关于细胞周期测定的研究页PPT文档
合集下载
细胞周期及其调控66页PPT
来自谢谢！细胞周期及其调控
51、山气日夕佳，飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣，泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿，帝乡不可期。 54、雄发指危冠，猛气冲长缨。 55、土地平旷，屋舍俨然，有良田美 池桑竹 之属， 阡陌交 通，鸡 犬相闻 。
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
51、山气日夕佳，飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣，泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿，帝乡不可期。 54、雄发指危冠，猛气冲长缨。 55、土地平旷，屋舍俨然，有良田美 池桑竹 之属， 阡陌交 通，鸡 犬相闻 。
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
细胞周期 PPT课件
16
二、周期蛋白依赖激酶
20世纪70年代初，哈特韦尔 （Leland Harwell）和纳斯（Paul Nurse）博士分别以不同种的酵母为 材料，利用遗传学方法先后分离出 cdc28和cdc2基因。
这类基因所编码的蛋白产物均为P34Kd的蛋白，称为P34cdc2 和P34cdc28, 它们本身不具有激酶活性，但和有关蛋白结合 后，可使多种蛋白底物磷酸化，因而它们统称为周期蛋白 依赖性激酶（cyclin dependent kinase cdk激酶）。
7
限制点,R
限制点（R点）：G1期对一些环境因素的敏感点，可限制正 常细胞通过周期。是控制细胞增殖的关键。
8
S期 S期：从DNA合成开始到DNA合成结束的全过程，是细胞增殖周 期的关键阶段。 主要特点： 1.DNA的复制 2.染色质组装 3.中心粒的复制
9
G2期 G2期 :从DNA复制完成到有丝分裂开始前的时期，为有丝分 裂进行物质条件和能量的准备（加速RNA和有丝分裂相关蛋 白的合成） 。 1. 合成微管蛋白等纺锤体的成分； 2. 合成染色质凝集相关蛋白； 3. 合成M期调控蛋白； 4. 中心粒开始向两极移动，体积膨大。
5
代谢抑制法
胸苷是合成DNA的前体，是不可或缺的。其适当的浓度为 10-7～10-5mol/L。如果给与过量的胸苷（10-3mol/L）则引 起脱氧胸苷合成受到抑制，其结果DNA的合成也将终止。 在培养中的细胞给与过量的胸苷后，则S期细胞都会向G2、 M、G1前进，再次给药后，细胞大都被阻滞在G1/S期。 优点是同步化程度高，适用于任何培养体系。可将几乎所 有的细胞同步化。缺点是产生非均衡生长，个别细胞体积 增大。
cyclinA 在S期DNA合成的起始过程中起作用,当cyclinE降解后, 其作用可延续至整个S期。
二、周期蛋白依赖激酶
20世纪70年代初，哈特韦尔 （Leland Harwell）和纳斯（Paul Nurse）博士分别以不同种的酵母为 材料，利用遗传学方法先后分离出 cdc28和cdc2基因。
这类基因所编码的蛋白产物均为P34Kd的蛋白，称为P34cdc2 和P34cdc28, 它们本身不具有激酶活性，但和有关蛋白结合 后，可使多种蛋白底物磷酸化，因而它们统称为周期蛋白 依赖性激酶（cyclin dependent kinase cdk激酶）。
7
限制点,R
限制点（R点）：G1期对一些环境因素的敏感点，可限制正 常细胞通过周期。是控制细胞增殖的关键。
8
S期 S期：从DNA合成开始到DNA合成结束的全过程，是细胞增殖周 期的关键阶段。 主要特点： 1.DNA的复制 2.染色质组装 3.中心粒的复制
9
G2期 G2期 :从DNA复制完成到有丝分裂开始前的时期，为有丝分 裂进行物质条件和能量的准备（加速RNA和有丝分裂相关蛋 白的合成） 。 1. 合成微管蛋白等纺锤体的成分； 2. 合成染色质凝集相关蛋白； 3. 合成M期调控蛋白； 4. 中心粒开始向两极移动，体积膨大。
5
代谢抑制法
胸苷是合成DNA的前体，是不可或缺的。其适当的浓度为 10-7～10-5mol/L。如果给与过量的胸苷（10-3mol/L）则引 起脱氧胸苷合成受到抑制，其结果DNA的合成也将终止。 在培养中的细胞给与过量的胸苷后，则S期细胞都会向G2、 M、G1前进，再次给药后，细胞大都被阻滞在G1/S期。 优点是同步化程度高，适用于任何培养体系。可将几乎所 有的细胞同步化。缺点是产生非均衡生长，个别细胞体积 增大。
cyclinA 在S期DNA合成的起始过程中起作用,当cyclinE降解后, 其作用可延续至整个S期。
细胞周期与调控]ppt课件
![细胞周期与调控]ppt课件](https://img.taocdn.com/s3/m/72d84426910ef12d2bf9e736.png)
ppt课件完整
4
1.1.1 细胞周期
1.概念：
• 细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分完成所 经历的一个有序过程。其间细胞遗传物质和其他 内含物分配给子细胞。
ppt课件完整
5
2. 细胞周期时相组成：
• 间期（interphase） G1 phase、S phase、G2 phase
• M phase 有丝分裂期（mitosis） 胞质分裂期（cytokinesis）
• 密度梯度离心法
不同时期的细胞体积不同，而细胞在给定离心场中
沉降的速度与其半径的平方成正比。优点：用于任
悬浮培养的细胞，缺点：同步化程度较低。
ppt课件完整
23
3. 诱导同步法
胸腺嘧啶核苷(Thymine Deoxyribonucleoside)
当PLM开始下降时，表明处于S期最初阶段的细胞 也已进入M期，所以出现LM到PLM又开始下降的一 段时间等于TS。
从LM出现到下一次LM出现的时间间隔就等于TC，
TC=TG1+TS+TG2+TM，即可求出TG1长度。
ppt课件完整
18
ppt课件完整
19
• 事实上由于一个细胞群体中TC和各时相不尽相同， 第一个峰常达不到100%，以后的峰会发生衰减， PLM不一定会下降到零，所以实际测量时，常以 （TG2+1/2TM）-TG2的方式求出TM。
ppt课件完整
22
2. 选择同步化
• 有丝分裂选择法
使单层培养的细胞处于对数增殖期，此时分裂活
Байду номын сангаас
跃，有丝分裂细胞变圆隆起，与培养皿附着性低，
轻轻振荡，M期细胞脱离器壁，悬浮于培养液中，收
细胞周期及其调控 ppt课件
M期末尾，M-cyclin的泛素化和细胞蛋白酶的降解 终止了M-Cdk/M-cyclin的活性。
调节M-cyclin的泛素化作用系统为分裂后期促进 复合物（anaphase-promoting complex， APC）
Page 11
泛素（ubiquitin ）一个高度保守的蛋白质，由76 个氨基酸残基组成
笨，没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
一、概述
调节细胞分裂与死亡的生化通路与生物化
学和细胞生物学密切相关。
这些通路通常涉及多种信号转导蛋白，它 们一般具有酶活性（多为激酶、磷酸酶、蛋白 酶），或者通过与其他蛋白质结合并诱导相关蛋 白质的构象改变而传递信号。
Page 15
细胞凋亡或死亡
P53
P21
Rb-p
E2F
G1/S-Cdk G1/S-cyclin
E2F
Rb
Page 16
陶俊宇
对细胞分裂和死亡的信号通路调节是非常 复杂的，并非简单地将信号自一个分子传递到下 一个分子的线性过程，部分通路甚至是多个平行 的通路通过节点连接、作用而形成的网络，相互 间可以串话。
Page 5
二、细胞周期及其调节
细胞周期 （cell cycle ）:连续分裂的细胞从上一次有丝分 裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的整个过程。包含G1 期、S期、G2期期、M期四个阶段。
Page 7
在G0期，细胞休眠或早衰。 休眠细胞不参与细胞周期，但可以通过生长刺激
（如提高环境中的生长因子浓度）使其重新进入 分裂周期。早衰细胞则不能。 不同的细胞G0期休眠期不同。成纤维细胞与上皮 细胞的G0期休眠很短或没有，成人的肝细胞每年 约分裂一次，而成人脑细胞几乎从不分裂。 与G1相比，G0期细胞的代谢率，蛋白质转化与合 成率都比较低，并且缺乏细胞周期相关的关键蛋 白，包括周期蛋白依赖性激酶和相关的调节蛋白。
调节M-cyclin的泛素化作用系统为分裂后期促进 复合物（anaphase-promoting complex， APC）
Page 11
泛素（ubiquitin ）一个高度保守的蛋白质，由76 个氨基酸残基组成
笨，没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
一、概述
调节细胞分裂与死亡的生化通路与生物化
学和细胞生物学密切相关。
这些通路通常涉及多种信号转导蛋白，它 们一般具有酶活性（多为激酶、磷酸酶、蛋白 酶），或者通过与其他蛋白质结合并诱导相关蛋 白质的构象改变而传递信号。
Page 15
细胞凋亡或死亡
P53
P21
Rb-p
E2F
G1/S-Cdk G1/S-cyclin
E2F
Rb
Page 16
陶俊宇
对细胞分裂和死亡的信号通路调节是非常 复杂的，并非简单地将信号自一个分子传递到下 一个分子的线性过程，部分通路甚至是多个平行 的通路通过节点连接、作用而形成的网络，相互 间可以串话。
Page 5
二、细胞周期及其调节
细胞周期 （cell cycle ）:连续分裂的细胞从上一次有丝分 裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的整个过程。包含G1 期、S期、G2期期、M期四个阶段。
Page 7
在G0期，细胞休眠或早衰。 休眠细胞不参与细胞周期，但可以通过生长刺激
（如提高环境中的生长因子浓度）使其重新进入 分裂周期。早衰细胞则不能。 不同的细胞G0期休眠期不同。成纤维细胞与上皮 细胞的G0期休眠很短或没有，成人的肝细胞每年 约分裂一次，而成人脑细胞几乎从不分裂。 与G1相比，G0期细胞的代谢率，蛋白质转化与合 成率都比较低，并且缺乏细胞周期相关的关键蛋 白，包括周期蛋白依赖性激酶和相关的调节蛋白。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
先头细胞达到 最大值的50%
G2期
TS
后尾细胞达到 最大值的50%
M期
S期所占时间Ts
时间
时间
细胞个数
先头细胞正好经历过整个周期
先头细胞达到 最大值的50%
先头细胞达到 最大值的50%
G2期
M期
下一细 胞周期
G1期
S期
G2期
带标记的分 裂细胞个数
整个细胞周期TC TC
间期
M期 时间
时间
到这里，突然出现一个问题，由求Ts的图可以看出 直线1和直线2的长度相等，可以平移
而且看起来公式2和3要比公式1简单许多，因为最大值的一半不好找，而上 升和下降的拐点则容易找
其实这是因为我们假定处在S期中各个时期的细胞个数相等。 如果不相等，则如下图所示
细胞个数
标记细胞 S期
G2期
M期 时间
S期
带标记的分 裂细胞个数
先头细胞达到 最大值的50%
G2期
后尾细胞达到 最大值的50%
关于细胞周期长短测定的研究
作者：RichardFantas
S期的细胞被H3-TdR标记，假设之后各 个细胞周期相同，则所有细胞的相对时 间相同
则如图所示，可认为淡蓝色图形为所有 的细胞 （横向代表时间，纵向代表细胞个数）
细胞个数
经过时间的推移，我们来看 看标记细胞最前面的进入了 哪个时期
S期 标记细胞
G2期 先头细胞
M期 时间
细胞个数
先头细胞进入M期
带标记的分 裂细胞个数
G2期所占时间TG2
G2期
M期
标记细胞
细胞开始进 入M期
时间
时间
细胞个数
先头细胞进入M期末期
带标记的分 裂细胞个数
G2期
M期 M期所占时间TM
未进入M期的标记细胞 TM
时间 重叠面积达到最大
时间
细胞个数
S期 带标记的分 裂细胞个数
因此虽然公式1比较麻烦，但是得出的结论符合一般情况， 而公式2和3只有在特殊情况下（即假设细胞分布的图像是 轴对称图形）才能够成立。
在试验中，应当考虑一般情况，所以书中所列为公式1。同 时我们也应当记住其余的几个公式。
TM
TS TC
间期
时间
敢竭鄙怀，恭疏见解， 请洒潘江，各倾陆海云尔 。
谢谢观赏！
时间
• 因而对于如下的三个计算S期的公式：
• 1.Ts=M期细胞总数到最大值的一半，经历到最大值，再 下降到一半所用的时间（时刻准确）
• 2.Ts=先头细胞先到达M期，再上升到最大值，最后即将 下降所用的时间（在特殊情况下准确）
• 3.Ts=先头细胞刚上升到最大值，再下降到最小值所用的 时间（在特殊情况下准确）
M期
S期所占时间Ts 时间
这里的图像便不
是原来对称的等
TS
腰梯形了！！
时间
先头细胞达到 最大值的50%
S期
G2期
后尾细胞达到 最大值的50%
M期
时间
不轴对称图形的等面积分线不在底边 中间，因而分底边所得的两条线段不 相等！
结合上一张图，可以得出 这里L1不等于L2
带标记的分 裂细胞个数
L1 L2
带标记的分 裂细胞个数
L1
L2
时间
• L1又可以平移到右侧L3
带标记的分 裂细胞个数
L1
L2
时间
• 那么计算S期的公式将有如下的三个：
1.Ts=M期细胞总数到最大值的一半，经历到最大值，再下降到一半所用的时间 2.Ts=先头细胞先到达M期，再上升到最大值，最后即将下降所用的时间 3.Ts=先头细胞刚上升到最大值，再下降到最小值所用的时间
Thank you