几种天然彩色茧品种蚕茧抑菌率的测定与比较

２０１１年第４期　蚕桑茶叶通讯　・５・　几种天然彩色茧品种蚕茧抑菌率的测定与比较　

侯国军　张金卫　李江涛２钟伯雄　冯世民　鱼南洋　’。金杏丽４　汤新新４　丁农２　徐森华２　（１．浙江大学动物科学学院，浙江杭，ｊ，ｒｔ　３１００２９；２．湖州市农业科学研究院，浙江湖州３１３０００；　３．湖州禾桑园农业科技开发有限公司，浙江湖州３１３０００；４．德清县蚕桑站，浙江德清３１３２００）　

摘要：对几种天然彩色茧品种蚕茧的抑菌率进行了测定分析，结果表明：天然彩色茧具有很好的抑菌效　果，其中绿色茧最高，Ｐ５０×秋丰、ＬＪ１３对金黄色葡萄球菌的抑制作用分别达到了７６．１４％、８３．４ｏ％，对大肠　杆菌的抑制率分别为７４．４％、７８．８９％；两对黄色茧品种对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率也均达到了　６０％以上，均比红色茧和白色茧品种高很多。　关键字：彩色茧；抑菌；金黄色葡萄球菌；大肠杆菌　

随着经济发展，人们生活水平不断提高以及消　费理念不断升级，对服饰要求也越来越个性化、舒适　化、高质化和环保化，因此，作为纯天然丝织材料的　丝绸制品充满了新的希望。天然彩色茧主要有绿、　黄、红几种颜色，由于其色素主要来源于桑叶或蚕体　内自身的合成，无毒无害、色泽自然、色调柔和，不仅　对人们健康有益，而且符合当前消费新理念，同时可　以避免印染工业对环境保护所造成的压力，是一种　前景非常广阔的产品。目前，国内对彩色茧色素特　性研究并不多，尤其是对天然彩色茧抑菌性方面的　报道也比较少，所以针对彩色茧抑菌性能的研究，使　其更好服务于人类生活，已经变得越来越重要。为　了了解彩色品种蚕茧的抑菌性能，笔者进行了实验　检测，其结果报告如下。　１材料与方法　１．１材料　天然黄色茧品种：秋丰Ｘ黄３（正反交）、秋丰×　ＨＪ７（正反交）；绿色茧品种：Ｐ５０×秋丰、ＬＪ１３；红色　茧品种：ＲＣ；白茧品种：白玉×秋丰。其中天然黄色　茧品种、绿色茧品种和红色茧品种由湖州市农业科　学研究院提供，白茧品种由中国农业科学院蚕业研　究所提供。　资助项目：湖州市科技攻关项目（２０１０ＧＮ１４）　＋通讯作者　实验用菌：大肠杆菌，Ｅ．Ｃｏｌｉ　Ｓｔｒａｉｎ（ＤＨ５ａ），购　于生工生物（上海）有限公司；金黄色葡萄球菌，由　湖州师范学院惠赠。　所用试剂：胰蛋白胨、酵母浸粉、氯化钠、琼脂、　蛋白胨、牛肉粉，以上试剂均购于生工生物（上海）　有限公司，０．３Ｍ的磷酸缓冲液（ｐＨ＝７．２），无磷洗　涤剂。　所需设备：立式压力蒸汽灭菌器、隔水式恒温培　养箱、台式冷冻恒温振荡器。　１．２方法　１．２．１试样茧洗涤程序　①将试样茧放人大烧杯中，加入自来水及无磷　洗涤剂（２ｇ／Ｌ），浴比为１：３０，水温４０＇（ｉ±３￣Ｃ，洗涤　５ｍｉｎ。然后常温下用清水清洗。　②第一遍清洗２ｍｉｎ，捞出试样茧，用力甩干，然　后，于常温下进行第二遍清洗。　③第二遍清洗２ｍｉｎ，捞出试样茧，用力甩干。　④上述①、②、③三步为一个循环，计为洗涤１　次。重复这三个步骤，直到洗涤到３Ｏ次。最后一次　洗涤采用大量清水将茧壳上的洗涤剂彻底清除，脱　水，烘干，然后用于抗菌实验的测定。　１．２．２试样准备　・６・　薯　黍茶叶盟讯　总第１５４期　将所有试样分别剪成０．３ｅｒａ。左右大小碎片，称　取各抗菌试样、标准空白试样０．７５ｇ若干份。用小　纸片将试样包好，在１０３ＫＰａ灭菌１５ｒａｉｎ。　１．２．３接种菌液的制备　从３—１０代的菌种ｒ（大肠杆菌和金黄色葡萄球　菌）试管斜面中取一接种环细菌，在培养皿里的营　养琼脂培养基上划线，然后，在３７℃下培养２０ｈ。取　营养肉汤２Ｏｒａｌ放人到１０Ｏｒａｌ锥形瓶中，用接种环在　已培养２０ｈ的培养皿中挑一个典型的菌落，接种到　营养肉汤中，在３７ｃＩ＝下，１３０ｒ／ｒａｉｎ，振荡培养１０ｈ，即　制成了接种菌悬液。通过测定活菌个数达到了（１　—５）×１０’ｃｆｕ／ｍｌ。　１．２．４接种菌液准备　用吸管从１．２．３制备好的细菌悬液中吸取　２ｍｌ，加入到装有６ｍｌ营养肉汤的培养基中，充分混　匀后再按１０倍稀释法以０．０３ＰＢＳ缓冲液稀释至含　活菌计数约为（３—４）×１０　ｅｆｕ／ｍｌ菌液。　１．２．５实验操作方法　①准备２个灭过菌的２５０ｍｌ锥形瓶，一个瓶　中加人标准空白试样Ｏ．７５ｇ，一个加入蚕茧试样　０．７５ｇ，然后在每个瓶中加入５０ｍｌＯ．３ＭＰＢＳ缓冲液。　９０．００％　８（Ｉ．∞％　７０．（）０％　，、６０．００％　零５０．００％　｜；ｊ｛Ｌ　４Ｏ・ｏ０％　：＝匾３０．００％　２０．００％　ＩＩＪ．（１０％　（｝．（ｘ】％　９０．００％　８０．００％　７０．００％　一６０．００％　兰５【ｌ＿０ｏ％　斟４０．００％　坦３０．００％　霹５　２０．ｏ０％　１０．００％　０．００％　②用灭菌吸管往每个瓶中加入５ｍｌ菌悬液。　盖上瓶盖，放在台式冷冻恒温振荡器上，在２３℃下，　以１５Ｏｆ／ｒａｉｎ，振荡１８ｈ后，用移液管从每个瓶中吸取　ｌｍｌ试液，放入９ｍｌ０．０３ＭＰＢＳ缓冲液中，摇匀。重　复这些步骤，用ｌ０倍稀释法稀释到３×１０’ｃｆｕ／ｍｌ。　然后用灭过菌的移液枪吸取５Ｏ微升分别涂于营养　琼脂培养基；倒置平皿，放入３７℃恒温培养箱中培　养２４ｈ，记录培养基上菌落个数。　１．２．６计算抑茵率　抑菌率＝（Ｋ—Ｑ）／Ｋ×１００％（５Ｏ微升标准空　白试样液含菌个数为Ｋ，５Ｏ微升含样茧试样液含菌　个数为Ｑ），实验重复３次，以下抑菌率为平均值。　

２　结果　・　２．１天然彩色茧对金黄色葡萄球菌的抑制结果　由图ｌ可知，天然绿色茧品种Ｐ５０×秋丰、Ｕ１３　对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强，分别达到了　７６．１４％、８３．４０％；其次为两对黄色茧品种秋丰×黄　３正反交、秋丰Ｘ　ＨＪ７正反交，抑制率也均在６６％以　上，比对照组白色茧品种高出了将近２４个百分点；　

ＰＳＯ×秋丰ＬＪｌ３　秋丰×黄　３秋丰×ｔｔｌｒ　ＲＣ　白玉×秋车　ｔｒ反空　正匣文　品种名　

图１　天然彩色茧对金黄色葡萄球菌的抑制率　

…ｌ～　一　晶种名　图２天然彩色茧对大肠杆菌菌的抑制率　２０１１年第４期　●　黍豢叶噩讯　・７・　红色茧品种ＲＣ对金黄色葡萄球菌的抑制率为　５２．１ｌ％。　２．２天然彩色茧对大肠杆菌的抑制结果　由图２可知，天然绿色茧品种Ｐ５０×秋丰、ＬＪ１３　对大肠杆菌的抑制率分别为７４．４％、７８．８９％，均比　两个黄色茧品种高出十几个百分点，其中秋丰Ｘ黄　３正反交、秋丰×ＨＪ’７正反交对大肠杆菌的抑制率　分别为６３．９８％、６１．４２％；红色茧品种ＲＣ的抑菌率　为４７．８６％，比对照组白色茧品种高８．５２％。　３小结与讨论　通过天然彩色茧对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌　的抑制实验，结果表明天然彩色茧对这两个菌种具　有不同程度的抑制作用，其中两个绿色茧品种的抑　制率最高，其次是两对黄色茧品种，然后是红色茧品　种，最后是对照组白色茧品种。王娜等…通过对生　姜黄酮粗提液对部分家蚕病原细菌的抑杀效果试验　；ｒ一　｛，一｛　ｒ一　中得出，黄酮类对病原细菌有很好的抑杀作用。同　样，戴群等　对香樟叶黄酮类化合物提取并做了抑　菌研究，得出了黄酮类对细菌类具有一定的抑制效　果，但对不同菌种的抑菌效果有明显的差异。天然　彩色茧品种蚕茧中含有黄酮类化合物，绿色茧品种　中含量最高，笔者认为这是绿色茧抑菌效果好的主　要原因，虽然黄色茧品种中黄酮类比绿色茧少，但抑　菌率也都达到了６５％左右，比红色茧和白色茧高出　了很多，表现出不错的抑茵性能。黄色茧之所以表　示出良好的抑菌效果，除了黄酮类化合物起作用外，　有可能还有其他的的色素也具有杀菌作用。对此有　待做更深一步的研究。　

参考文献　［１］王娜，褚衍亮．生姜黄酮粗提液对部分家蚕病原纽茵的　抑杀效果试验［Ｊ］．蚕业科学，２００９，３５（３）：６４８￣６５２．　［２］戴群，朱晓新，翁德宝．香樟叶黄酮类化合物的提取及抑　菌作用的研究［Ｊ］．江苏教育学院学报，２００８，２５（３）：３０—３４．　

２０１　１年《誉桑茶叶蘧ｉ１ｆＩ》优秀学术论文征集与评选活动通知　＜蚕桑茶叶通讯＞是江西省唯一的蚕桑茶叶科技期刊，主要刊登有关蚕桑茶叶科技的研究论文、科技成果、蚕桑茶叶的基础　科技知识和经营管理技术等文章，报导有关蚕桑与茶叶的生产、加工、营销等方面的动态信息。适合广大蚕桑、茶叶科技工作　者惠稿。　为了促进蚕索茶叶科技研究，扩大《蚕桑茶叶通讯》学术影响力，同时为了培养蚕桑与茶叶科技人才知识创新，本刊面向全　国蚕桑茶叶单位和个人征集优秀学术论文。　１优秀学术论文人选要求　１）文稿符合我刊调查研究、试验研究、技术应用、经验交流、病虫害防治各栏目的报道范围，要求选题新颖，主题鲜明。内容　真实，原创或有一定的知识创新。　２）文稿思路清晰，层次分明，论点明确，论据充分，论证科学，结论客观。　３）文字精炼，表达准确，图表简明，格式规范，结构完整。　４）篇幅２　０００－４　０００字，摘要２００字左右，关键词３—５个，附有参考文献且在正文中标注。　２优秀学术论文的评选办法　１）分期评选，分期选登，投稿时间不限。　２）稿件一经本刊编委联审通过，即可在本刊上优先发表，获赠稿酬及样刊，并免收版面费，年终由编辑部颁发“２０１１年＜蚕　桑茶叶通讯＞优秀学术论文获奖证书。”　３）参评稿件须注明“２０１１年优秀学术论文参评作品”字样，并由第一作者单位知名专家或负责人于纸质稿件上签署推荐　意见（加盖公章）。　・　３投稿方式　１）纸质稿ｌ份，电子稿ｌ份。纸质稿邮寄地址为：江西省南昌县梁家渡＜蚕桑茶叶通讯＝》编辑部，邮编：３３０２０２；电子稿发至　本刊邮箱：ｃｓｃｔ＠ｃｈｌｎａｊｏｕｒｎａｌ，ｎｅｔ　ｃｎ　ｏ　２）非参评稿件无须签字盖章，电子稿发至本刊邮箱：ｃｓｃｔ＠ｃｈｉｎａｊｏｕｒｎａ１．ｎｅｔ．ｃｎ即可。　

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