病原学诊断
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• 包涵体
epithelial cells - adenovirus
uninfected
slides from CDC
early infection
late infection
（2）红细胞吸附： （3）干扰现象 （4）pH改变
病毒数量与感染性测定
– 蚀斑测定：
PFU（空斑形成单位） 病毒量：Pfu/ml
细菌学诊断
细菌学诊断
细菌学诊断
病原菌抗原的检测
优点： ①不受抗生素使用的限制； ②敏感性高。
免疫学技术: 沉淀试验 ELISA 免疫荧光等
细菌学诊断
血清学诊断
细菌学诊断
❖ 用已知抗原检测患者血清中未知抗体及其量的变化—— 辅助诊断方法
• 适用于抗原性较强、病程较长的传染病诊断 • 取双份血清（隐性感染或者疫苗接种） • 血清抗体效价受多种因素影响
病毒学诊断
形态学检查
光学显微镜： 观察病毒的包涵体
电子显微镜： 直接观察病毒
病毒蛋白抗原的检测
1、免疫荧光技术 2、ELISA 3、免疫印迹试验 4、放射免疫法
真菌学诊断
Diagnosis of fungi
一、病原性真菌的检查与鉴定
▪ 直接镜检：
▪ 分离培养：
－常用培养基 ➢ 沙保（Sabourud）培养 基 ➢ 培养方法： 一般培养 小培养
用于病毒浓度的精确定量
– TCID50与ID50
概念：病毒感染鸡胚、动物与细胞后， 引起50%死亡或病变的最小病毒量。
病毒感染的血清学诊断
➢ 原理：
➢ 应用： ➢ 常用实验：
中和实验 血凝抑制实验
病毒学诊断
病毒感染的快速诊断
➢ 形态学检查：
➢ 病毒蛋白抗原检查： ➢ 特异IgM检测： ➢ 病毒核酸检测：
分离培养是微生物学诊 断的金标准，是最可靠的传 统诊断技术。
细菌学诊断
致病菌的检验程序
细菌学诊断
普通琼脂平板
血平板
标本 选择培养基 观分培察菌离养涂落片性、状染、色溶、血镜性检、色素——初步鉴别
挑取可疑菌落
生化反应测定
纯培养
血清学鉴定
致病菌的检验程序
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验
存在问题
自身带病毒； 有的接种后不敏感； 动物饲养问题
鸡胚培 来源客观，易于管理，带病毒机会少；多途 敏感病毒谱窄
养
径接种
细胞培 应用广泛，敏感病毒谱广 养
设备技术要求条件高
识别病毒在培养细胞中增殖的方法
（1）细胞的变化 • 细胞病变效应（CPE）：
病毒感染细胞后，可出现细胞圆缩、裂解或细胞肿大、数 个细胞融合成多核巨细胞等。
细菌学诊断
细菌学诊断
革兰染色（Gram stain）
• 原理：细胞壁结构 • 用途:
鉴别细菌 选择用药 了解细菌致病性
细菌学诊断
细菌学诊断
▪ 抗酸染色
• 原理：分枝杆菌的细胞壁结构特点。 • 用途：分枝杆菌的鉴定 • 方法
初染：石炭酸复红
脱色：3%盐酸酒精
复染：碱性美兰
细菌分离和鉴定
▪ 动物实验
▪ 皮肤超敏反应实验
二、真菌快速诊断 ▪ 血清学实验： ▪ 核酸检测： ▪ 真菌毒素检测：
❖ 诊断方法
• 直接凝集试验（肥达试验） • 中和试验 • ELISA
病毒学诊断
Diagnosis of virus
标本采集与转运
➢急性期标本； ➢根据感染性质取不同的标本； ➢标本置于转运液中；
➢冷藏快运。
病毒学诊断
病毒感染的实验室诊断方法
病毒分离培养
方法
应用价值
动物接 种
应用最早； 方法简便； 结果易于观察
区别取材 无菌操作 用抗生素之前 尽快送检、妥善保护 做好标记
• 病原菌的检测方法
细菌形态与结构检查 分离和鉴定
显微镜放大法 染色法——革兰染色法
革兰染色（Gram stain）
方法
•涂片 •干燥 •固定
•染色：
初染：结晶紫 媒染：碘液 脱色：95%酒精 复染：沙黄
第八章 病原学诊断
▪ 细菌学诊断 ▪ 病毒学诊断 ▪ 真菌学诊断
细菌学诊断
Diagnosis of bacteria
细菌学诊断
wenku.baidu.com
病原菌检测
细菌学诊断：以检测病原菌及其抗原、产物 病原菌抗原检测
或核酸为目的。
其他检测法：PCR等
血清学诊断：以检测患者血清中特异抗体为目的。
病原菌检测
细菌学诊断
• 标本采集与送检的原则
epithelial cells - adenovirus
uninfected
slides from CDC
early infection
late infection
（2）红细胞吸附： （3）干扰现象 （4）pH改变
病毒数量与感染性测定
– 蚀斑测定：
PFU（空斑形成单位） 病毒量：Pfu/ml
细菌学诊断
细菌学诊断
细菌学诊断
病原菌抗原的检测
优点： ①不受抗生素使用的限制； ②敏感性高。
免疫学技术: 沉淀试验 ELISA 免疫荧光等
细菌学诊断
血清学诊断
细菌学诊断
❖ 用已知抗原检测患者血清中未知抗体及其量的变化—— 辅助诊断方法
• 适用于抗原性较强、病程较长的传染病诊断 • 取双份血清（隐性感染或者疫苗接种） • 血清抗体效价受多种因素影响
病毒学诊断
形态学检查
光学显微镜： 观察病毒的包涵体
电子显微镜： 直接观察病毒
病毒蛋白抗原的检测
1、免疫荧光技术 2、ELISA 3、免疫印迹试验 4、放射免疫法
真菌学诊断
Diagnosis of fungi
一、病原性真菌的检查与鉴定
▪ 直接镜检：
▪ 分离培养：
－常用培养基 ➢ 沙保（Sabourud）培养 基 ➢ 培养方法： 一般培养 小培养
用于病毒浓度的精确定量
– TCID50与ID50
概念：病毒感染鸡胚、动物与细胞后， 引起50%死亡或病变的最小病毒量。
病毒感染的血清学诊断
➢ 原理：
➢ 应用： ➢ 常用实验：
中和实验 血凝抑制实验
病毒学诊断
病毒感染的快速诊断
➢ 形态学检查：
➢ 病毒蛋白抗原检查： ➢ 特异IgM检测： ➢ 病毒核酸检测：
分离培养是微生物学诊 断的金标准，是最可靠的传 统诊断技术。
细菌学诊断
致病菌的检验程序
细菌学诊断
普通琼脂平板
血平板
标本 选择培养基 观分培察菌离养涂落片性、状染、色溶、血镜性检、色素——初步鉴别
挑取可疑菌落
生化反应测定
纯培养
血清学鉴定
致病菌的检验程序
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验
存在问题
自身带病毒； 有的接种后不敏感； 动物饲养问题
鸡胚培 来源客观，易于管理，带病毒机会少；多途 敏感病毒谱窄
养
径接种
细胞培 应用广泛，敏感病毒谱广 养
设备技术要求条件高
识别病毒在培养细胞中增殖的方法
（1）细胞的变化 • 细胞病变效应（CPE）：
病毒感染细胞后，可出现细胞圆缩、裂解或细胞肿大、数 个细胞融合成多核巨细胞等。
细菌学诊断
细菌学诊断
革兰染色（Gram stain）
• 原理：细胞壁结构 • 用途:
鉴别细菌 选择用药 了解细菌致病性
细菌学诊断
细菌学诊断
▪ 抗酸染色
• 原理：分枝杆菌的细胞壁结构特点。 • 用途：分枝杆菌的鉴定 • 方法
初染：石炭酸复红
脱色：3%盐酸酒精
复染：碱性美兰
细菌分离和鉴定
▪ 动物实验
▪ 皮肤超敏反应实验
二、真菌快速诊断 ▪ 血清学实验： ▪ 核酸检测： ▪ 真菌毒素检测：
❖ 诊断方法
• 直接凝集试验（肥达试验） • 中和试验 • ELISA
病毒学诊断
Diagnosis of virus
标本采集与转运
➢急性期标本； ➢根据感染性质取不同的标本； ➢标本置于转运液中；
➢冷藏快运。
病毒学诊断
病毒感染的实验室诊断方法
病毒分离培养
方法
应用价值
动物接 种
应用最早； 方法简便； 结果易于观察
区别取材 无菌操作 用抗生素之前 尽快送检、妥善保护 做好标记
• 病原菌的检测方法
细菌形态与结构检查 分离和鉴定
显微镜放大法 染色法——革兰染色法
革兰染色（Gram stain）
方法
•涂片 •干燥 •固定
•染色：
初染：结晶紫 媒染：碘液 脱色：95%酒精 复染：沙黄
第八章 病原学诊断
▪ 细菌学诊断 ▪ 病毒学诊断 ▪ 真菌学诊断
细菌学诊断
Diagnosis of bacteria
细菌学诊断
wenku.baidu.com
病原菌检测
细菌学诊断：以检测病原菌及其抗原、产物 病原菌抗原检测
或核酸为目的。
其他检测法：PCR等
血清学诊断：以检测患者血清中特异抗体为目的。
病原菌检测
细菌学诊断
• 标本采集与送检的原则