分光光度计的性能检验

实验名称：分光光度计的性能检验

一、实验目的

1、掌握分光光度计的重现性、波长精度检查等性能检验方法。

2、熟悉分光光度计的使用方法。

二、实验原理

1、分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此，新购仪器及使用一段时间后，均需进行检验调整。

2、利用镨钕滤光片的特征吸收峰值检验波长精度。

3、同种厚度的吸收池，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故在使用时需加以选择配对。

三、仪器与试剂

1、仪器：紫外—可见分光光度计（配镨钕滤光片）。

2、试剂：高猛酸钾溶液、蒸馏水。

四、实验内容与步骤

取两个干净的比色皿，将其中一个用蒸馏水润洗两到三遍，最后倒入蒸馏水（注意不要超过比色皿体积的三分之二）；另一个用高锰酸钾溶液润洗两到三遍，最后倒入高锰酸钾溶液（注意不要超过比色皿体积的三分之二）。然后将两个比色皿放入风光光度计中，以蒸馏水作为空白对照检测高锰酸钾的吸收波长。

在电脑上输入开始波长:590.0 nm；结束波长:420.0 nm开始检测。

五、注意事项

1、仪器预热时必须打开样品室盖，因样品室盖是光闸门的开关，打开时，光闸门处于关的位置，可避免光电倍增管照光，延长光电倍增管的使用寿命。

2、大幅度改变测试波长时，需要等数分钟后，才能正常工作。（因波长大幅移动时，光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一定光响应平衡时间。）

3、每台仪器所配套的吸收池不能与其他仪器上的吸收池单个调换。

4、仪器使用完毕后，用随机提供的塑料套罩住，在套子内应放数袋硅胶，以免灯室受潮。反射镜发霉或沾污会影响仪器能量。

5、吸收池每次使用完毕后，应立即用蒸馏水洗净，用吸水纸揩干，存于吸收池的盒内。

6、仪器工作1个月左右或搬动后，要重新进行波长精确性等方面的检查，以确保仪器的使用和测定的精确。

六、数据处理

结论：由图表可知，高锰酸钾的最大吸收波长为525.0nm,与理论值相等，说明此仪器的波长精确性很好。

七、思考题

1、同种吸收池透光度的差异对测定有何影响？

答：进入比色皿的选定光线应该是稳定的(强度稳定、波长稳定），它在比色皿中被溶液吸收一部分能量后再穿出比色皿而加入光电池产生电信号得到读数，然后进行结果计算。如果有比色皿本身透光率的差异而出现的不是溶液对光线的吸收，而这个差异产生的电信号数值又算在样品溶液的电信号内，这就产生了测定的读数误差，从而导致计算结果有不应该有的误差。

2、检查分光光度计的波长精度及重现性对测定有什么实际意义？

答：波长精度和波长重复性的改变可使分光光度计的定量分析造成误差，定性分析或结构分析判断错误。因此，为确保分析结果的准确性，应在仪器安装完或使用一段时间后要进行一次检查校正。

3、使用紫外—可见分光光度计时，应注意哪些问题？

答：（1）比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。首先，应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜，就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致，还可能使入射光不能全部通过样品池，导致测试比准确度不符合要求。其次，应保证每次测试时，比色皿架推拉到位。若不到位，将影响到测试值的重复性或准确度。最后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命.

（2）干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致：（a）数显不稳、无法调“0”点或“100%”点（电路或光电管受潮）。（b）反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因，分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。

（3）仪器的工作环境。应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。