穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定

天然药物化学设计试验

题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定

学生：

学号：

院（系）：生命科学与工程学院

专业：药物制剂

指导教师：

2011年12月30日

天然药物化学课程实验任务书

一、题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定

二、实验任务

1.查阅文献资料并写出所选药材化学研究进展的文献综述

2.设计实验方案并进行可行性分析（方案应包括目的意义，设计原理、

流程、实验方法、时间安排、需要的仪器与试剂）

3.对实验材料进行性状、显微和理化鉴定

4.完成穿心莲内酯单体化合物的分离及结构鉴定，鉴定数据应包括熔

点、旋光度、紫外图谱。

5.对所得数据进行分析

6.完成实验报告并提交少量穿心莲内酯样品。

三、实验要求

1.实验中要求学生不完全依赖现成条件，能在教师指导下自己创造一

些条件完成实验。

2.实验方法力求创新。

3.目的物的纯度要求用薄层层析法和熔点的测定数据说明；

4.本题目要求2-3名学生配合完成。

四、实验报告内容

1.题目

2.实验目的

3.基本原理

4.实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家

5.分离方法创新之处

6.自制或创造了那些实验条件条件

7.实验流程及操作方法

8.结果与分析

9.结论

10.在所完成实验的基础上提出一个新的研究课题

11.合理化建议

穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定

一、文献综述

1、成分来源：为爵床科植物穿心功Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees的地上部分，主产广东、福建。

结构及化学成分：

穿心莲内酯的结构式

[中文名称] 穿心莲内酯

[别名] 穿心莲乙素、熊耳内酯

[分子式] C

20H

30 O

5

[分子量] Mw＝350.45

[ 熔点 ] 229-232℃

[物理性质] 斜方棱形或片状结晶（乙醇或甲醇），无臭, 味极苦,穿心莲内酯在水中的溶解度非常小（几乎不容），易溶于丙酮、甲醇、乙醇。比旋度[A]2 126. 6? 2b( 冰醋酸)

[药理作用] 穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。

○1抗菌作用○2抗病毒作用○3利胆保肝作用○4抗心脑血管疾病作用○5抗肿瘤

作用

2、药材介绍

穿心莲内酯又称穿心莲乙素，清热解毒，凉血，消肿。用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤。

二、实验部分

总内酯的提取：

（1）原理：冷浸法得到的提取物颜色洁白，穿心莲内酯含量高，所以选择冷浸法提取。穿心莲内酯的最佳的提取工艺为10倍量95％乙醇冷浸2次。且该工艺简便易行，适于工业生产。

（2）工艺设计：有关穿心莲内酯提取分离、精制方法的报道较多，有水提醇沉法、碱水提取乙醇重结晶法、水提大孔吸附树脂洗脱法等。现综合考虑操作的简易程度、成本高低以及环境保护等因素，拟采用乙醇冷浸提取，有机溶剂洗涤的方法。

穿心莲提取正交实验结果

根据正交实验直观分析，穿心莲内酯的最佳的提取工艺为A1C3B1，即10倍量95％乙醇冷浸2次，而方差分析得到的结论是只有因素A提取次数对实验结果有显著影响。

冷浸提取法得到的提取物穿心莲内酯含量最高，且颜色洁白，适宜进一步精制。

步骤：称取穿心莲粗粉300．0g，以3倍量(500m1)95％的乙醇常温冷浸2次，每次1天，合并2次提取液，过滤得到初步的滤液。

设计工艺路线如下：

穿心莲粗粉

乙醇冷浸

乙醇浸出液

活性炭回流脱色，趁热抽滤

沉淀滤液

回收乙醇，缓慢加水，放置结晶，抽滤

滤液白色穿心莲内酯粗粉

浓缩析晶氯仿冷浸，过滤，不容部分处理2

次少量穿心莲内酯

氯仿液不溶部分

50℃干燥，乙醇回流溶解，

稍冷，加活性炭回流，抽滤

析晶沉淀

母液结晶（精致穿心莲内酯）

三、定性鉴别

(1)取本品约1mg，加乙醇3ml，微温溶解，放冷，加1％3，5-二硝穿心莲内酯滴丸基苯甲酸的乙醇溶液的乙醇溶液1ml，氢氧化钠试液2滴，即显紫红色。

(2)取本品约10mg，加乙醇2ml微温溶解后，加乙醇制氢氧化钾试液2～3滴，渐显红色。

(3)取含量测定项下的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录Ⅳ

A)测定，在224nm的波长处有最大吸收。

(4)本品的红外光吸收图谱与对照的图谱(光谱集301图)一致。

四、纯度测试及结构鉴定

1、熔点数据：230℃

2、无色片状结晶(1VleOH)， [Q]2D0—112．7。(c 0．53，MeOH)；Kedde 试剂反应阳性；UV(MeOH)nm：223；IR(KBr)em一：3 414，1 727，1 673，905有吸收峰出现。其理化常数及光谱数据与文献[1]报道一致，故鉴定该化合物为穿心莲内酯。

五、含量测定

取本品粉末0.5g[同时另取本品粉末测定水分（附录ⅨH第一法）]，精密称定，加乙醇30ml，浸泡30分钟，超声处理30分钟，滤过，残渣用适量乙醇洗涤3次，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加无水乙醇使溶解，转移至5ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取脱水穿心莲内酯、穿心莲内酯对照品适量，精密称定，加无水乙醇分别制成每1ml各含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，精密吸取供试品溶液2～4μl 、上述两种对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254 薄层板上，以氯仿－醋酸乙酯-甲醇（4:3：0.4）为展开剂，展开，