(三)原生质体融合
细菌计数-生长筛选诱变-第三节
血球计数板
5
数数细菌（或其他微生物或细胞）数目，（一般数 125个小格），折算样品细菌浓度；
提问：数了 125个小格中有 90个细菌，样品中的细菌浓度是 多少？
(90个÷125) * 400 / 0.1ml =2880个
/ml
适用范围：测定个体较大的细菌或原生动物
细菌个体若太小、过多，由于每一小格中细 菌层层叠加，相互遮挡，难以准确计数。
接 合
接 合
接 合
36
基因工程方法看似简单，但在具体实施上有较大的
难度。A.细菌的质粒本身容易丢失或转移
B.质粒具有不相容性
（只有在一定条件下，属于不同的不相容种群的质粒才
能稳定地共存于同一宿主中。）
37
三、原生质体融合 通过人为方法,使遗传性状不同的两个 细胞的原生质体融合,继而遗传重组,借
2.计数器(血球计数板）测定法
每小格深 0.1cm 盖玻片 载玻片
0.052cm2×25
计数格=4×4=16 大格 血球计数板 1 大格=5×5=25 小格 1 小格=0.05cm×0.05cm=0.0025cm2 总体积=16×0.1×25×0.0025=0.1cm3=0.1mL
菌液滴
染色（或不染色）
定义：对遗传物质进行改造（人工干预下的杂交、转化、 接合、转导）的技术。
工程：类似工程设计那样有很高的预见性、精确性与严
密性。
33
遗传工程的方法
遗传工程方法包括两个水平的研究：一种是细胞水平；另一种是
基因水平。所以，又可把它分为细胞工程和基因工程。
细胞工程——两个细胞原生质体融合 基因工程——两个细胞DNA片段剪接拼接 狭义的讲，遗传工程就是基因工程。 原理：限制性核酸内切酶 体外切割 导入 遗传物质 基因片段 受体细胞
(完整word版)生物选修三(全)
最终获得所需的蛋白质。
（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ,位于基因的尾端.（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.常用的标记基因是抗生素基因.第三步：将目的基因导入受体细胞1。
转化的概念:是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术.此方法的受体细胞多是受精卵.将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌 ,其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。
3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
第四步：目的基因的检测与鉴定1。
首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。
2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。
3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。
4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定.如：转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
（三）基因工程的应用1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2。
动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物.3。
基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。
（四)蛋白质工程的概念1、概念：蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。
大学设计生物实验报告(3篇)
第1篇实验名称：植物细胞原生质体融合实验实验目的：1. 了解植物细胞原生质体融合的基本原理和实验方法。
2. 掌握植物原生质体融合实验的操作步骤。
3. 学习观察和分析原生质体融合实验的结果。
实验时间：2023年3月15日实验地点：生物实验室实验材料：1. 植物细胞：番茄、胡萝卜2. 生理盐水3. 2.5%的纤维素酶和果胶酶混合液4. 融合诱导剂：聚乙二醇（PEG）5. 生理盐水6. 酶母菌培养基7. 显微镜8. 其他实验器材实验步骤：1. 细胞分离：取新鲜的番茄和胡萝卜组织，用生理盐水冲洗干净，切成小块，放入含有纤维素酶和果胶酶的混合液中，在37℃的水浴中酶解2小时，使细胞壁被分解，得到原生质体。
2. 原生质体洗涤：将酶解后的细胞混合液用离心机离心，弃去上清液，然后用生理盐水洗涤两次，去除未分解的细胞壁和杂质。
3. 原生质体融合：将洗涤后的原生质体用聚乙二醇（PEG）诱导融合，具体操作为：将原生质体悬浮于含有PEG的溶液中，混合均匀，室温下静置30分钟，然后用生理盐水洗涤两次，去除未融合的原生质体。
4. 再生培养：将融合后的原生质体接种于酶母菌培养基上，在适宜的条件下培养，使其再生出新的细胞壁。
5. 观察与鉴定：用显微镜观察再生细胞的形态和结构，鉴定融合是否成功。
实验结果：经过实验操作，成功得到了再生细胞，并在显微镜下观察到融合细胞的形态和结构。
实验结果显示，番茄和胡萝卜的原生质体成功融合，形成了新的细胞。
实验分析：1. 本实验采用植物细胞原生质体融合技术，成功实现了番茄和胡萝卜细胞的融合。
2. 在原生质体融合过程中，聚乙二醇（PEG）起到了诱导融合的作用。
3. 通过再生培养，融合细胞成功再生出新的细胞壁，表明融合过程是成功的。
实验结论：1. 植物细胞原生质体融合实验是一种有效的细胞工程技术，可以用于植物遗传育种和基因工程等领域。
2. 本实验成功实现了番茄和胡萝卜细胞的融合，为后续的研究和应用奠定了基础。
微生物遗传育种学
微生物遗传育种学一、名词解释（3*5）1、pcr:聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定dna片段的核酸合成技术。
2、操纵子：操纵子(operon)：原核生物能mRNA出来一条mrna的几个功能有关的结构基因及其上游的调控区域，称作一个操纵子（operon）。
3、启动子(promoter)：真核基因启动子是rna聚合酶结合点周围的一组转录控制元件，包括：至少一个转录起始点及一个以上的功能组件。
4、冈崎片段:冈崎片段就是由于解链方向与激活方向不一致，其中一股子链的激活，Gondrecourt母链求出足够多长度才已经开始分解成引物接着缩短。
这种不已连续的激活片段就是冈崎片段。
5、营养缺陷型：指某一菌株在诱变后丧失了合成某种营养成分（生长因子）的能力，使其在基本培养基上不能生长，必须加入相应物质才能生长的突变体。
6、准性生殖：就是一种类似有性生殖但比它更为完整的一种生殖方式。
可使同一种生物的两个相同来源（即为同种相同株）的体细胞经融合后，不通过有丝分裂而引致高频率的基因重组。
准性生殖常见于某些真菌，尤其就是半知菌中。
7、限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease):识别并切割特异的双链dna序列的一种内切核酸酶。
8、密码的自旋性：密码的自旋性就是多个密码子编码同一个氨基酸的现象。
9、转座子(transposons):转座子是可以从一个染色体位点转移至另一个位点的分散的重复序列。
转座子也包括含有两个反向重复序列的侧翼，内有转座酶基因，并含有抗生素耐药基因等其他基因。
10、微生物繁育：人为地使用物理、化学的因素，引致有机体产生遗传物质的突变，经选育成为新品种的途径。
二、是非题（2*5）三、选择题（3*5）1、限制性内乌酶的种类、辨识位点、功能、区别根据酶的亚单位组成、识别序列的种类和是否需要辅助因子，限制与修饰系统主要分成三大类。
ⅱ型酶所占到的比例最小，相对来说最简单，它们辨识回文等距序列，在回文序列内部或附近研磨dna。
《园艺植物育种学》形考3参考答案
《园艺植物育种学》形考3参考答案一、名词解释（30）每题5分倍性育种：采用人工诱变的方法，成倍的改变染色体基数，育成新品种的途径。
多倍体：体细胞中含有三套或三套以上染色体的植物。
单倍体：体细胞中含有该物种配子染色体数的生物个体。
二、填空题（24）每空6分请用给出的关键词填空。
同源多倍体分子生物学DNA序列浸渍法1．多倍体按其来源可分为同源多倍体和异源多倍体两大类。
2．秋水仙素处理的具体方法，依处理的器官、药剂溶媒的不同而有多种，主要有浸渍法、涂抹法、滴液法、套罩法四种。
3．细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上，遵循细胞的遗传和生理活动规律，有目的地制造细胞产品的一门生物技术。
4．分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种新的较为理想的遗传标记，它通过遗传物质DNA序列的差异进行标记。
填空题(24 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)三、单项选择题（18分）每题6分1．原生质体融合获得多倍体属于多倍体人工培育途径中的（D）。
单选题(6 分) A.化学诱变B.物理方法C.有性杂交培育多倍体D.离体培养获得多倍体2．拟南芥油菜的获得是利用了细胞工程技术中的（B）。
单选题(6 分)A.突变体筛选技术B.体细胞杂交技术C.单倍体诱导技术D.组培快繁技术3．简单重复序列标记是DNA分子标记技术中的（D）。
单选题(6 分)A.RFLP标记B.RAPD标记C.AFLP标记D.SSR标记四、问答题（28分）请用给出的关键词填空。
育种材料选择效果效率化学药剂花粉子房育种年限孤雌生殖双生苗简述单倍体在遗传育种中的作用及获得单倍体的方法。
作用：（1）提供遗传研究和育种材料（2）提高选择效果（3）缩短育种年限，节省人力、物力（4）提高育种效率获得单倍体的方法：（1）远缘花粉刺激孤雌生殖（2）辐射、处理诱导孤雌生殖（3）从双生苗中选择（4）花药、花粉培养（5）未受精子房培养填空题(18 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案) 请用给出的关键词填空。
高中生物选修3(浙科版)知识点总结
第一章基因工程一、工具酶的发觉和基因工程的诞生1、基因工程的概念：（1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。
（2）基因工程：就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们须要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。
基因工程的核心是构建重组DNA分子。
由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA 重组技术。
（3）基因工程诞生的理论基础：DNA是遗传物质的发觉过程、DNA双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。
2、基因工程的基本工具（1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）①来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的。
②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。
例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,能在G和A之间切割DNA，如下图所示。
黏性末端黏性末端③结果：能将DNA分子切割成很多不同的片段。
备注：不同DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个DNA分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
（2）“分子缝合针”——DNA连接酶①作用：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的DNA分子称为重组DNA 分子。
因此，DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。
（3）“分子运输车”——载体——质粒①载体具备的条件：1）能在受体细胞中复制并稳定保存。
2）具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
3）具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
②最常用的载体——质粒：质粒在细菌中以独立于拟核之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质，并具有自我复制实力的双链环状DNA分子。
2023年高考选择性必修三试题整理+-含答案+副本
2023年全国高考各省选择性必修三试题整理（非选择题）（2023年全国甲卷（3卷））11.为了研究蛋白质结构与功能，常需要从生物材料中分离纯化蛋白质。
某同学用凝胶色谱法从某种生物材料中分离纯化得到了甲、乙、丙3种蛋白质，并对纯化得到的3种蛋白质进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳，结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。
已知甲的相对分子质量是乙的2倍，且甲、乙均由一条肽链组成。
回答下列问题。
（1）图中甲、乙、丙在进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳时，迁移的方向是_____（填“从上向下”或“从下向上”）。
（2）图中丙在凝胶电泳时出现2个条带，其原因是_____。
（3）凝胶色谱法可以根据蛋白质_____的差异来分离蛋白质。
据图判断，甲、乙、丙3种蛋白质中最先从凝胶色谱柱中洗脱出来的蛋白质是_____，最后从凝胶色谱柱中洗脱出来的蛋白质是_____。
（4）假设甲、乙、丙为3种酶，为了减少保存过程中酶活性的损失，应在_____（答出1点即可）条件下保存。
（2023年全国甲卷（3卷））12.接种疫苗是预防传染病的一项重要措施，乙肝疫苗的使用可有效阻止乙肝病毒的传播，降低乙型肝炎发病率。
乙肝病毒是一种DNA病毒。
重组乙肝疫苗的主要成分是利用基因工程技术获得的乙肝病毒表面抗原（一种病毒蛋白）。
回答下列问题。
（1）接种上述重组乙肝疫苗不会在人体中产生乙肝病毒，原因是_____。
（2）制备重组乙肝疫苗时，需要利用重组表达载体将乙肝病毒表面抗原基因（目的基因）导入酵母细胞中表达。
重组表达载体中通常含有抗生素抗性基因，抗生素抗性基因的作用是_____。
能识别载体中的启动子并驱动目的基因转录的酶是_____。
（3）目的基因导入酵母细胞后，若要检测目的基因是否插入染色体中，需要从酵母细胞中提取_____进行DNA分子杂交，DNA分子杂交时应使用的探针是_____。
（4）若要通过实验检测目的基因在酵母细胞中是否表达出目的蛋白，请简要写出实验思路。
4 第三章 食用菌遗传育种
二、选择育种
又称自然选种 又称自然选种，是指利用自然界现有的变 自然选种， 经过选择培育获得新品种的方法。 异，经过选择培育获得新品种的方法。 包括以下步骤： 包括以下步骤： 1、品种资源的收集 品种不同地区：不同海拔高度、 品种不同地区：不同海拔高度、不同纬 不同基物上生长的野生菌。 度、不同基物上生长的野生菌。并记录采 集时间、地点、海拔、坡向、土质、 集时间、地点、海拔、坡向、土质、阴蔽 基物等。 度、基物等。 2、纯种分离
杏鲍菇同工酶酶谱
电泳
白6， 8， 11， 13， 19， 29， 野平，杏5
三、诱变育种
概念：是利用物理或化学等因素诱使DNA分子发生变异， 是利用物理或化学等因素诱使DNA分子发生变异，
从中加以选择和利用。
原理： 诱发突变
物理诱变：采用高能量辐照引起DNA受损伤，人为地改变碱基组 物理诱变：采用高能量辐照引起DNA受损伤，人为地改变碱基组 DNA
第三章 食用菌遗传育种
主要内容 第一节 食用菌的生活史 第二节 食用菌的交配系统 第三节 食用菌育种技术
第一节 食用菌的生活史
一、 概念----食用菌孢子萌发形成初生菌丝， 概念----食用菌孢子萌发形成初生菌丝， 初生菌丝经过质配形成次生菌丝，然后扭结 形成子实体，成熟子实体产生新一代孢子的 过程。 二、 典型生活史 三、常见食用菌的生活史
化学诱变：采用化学物质引起DNA改变，引起突变， 化学诱变：采用化学物质引起DNA改变，引起突变，
创造可实用的基因的可能。 诱变因素：根据诱变因素的化学性质或作用方式，可分为3 诱变因素：根据诱变因素的化学性质或作用方式，可分为3 大类：第1类不能在立体条件下进行。后2 大类：第1类不能在立体条件下进行。后2者可离体进行。 碱基类似物：有时掺入DNA分子中，导致原碱基对在空间 碱基类似物：有时掺入DNA分子中，导致原碱基对在空间 位置上的讹误，使遗传基因突变。有5 位置上的讹误，使遗传基因突变。有5-溴脱氧尿苷、 5-溴 尿嘧啶、a 尿嘧啶、a-氨基嘌呤。 改变DNA结构的诱变剂：能和1 改变DNA结构的诱变剂：能和1个或多个碱基发生化学反 应，从而导致复制时碱基配对的转换，即A 应，从而导致复制时碱基配对的转换，即A-T与G-C的转换， 引起突变。有亚硝酸、硫酸二乙酯、甲基磺酸乙酯、亚硝 基胍。 码阻移动诱变剂：能插入DNA分子的碱基对之间，使DNA 码阻移动诱变剂：能插入DNA分子的碱基对之间，使DNA 的结构变形，从而导致DNA复制时发生突变。包括丫啶类 的结构变形，从而导致DNA复制时发生突变。包括丫啶类 类、吡啶类、多环烃、含氮杂环致癌物、真菌毒素、抗生 素，研究最多的是丫啶类化合物。
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二、原生质体融合育种程序
（一）直接亲本及遗传标记的选择 （二）原生质体的制备与再生 （三）原生质体融合 （四）融合体再生
（一）直接亲本及遗传标记的选择
一般把诱变谱系中筛选获得的不同正变 株作为直接亲本进行融合。 现在认为融合亲本应采用较大差异的近 亲菌株。
标记：营养缺陷型，抗性 热致死（灭活）孢子颜色菌落形态 遗传分析：采用营养缺陷型，抗性 提高产量：热灭活 荧光染色标记
酶解
过滤
离心 原生质体
培养基组成 Musilkova 等研究发现，黑曲霉在限制性培养 基或合成培养基中分离原生质体的数量会显著 增加。 放线菌只有在加入甘氨酸的培养基中培养后， 才能使酶类易于渗入和瓦解细胞壁。 ②菌体的培养方式 丝状菌常用平板玻璃纸法 细菌和酵母多用振荡沉没培养法。
①
（1）影响原生质体制备的因素
沉淀物用酶液悬浮水解去壁制成原生质体 高渗溶液洗涤原生质体 原生质体稀释后取适量放入无菌培养皿 培养皿移至紫外灯下诱变 再生培养基再生培养 分离优质菌株并遗传稳定性鉴定 菌种特性和发酵性能研究
出发菌株的培养和 原生质体制备
选择合适的化学诱变剂，配制成合适的浓度 加入原生质体悬浮液（含高渗溶液）
诱变处理 离心弃诱变剂、原生质体用稳定液洗涤
原生质体育种
Weibull 等于 1953 年首次用溶菌酶处理巨大芽 孢杆菌细胞获得原生质体，并首次提出原生质 体的概念。 Mcquillen 于 1955 年首次发现巨大芽孢杆菌原 生质体再生方法。 1978 年第三届国际工业微生物遗传学讨论会 上提出原生质体融合。
与正常细胞相比，原生质体具有一些 新的独特的特性
再生培养基再生培养 分离优质菌株并遗传稳定性鉴定
菌种特性和发酵性能研究
1、转化 染色体DNA或其他线状染色体转化原生质 体效率低，质粒DNA具有高频转化率。
三、原生质体转化育种
2、影响原生质体转化的因素 ①融合促进剂PEG来源、批号及聚合度。 ②制备原生质体的菌丝年龄、菌丝生长条件、 原生质体再生条件。 ③转化时，质粒及原生质体的浓度。 ④再生培养基的组成。
（3）
常规诱变育种选用材料为孢子， 这些休眠体对诱变剂比较迟钝， 获得的大部分为负变株，
而制备原生质体的出发材料一般为对数期的 细胞，活力较强，对环境和诱变剂较为敏感， 破壁和再生过程中又淘汰了大量弱势菌株， 能再生的菌株不论初级代谢与次级代谢过程 均较活跃，故高产优质菌株比例比较大
（4）原生质体再生材料无需经过遗传标记， 减少了对菌株的损伤和优良性状的菌株。
一、原生质体再生育种
1、定义：制备原生质体—直接再生—筛选高产 变异株
完整细胞
原生质体
完整细胞
2、产生比常规诱变还高的正变率，其原因有 以下方面：
（1）原生质体比较敏感，制备和再生过程中 的各种化合物及环境中的物理因子对染色体 或质粒DNA都有一定诱变效应。
（2）原生质体再生本质上是细胞壁重建和分 裂能力的恢复的过程，再生的细胞壁在组成 和结构上发生变化，甚至于产生有利于细胞 代谢产物分泌的变异。
二、原生质体诱变育种
1、定义： 以微生物原生质体为原料，物理化学诱变 剂处理，再生培养基再生，从中筛选高产菌 株。
2、原生质体作为诱变材料的优点 ①单孢子壁结构致密牢固，不利于诱变剂向 核内渗透。 ②孢子代谢缓慢，造成基因突变频率较低或 因表型延迟而漏筛。
3、原生质体诱变一般程序
10ml对数期微生物培 养为离心收集菌体
（二）原生质体的制备与再生
1、制备: 原生质体分离：机械法、非酶法和酶法 （1）平板玻璃纸或摇瓶振荡培养 （2）取年轻菌体于高渗溶液中，加有关酶液， pH、温度下酶解 （3）过滤除去菌丝片段 （4）低速离心弃上清,高渗溶液重悬
诱 变
沉淀用高渗亲本
振荡培养
4、原生质体转化一般程序
对数期微生物培养为 离心收集菌体
沉淀物用酶液悬浮水解去壁制成原生质体 高渗溶液洗涤原生质体、2倍SMM浓缩 液、质粒DNA、40%PEG 混合2min，离心 再生培养基再生培养 分离优质菌株并遗传稳定性鉴定 菌种特性和发酵性能研究
四、原生质体融合育种
原生质体融合（protoplast fusion）20世纪 70年代发展起来的基因重组技术。 Fodorhe Schaeffer于1976年分别报道了巨 大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌种内原生质体融 合，微生物融合现象得到证实，并建立了相 应的试验体系。
2、扩大重组的亲本范围
3、原生质体融合时亲本整套染色体参与 交换，遗传物质转移和重组性状较多，集 中双亲优良性状计划更大。
不足之处是原生质体融合后DNA交换和重 组是随机的发生，增加重组体分离筛选的难 度。 此外细胞对异体遗传物质的降解和排斥作 用，以及遗传物质非同源性等因素也会影响 原生质体融合的重组频率，使远缘融合存在 较大困难。
3、实例： 弗氏链霉菌再生后，泰乐菌素产量提高3倍 产二素链霉菌再生后，螺旋霉素产量提高2倍 原因可能为13%-85%的质粒脱落， 解除抗生 素 的调节机制。
4、原生质体再生育种一般程序
出发菌株的选择 菌株的活化和预培养 原生质体的制备 原生质体再生 高产菌株分离 复筛 遗传稳定性鉴定 菌种特性和发酵性能研究
1、由于去除了细胞壁，对外界环境影响更加敏 感，对诱变剂的诱变效应也更为强烈。
2、破壁后细胞表面的受体和噬菌体的结合部位 相应不存在，失去对噬菌体的敏感性。 3、由于解除了遗传物质的最大屏障—细胞壁， 也不受感受态的影响，可进行原生质体转化和 融合等基因重组。
以微生物原生质体育种的常见的 育种方法有： 一、原生质体再生育种 二、原生质体诱变育种 三、原生质体转化育种 四、原生质体融合育种
原生质体融合：
指亲本的原生质体在高渗条件下使之 混合，由聚乙二醇（ PEG ）作为助融剂， 使它们互相凝集，发生细胞融合，接着两 亲本基因组由接触到交换，从而实现遗传 重组。在再生成细胞的菌落中就有可能获 得具有理想性状的重组子。
一、与常规杂交相比，原生质体
融合育种的优越性和不足
1、大幅度提高亲本之间的重组频率