基因工程1.1DNA重组技术的基本工具
人教版高中生物《选修3》答案与提示
选修3课本答案：专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具答案与提示（一）思考与探究1.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段：(1) …CTGCA (2) …AC (3) GC……G …TG CG…（4）…G (5) G…(6) …GC…CTTAA ACGTC… …CG(7) GT… (8)AATTC…CA… G…你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？答：2和7能连接形成…ACGT……TGCA…；4和8能连接形成…GAATTC……CTTAAG…；3和6能连接形成…GCGC……CGCG…；1和5能连接形成…CTGCAG……GACGTC…。
2.联系你已有的知识，想一想，为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。
细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解掉。
生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。
这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵（本题不要求学生回答的完全，教师可参考教师用书中的提示，根据学生的具体情况，给予指导。
上述原则也应适用于其他章节中有关问题的回答。
）。
3.天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？提示：基因工程中作为载体使用的DNA分子很多都是质粒（plasmid），即独立于细菌拟核处染色体DNA之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露的DNA分子。
是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件。
（1）载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。
人教版 高考生物选修三 1.1 DNA重组技术的基本工具
知识目标：2、简述DNA重组技术所需的三种基本工具能力目标：运用所学DNA重组技术的知识，模拟制作重组DNA模型。
情感态度价值观：1、关注基因工程的发展。
2、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
教学重点：DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。
教学难点：基因工程载体需要具备的条件。
★学情分析：★教材分析：《DNA重组技术的基本工具》是人教版生物选修三专题一《基因工程》的第一节，本节内容主要是介绍了DNA重组技术的三种基本工具，是学习《基因工程的基本操作程序》的基础和前提。
★教学建议：探究式教学，通过创设问题情境，在分析问题、解决问题的过程中不断生成一系列新的问题，培养学生的自学能力，以及探究和思维能力。
利用教学多媒体，自制教具，使抽象的问题形象化，引导学生自主动手操作，解决每一程序中的技术难点和重点。
1.设置情境，引导学生在思考中学习新知识。
2.让抽象的语言在插图与动手中形成深刻认识。
抽象的黏性末端、平末端以及磷酸二酯键的部位，与直观的插图配合运用，使学生准确理解切割或连接部位以及“黏性”的内涵。
DNA连接酶“缝合”磷酸二酯键，在重组DNA过程中体现在何处，结合插图更易于理解。
在模拟制作DNA重组模型时，改为教师提供基因纸带（类似于物理打点计时器纸带），纸带上分两种，一种是一条作为提供目的基因的DNA 片段，上面设计了很多不同的酶切位点，另一个制成环状表示质粒载体，上有各种酶切位点及两个标记基因。
让学生自己分析动手来操作，更容易让学生获得更理性直观的认识。
引导学生对基因工程进行整体性思考。
3.创设情境：假如我们用从霍乱弧菌中提出的质粒来做载体，会出现什么问题？让学生从而认清载体要对受体细胞无害。
★导入设计导入二。
高中生物选修3教案 第1章 基因工程
专题一 1.1 DNA重组技术的基本工具1、教材分析《DNA重组技术的基本工具》是人教版生物选修三专题一《基因工程》的第一节，本节内容主要是介绍了DNA重组技术的三种基本工具，是学习《基因工程的基本操作程序》的基础和前提。
2、教学目标1．知识目标：（1）简述基础理论研究和技术进步催生了基因工程。
（2）简述DNA重组技术所需的三种基本工具。
2．能力目标：运用所学DNA重组技术的知识，模拟制作重组DNA模型。
3．情感、态度和价值观目标：（1）关注基因工程的发展。
（2）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
3、教学重点和难点1、教学重点DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。
2、教学难点基因工程载体需要具备的条件。
4、学情分析学生在必修课中已经学习过关于基因工程的基础知识，对于本部分内容已经有了初步了解，所以学习起来应该不会有太大的困难。
5、教学方法1、学案导学：见学案。
2、新授课教学基本环节：预习检查、总结疑惑→情境导入、展示目标→合作探究、精讲点拨→反思总结、当堂检测→发导学案、布置预习6、课前准备1．学生的学习准备：预习《DNA重组技术的基本工具》，初步把握DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。
2．教师的教学准备：多媒体课件制作，课前预习学案，课内探究学案，课后延伸拓展学案。
七、课时安排：1课时一、教学过程(一) 预习检查、总结疑惑。
检查学生落实预习情况并了解学生的疑惑，使教学具有针对性。
（二）情景导入、展示目标。
教师首先提问：A.我们以前在哪部分学习过基因工程？（必修二从杂交育种到基因工程）B.回想一下，转基因抗虫棉是怎样培育出来的？经过了哪些主要步骤？（实质是基因工程的基本操作程序：目的基因的获取，基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定）从这节课开始，我们将深入学习基因工程，今天我们来学习DNA重组技术的基本工具。
我们来看本节课的学习目标。
（多媒体展示学习目标，强调重难点）（三）合作探究、精讲点拨。
DNA重组技术的基本工具
DNA重组技术的基本工具DNA重组技术是一种重要的分子生物学技术，用于改变基因组中的DNA序列，使之具有特定的功能。
这项技术的应用范围广泛，可以在基础研究、医学诊断、药物开发等领域发挥重要作用。
DNA重组技术的基本工具包括DNA片段的制备、限制性内切酶、DNA连接酶、质粒和载体等。
首先，DNA片段的制备是DNA重组技术的第一步。
通过PCR（聚合酶链反应）或限制性内切酶切割，可以从某个DNA源中获取特定的DNA片段。
PCR是一种体外扩增技术，可以将特定的DNA序列进行快速放大。
限制性内切酶是一类特殊的酶，可以识别特定的DNA序列并在该序列上切割DNA链。
通过PCR和限制性内切酶的组合应用，可以制备出需要的DNA片段。
其次，限制性内切酶是DNA重组技术中的重要工具之一。
限制性内切酶可以特异性地切割DNA链，并产生一定的粘性或平滑的DNA末端。
这些末端的特性决定了DNA片段连接的方式。
常用的限制性内切酶有EcoRI、BamHI、HindIII等。
当两个DNA片段具有相同的限制性内切酶切割位点时，它们可以通过限制性内切酶的连接来形成一个新的DNA分子。
接下来，DNA连接酶也是DNA重组技术中必不可少的工具之一。
DNA连接酶能够将两个DNA片段在适当的条件下连接在一起。
常用的DNA连接酶有T4 DNA连接酶和DNA聚合酶。
通过合适的实验条件和适当的连接酶，可以使两个DNA片段有效地连接成为一个整体。
此外，质粒和载体也是DNA重组技术中的重要工具。
质粒是一种小环状DNA分子，在细菌细胞中存在，并能自我复制。
载体则是质粒或其他DNA分子，用于携带所需的DNA片段。
通过将需要插入的DNA片段连接到载体上的限制性内切酶切割位点上，并将该载体转化至宿主细胞中，就可以实现外源DNA的导入。
在实际应用中，DNA重组技术的基本工具往往是共同配合使用的。
通过PCR或限制性内切酶的组合，可以制备出所需的DNA片段；通过限制性内切酶的连接和DNA连接酶的应用，可以将不同的DNA片段连接起来形成一个新的DNA分子；通过质粒和载体的应用，可以将需要插入的DNA片段导入到宿主细胞中实现转化。
DNA重组技术的基本工具定稿
形成两种末端 4、结果： 结果：
基因的针线──DNA连接酶 ──DNA 二、基因的针线──DNA连接酶
连接酶有两种： 连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得 到的，称之为E·coli连接酶。另一种是从 连接酶。 到的，称之为 连接酶 T4噬菌体中分离得到，称为 4连接酶。 噬菌体中分离得到， 噬菌体中分离得到 称为T 连接酶。
第三阶段
精子细胞
变形
精子
精子细胞变形中的主要变化： 精子细胞变形中的主要变化：
1.细胞核—— 1.细胞核—— 精子头的主要部分 细胞核 2.高尔基体—— 2.高尔基体—— 头部的顶体 高尔基体 3.中心体—— 3.中心体—— 精子的尾 中心体 4.线粒体—— 线粒体鞘膜(尾的基部) 4.线粒体—— 线粒体鞘膜(尾的基部) 线粒体 5.细胞内其他物质—— 原生质滴(球状, 5.细胞内其他物质—— 原生质滴(球状, 细胞内其他物质
二、基因表达载体的组成： 基因表达载体的组成：
a、目的基因 b、启动子 c、终止子 d、标记基因
三、将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入 植物细胞 方法 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法
将目的基因导入 ——显微注射法 显微注射法 动物细胞 将目的基因导入 ——感受态细胞 感受态细胞 微生物细胞
(二)利用PCR技术扩增目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 PCR
聚合酶链式反应 概念：PCR全称为_______________， 全称为_______________ ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 特定DNA DNA片段 体外 特定DNA片段 在生物____复制___________ ____复制___________的核酸合成技术 在生物____复制___________的核酸合成技术 DNA复制 ②原理：__________ 原理： DNA复制 已知基因的核苷酸序列 ③条件：_______________________、 条件：_______________________、 四种脱氧核苷酸 _______________、 一对引物 _______________、___________ 、 DNA聚合酶 DNA聚合酶 ___________. 指数 方式扩增， ____（ 方式： _____方式扩增 ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循 2n 环的次数） 环的次数） 结果： ⑤结果： 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增
lyy1.1DNA重组技术的基本工具
评价反馈
1.科学家们经过多年的努力创立了一种新兴生物技术---基因 工程，实施该工程的最终目的是（ D ）
A.定向提取生物体的DNA分子
B.定向地对DNA分子进行人工“剪切”
C.在生物体外对DNA分子进行改造 D.定向地改造生物的遗传性状 2.下列有关基因工程中限制性内切酶的描述错误的是（ C ）
4.DNA连接酶的重要功能是（ B ）
A.DNA复制时母链与子链间形成氢键 B.将两DNA片段之间的缝隙连接起来 C.黏性末端互补碱基间形成氢键 D.A、B、C三项都不正确
学科网
对基因工程概念的理解：
• • • • • • 基因工程别名： DNA重组技术或基因拼接技术 操作对象： 基因 操作环境：体外 原理： 基因重组 操作水平：DNA分子水平 目的： 定向地改造生物的遗传特性
基因工程的基本操作程序
1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定
作用——把两条DNA末端之间的缝隙“缝 合”起来。 GAAT T C C T TAAG P
G
A
即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 P
连接的部位：磷酸二酯键（梯子的扶手） 而不是氢键（梯子的踏板）
E· coli DNA连接酶
或T4DNA连接酶
可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，
即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
2、种类：约4000种。
识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸 3、作用：
序列，并且使每一条链中特定部位的两 个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
黏性末端 平末端
4、结果： 形成两种末端
切断的DNA片段要与受体细 胞的DNA连接，你觉得可以 用什么酶？
测控指导2018学年高中生物选修3福建课件：1.1 DNA重组技术的基本工具
一二三四
三、与遗传有关的各种酶的比较
名称 DNA 连接酶
限制性核 酸内切酶
作用
参与的生理 过程或应用
连接两个 DNA 片段
能够识别双链 DNA 分子 的某种特定核苷酸序列, 基因工程 并且使每一条链中特定部 位的两个核苷酸之间的磷 酸二酯键断开
作用位点 (如下图) a
a
一二三四
名称
DNA 聚合酶 RNA 聚合酶
一二三四
2.基因工程的原理和理论基础 (1)原理:基因重组。 (2)理论基础 ①拼接:不同生物DNA分子的基本组成单位相同,都是4种脱氧核 苷酸;空间结构相同,都是规则的双螺旋结构。 ②表达:生物界共用一套遗传密码,相同的遗传信息在不同生物 体内表达出相同的蛋白质。
一二三四
二、限制性核酸的条件
条件
适应性
稳定并能复制
目的基因稳定存在且数量可扩大
有一个至多个限制酶切割位 点
可携带多个或多种外源基因
具有特殊的标记基因
便于重组 DNA 的鉴定和选择
题型一 题型二 题型三
题型一 限制酶及其作用特点 【例1】 下列有关基因工程中限制酶的描述,正确的是 ( ) A.限制酶只能识别6个或8个脱氧核苷酸组成的序列 B.限制酶的活性受温度的影响 C.限制酶能识别和切割RNA D.限制酶只能从原核生物中提取 解析:限制酶能够识别并切割双链DNA上特定的核苷酸序列,多 数限制酶能够识别6个核苷酸组成的序列,少数可以识别4,5或者8 个核苷酸组成的序列。限制酶的化学本质是蛋白质,活性受温度影 响。限制酶主要从原核生物中获得,同时在某些真核生物(如酵母 菌)细胞内也存在。 答案:B
答案:C
题型一 题型二 题型三
题型三 基因工程中的常用载体——质粒 【例3】 质粒是基因工程最常用的载体,下列关于质粒的说法,正 确的是( ) A.质粒进入受体细胞内都要整合到染色体DNA上 B.质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器 C.基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的 D.质粒上碱基之间在数量上存在A+G=U+C的关系 解析:基因工程使用的载体需有一个至多个酶切位点,具有自我 复制的能力,有标记基因,对受体细胞安全,且分子大小适合。而自 然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件,都要进行人工改造 后才能用于基因工程操作。质粒进入受体细胞后,在细胞中进行自 我复制,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA进行同步复制。质 粒是小型环状双链DNA分子而不是细胞器,也不会有碱基U。 答案:C
高中生物选修三教材答案(适合打印)
高中生物选修三《现代生物科技专题》课后题答案和提示专题一基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具（一）思考与探究1.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段：(1) …CTGCA (2) …AC (3) GC……G …TG CG…（4）…G (5) G… (6) …GC…CTTAA ACGTC……CG(7) GT…(8)AATTC…CA… G…你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？答：2和7能连接形成…ACGT……TGCA…；4和8能连接形成…GAATTC……CTTAAG…；3和6能连接形成…GCGC……CGCG…；1和5能连接形成…CTGCAG……GACGTC…。
2.联系你已有的知识，想一想，为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。
细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解掉。
生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。
这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵。
3.天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？提示：基因工程中作为载体使用的DNA分子很多都是质粒（plasmid），即独立于细菌拟核处染色体DNA之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露的DNA分子。
是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件。
（1）载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。
这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。
高中生物人教版选修三教学案：专题1 1.1 DNA重组技术的基本工具 Word版含答案
1.基因工程的基本原理是基因重组，外源DNA能在受体细胞表达的理论基础是密码子的通用性。
2．DNA重组技术的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和使目的基因进入受体细胞的载体。
3．限制性核酸内切酶可识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定位点上切割。
4．E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端，而T4DNA连接酶既能连接黏性末端也能连接平末端。
5．质粒作为基因工程的载体需具备的条件有：能在宿主细胞内稳定保存并自我复制；具有一个或多个限制酶切割位点；具有标记基因。
6．在基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
一、基因工程的概念及其诞生与发展1．基因工程的概念[填表]别名DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平结果创造出人类需要的新的生物类型和生物产品2．基因工程的诞生和发展(1)基础理论的突破：DNA是遗传物质的证明；DNA双螺旋结构和中心法则的确立；遗传密码的破译。
(2)技术的发明：基因转移载体和工具酶的相继发现；DNA合成和测序技术的发明；DNA体外重组的实现及重组DNA表达实验的成功；第一例转基因动物的问世及PCR技术的发明。
二、DNA重组技术的基本工具1．限制性核酸内切酶(又称限制酶)(1)来源：主要来自原核生物。
(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
(3)结果：产生黏性末端或平末端。
(4)应用：已知限制酶Eco RⅠ和SmaⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓AATTC和CCC↓GGG，在图中写出两种限制酶切割DNA后产生的末端并写出末端的种类。
Eco RⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶识别的碱基序列不同，切割位点不同(填“相同”或“不同”)，说明限制酶具有专一性。
2．DNA连接酶(1)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
DNA重组技术的基本工具
（1）种类： E·coli DNA连接酶、T4 DNA连接酶 （2）作用： 形成磷酸二酯键
基因A
基因B
将双链 DNA片段“缝合”起来，恢复被限制 酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 ,这样一个 重组的DNA分子就形成了。
4
载体--质粒
（1）作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中 （2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制
载体的作用
（1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存
载体的必要 条件
（2）具多个限制酶切点，以便与外源基因连接
（3）具有某些标记基因，便于进行鉴定和选择
载体的种类
（1）细菌的质粒 （2）病毒：λ噬菌体衍生物、动植物病毒等
பைடு நூலகம்
黏性末端
2
限制性核酸内切酶
②SmaⅠ: 只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。 在G与C 之间切割
中轴线
2
限制性核酸内切酶
②SmaⅠ: 只能识别CCCGGG序列。
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的 DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。
平末端
平末端
３
DNA连接酶
1.1 DNA重组技术的基本工具
具有绿色荧光蛋白基因的水母能发出绿色的荧光
1.1 DNA重组技术的基本工具
转入水母绿色荧光蛋白基因后的小鼠
1
基因工程
（1）概念： 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设 计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予 生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要 的新的生物类型和生物产品。 （2）别名： DNA重组技术 （3）原理： 基因重组 （4）操作环境：体外操作 （5）操作水平：DNA分子水平
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2.酶的作用：
将双链DNA分子片段“缝合”起来，恢复 两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
三、基因进入受体细胞的载体—“分子运输车” 要让一个从甲生物细胞内取出来的基 因在乙生物体内进行表达，首先得将这个 基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基 因送入细胞的工具就是运载体。
作为基因工程运载体的条件
①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 ②具一个至多个限制酶切点，以便与外源 基因连接。 ③具有某些标记基因，便于进行筛选。 ④载体是安全的，不能对受体细胞有害。
下列关于基因工程的叙述，正确的是( C ) A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B. 所有的限制酶都能识别同一种特定的核苷酸 序列 C.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、 DNA连接酶和运载体 D.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是应为细 菌繁殖快。
什么是基因工程？
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重 组技术。该技术是在生物体外，按照 人们的意愿，通过对DNA分子进行人 工“剪切”和“拼接”，对生物的基 因进行改造和重新组合，然后导入受 体细胞内，使重组基因在受体细胞内 表达，产生出人类所需要的基因产物。
一、限制性核酸内切酶—“分子手术刀”
概述：切割DNA的工具是限制性核 酸内切酶，又称限制酶。这类酶 主要是从原核生物中分离纯化出 来的。现在已分离出约4000种限 制酶。限制酶能识别双链DNA分 子的某种特定核苷酸序列，并在 特定的位置切割。
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中 箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
限制酶 识别序列 及切割位 点 BamH Ⅰ ↓ GGATCC CCTAGG ↑ Hind Ⅲ ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ EcoR Ⅰ ↓ GAATTC CTTAAG ↑ Sma Ⅰ ↓ CCCGGG GGGCCC ↑
二、DNA连接酶—“分子缝合针”
1.酶的种类：
（1）E·coli DNA连接酶（大肠杆菌） （2）T4 DNA连接酶（噬菌体）
两种酶的区别：
（1）E·coli DNA连接酶只能将双链DNA 片段互补的黏性末端之间连接起来。 （2）T4 DNA连接酶都能连接黏性末端和平 末端，但连接平末端之间的效率比较低。
3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不 能使用 Sma Ⅰ切割，原因是 _________ 。 (1) 一个图 1所示的质粒分子经 Sma Ⅰ切割前后，分别 (4) 与只使用EcoR Ⅰ相比较，使用BamH Ⅰ和 含有 ________ 个游离的磷酸基团。 (5) 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源 DNA的 (2) 若对图中质粒进行改造，插入的 Sma Ⅰ酶切位点越 优点在于可以防止_________ 多，质粒的热稳定性越 ______。
( 。
_________________________
答案： (1)0、2 (2)高 (3)Sma Ⅰ会破坏质粒的抗性基因和外源 DNA中的目的基因 (4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身 环化 (5) 鉴别和筛选含有重组质粒的细胞
基因工程
专题1
1.1 1.2 1.3 1.4
基因工程
基因工程的基本工具 基因工程的基本操作程序 基因工程的应用 蛋白质工程的崛起
一、理解基因工程的概念，基因工程 有什么优点。 二、基因工程的基本工具 1、限制性核酸内切酶来源于哪里？有什 么作用?作用的特点是什么？ 2、DNA连接酶的种类和作用是什么? 3、运载体的作用是什么?作为运载体需 要什么条件？运载体的种类有哪些？