒全长NS3基因的克隆、序列分析及表达 [J], 王尊文;祁自柏;谷金莲;于洋;杨振;张华远;李河民
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【 关键词 】 Ｃ ５ 基因 ；Ｄ 基 因； 基因； Ｄ９ Ｃ２ 融合 真核表达载体 ［ 中图分类 号】 Ｒ９ ．２ ３２１ ［ 文献标志码】 Ａ 【 文章 编号】 １０—１９２ １）１ ０５ ５ ０８８９ （０１０－ １－ ０ ０
Ｃ ｎｔｕｔ ｎｏ ｕ ａｙｆ ｘ ｒｓｉｎｖｃ ｒｃｎａｎｎ Ｄ ９ｌ ｋ ｒＣ ２ｆｓ ｎｇｎ ｏ ｓ ｃｉ ｆ ｅ ｋｒｏ ｃｅｐｅｓ ｅｔ ｏ ｔｉｉｇＣ ５ －ｎ ｅ，Ｄ ｕｉ ｅｅ ｒ ｏ ａ ｉ ｏ ｏ ｉ ｏ
一
在Ｃ５ Ｄ ９基 因和 Ｃ ２基 因间加 入 Ｄ
段柔性链接头 （ｉｋｒ基 因序列 ， １ ｅ） ｎ 构建 Ｃ ５ 一ｎ ｅ—Ｄ Ｄ ９ｌ ｋｒＣ ２融合基 因真核表达 系统 。利用 Ｒ —Ｃ ｉ ＴＰ Ｒ法从 人 Ｔ细胞 白血病细胞 系 测序证实 Ｃ ５ Ｄ ９和 Ｃ ２基因扩增成功 ； 限制 Ｄ 经
Ｊｒａ 细胞 总 Ｒ Ａ中扩增 Ｃ ５ ｕｋｔ Ｎ Ｄ ９和 Ｃ ２基 因， Ｄ 分别构 建 Ｃ ５ － Ｃ ２Ｔ重组克隆载体 ， Ｄ ９Ｔ和 Ｄ 一 经限制性核酸 内切酶酶切后与 ｐＲ Ｓ ｌＥ
质粒进行重组 ， 构建 ｐＲ ＳＣ ５ －ｎ ｅ－ Ｄ Ｉ Ｅ －Ｄ ９ｌ ｋｒ ２融合基 因真核表达系统 。 结果 ｉ Ｃ 性核酸 内切酶酶切 、Ｃ Ｐ Ｒ和测序鉴定表 明携 带 Ｃ ５ 一ｎ ｅ—Ｄ Ｄ ９ｌ ｋｒ ２融 合基 因的重 组质粒 构建 成功 。 结论 构建 Ｃ ５ 一ｎｅ— ｉ Ｃ Ｄ ９ｌ ｋｒ ｉ Ｃ ２真核表达系统为在真核细胞中表达 Ｃ ５ Ｄ Ｄ ９与 Ｃ ２并进一 步探讨其在 Ｔ细胞信号转导中的作用提供了实验材料。 Ｄ
ｎ ｌｔ ｎ ｄ ｃｉｎ ｈ ｕ ｐ ｓ ｆ ｈｓｓｕ ｙｗａ ｏ ｓｒ ｃ ｕ ａ ｙ ｔ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ｖ ｃｏ ｆ ｈ Ｄ５ ｎ Ｄ２ ｆ ｓｏ ｅ ｅ ｔ ｃｌ ａｅ ａ ｒ ｓ ｕ ｔ ．Ｔ ｅｐ ｒ ｏ ｅｏ ｉ ｔ ｄ ｓｔ ｃ ｎ ｔｕ ｔ ｅ ｋ ｒ ｏｉ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｅ ｔ ｒ ｅ Ｃ ９ ａ ｄ Ｃ ｕ ｉｎ ｇ ｎ ｆ ｉ ｔｔ ａ ｏ ｔ ｏ ａ ｃ ｏｔ ｏａ ｉ ｔ ｅｉ ｖ ｓｉａｉ ｎ ｏ ｅ ｍｅ ｈ ｎ ｓ ｏ ｉｎ ｌｔ ｎ ｄ ｃｉｎ ｆｏ Ｃ ９ ｔ ｅｌ ｎ ｈ ｎｅ ａ ｔ ｎ ｂ ｔ ｅ Ｄ５ ｎ ２ Ｍ ｅ ｈ ｄ ｈ ｎ ｅ ｔ ｔ ｆｔ ｃ ａ ｉｍ ｆｓ ａ ａ ｓ ｕ ｔ ｒ ｍ Ｄ５ ｏ Ｔ ｃ ｌ ａ ｄ ｔ ｅ ｉ ｔｒ ｃｉ ｅｗｅ ｎ Ｃ ９ ａ ｄ ＣＤ ． ｇ ｏ ｈ ｇ ｒ ｏ ｓ ｏ ｔｏ ｓ Ｗｅ ｃ ｎ ｔ ｃｅ ｕ ａｙ ｔ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ｖ ｃ ｏ ｆｔｅ Ｃ ５ ・ ｎ ｅ ・ Ｄ２ ｆ ｓ ｎ ｇ ｎ ｙ ｌ ｋ ｎ ｈ Ｄ５ ｎ Ｄ２ ｇ ｎ ｓｗ ｔ ｅ ｉ ｌ ｏ ｓ ｕ ｔ ｄ ａ ｅ ｋ ｒ ｏ ｉ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｅ ｔｒｏ Ｄ ９— ｋ ｒＣ ｕ ｉ ｅ ｅ ｂ ｎ ｉｇ ｔ ｅ Ｃ ９ ａ ｄ Ｃ ｅ ｅ ｉ ａ ｆ ｘ ｂｅ ｒ ｃ ｈ ｌ ｉ － ｏ ｉ ｈ ｌ
ｃ ａｎ （ｉｋ ｒ ．Ｔｈ Ｄ５ ｎ Ｄ２ｇ ｎ ｓｗ ｒ ｌｎ ｄｂ — Ｃ ｆｏ ｔｅｔｔｌ ｈｉ １ ｅ） ｎ ｅ Ｃ ９ ａ ｄＣ ｅ ｅ ｅｅｃｏ ｅ ｙＲＴ Ｐ Ｒ ｍ ｏａ ｒ ｈ ＲＮＡ ｏ ｕｋ ｔ ｅｌ ｓ ｂｉｈＣＤ ９ Ｔ ａ ｄＣ 一 ｆ ｒａ ｃ ｌ ｔ ｅｔ ｌ ５ 一 ｎ Ｄ２ Ｊ Ｔ ｓｏ ａ ｓ
医堂 窒生 堂握 ｌ 年 １ 第 ２ 】 月 ４卷 第 １ Ｊ ｅ ｏ ｇ ，ｏ ２ ， ｏ１ Ｊ ｕｒ， ０ １ 期 ｄ ｓｒ Ｖ １ ４ Ｎ ． ， ａ ａ ２１ Ｍ Ｐ ｔａ ． ｎ ｙ
・
１ ・ ５
论
著
（ 础 研 究） 基
Ｃ ５ 一ｎｅ—Ｄ Ｄ ９ｌ ｋｒＣ ２融合 基 因真 核表 达 系统 的构建 ｉ
钟 丹丹 ， 高美华 ， 李伟伟 ， 张 蓓
【 摘要 】 目的 Ｃ ５ Ｄ ９和 Ｃ ２都是重要 的淋巴细胞膜表 面分 子 ， Ｄ 参与 Ｔ细胞信号转导 。文 中构建 Ｃ ５ Ｄ ９和 Ｃ ２融合基 因 Ｄ
真核表达系统 ， 探讨 Ｃ ５ Ｄ ９向 Ｔ细胞传递信号的机制及 Ｃ ５ Ｄ ９与 Ｃ ２的相互作用 。 方法 Ｄ
Ｔ ｃ ｏ ｉ ｇ ｖ ｃ ｏｓ ｅ ｐ ｃｉｅｙ，ｗ ｉｈ ｉ ｕ ｎ ｗ ｒ ｌｎ ｄ ｉｔ ｈ ｌ ｓ ｄ ｐ Ｒ ｏｌｗｉｇ ｒ ｓｒ ｔ ｎ ｅ ｄ ｎ ｃｅ ｓ ｉｅ ｔ ｎ ｔ ｏ ・ ｌ ｎｎ ｅ ｔ ｒ ，ｒ ｓ ｅ ｔ ｌ ｖ ｈ ｃ ｎ ｔｒ ｅ ｅ ｃｏ ｅ ｎ ｏ ｔ ｅ ｐ ａ ｍｉ ｌ ＥＳ ｆｌ ｏ ｎ ｅ ｔ ｃｉ ｎ ｏ ｕ ｌ ａ ｅ ｄ ｇ ｓ ｏ ｏ ｃ ｎ ｉ ｏ ｉ ｓ ｕ ｔａ ｅ ｋ ｒ ｏｉ ｅ ｔｒ ｃ ｎ ａｎ ｎ ｈ ＣＤ ９ ｌ ｋ ｒ Ｃ ２ ｕ ｉｎ ｇ ｎ ． ｔ ｅ ｕ ａｙ ｔ ｖ ｃｏ ｏ ｔ ｉｉ ｇ ｔ ｅ ｒ ｃ ５ 一ｉ ｅ — Ｄ ｆ ｓｏ ｅ ｅ ｎ Ｒｅ ｕ ｔ ｓｌ ｓ ＤＮＡ ｅ ｕ ｎ ｉ ｇ ｏ ｆ ｍｅ ｈ ｕ ｃ ｓ ｆ ｌ ｓ ｑ ｅ ｃｎ ｃ ｎｉ ｄ ｔ ｅ ｓ ｃ ｅ ｓ ｒ ｕ