激光扫描共聚焦显微镜操作手册
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激光扫描共聚焦显微镜(A1R-si)
操作指南
目录
第一章:Ti-E 显微镜操作2-7 显微镜光路调节和照明注意事项 6
Ti-E 物镜,DIC 插片,DIC 棱镜对照表7
第二章:共聚焦开关机8-10 第三章:共聚焦图像拍摄1-38
NIS-Elements C 软件开启和操作界面简介1-15
NIS-Elements C 的实时图像获得基本操作16-23
图像拍摄24-27
探测模式(标准探测器)设置28-38 第四章: 图像的保存和查看39-42 第五章:图像分析43-46 附件一、多维拍摄功能和操作方式介绍47-51
附件二:图像格式批量转换操作52-53
第一章Ti-E 显微镜操作指南
(一)认识显微镜各个部件
(1)滤光片:包括D---毛玻璃;NCB---色温(8)滤色块转盘(包括DIC 检偏器);
平衡片;ND---减光片;“G IF”---绿色滤(9)手动荧光光闸;
光片和用于PFS 的红外滤光片;(10)电动焦距调节旋钮;(2)视场光阑;(11)ND 减光片;
(3)聚光器升降旋钮;(12)遥控器;
(4)起偏器(DIC 用);(13)透射光电源;
(5)聚光器对中旋钮;(14)汞灯荧光光源;
(6)孔径光阑;(15)PFS 控制器
(7)聚光器模块(包括明视场,DIC);(16)HUB 控制器
遥控器示意图(根据具体配置有些图标可能不显示)
1)物镜切换按钮;
2)滤光块,DIC 检偏器切换按钮;
3)DIC 检偏器快速切换按钮;
4)光路端口切换按钮;
5)PFS 开关控制按钮;
6)聚光器转盘切换按钮;
7)透射光源控制按钮*。
*请注意:CNTL 按钮灯亮,则可以通过遥控器或电脑控制软件来调节透射光源强度,此时显微镜底座左侧光源开关和调节旋钮锁定;CNTL 功能关闭,可以通过显微镜底座开关和旋钮来控制透射光源。
前面板示意图
1)状态显示屏;
2)PFS 开关按钮和PFS 聚焦状态指示灯(需要选购PFS 部件);
3)光路端口切换按钮;
4)中间变倍旋纽;
侧面板示意图
1)调焦旋钮
2)粗微调切换按钮
3)物镜切换按钮;
4)滤光块,DIC 检偏器切换按钮
5)透射光光源开关(当遥控器透射光源控制按钮打开时,此按钮无效);
6)透射光量度调节旋钮(当遥控器透射光源控制按钮打开时,此旋按钮无效);
7)物镜复位;
8)物镜向下移动2 毫米;
注意:在使用显微镜之前,要把主机底座右后端的黑色HUB 控制器(显微镜示意图15 位置)右侧的电源开关打开。
(二)明视场透射光操作要点
1)打开电源开关,并打开显微镜透射光卤素灯电源开关;
2)把滤色块移到空位;
3)把起偏器,检偏器移出光路;
4)把聚光器转盘切换到A 状态;
5)检查柯勒照明(柯勒照明调节方法参看附录1);
6)检查出光端口。
(三)微分干涉(DIC)操作要点
1)按照明视场透射光观察方法调节好显微镜;
2)把起偏器,检偏器移入光路;
3)按照相对应物镜将聚光器镜转盘转到相应N1/N2 位置(请参见另外所附对照表);
4)检查出光端口;
5)旋转起偏器,选择最佳显示效果。
(四)荧光观察操作要点
1)打开荧光电源稍待片刻至光源指示灯不闪;(打开约10min 稳定,关闭需要超过15min 后才可以再次启动)
2)确认透射光开关处于关闭状态;
3)检查出光端口;
4)选择合适的滤色块;
5)打开光闸(汞灯面板的shutter 旋钮),调节荧光亮度(汞灯面板的ND 旋钮),进行观察;
6)不观察时,把光闸关掉,以避免荧光淬灭。
注意:该系统配置透射和荧光光闸,在做相应操作时,应将对应光闸打开。光闸开关可在遥控器上设定。
落射光照明
光闸按钮
透射光光闸
按钮
汞灯光闸按钮
(电动型号)
显微镜光路调节和照明注意事项
(一)柯勒照明的调节方法
1)选择10X 物镜;
2)调焦,使标本清晰成像;
3)缩小视场光阑(显微镜视图2 位置);
4)上下调节聚光器(显微镜视图3 位置),使视场光阑边缘清晰;
5)调节聚光器对中旋钮,使其居中;
6)放大视场光阑,使其刚刚外切于视野。
(二)长寿命汞灯电源的注意事项
1)电源打开以后,大约10 分钟左右光源达到稳定状态;
2)电源关闭以后,至少要等10 分钟才能重新打开。
(三)物镜盖玻片矫正环的调节方法
1)调焦,使图像相对最清楚;
2)把矫正环向一个方向转动一定角度,此时图像变模糊,调焦,使图像相对最清楚;
3)判断此时的图像质量是否有所改善。如有改善,则按照该方向再旋转一定角度;如质量下降,则反方向旋转;
4)重复2)和3)直到图像质量改善之后又有所下降;
5)反方向旋转,回到倒数第二次的位置即可。
Ti-E 物镜,DIC 插片,DIC 棱镜对照表
Ti-E: Combinations of objective and DIC prism
Objective DIC Slider N1/N2 Plan Apo 10×10×N1 Plan Apo VC 20×20×N2
Plan Apo 40×40×ⅠN2 Plan Apo VC 60×60×I N2
Plan Apo VC 100×100×I N2